养荣润肠舒合剂对慢性传输型便秘SD大鼠结肠5-HT、VIP的影响

目的探讨慢性传输型便秘大鼠结肠黏膜5-羟色(5-hydroxytryptophan,5-HT)、血管活性肠多肽(vasoactive intestinal polypeptide,VIP)的含量,以明确中药制剂养荣润肠舒合剂对大鼠结肠5-HT、VIP表达的调节作用。方法将60只健康的SD大鼠随机分为空白组10只,造模组50只(模型组10只、莫沙必利组10只、养荣润肠舒合剂高、中、低剂量组各10只)。应用复方地芬诺酯灌胃(2 mL/200 g体质量)以复制慢性传输型便秘大鼠模型(每天1次,连续10 d)。期间记录大鼠首次排便时间,并收集粪便、测量粪便剂量、含水量以判断造模是否成功。复制模型成功后进行药物治疗,每天1次,连续10 d。然后采用间接酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)观测大鼠结肠5-HT、VIP的光密度(optical density,OD)值。结果①与空白组比较,模型组SD大鼠的首次排便时间延后,且新鲜粪便的剂量、含水量减少,差异有显著统计学意义(P<0.01)。②与模型组比较,莫沙必利组和养荣润肠合剂低、中、高剂量组治疗后大鼠的首次排便时间均提前,且粪便的含水率、重量除使用养荣润肠低组外均有所增长(P<0.01)。③与莫沙必利组比较,养荣润肠舒合剂中组剂量组大鼠的一般状况最好,首次排便时间最接近莫沙必利组且较短于莫沙必利组,差异无统计学意义(P>0.05),新鲜粪便剂量最接近莫沙必利组且较重于莫沙必利组,差异无统计学意义(P>0.05),含水量明显优于莫沙必利组,差异有统计学意义(P<0.05);养荣润肠舒合剂高剂量组大鼠排便状况与莫沙必利组相差不大,差异无统计学意义(P>0.05);莫沙必利组大鼠排便状况明显优于养荣润肠舒合剂低剂量组,差异有显著统计学意义(P<0.01)。④养荣润肠舒合剂中剂量组的大鼠一般状况更佳,而低剂量组的大鼠状况较差,新鲜粪便的剂量、含水量较小。⑤与空白组比较,模型组大鼠近端结肠组织5-HT、VIP的含量显著降低,OD值缩小(P<0.01)。⑥治疗后与模型组比较,莫沙必利组及养荣润肠舒合剂低、中、高剂量SD大鼠结肠5-HT、VIP含量显著升高,OD值增加,差异有明显统计学意义(P<0.01)。⑦治疗后与莫沙必利组比较,养荣润肠舒合剂中剂量大鼠结肠的5-HT、VIP含量及OD值增加,最接近莫沙必利组且较高于莫沙必利组,差异无统计学意义(P>0.05);养荣润肠舒合剂高剂量组大鼠状况及大鼠结肠5-HT、VIP含量与莫沙必利组相差不大,差异无统计学意义(P>0.05)。⑧与养荣润肠舒合剂高剂量组比较,养荣润肠舒合剂中剂量组大鼠结肠5-HT、VIP含量更高,OD值差异无统计学意义(P>0.05),而养荣润肠舒合剂低剂量组大鼠结肠的5-HT、VIP含量相对较低,与养荣润肠舒合剂中剂量组相比OD值也较低,具有统计学意义(P<0.01)。结论5-HT作为脑—肠轴的关键神经递质,VIP作为存在于中枢神经和肠神经系统中的神经递质,在慢性传输型便秘的发病中起着重要的作用;中药方剂养荣润肠舒合剂能有效提高慢性传输型便秘大鼠结肠5-HT、VIP含量,增强5-HT、VIP的表达有关;因此,作者认为养荣润肠舒合剂可能是通过这一机制改善慢性传输型便秘的临床症状,从而达到“以补治秘”的目的。

血管活性肠肽调控滤泡辅助性T细胞/滤泡调节性T细胞平衡治疗溃疡性结肠炎的研究进展

溃疡性结肠炎(UC)是以结肠黏膜屏障持续损伤为病理基础的自身免疫性疾病。滤泡辅助性T(Tfh)细胞和滤泡调节性T(Tfr)细胞的异常表达与UC的发生发展密切相关,Tfh细胞具有分泌促炎因子、辅助B细胞产生抗体等作用,能够促进UC的发展,Tfr细胞则具有抑制Tfh细胞活性、分泌抗炎因子等作用,如何调节两者平衡已成为UC的潜在治疗靶点之一。血管活性肠肽(VIP)对UC具有防治作用,其机制与调控Tfh/Tfr细胞平衡密切相关,可对UC的治疗提供思路。

血管活性肠肽(VIP)对大鼠Leydig细胞FasL表达及介导Jurkat细胞凋亡的影响

目的研究VIP对大鼠Leydig细胞FasL表达及介导Jurkat细胞凋亡的影响。方法VIP作用于UU感染的SD大鼠及大鼠Leydig细胞,观察VIP对大鼠Leydig细胞FasL表达的调节,从体外及动物整体水平来探讨VIP对大鼠Leydig细胞FasL表达及介导Jurkat细胞凋亡的影响。结果在睾丸局部感染时,VIP能调节Leydig细胞FasL表达格局并能调节Leydig细胞介导Jurkat细胞的凋亡率。结论VIP参与调节大鼠睾丸局部的免疫豁免。

脾虚证模型大鼠血清中血管活性肠肽和胆囊收缩素的变化及四君子汤的干预作用

目的研究脾虚证模型大鼠血清中血管活性肠肽(VIP)和胆囊收缩素(CCK)的变化以及四君子汤的干预作用,探讨四君子汤调节大鼠胃肠动力的机制。方法采用饥饱失常加劳倦加破气耗气方法复制脾虚大鼠模型,将60只大鼠随机分为正常组、模型组、四君子汤组、莫沙必利组,用Elisa法测定每组大鼠血清中血管活性肠肽和胆囊收缩素的含量。结果模型组大鼠血清中血管活性肠肽含量(28.60±41.88)明显减少,与正常组(51.55±16.22)比较差异具有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠血清中胆囊收缩素(3.55±2.53)含量明显升高,与正常组(2.05±0.67)比较差异具有统计学意义(P<0.05)。经治疗后,四君子汤组大鼠血清中血管活性肠肽(57.51±13.25)、莫沙必利组大鼠血清中血管活性肠肽(61.63±27.46)均较模型组显著升高(P<0.05),四君子汤组大鼠血清胆囊收缩素(2.29±0.81)较模型组显著降低(P<0.05)。结论四君子汤能调节脾虚证大鼠的胃肠激素,从而纠正其胃肠功能紊乱,这是四君子汤治疗脾虚证的作用机制之一。

鸡血管活性肠肽RNA探针制备及其在鸡肠Remak神经的原位杂交反应

应用RT-PCR方法从鸡脑中扩增血管活性肠肽(VIP)基因片段,将其连接于pGM-T easy。分别利用pGM-T easy中T7和SP6启动子及其RNA聚合酶,以线性化的VIP/pGM-Teasy为模板转录合成正、反义DIG标记RNA探针。通过原位杂交方法将合成的探针用于探查VIP-mRNA在鸡肠Remak神经(INR)中的分布情况。结果表明,INR的神经元胞体中有VIP-mRNA的转录,且这种神经元数量众多;原位杂交阳性神经元胞体大部分是大型神经元细胞,呈圆形或椭圆形;阳性神经元胞体在INR神经节中呈层状或成群分布。INR的神经纤维呈弱阳性。在节间束也有少量的阳性细胞分布。本研究从基因水平证明INR中有VIP神经元存在。

鸡肠道组织中血管活性肠肽的分布特点

为探讨鸡肠道组织中肽能神经支配的途径及其功能,运用免疫组织化学超敏SP法,对不同生长阶段鸡肠道中血管活性肠肽(Vasoactive intestinal peptide,VIP)的分布特点进行了研究。结果显示,肠壁中VIP的表达范围较为广泛,涉及黏膜上皮和固有层、肌层和外膜,尤以固有层和肌层最为典型;随着日龄增加,黏膜上皮间VIP阳性细胞数量逐渐增多;从肠道不同部位的分布来看,十二指肠中VIP的表达强于同时期其他部位,空肠中的表达次之,回肠和盲肠的表达相对较弱。黏膜固有层和肌层一直分布有染色较深的VIP阳性神经纤维,呈串珠状、细线状或膨体状。提示鸡肠道是产生VIP的又一个重要部位,肠道中的VIP可参与鸡免疫器官的功能调节,并作为一种信息分子介导神经内分泌系统和黏膜免疫系统之间的相互作用。

VIP对人脐血CD34^+细胞向肝系分化的影响初探

目的探讨血管活性肠肽(V IP)对人脐血造血干细胞(HSC)向肝系分化的影响。方法采用免疫磁分选技术纯化人脐血CD 34+细胞,流式细胞术鉴定纯度;V IP和混合因子(包括V IP、EGF、HGF)作用CD 34+细胞后,酶联免疫化学法测定CD 34+细胞及上清AFP水平,免疫细胞化学法检测CD 34+细胞上肝系标志AFP、白蛋白(ALB)、细胞角质素19(CK-19)的表达,W estern b lot方法检测CD 34+细胞上ALB表达;巢式RT-PCR方法检测CD 34+细胞上AFP、ALB的mRNA表达,随机选送ALB产物测序。结果免疫组化结果显示CD 34+细胞上不表达CK-19蛋白,但有AFP和ALB蛋白表达;V IP作用CD 34+细胞14 d后,细胞内的AFP质量浓度(165.00±8.51 pg/mL)较对照组(270.00±11.37 pg/mL)显著下降(P<0.05)。W estern b lot显示V IP作用后CD 34+细胞内ALB蛋白表达有减弱趋势。人脐血CD 34+细胞表达了AFP mRNA和ALB mRNA,随机选取ALB产物测序与G eneB ank中ALB基因序列完全相同。结论人脐血CD 34+细胞表达肝系标志AFP、ALB,虽未见CK-19表达,但仍提示造血干细胞有向肝细胞横向分化的可能。V IP降低了人脐血CD 34+细胞AFP及ALB表达。这种对造血干细胞内胚层细胞标志物表达的抑制,提示V IP对HSC向肝细胞横向分化具有抑制作用。

运脾除湿中药对妇科腹部术后患者GAS VIP的影响

目的:观察运脾除湿中药对妇科腹部术后患者胃肠功能紊乱的防治效果及血浆胃泌素(GAS)、血管活性肠肽(VIP)影响,并探讨其作用机理。方法:将51例患者随机分为治疗组(30例)和对照组(21例),治疗组术后给予运脾除湿中药运脾饮(苍术、枳实、厚朴、藿香、丹参、黄芪等)治疗,对照组术后给予温开水,各用2天。采用放射免疫法检测两组患者手术前后GAS和VIP水平,比较两组主要临床症状(恶心、呕吐、腹胀、纳呆等)改善情况及手术前后GAS和VIP水平差异。结果:所有患者于术后第1天均出现GAS明显下降(P<0.05),VIP明显升高(P<0.05)。术后第3天,治疗组患者GAS含量较术后第1天明显升高(P<0.05),VIP含量较术后第1天明显降低(P<0.05),与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。对照组患者术后第1天和术后第3天的GAS和VIP含量比较差异无显著性(P>0.05)。经运脾除湿中药治疗后患者恶心、呕吐、腹胀、纳呆等症状较对照组有明显改善,其积分比较有显著性差异(P<0.05),结论:腹部术后患者GAS含量降低,VIP含量升高,提示GAS、VIP可能参与了术后患者胃肠功能紊乱的发病机制;运脾除湿中药能促进术后胃肠功能的恢复,明显降低妇科腹部术后患者胃肠功能紊乱症状发生率,其作用机理可能与调控术后患者的GAS、VIP水平相关。

P物质、血管活性肠肽与脾虚便秘型小鼠肠道之间的关系初探

目的:通过观察脾虚便秘型小鼠肠道中P物质、血管活性肠肽的含量变化,探讨二者在脾虚便秘型小鼠肠道改变之间的关系。方法:实验设空白对照组和脾虚便秘模型组,经造模成功后用免疫组织化学方法进行P物质﹑血管活性肠肽两项指标检测。结果:脾虚便秘模型组中小鼠肠道P物质、血管活性肠肽含量均较空白组降低明显(P<0.01)。结论:脾虚型小鼠便秘的发生和肠道中P物质、血管活性肠肽表达的降低关系密切,此为临床上阐明脾虚型便秘机制提供更多证据。

Treg细胞在VIP治疗实验性类风湿性关节炎中的作用研究

目的:本研究探讨血管活性肠肽(VIP)治疗实验性类风湿性关节炎的免疫调节机制及Treg细胞参与的调节。方法:本研究以鸡Ⅱ型胶原(CCⅡ)诱导的Wistar大鼠实验性类风湿性关节炎(CIA)为动物模型,分析大鼠关节指数评分和关节病理变化,通过细胞因子检测分析Th1/Th2平衡关系;通过流式细胞术和功能实验分析Treg的变化,评价VIP的治疗作用和机制。结果:我们的研究显示体内经VIP治疗的CIA大鼠在临床和组织学水平均得到了保护和缓解。其抑制作用与下列因素有关:抑制致病性T细胞的增殖,免疫应答由Th1型应答向Th2型应答转换,以及上调了具有抑制T细胞活化和增殖作用的CD4+CD25+Treg细胞数量与功能。结论:本研究揭示了VIP可通过调节Th1/Th2平衡和上调Treg细胞来抑制致病性T细胞的活性,从而保护、缓解实验性关节炎。

大鼠脊髓半横断后脊髓腹角运动神经元VIP的表达变化

目的探讨大鼠脊髓半横断后脊髓腹角运动神经元中血管活性肠肽(VIP)的表达变化。方法建立脊髓半横断损伤模型,取半横断损伤位点尾侧L_3节段脊髓作冰冻切片,运用VIP兔抗血清以免疫组化ABC法染片。观察并计数脊髓半横断后两侧腹角VIP阳性神经元数。结果VIP主要分布在正常大鼠脊髓腹角运动神经元胞浆内。脊髓半横断后3 d,两侧VIP阳性神经元数较正常对照组均有明显增加(P<0.05)。此后非手术侧7和21 d组较正常组仍增加(P<0.05),但在手术侧7和21 d组较正常组无明显变化(P>0.05)。结论脊髓半横断后腹角神经元VIP表达明显增加,提示VIP可能与脊髓损伤修复有关。

海珠益肝胶囊对免疫性肝损伤小鼠神经肽SP VIP及辅助性T细胞亚群的影响

目的:观察海珠益肝胶囊对免疫性肝损伤小鼠神经肽SP、VIP及辅助性T细胞亚群的影响。方法:应用尾静脉注射卡介苗(BCG)和脂多糖(LPS)建立免疫性肝损伤小鼠模型,分离小鼠淋巴细胞,经佛波醇乙酯(PMA)、离子霉素、莫能菌素刺激培养6h后,收获细胞,利用细胞内细胞因子染色流式细胞术检测Th1/Th2比例:采用放免法检测血浆和脑垂体中SP、VIP含量。结果:在模型组,外周血和脑垂体中SP含量较正常组逐渐增加,VIP含量较正常组逐渐降低,第18天、25天与正常组比较有显著性差异(P<0.05);Th1细胞的百分率逐渐升高,Th2细胞的百分率逐渐降低,Th1/Th2的比值增大,与肝组织损害程度呈现正相关:海珠益肝胶囊能够降低外周血和脑垂体中SP含量,增加V lP含量,与模型组第25天比较有显著差异(P<0.01),能够恢复SP与V lP的平衡;降低Th1细胞的百分率,恢复Th1/Th2的比例,对肝组织损害具有保护和改善作用(P<0.05)。结论:在小鼠免疫性肝损伤过程中,存在SP与VIP的分泌紊乱及Th1/Th2细胞失衡,海珠益肝胶囊能够恢复SP/VIP、Th1/Th2细胞的平衡,对肝组织损害具有保护利改善作用,可能是其免疫约理机制之一。

异丙肾上腺素对心内神经节中肽能递质VIP影响

异丙肾上腺素是临床常用的心脏骤停的抢救药物。为了研究该药对心内神经节中肽能递质的影响，本文在大鼠皮下注射异丙肾上腺素５ｍｇ／ｋｇ，连续三天，后固定取心房后壁，用免疫组化结合图像分析，观察心内神经节中肽能递质ＶＩＰ的变化。对照组大鼠心内神经节中含有ＶＩＰ免疫反应（ＶＩＰ－ＩＲ）阳性神经纤维和胞体；实验组大鼠心内神经节中含有ＶＩＰ－ＩＲ阳性神经纤维和胞体呈不同程度增多。其中ＶＩＰ－ＩＲ阳性神经纤维积分光密度较对照组增加２５．３％，而神经胞体积分光密度只增加８．１％。结果提示：１．大鼠心内神经节中ＶＩＰ－ＩＲ阳性神经纤维可能有两个来源：即心内ＶＩＰ－ＩＲ阳性神经节细胞和心外副交感神经元；２．异丙肾上腺素对心脏的作用并非单一的直接作用，其中部分是通过影响心内神经节中肽能递质的变化而发挥间接作用。

厚朴排气合剂对剖宫产术后患者血清胃泌素、胃动素和血管活性肠肽的影响

目的:观察厚朴排气合剂对剖宫产术后患者胃肠功能恢复的作用及对血清胃泌素(GAS)、胃动素(MTL)和血管活性肠肽(VIP)的影响。方法:90例剖宫产妇随机分为对照组和观察组各45例。对照组给予西医常规对症处理。观察组采用厚朴排气合剂口服。2组疗程为3天。记录术后肠鸣音恢复时间;记录术后首次排气、排便时间;分别于术后第1、2、3天进行记录主要症状、体征评分;检测术后第1、3天患者血GAS、MTL和VIP水平。结果:观察组肠鸣音恢复时间、首次排气和排便时间均短于对照组,差异均有非常显著性意义(P<0.01)。术后第2天对照组主要症状、体征评分较术后第1天有所下降,但差异无显著性意义(P>0.05),术后第3天,对照组主要症状、体征评分较术后第1天下降,差异有显著性意义(P<0.05);观察组术后第2、3天主要症状、体征评分均较术后第1天明显下降,差异均有显著性意义(P<0.05),并低于同期对照组(P<0.05)。术后第3天,对照组血清GAS、MTL和VIP水平变化不明显;观察组术后第3天GAS、MTL和VIP水平均较术后第1天明显变化,差异均有非常显著性意义(P<0.01),与对照组各项指标比较,差异均有非常显著性意义(P<0.01)。结论:厚朴排气合剂能促进剖宫产术后产妇胃肠功能的恢复,改善症状和体征,其作用机制可能与升高患者血清GAS和MTL水平,抑制VIP水平有关。

感染NDV后鸡腺胃中P物质和VIP的分布及动态观察

70只35日龄SPF鸡随机分成对照组和攻毒组。攻毒组经腹腔接种鸡新城疫病毒后,分别取腺胃,并用免疫组织化学方法检测组织中NDV、P物质和VIP的分布及动态变化。结果表明:P物质和VIP在两组鸡的腺胃中都有存在,且三种物质的表达量呈现正相关性,其含量在感染后有增加,证明了P物质和VIP在感染NDV后有调节动物防御系统的作用。

脾虚证大鼠胃肠道Vip和nNos神经元共存

目的:探讨Vip、nNos神经元在脾虚证大鼠胃肠道消化活动中的调节作用。方法:免疫组织化学染色法和双重染色法。结果:脾虚证时Vip、nNos神经元同时存在于胃肠道组织中,且主要分布于胃窦及结肠的肌间丛,黏膜下丛较少见到共染现象。结论:大鼠脾虚证所表现的胃肠生理功能紊乱/不足的病理生理过程是由Vip、nNos神经元协同调节实现的,由此验证了结构与功能的相关性。

松果腺褪黑激素对大鼠下丘脑视交叉上核AVP VIP肽能神经细胞的影响

本研究选用成年健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠建立松果腺切除和松果腺褪黑激素（ＭＬＴ）注射模型，并设置正常、松果腺切除假术、生理盐水注射三种对照组。ＭＬＴ注射时间分别为１０００，１７００，２４００。实验组、对照组动物均存活３０天，于上午９００麻醉、固定、取材、切片、ＡＢＣ免疫组化染色、显微图象分析系统（ＭＩＡＳ）相对定量分析处理，目的在于观察ＭＬＴ对ＳＣＮ不同肽能神经细胞的作用。结果表明：ＭＬＴ对ＳＣＮ内ＡＶＰ样神经细胞无显著作用，而可促使其ＶＩＰ样神经细胞中ＶＩＰ含量增多。

自拟宣肺通便汤治疗慢性阻塞性肺病稳定期气虚型便秘的临床观察及对VIP的影响

目的:观察自拟宣肺通便汤治疗慢性阻塞性肺病稳定期气虚型便秘的临床疗效及对血管活性肠肽(VIP)的影响。方法:随机选择本院就诊的50例慢阻肺稳定期气虚型便秘的患者,分为对照组和观察组各25例。对照组患者予乳果糖口服液,观察组患者予自拟宣肺通便汤,2组均连续治疗1个月;治疗前后对2组患者进行便秘患者症状自评量表评分(Pac-sym)和便秘患者生活质量量表(Pac-qol)评分,放免法检测血浆血管活性肠肽(VIP)含量。结果:治疗1个月后,2组患者Pac-sym、Pac-qol评分均较治疗前降低(P<0.05),VIP水平较治疗前明显升高(P<0.05);观察组上述指标变化均明显优于对照组(P<0.05)。结论:自拟宣肺通便汤治疗慢性阻塞性肺病稳定期气虚型便秘可有效减轻患者临床症状,改善生活质量,提高VIP分泌是其作用机制之一。

血管活性肠肽在皖西白鹅下丘脑与垂体中的分布

【目的】对青春期和休产期皖西白鹅下丘脑和垂体中血管活性肠肽的分布与表达进行研究。【方法】采集青春期和休产期皖西白鹅的下丘脑和垂体,应用免疫组织化学PV-9000二步法并结合DAB显色技术,对血管活性肠肽的免疫反应阳性分布进行定位,并用Image-Pro Plus 6.0软件分析阳性区域的累积光密度值。【结果】血管活性肠肽免疫反应阳性细胞主要分布于青春期和休产期皖西白鹅下丘脑的弓状核、室旁核、内侧核、视上核、乳头体内侧核等处及腺垂体中;休产期皖西白鹅下丘脑和垂体中的血管活性肠肽的累积光密度值显著高于青春期。【结论】血管活性肠肽可能对皖西白鹅的休产状态有一定的调控作用。