circRNA TCF25靶向miR-128b对人乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响

目的探究环状RNA(circRNA)转录因子25(TCF25)靶向微RNA-128b(miR-128b)对人乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响。方法收集人乳腺癌细胞MCF-7培养至对数生长期,将MCF-7细胞随机分为空白组(未转染)、si-NC组(转染si-NC)、si-circRNA TCF25组(转染si-circRNA TCF25)、pcDNA-circRNA TCF25组(转染pcDNA-circRNA TCF25)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-128b mimic组(转染miR-128b模拟物)、miR-128b inhibitor组(转染miR-128b抑制剂)、pcDNA-circRNA TCF25+miR-128b mimic组(转染pcDNA-circRNA TCF25和miR-128b模拟物),每组6个复孔。转染48 h后,荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组细胞中circRNA TCF25、miR-128b表达;RNase R酶消化实验进行环状RNA鉴定;核浆分离法检测circRNA TCF25的亚细胞定位;噻唑蓝(MTT)实验检测细胞增殖活力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;RT-qPCR检测磷酸酯酶与张力蛋白同源物(PTEN)、细胞增殖核抗原-67(Ki-67)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶3(caspase-3)mRNA表达;Western blotting检测PTEN、Ki-67、caspase-3、活化的caspase-3蛋白表达;双荧光素酶报告实验分析circRNA TCF25与miR-128b的靶向关系。结果与对照组比较,circRNA TCF25的相对表达量在RNase R酶处理后并无显著变化(P>0.05),而线性TCF25的相对表达量在经RNase R酶处理后降低(P<0.05);circRNA TCF25在胞质中的相对表达量高于细胞核(P<0.05)。与空白组和si-NC组比较,si-circRNA TCF25组细胞增殖活力降低,凋亡率升高,Ki-67 mRNA及蛋白表达降低,PTEN、caspase-3、活化的caspase-3 mRNA及蛋白表达升高;pcDNA-circRNA TCF25组细胞增殖活力升高,凋亡率降低,Ki-67 mRNA及蛋白表达升高,PTEN、caspase-3、活化的caspase-3 mRNA及蛋白表达降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与空白组和miR-NC组比较,miR-128b mimic组细胞增殖活力降低,凋亡率升高,Ki-67 mRNA及蛋白表达降低,PTEN、caspase-3、活化的caspase-3 mRNA及蛋白表达升高,miR-128b inhibitor组细胞增殖活力升高,凋亡率降低,Ki-67 mRNA及蛋白表达升高,PTEN、caspase-3、活化的caspase-3 mRNA及蛋白表达降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与pcDNA-circRNA TCF25组比较,pcDNA-circRNA TCF25+miR-128b mimic组细胞增殖活力降低,凋亡率升高,Ki-67 mRNA及蛋白表达降低,PTEN、caspase-3、活化的caspase-3 mRNA及蛋白表达升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。双荧光素酶实验结果证实了circRNA TCF25可靶向调控miR-128b。结论circRNA TCF25可能通过靶向抑制miR-128b表达,促进Ki-67表达,抑制PTEN、caspase-3、活化的caspase-3表达,发挥促进人乳腺癌细胞MCF-7增殖,抑制其凋亡的作用。

骨髓间充质干细胞外泌体源性miR-128调控GSK3B参与脑梗死进展

目的探索骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCS)外泌体源性miR-128调控GSK3B对脑梗死大鼠自噬与炎性反应的影响。方法分离BM-MSCS及外泌体,实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)对miR-128与GSK3B的表达量进行检测,双荧光素酶报告实验验证miR-128和GSK3B的靶向关系,Western blot法检测自噬相关蛋白(LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ)的表达,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测组织中炎性细胞因子(TNF-α、IL-6)分泌水平。结果与sham组大鼠比较,大脑中动脉闭塞模型(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠脑组织中miR-128表达下调,但miR-128在BM-MSCS外泌体中表达上调(P<0.05)。外泌体处理或上调外泌体中miR-128表达能降低MCAO大鼠脑组织中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达,抑制TNF-α、IL-6浓度(P<0.05)。但下调外泌体中miR-128表达则相反。miR-128与GSK3B的靶向关系被验证,下调miR-128的作用被si-GSK3B部分抵消。结论BM-MSCS外泌体源性miR-128通过靶向GSK3B抑制脑梗死大鼠自噬与炎性反应。

银杏叶提取物抑制miR-128-3p表达对阿尔茨海默病老龄大鼠的干预效果

目的 研究银杏叶提取物抑制微小RNA-128-3p(miR-128-3p)表达对阿尔茨海默病老龄大鼠的干预效果。方法 50只大鼠随机选取10只为正常组,其余40只建立阿尔茨海默病模型,喂养1 w后随机抽样正常和模型鼠各2只,取海马组织进行苏木素-伊红(HE)染色,发现模型鼠海马组织胞体形状不规则、出现大量细胞的核仁固缩为建模成功。建模成功后将阿尔茨海默病模型组剩余的38只大鼠分为模型组(13只)、低剂量组(12只)、高剂量组(13只)。低剂量组给予银杏叶提取物10 mg/kg灌胃,高剂量组给予银杏叶提取物40 mg/kg灌胃,正常组、模型组给予等量的生理盐水。以上各组均连续灌胃2 w。对比分析各组转化生长因子(TGF)-β1、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平及Toll样受体(TLR)-4/核因子(NF)-κB通路蛋白表达量。结果 与正常组相比,模型组、低剂量组、高剂量组TGF-β1、IL-1β、IL-6、miR-128-3p、TLR4、NF-κB水平升高,具有统计学差异(P<0.05);与模型组相比,低剂量组、高剂量组上述指标水平降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与低剂量组相比,高剂量组上述指标水平降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 阿尔茨海默病模型老龄大鼠通过银杏叶提取物抑制miR-128-3p表达后可以减轻海马组织病变,减轻脑组织内炎性反应,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB通路有关。

颈动脉超声定量参数联合血清miR-128b、miR-146a对急性缺血性脑卒中的诊断价值及对预后的评价意义

本研究选取了112例急性缺血性脑卒中(AIS)患者作为观察组,另选取112例健康体检者作为对照组。用彩色多普勒超声检测所有对象的颈动脉,并对血清miR-128b、miR-146a水平进行测定,结果发现观察组颈内动脉收缩期峰值血流速度(PSV)、miR-146a低于对照组,舒张末期血流速度(EDV)、颈动脉内膜中层厚度(IMT)、miR-128b高于对照组(P<0.05)。颈动脉超声定量参数与两种血清生物标志物联合诊断AIS的AUC为0.898,大于任一单一指标;PSV、EDV、IMT、miR-128b、miR-146a与AIS患者预后(mRs评分)显著相关(P<0.05)。颈动脉超声定量参数与两种血清生物标志物联合预测AIS患者预后敏感度达71.43%,特异度达90.48%。颈动脉超声定量参数、血清miR-128b、miR-146a在诊断AIS及预测预后方面具有较高应用价值。

中外不同猪种皮下脂肪miR-128、miR-133b差异表达研究

为了研究miRNA表达量与猪胴体及肉质性状的相关性,试验采用荧光定量PCR(qRT-PCR)技术对引进猪种大约克夏猪和6个四川省地方猪种(丫杈猪、内江猪、成华猪、青峪猪、雅南猪和藏猪)背部皮下脂肪中miR-128和miR-133b的差异表达情况进行测定和分析。结果表明:大约克夏猪miR-128相对表达量显著或极显著高于除雅南猪以外的其余地方猪种(P<0.05或P<0.01),地方猪种中雅南猪miR-128相对表达量最高,显著高于丫杈猪(P<0.05);大约克夏猪miR-133b相对表达量最高,显著高于青峪猪(P<0.05),地方猪种间差异不显著(P>0.05)。相关分析结果表明,miR-128、miR-133b与瘦肉率呈显著正相关(P<0.05),miR-128与单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸含量分别呈极显著负相关(P<0.01)和极显著正相关(P<0.01)。说明miR-128和miR-133b可能对猪脂肪沉积有抑制作用,miR-128还可能抑制单不饱和脂肪酸的生成,促进多不饱和脂肪酸的生成。

帕金森病患者治疗期间血清miR-153,miR-128b水平表达与非运动症状的相关性研究

目的观察并对比帕金森病患者不同治疗时期非运动症状[非运动症状评价量表(NMSS)]与血清微小RNA-153(miR-153)和微小RNA-128b(miR-128b)表达谱,并分析NMSS评分与miR-153和miR-128b之间的相关性,旨在为临床诸多帕金森病患者的非运动症状治疗提供新的干预靶点。方法前瞻性研究,选取湖南中医药高等专科学校附属第一医院2018年1月~2019年10月期间收治的82例帕金森患者,对所有患者均进行有效追踪,患者分别于治疗前、治疗4,8和12周于该院门诊复查,采用NMSS量表评估患者非运动症状,并检测血清miR-153和miR-128b水平,采用双变量Pearson相关性检验与一般线性回归分析得到线性回归方程,检验血清miR-153和miR-128b对帕金森患者非运动症状的影响。结果治疗前血清miR-153和miR-128b表达谱及NMSS评分>治疗4w>治疗8w>治疗12w,差异均有统计学意义(F=7.640,134.902,18.048,均P<0.05);经相关性分析得出:NMSS评分与血清miR-153和miR-128b表达谱均呈正相关(r=0.246,0.486,均P<0.001);经线性回归分析检验得到血清miR-153线性回归方程:Y=13.656+1.704X,血清miR-128b:Y=13.656+22.661X,帕金森患者血清miR-128b水平可能是患者非运动症状的影响因素(t=8.879,P<0.05)。结论帕金森病患者血清miR-153和miR-128b表达谱与非运动症状密切相关,临床可通过监测并干预血清miR-153和miR-128b表达谱,以此缓解帕金森病患者非运动症状,提高患者预后。

piR-128通过DNA甲基化酶3B对结直肠癌的调节作用及诊断价值

目的检测piR-128通过DNA甲基化酶(DNMT)3B对结直肠癌的调节作用及其诊断价值。方法选取2018年2月至2020年1月于河北北方学院附属第一医院普通外科诊断为结直肠癌的54例患者的手术标本,采用qRT-PCR检测结直肠癌组织及邻近正常组织中piR-128和DNMT1、DNMT3A、DNMT3B的表达水平,通过Spearman相关分析评估piR-128和DNMT3B之间的关联,并进一步分析不同piR-128和DNMT3B mRNA表达水平患者与其临床特征的关系,通过受试者操作特征曲线评估piR-128在结直肠癌中的诊断和预后价值。选取人结直肠癌细胞LIM1215,将其分为对照组(转染空白抑制剂、si-空白)、piR-128抑制剂组(转染piR-128抑制剂)、si-DNMT3B组(转染si-DNMT3B)、抑制剂+Vector组(转染piR-128抑制剂+DNMT3B Vector),通过Western blot、qRT-PCR分析piR-128和DNMT3B的相互调控关系,通过transwell实验、细胞划痕实验和流式细胞术分析piR-128和DNMT3B对结直肠癌细胞侵袭、迁移和凋亡的作用。结果结直肠癌组织中piR-128、DNMT3BmRNA的表达水平高于邻近正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析结果显示,结直肠癌组织中piR-128与DNMT3B mRNA表达水平呈正相关(rs>0,P<0.05)。piR-128抑制剂组、抑制剂+Vector组piR-128、DNMT3B mRNA水平低于对照组,si-DNMT3B组DNMT3B mRNA水平低于对照组,抑制剂+Vector组DNMT3B mRNA水平高于si-DNMT3B组,piR-128抑制剂组、si-DNMT3B组、抑制剂+Vector组DNMT3B蛋白水平均低于对照组,抑制剂+Vector组DNMT3B蛋白水平高于si-DNMT3B组,差异有统计学意义(P<0.05)。si-DNMT3B组、piR-128抑制剂组、抑制剂+Vector组在24、36、48、72 h的吸光度均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。piR-128抑制剂组、si-DNMT3B组、抑制剂+Vector组细胞侵袭、迁移率均低于对照组,凋亡率高于对照组,抑制剂+Vector组侵袭、迁移率高于si-DNMT3B组、piR-128抑制组,凋亡率低于si-DNMT3B组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论piR-128可能通过DNMT3B参与结直肠癌进展。

miR-128b对胶质母细胞瘤增殖、迁移和侵袭的影响

目的研究miR-128b对胶质母细胞瘤增殖、迁移及侵袭的影响。方法 Real-time PCR测定miR-128b在胶质母细胞瘤细胞系U251及正常星形胶质细胞系HA1800中的表达。将U251细胞分为3组,即miR-128b类似物组、miR-128b抑制剂组及对照组,分别转染miR-128bmimics、抑制剂及microRNA scramble。转染24h后,Real-time PCR检测3组细胞中miR-128b的表达水平。通过MTT实验、克隆形成实验测定细胞增殖;通过细胞划痕实验、Transwell小室基质渗透实验测定细胞迁移及侵袭能力。结果miR-128b在胶质母细胞瘤细胞系U251较正常星形胶质细胞系HA1800低表达,为HA1800的(0.21±0.03)倍(P<0.01)。转染24h后,miR-128b类似物组miR-128b较对照组表达量显著升高,为对照组的(9.16±0.85)倍(P<0.01),miR-128b抑制剂组较对照组表达量显著降低,为对照组的(0.32±0.03)倍(P<0.01)。MTT结果示:miR-128b类似物组A490nm值在24、48和72h显著低于对照组和miR-128b抑制剂组;培养72h后,miR-128b类似物组克隆形成率为(24.67±2.82)%,对照组为(52.48±5.86)%,miR-128b抑制剂组为(82.63±9.14)%,3组比较,miR-128b类似物组的克隆形成率显著低于对照组及miR-128b抑制剂组(P<0.05,P<0.01)。miR-128b类似物组、miR-128b抑制剂组及对照组划痕愈合率分别为(31.24±3.72)%、(88.74±7.52)%及(62.37±4.33)%,miR-128b类似物组的划痕愈合率显著低于对照组及miR-128b抑制剂组(P<0.05)。miR-128b类似物组、miR-128b抑制剂组及对照组侵袭细胞数分别为每个100倍视野下(278±28)个、(696±43)个及(463±37)个,miR-128b类似物组的迁移细胞数显著少于对照组及miR-128b抑制剂组(均P<0.05)。结论 miR-128b抑制胶质母细胞瘤增殖、迁移及侵袭,有望作为一个新的治疗靶点。

肠致病性大肠杆菌O128∶K67(B12)的脉冲场凝胶电泳分型方法研究

目的:应用脉冲场凝胶电泳技术(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)对由原料乳和牛粪中分离的肠致病性大肠杆菌EPEC O128∶K67(B12)进行基因分型,了解来自天津市9个奶牛场和保定市9个奶牛场的原料乳样品和牛粪样品分离株的遗传相关性。方法:对7株肠致病性大肠杆菌EPEC O128∶K67(B12)按照脉冲场凝胶电泳方法进行基因分型。结果:用XbaI限制性内切酶对分离株的基因组DNA进行酶切,经PFGE可形成17～20条清晰条带的分离株DNA指纹图谱,由聚类分析树状图可将7株分离株分为3个基因群。结论:7株肠致病性大肠杆菌EPEC O128∶K67(B12)分离株存在3个图谱类型,各型之间不紧密相关,未发现单个基因型菌株流行的迹象。研究发现,脉冲场凝胶电泳分型技术分辨率高、可靠、应用性强、技术先进,对原料乳的致病菌溯源有较大的应用前景。

羊口疮病毒ORF128锚蛋白对HEK293T细胞NF-κB信号通路的调节作用及机制

目的研究羊口疮病毒(ORFV)感染HEK293T宿主细胞后,其编码的锚蛋白ORF128蛋白对宿主核因子κB(NF-κB)信号通路的影响及其机制。方法将来自ORFV/QH02/2010株的ORF128 DNA序列分别构建至真核表达载体pCMV-tag2B和pEGFP-N1;在病毒感染细胞期间,利用反转录PCR检测ORF128 mRNA水平、激光共聚焦显微镜检测ORF128蛋白的亚细胞定位;利用双荧光素酶报告基因检测系统分析ORF128对NF-κB信号通路的调节作用, Western blot法检测NF-κBp65的核移位以及NF-κB抑制蛋白α(IκBα)的蛋白磷酸化水平。结果 ORF128蛋白在病毒感染早期表达且定位于宿主细胞核, ORF128蛋白可抑制NF-κB转录因子报告载体荧光素酶活性; ORF128的表达抑制NF-κBp65的核移位和磷酸化的IκBα(p-IκBα)的降解。结论 ORF128蛋白通过抑制p-IκBα蛋白的降解过程,阻止NF-κBp65蛋白核移位,进而抑制宿主NF-κB信号通路的活化。

子宫内膜癌组织中miR-128-3p、Notch1 mRNA、BMI1 mRNA的表达变化及其意义

目的观察子宫内膜癌组织中微小RNA-128-3p(miRNA-128-3p)及缺口受体1(Notch1)、B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1(BMI1)mRNA的表达变化,并探讨其临床意义。方法选取子宫内膜癌及其癌旁组织各150例份,采用qRT-PCR法检测两组织miR-128-3p及Notch1、BMI1 mRNA,Pearson相关分析法分析三指标间及其与子宫内膜癌临床病理特征的关系,K-M法绘制不同miR-128-3p、Notch1 mRNA、BMI1 mRNA表达子宫内膜癌患者生存曲线,多因素Cox回归分析法分析子宫内膜癌患者死亡影响因素。结果子宫内膜癌组织中miR-128-3p、Notch1 mRNA、BMI1 mRNA相对表达量分别为0.66±0.22、2.79±0.43、1.25±0.26,癌旁组织分别为1.00±0.21、2.02±0.37、0.76±0.28,两者比较,P均<0.05。子宫内膜癌组织中miR-128-3p与Notch1 mRNA、BMI1 mRNA表达呈负相关(r分别为-0.744、-0.733,P均<0.05),Notch1 mRNA与BMI1 mRNA表达呈正相关(r=0.803,P<0.05)。miR-128-3p、Notch1 mRNA、BMI1 mRNA表达均与子宫内膜癌分化程度、国际妇产科联盟(FIGO)分期、血管侵犯、淋巴结转移有关(P均<0.05)。miR-128-3p≥0.66、0.66者术后3年累积生存率分别为80.56%(58/72)、57.69%(45/78),两者比较,P<0.05;Notch1 mRNA≥2.79、<2.79者术后3年累积生存率分别为60.00%(45/75)、77.33%(58/75),两者比较,P<0.05;BMI1 mRNA≥1.25、<1.25者术后3年累积生存率分别为55.84%(43/77)、82.19%(60/73),两者比较,P<0.05。FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移、Notch1 mRNA≥2.79、BMI1 mRNA≥1.25为子宫内膜癌患者死亡独立风险因素,miR-128-3p≥0.66为独立保护因素。结论子宫内膜癌组织中miR-128-3p低表达,Notch1、BMI1 mRNA高表达,均与子宫内膜癌分化程度、FIGO分期、血管侵犯、淋巴结转移有关,是子宫内膜癌患者死亡的影响因素,可能成为患者预后评估的生物标志物。

MCS12DG128B与液晶显示模块的接口及程序设计

液晶显示有很广泛的用途,本文主要介绍了液晶显示模块CM320240-3E及其主控芯片SED1330的特性,然后给出了Freescale公司的MCS12DG128B芯片与液晶显示模块CM320240的接口电路及软件程序设计思路,并提供了完整的汉字显示程序。

尼麦角林联合阿替普酶治疗对急性缺血性脑卒中患者Chemerin、miR-128b表达的影响

目的探究尼麦角林联合阿替普酶治疗对急性缺血性脑卒中患者趋化素(Chemerin)、微小RNA-128b(Microrna-128b,miR-128b)表达的影响。方法选取收治的198例急性缺血性脑卒中患者,随机分为对照组、观察组各99例。对照组使用阿替普酶治疗,观察组使用尼麦角林联合阿替普酶治疗。对两组患者治疗前后生活能力、神经功能进行评价,检测两组颈动脉内膜中层厚度(carotid intima-media thickness,IMT)、颈动脉斑块面积及血液流变学指标水平,Western blot法检测Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/核因子-κB(nuclear factor-kappaB,NF-κB)通路蛋白表达,RT-PCR法检测miR-128b表达,酶联免疫吸附法检测血清炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(inter-leukin-1β,IL-1β)水平及Chemerin水平,对比两组治疗效果。结果治疗后,观察组日常生活能力评分(activity of daily living,ADL)高于对照组,国立卫生研究院卒中量表(National Institute of Health stroke scale,NIHSS)评分、IMT、斑块面积、全血高切黏度(high blood viscosity,HBV)、全血低切黏度(low blood viscosity,LBV)水平低于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组TLR4、NF-κB p65、miR-128b表达及TNF-α、IL-1β、Chemerin水平均低于对照组(P<0.05)。结论使用尼麦角林联合阿替普酶治疗,急性缺血性脑卒中患者生活能力、神经功能提升,IMT、斑块面积下降,血液流变学改善,炎症反应减轻,Chemerin、miR-128b表达受到调控,治疗效果显著。

基于MC9S12DG128B单片机模糊控制的直流电机调速系统的设计

本文介绍了freescale公司生产的16位单片机MC9S12DG128B在模糊控制系统中的应用,并以直流电机调速系统为例着重讨论了该系统模糊控制器的设计以及软件实现方法。实验结果表明该系统具有较好的鲁棒性,有很强的应用推广价值。

基于16位单片机MCS12DG128B PWM的舵机控制系统

舵机是一种位置伺服的驱动器,适用于那些需要角度不断变化并可以保持的控制系统,DG128B是一种freescale 16位单片机,其内部资源丰富,并提供了完善的PWM模块。用户利用MCS12DG128B的PWM模块可以非常方便地实现所需要的脉冲输出。本文详细介绍了一种基于freescale单片机MCS12DG128B的舵机控制系统。并通过了实验的验证。

不同热处理温度对AAR TC128Gr.B钢力学性能的影响

研究了不同回火温度与正火温度对AAR TC128Gr.B力学性能的影响。结果表明：轧态钢板经不同温度回火后,抗拉强度出现下降,而在500℃及650℃回火时屈服强度降低,在550℃及600℃回火时屈服强度升高;经不同温度正火热处理后,其屈服强度及抗拉强度均出现下降,屈服强度下降幅度更大;热处理态较轧态钢板的冲击吸收能量值均大幅提高,回火较正火后的冲击吸收能量值更高;500~650℃区间回火后的冲击吸收能量值变化不大;850~910℃区间正火,随正火温度的提高,冲击吸收能量值为先上升后下降的趋势。

脑梗死患者血清miR-181c、miR-128b表达水平及其与90天预后的相关性

目的探讨脑梗死患者血清微小RNA(miRNA)miR-181c、miR-128b表达水平及其与90天预后的相关性,为miRNA在脑梗死诊断和治疗上提供参考意义。方法选取128例脑梗死患者以及同期108例健康体检者作为研究对象,分别作为研究组和对照组。比较两组研究对象的miR-181c和miR-128b表达水平,并分析miR-181c、miR-128b表达水平与疾病严重程度的相关性以及脑梗死相关危险因素;根据90天随访的预后情况分为预后良好组和预后不良组,并对影响90天预后的相关因素进行单因素和Logistic回归分析,探讨影响疾病发生及预后的独立影响因素。结果研究组吸烟、高血脂、高血压、糖尿病以及心房颤动比例明显高于对照组(P<0.05),研究组患者miR-181c、miR-128b表达水平显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),Logistic回归分析结果显示糖尿病、miR-181c、miR-128b表达水平是脑梗死的独立危险因素(P<0.05);Spearman相关性分析显示急性脑梗死患者病情严重程度与血清miR-181c和miR-128b水平呈正相关(r=0.867,P=0.005;r=0.885,P=0.002);预后不良组患者发生高血压、糖尿病、心房颤动的比例和入院时NIHSS评分以及血清miR-181c、miR-128b水平均显著高于预后良好组(P<0.05),Logistic回归分析结果显示入院时NIHSS评分及血清miR-181c、miR-128b水平均与脑梗死患者90天预后存在密切相关性(P<0.05)。结论脑梗死患者血清miR-181c、miR-128b表达水平显著高于健康人群,糖尿病、miR-181c、miR-128b表达水平是脑梗死的危险因素(P<0.05),miR-181c、miR-128b表达水平与患者脑梗死严重程度存在显著正相关,且两者表达水平以及NIHSS评分均与急性脑梗死患者90天预后存在密切联系。

miR-128-3p靶向Lin28B增加肝癌细胞对奥沙利铂的敏感性

目的研究miR-128-3p与肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞对奥沙利铂敏感性的影响,并探讨其作用机制.方法采用qRT-PCR法检测人正常肝细胞HL-7702、HCC细胞BEL-7402和Hep-3B中miR-128-3p、Lin28B的表达;将对数生长期的HCC细胞BEL-7402、Hep-3B随机分成miR-128-3pmimics组(转染miR-128-3Pmimics)、miR-NC组(未转染细胞)、Lin28B-3'UTR WT组(载体psiCHECK2-Lin28B-3'UTR WT和miR-128-3p共转染)、Lin28B-3'UTRMUT组(载体psiCHECK2-Lin28B-3'UTRMUT和miR-NC共转染)和miR-128-3p+Lin28B组(miR-128-3p和Lin28B共转染)、si-Lin28B组(转染si-Lin28B)和si-NC组(转染沉默对照),均以脂质体转染.采用MTT法检测各组细胞的存活率和活力; Western Blot检测各组细胞的蛋白表达.结果与人正常肝细胞相比, HCC细胞BEL-7402和Hep-3B中miR-128-3p的表达较显著降低(P<0.01), Lin28B的表达较显著升高(P<0.01),且过表达miR-128-3p、沉默Lin28B均可抑制HCC细胞增殖,促进凋亡,增加HCC细胞对奥沙利铂的敏感性.Lin28B为mi R-128-3p的靶标,且回补Lin28B可逆转mi R-128-3p增加HCC细胞对奥沙利铂敏感性的作用.结论miR-128-3p可增加HCC细胞对奥沙利铂的敏感性,其作用机制可能与靶向Lin28B有关,提示miR-128-3p可作为抗奥沙利铂耐药性的潜在靶点.

三株肠致病性大肠杆菌O128∶K67(B_(12))生物学关系实验研究

目的 :了解从不同时间、不同地点食物中毒标本中分离到的 3株肠致病性大肠杆菌 (EPEC) O12 8∶ K6 7(B1 2 )是否存在着种间生物学差异。方法 :用同批试剂 ,对上述 3株细菌进行生化反应、噬菌体裂解及药敏等各种生物学试验。结果 :3株 EPECO12 8∶ K6 7(B1 2 )存在着四项生化反应差异 ;噬菌体裂解模式也不同 ;药敏试验结果亦存在着差异。结论 :同一血清型 EPEC O12 8∶ K6 7(B1 2 )存在着种间生物学差异。