RNA干扰沉默人乳腺癌细胞VPAC1受体抑制VIP跨位激活EGFR/HER2和VEGF的分泌在乳腺癌治疗中的意义

目的研究RNA干扰沉默人乳腺癌细胞VPAC1受体对VIP跨位激活EGFR/HER2和VEGF的分泌的影响。方法使用小干扰RNA(siRNA)探讨血管活性肠肽(VIP)对人乳腺癌细胞的作用机制。向雌激素依赖的(T47D)和雌激素非依赖的(MDA-MB-468)乳腺癌细胞转染VPAC1受体的siRNA完全消除VIP刺激分泌促进的血管生成因子(血管内皮生长因子,VEGF)的作用,以及跨位激活表皮生长因子受体(EGFR/HER2)。结果 VPAC1受体阻断导致T47D细胞增殖率下降至10%,MDA-MB-468细胞增殖下降至25%;采用ELISA试剂盒测定VPAC1受体沉默对乳腺癌细胞胞外血管内皮生长因子VEGF165分泌的影响,无论有无VIP诱导时,VEGF165分泌均被完全抑制(P<0.05);VIP可以导致HER2/EGFR的跨位激活造成磷酸化,沉默VPAC1受体后,其磷酸化消失(P<0.001);采用酪氨酸激酶抑制剂AG-825和AG-1478(10μmol/L)可以抑制VIP诱导的VEGF分泌活性,敲除VPAC1受体也完全阻断了VIP诱导的VEGF165分泌。结论实验结果阐明了人乳腺癌细胞中VIP-VPAC1受体信号通路机制,同时揭示了采用VPAC1受体拮抗剂联合靶向治疗乳腺癌的潜在用途及采用RNA干扰VPAC1受体分子疗法的潜在意义。