LncRNA VIM-AS1通过miR-497-5p/FBXW7轴调控高糖环境下视网膜内皮细胞的迁移和凋亡

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)VIM反义RNA 1(VIM-AS1)在糖尿病视网膜病变中的潜在分子机制。方法:使用q RT-PCR测定LncRNA VIM-AS1、miR-497-5p和FBXW7 mRNA的表达。使用蛋白质印迹检测FBXW7蛋白水平。分别使用CCK-8实验、伤口愈合实验和流式细胞技术分析评估细胞增殖、迁移和凋亡。通过双荧光素酶报告基因分析验证lncRNA VIM-AS1、miR-497-5p和FBXW7之间的结合关系。结果:在高糖处理的ARPE-19细胞中,LncRNAVIM-AS1和FBXW7的表达显著降低,而miR-497-5p的表达上调。LncRNA VIM-AS1可以通过竞争性结合miR-497-5p上调FBXW7的表达。LncRNA VIMAS1过表达能够促进HG处理的ARPE-19细胞的增殖和迁移,并抑制细胞凋亡,而miR-497-5p过表达消除了lncRNA VIM-AS1过表达对HG处理的ARPE-19细胞的影响。此外,FBXW7敲低消除了miR-497-5p对HG处理的ARPE-19细胞表型的抑制。结论:lncRNA VIM-AS1可通过调控miR-497-5p/FBXW7轴促进HG处理的ARPE-19细胞增殖和迁移,同时抑制细胞凋亡,提示lncRNA VIM-AS1作为治疗靶点潜力巨大。

长链非编码RNA波形蛋白反义RNA1(VIM-AS1)促进C4-2去势抵抗性前列腺癌细胞增殖与侵袭

目的评估长链非编码RNA波形蛋白反义RNA1(VIM-AS1)在前列腺癌组织中的表达及临床相关性,探索其对去势抵抗性前列腺癌(CRPC)C4-2细胞增殖和侵袭能力的影响及潜在机制。方法利用生物信息学数据库分析VIM-AS1在前列腺癌组织中的表达水平及其与TNM分期、生存周期的相关性;应用反义寡核苷酸(ASO)沉默C4-2细胞中VIM-AS1的表达,5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶(EdU)实验检测细胞增殖的变化,流式细胞术检测细胞凋亡和周期的变化,CCK-8法检测比卡鲁胺杀伤敏感性的变化,Transwell^(TM)实验检测细胞侵袭和迁移以及细胞数目的变化,划痕实验检测迁移距离的变化。生物信息学分析VIM-AS1与含三联基元蛋白24(TRIM24)表达的相关性,实时定量PCR和Western blot法分别检测VIM-AS1对TRIM24 mRNA和蛋白表达的影响。结果前列腺癌组织VIM-AS1表达上调,并与患者TNM分期正相关,与总体生存率呈负相关。敲低VIM-AS1表达后,C4-2细胞增殖能力、S期细胞比例、侵袭细胞数和迁移距离、迁移细胞数降低,而比卡鲁胺杀伤敏感性、凋亡细胞百分比和G2期细胞比例升高。TRIM24与VIM-AS1表达正相关,沉默VIM-AS1将导致TRIM24表达下调。结论VIM-AS1在CRPC组织中上调,可能通过上调TRIM24表达促进C4-2细胞增殖与侵袭。

lncRNA VIM-AS1靶向miR-126-5p调控肺癌细胞放射敏感性分子机制研究

目的研究lncRNA VIM-AS1对肺癌A549细胞放射敏感性的影响和潜在的分子机制。方法qRT-PCR检测lncRNA VIM-AS1和miR-126-5p在正常肺上皮细胞BEAS-2B及肺癌细胞A549、SPC A1和HCI-H596中的表达水平,克隆形成实验测定不同放射剂量(0、2、4、6、8 Gy)处理后A549细胞存活分数和存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,双荧光素酶报告系统验证VIM-AS1与miR-126-5p的靶向关系。结果与正常肺上皮细胞BEAS-2B组比较,肺癌细胞A549、SPC A1和HCI-H596组中VIM-AS1含量均显著升高(P<0.05),miR-126-5p的含量均显著降低(P<0.05);沉默lncRNA VIM-AS1后,放射处理(2、4、6、8 Gy)的A549细胞存活分数逐渐下降(P<0.05),细胞凋亡率也显著升高(P<0.05),放射增敏比为1.776;VIM-AS1靶向负调控miR-126-5p的表达;抑制miR-126-5p表达同时沉默VIM-AS1后A549细胞细胞存活分数显著升高(P<0.05),凋亡率显著降低(P<0.05),细胞增敏比为0.598。结论LncRNA VIM-AS1通过靶向miR-126-5p调控A549细胞的凋亡和放射敏感性,VIM-AS1可能是肺癌的放射增敏靶点。

VIM-AS1调控miR-143-3p/Smad3轴对瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡和细胞周期的影响

目的探讨波形蛋白反义RNA 1(VIM-AS1)对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(HKF)凋亡和细胞周期的影响及可能机制。方法RT-qPCR法检测瘢痕疙瘩组织和正常皮肤组织中VIM-AS1和miR-143-3p表达,Western blot检测细胞中Smad3蛋白表达。体外培养HKF细胞,分别转染VIM-AS1小干扰RNA、miR-143-3p模拟物或共转染VIM-AS1小干扰RNA与miR-143-3p抑制剂,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,Western blot检测细胞中Smad3蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证VIM-AS1和miR-143-3p及miR-143-3p和Smad3调控关系。结果与正常皮肤组织比较,瘢痕疙瘩组织中VIM-AS1表达显著升高,而miR-143-3p表达显著降低。干扰VIM-AS1或过表达miR-143-3p后,HKF细胞增殖抑制率和凋亡率显著升高,细胞周期G0/G1期延长,S期缩短。VIM-AS1靶向负调控miR-143-3p,miR-143-3p靶向负调控Smad3。干扰miR-143-3p降低了VIM-AS1对HKF细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。结论VIM-AS1在瘢痕疙瘩组织中表达升高,其可能通过靶向miR-143-3p/Smad3轴促进HKF细胞增殖和细胞周期进程,并阻碍细胞凋亡。