FTA-DNA直接提取法在病原真菌分子鉴定中的应用

目的建立并评价FTA-DNA直接提取法在病原真菌分子鉴定中的应用。方法采用whatman FTA-DNA直接提取法从25个不同种属的45株培养的菌株和6例临床标本中提取病原真菌DNA,用于病原真菌的测序鉴定。配制不同浓度的孢子悬液探索该方法的检测限和安全性。结果 45株菌株扩增后均能得到1条清晰的DNA扩增片段,并成功测序。应用该方法亦成功从腹水、胸水、口腔拭子、宫颈拭子来源的临床标本中直接提取DNA并成功鉴定病原真菌。该DNA提取方法联合降落PCR能检测到1.0×103个cell/mL的孢子悬液,1.0×104个cell/mL及以下浓度的孢子悬液可以被FTA卡完全灭活。结论 FTA-DNA直接提取法可快速有效地从培养的菌株及部分临床标本中提取并保存病原真菌DNA,用于病原真菌的测序鉴定。

近期使用卡泊芬净或氟康唑影响念珠菌菌血症的流行病学

作者收集法国巴黎27所大学医院中共计2441例2618株念珠菌，其中复发97例。进行菌种鉴定，采用EUCAST方法进行抗真菌药药敏试验。9．5％（232／2441）初发念珠菌血症患者和56．7％（55／97）复发患者近30d内接受过抗真菌治疗。与用药前念珠菌菌种的分布相比，曾用氟康唑或卡泊芬净患者的分离菌中白念珠菌均见减少；

Vitek MS在丝状真菌临床分离株鉴定中的应用评估

目的评估Vitek MS对丝状真菌临床分离株的鉴定性能，为丝状真菌的准确菌种鉴定提供新思路。方法对接种在不同培养条件下的25株菌种信息明确的丝状真菌进行Vitek MS鉴定，评估培养条件对Vitek MS丝状真菌鉴定能力的影响。收集207株丝状真菌临床分离株对其进行Vitek MS鉴定．并将Vitek MS鉴定结果与形态学及基因测序鉴定结果进行比较，进一步评估Vitek MS对病原性丝状真菌的鉴定能力。结果不同培养条件对Vitek MS丝状真菌鉴定能力几乎无影响。Vitek MS可将87．9％（182／207）受试丝状真菌鉴定成功；余下未能鉴定菌株多因Vitek MS数据库中缺乏对应菌种的参考质谱峰图。Vitek MS对受试菌株特别是非曲霉丝状真菌的种水平鉴定率优于形态学方法。结论Vitek MS可用于丝状真菌临床分离株的准确鉴定；数据库中参考菌种的持续扩充对于提升Vitek MS丝状真菌鉴定能力至关重要。

科玛嘉念珠菌显色培养基的临床应用评价

目的比较科玛嘉念珠菌显色培养基(CHROMAgarCandida)和VITEK真菌鉴定卡鉴定出的念珠菌的符合程度。方法250株念珠菌用科玛嘉念珠菌显色培养基培养分离鉴定出白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌,并用VITEK真菌鉴定卡鉴定该4种念珠菌做统计比较。结果两法鉴定的白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌,无显著性差异,用χ2检验P值均>0.05。另有10株科玛嘉显色培养基上显色,被VITEK真菌鉴定卡鉴定为其它念珠菌,科玛嘉显色培养基鉴定念珠菌的特异性为96%(240/250),灵敏度为100%。结论科玛嘉念珠菌显色培养基具有快速培养分离和鉴定念珠菌的功能。