肾癌组织中卷曲螺旋结构域蛋白62的HLA-A2表位肽的筛选和鉴定

目的筛选和鉴定肾癌组织中癌睾抗原卷曲螺旋结构域蛋白62(CCDC62)的人类白细胞抗原(HLA)-A2的特异性细胞毒性T细胞(CTL)的表位肽,为肾癌的免疫治疗提供实验基础。方法通过NetCTL1.2软件预测CCDC62的HLA-A2限制性表位,对得分>1.0的表位肽进行合成。结合力实验检测候选表位肽与T2A2细胞表面HLA-A2分子的结合强弱,细胞内因子染色检测候选表位肽诱导CTL分泌干扰素-γ(IFN-γ)的能力。比较实验组的表位肽与对照组的差异来判断表位肽的活性。结果表位肽CCDC62-P137和CCDC62-P141有较好的HLA-A2结合力。细胞内因子染色表明表位肽CCDC62-P137相比于对照组能诱导肾癌的CTL分泌更多的IFN-γ。结论表位肽CCDC62-P137有较高的HLA-A2分子亲和力和诱导产生更多IFN-γ的能力,是CCDC62在肾癌组织中的HLA-A2限制性CTL候选表位肽,为肾癌的抗肿瘤多肽治疗提供实验基础。

肾细胞癌肿瘤抑制基因VHL的变异多药耐药基因Mdr的表达

目的 探讨人肾细胞癌中的VHL肿瘤抑制基因的变异和Mdr基因的表达水平 ,同肾癌发生发展的关系。方法 采用多聚酶链式反应 (PCR) ,DNA单链多态性分析和DNA测序的方法分析了 4 0例肾细胞癌标本 (其中包括 30例富糖原型 ,6例是嗜染型、3例多形性、1例颗粒型 )。用免疫组织化学法检测了正常肾组织和 35例肾细胞癌组织切片。结果 19 30 ( 63% )的富糖原型肾细胞癌的VHL肿瘤抑制基因发生了变异 ,其中包括 13例缺失、3例插入、2例错译和 1例无义。而在对照组未发现基因变异。而Mdr表达与组织学类型相关 ,且表达量与肿瘤分级有关。结论 富糖原型肾细胞癌可能在分子遗传学水平上与其它类型的肾细胞癌有所区别。

非遗传性肾透明细胞癌中VHL抑癌基因的突变及其意义

目的 :探讨国人非遗传性肾透明细胞癌中VHL抑癌基因的突变及其意义。分析希佩尔林道 (vonHippel Lindau ,VHL)抑癌基因突变与肾癌分期分级的关系。方法 :采用聚合酶链反应 (PCR)、变性高效液相色谱 (DHPLC)以及DHPLC阳性者进行直接测序的方法 ,分析了 5 7例非遗传性肾透明细胞癌中VHL抑癌基因突变的情况。结果 :发现 30例VHL基因突变 ,突变率为 5 3%。这些突变主要发生在第 1 ,2 ,3号外显子的后 1 / 3区 ,其中 1 3例缺失 ,2例插入 ,1 5例误义突变。结论 :国人非遗传性肾透明细胞癌中存在VHL基因的突变 ,且与患者年龄 ,肿瘤分期。

NT4-TAT-6×His-VHLβ结构域肾癌抑制融合肽cDNA克隆的构建

目的构建VHL蛋白(von Hippel-Lindau protein,pVHL)β结构域肾癌抑制融合肽cDNA,并将其应用于肾癌的微基因治疗。方法分别设计合成pVHLβ结构域104-123短肽cDNA的正向和反向引物以及编码TAT-6×His cD-NA的正、反向引物,使用互为引物模板PCR方法,扩增获得具有NaeI/Eco72I酶识别位点的TAT-6×His cDNA片段和具有Eco72I/BamH I酶识别位点的VHLβ抑制肽cDNA片段,将两个片段分别克隆到pGEM-T easy中,使用双脱氧终止法测序,通过DNASIS软件分析同数据库资料一致性和编码的氨基酸序列。用NaeI和BamH I双酶切获取的TAT-6×His-VHLβcDNA片段插入到具有NT4信号肽的pBV220载体中,构建了pBV220-NT4-TAT-6×His-VHLβ质粒。结果经DNA测序证实,获得了编码TAT-6×His cDNA片段和编码VHLβ抑制肽的cDNA片段,分析证实核酸序列和推导的氨基酸同数据库资料一致。重组质粒pBV220-NT4-TAT-6×His-VHLβ酶切图谱证实已将NT4-TAT-6×His-VHLβ融合肽cDNA克隆到pBV220原核表达载体中。结论成功扩增了编码TAT膜渗透肽和6×His标签肽以及VHL抑癌基因β结构域肾癌抑制肽的cDNA片段,构建了具有NT4信号肽的TAT-6×His-VHLβ融合肽cDNA。

治疗希佩尔-林道综合征相关癌症新药——缺氧诱导因子-2α抑制药贝组替芬(Belzutifan)

希佩尔-林道(VHL)综合征,是VHL抑癌基因突变引起的一种常染色体显性遗传疾病,患者出现多发性、多器官肿瘤病变。缺氧诱导因子(HIF)是感应氧浓度变化的关键,家族成员包括HIF-1α、HIF-1β、HIF-2α、HIF-2β、HIF-3α、HIF-3β等。VHL基因失活会导致VHL蛋白稳定性异常和HIF-2α累积,促使肿瘤生长。VHL患者往往会发生透明细胞肾细胞癌、胰腺神经内分泌瘤、中枢神经系统血管母细胞瘤和视网膜血管母细胞瘤等病变。为控制透明肾细胞和VHL综合征其他临床症状的发展,尚无批准系统性的治疗方案,患者的治疗选择有限,往往需要重复手术。对新的治疗方案存在着迫切的需求。一种口服小分子HIF-2α抑制药贝组替芬(belzutifan)由美国Peloton公司首先开发,2019年5月22日美国默克制药集团(Merck&Co Inc)收购美国Peloton公司,获得该公司所有靶向抑制HIF-2α的候选治疗药物及其制备工艺、适应证和品种专利独占权。Ⅰ期临床研究于2021年6月4—8日在美国芝加哥举行美国临床肿瘤学会泌尿生殖系统肿瘤年会(ASCO GU)虚拟大会上口头报告,贝组替芬单药治疗肾细胞癌(RCC)的Ⅰ/Ⅱ期研究取得良好疗效,HIF-2α抑制药在晚期肾癌治疗中显示出优异的潜力。2021年3月16日默克制药公司向美国食品药品监督管理局(FDA)递交HIF-2α抑制药贝组替芬(belzutifan)口服片的上市申请(NDA)。美国FDA已接授该公司的(NDA),并对用于治疗VHL综合征相关透明肾细胞癌(ccRCC)和肾细胞癌授予突破性药物资格(BTD)和罕见疾病用药的认定(ODD),给予优先审评资格。2021年8月13日,贝组替芬片在美国批准上市,用于治疗患有VHL相关疾病的成年患者或不需要立即手术的患者。商品名为Welireg®。该文对贝组替芬口服片的非临床和临床药理毒理学、临床研究、不良反应、适应证、剂量与用法、用药注意事项及知识产权状态和国内外研究进展等进行介绍。

转移性肾癌的抗血管内皮生长因子抗体的随机试验

背景 肾细胞癌发生后，肿瘤抑制基因VHL变异引起的血管内皮生长因子过量分泌。在患有转移性肾细胞癌病人中做了一个临床试验，该试验用于测试抗血管内皮生长因子的中和抗体-bevacizumab。

肿瘤抑制基因VHL、低氧诱导因子与肾细胞癌

肿瘤抑制基因von Hippel—Lindau（VHL）的突变是VHL综合征相关的透明细胞肾细胞癌（clear cell renal cell carcinoma，CCRCC）的重要分子病理变化。34％-56％散发性CCRCC也存在VHL基因突变。低氧诱导因子（hypoxia inducible factor，HIF）是受VHL调控的转录因子，具有调节细胞增殖、肿瘤血管生成、代谢等重要功能。HIF的调控紊乱与CCRCC的发生发展密切相关，是一个应予重视的研究领域。本文简要介绍VHL和HIF的结构和功能，以及VHL和HIF异常与CCRCC的关系的研究进展。

TIGIT在泌尿系统肿瘤中的研究进展

T细胞免疫球蛋白和酪氨酸抑制基序结构域蛋白(TIGIT)是一种共抑制性受体,在多种恶性肿瘤中高表达,能够对T细胞及自然杀伤(NK)细胞起到功能抑制作用,在调节免疫反应和肿瘤免疫逃逸中扮演着关键角色。TIGIT与泌尿系肿瘤的生长、转移及预后密切相关,其过度表达与肿瘤进展和不良预后有关。目前基于免疫抑制剂TIGIT治疗泌尿系肿瘤的策略包括单抗疗法和联合免疫治疗等,如与程序性死亡受体1(PD-1)/细胞程序性死亡-配体1(PD-L1)等药物的联合疗法等。TIGIT相关的动物实验与临床研究也在不断开展,并已取得重大进展,因而TIGIT有望成为免疫治疗的新靶点以及预测泌尿系肿瘤患者预后的生物标记物。本文就TIGIT在泌尿系肿瘤中的研究进展作一综述。

The Lancet Oncology:帕唑帕尼在VHL综合征患者中的应用——一项单臂、单中心二期临床研究

VHL综合征（von Hippel-Lindau disease），又称为希道尔·林道综合征，是一种罕见的常染色体显性遗传性疾病，病因是位于3号染色体短臂（3p25-26）的VHL基因发生突变所致。VHL综合征表现为视网膜、中枢神经系统血管母细胞瘤合并肾脏或胰腺囊肿、嗜铬细胞瘤、肾细胞癌等腹腔脏器病变，然而对这一罕见病，目前并没有被公认的系统的治疗手段。