分离胶辅助VITEK-MS质谱仪快速鉴定血培养阳性菌的方法学研究

目的探讨用分离胶采血管联合基质辅助激光解析电离飞行时间质谱系统（VITEK-MS）快速鉴定血培养阳性菌的方法。方法收集2015年3~10月广州医科大学附属第一医院BacT/ALERT3D血培养仪报阳性,且直接涂片染色为革兰阴性菌的血培养标本50例,通过分离胶采血管直接从血培养瓶中提取细菌,采用VITEK-MS对细菌进行快速鉴定;同时用常规方法对细菌进行转种培养及鉴定,比较该方法的鉴定符合率。结果 50例血培养阳性的革兰阴性菌中,21例鉴定不出细菌名,29例鉴定出细菌名,阳性率58.0%,与常规鉴定方法阳性正确率为96.6%;分离胶联合VITEK-MS较常规法提前近24h。结论采用分离胶集菌联合VITKE-MS鉴定细菌的方法,对血培养阳性革兰阴性菌的鉴定符合率高,可以大大缩短鉴定的时间,方法快速、简便。

VITEK-MS系统直接鉴定体液培养阳性标本的研究

目的利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统(VITEK-MS)对体液培养阳性瓶进行直接鉴定,探索快速诊断临床致病菌的新策略。方法收集体液培养阳性瓶,不经琼脂平板培养,直接利用VITEK-MS进行鉴定,并与传统生化鉴定的方法进行比较分析。结果 50例体液培养阳性瓶中,传统细菌鉴定法检出47株阳性菌,3例阴性;而VITEK-MS直接鉴定法检出31株阳性菌,同样3例阴性。VITEK-MS直接鉴定法灵敏度达65.96%,特异度为100%,临床符合率为68%。鉴定时间从24小时缩短到2小时。结论利用VITEK-MS质谱系统直接鉴定体液培养阳性标本中的病原菌,能有效缩短细菌鉴定时间,准确快速地诊断临床致病菌。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在流感嗜血杆菌鉴定中的应用

目的分析基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOP MS)在流感嗜血杆菌鉴定中的应用。方法收集2022年1—12月南京艾迪康医学检验所有限公司实验室接收的1300份呼吸道感染患者的痰液或咽拭子样本培养和分离的嗜血杆菌,经16SrDNA序列测定检出50株为流感嗜血杆菌;分别使用MALDI-TOP MS检测系统、Analytic Products INC(API)生化细菌鉴定系统以及纸片法卫星试验对流感嗜血杆菌进行鉴定,比较并分析3种方法对流感嗜血杆菌的检出率、检测时间、检测成本及读取方式。结果MALDI-TOP MS检测系统对流感嗜血杆菌的检出率为98.0%,API生化细菌鉴定系统的检出率为90.0%,纸片法卫星试验的检出率为74.0%。MALDI-TOP MS对流感嗜血杆菌的检出率明显高于纸片法卫星试验,差异有统计学意义(P<0.05),而与API生化细菌鉴定系统比较检出率差异无统计学意义(P>0.05)。MALDI-TOP MS检测所用时间为5~10 min,API生化细菌鉴定检测所用时间为4~24 h,纸片法卫星试验检测所用时间为24~48 h。采用MALDI-TOP MS鉴定流感嗜血杆菌的成本更低,传统API生化细菌鉴定方法价格昂贵,而纸片法卫星试验操作比较繁琐。结论MALDI-TOP MS检测系统对流感嗜血杆菌鉴定的准确率较高,鉴定周期较短,成本较低,且使用方便,在临床上对流感嗜血杆菌的检出具有重要价值。

全自动快速微生物质谱检测系统在流感嗜血杆菌快速鉴定中的应用价值

目的:分析全自动快速微生物质谱检测系统在流感嗜血杆菌快速鉴定中的应用价值。方法:选取2021年6月—2022年6月大理市第一人民医院检验科微生物室收集的呼吸道感染患者的痰液样本或咽拭子样本680份为研究对象,应用16SrDNA序列鉴定细菌种属,获得流感嗜血杆菌30株。比较全自动快速微生物质谱检测系统、常见微生物鉴定系统、M-H琼脂药敏试验对流感嗜血杆菌的鉴定能力及三种鉴定方法的临床应用特点。结果:全自动快速微生物质谱检测系统流感嗜血杆菌检出率高于M-H琼脂药敏试验,差异有统计学意义(P=0.020)。M-H琼脂药敏试验和常见微生物鉴定系统鉴定能力比较,差异无统计学意义(P=0.222)。全自动快速微生物质谱检测系统鉴定操作简单,用时更短,结果自动读取,经济性良好。结论:全自动快速微生物质谱检测系统可以在短时间内完成对流感嗜血杆菌的鉴定,检出率高、操作简便、经济性良好。

全自动快速微生物质谱检测系统在流感嗜血杆菌快速鉴定中的价值分析

目的 分析全自动快速微生物质谱检测系统(MALDI-TOF)在鉴定流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae,Hi)中的应用价值。方法 收集皖北煤电集团总医院2020年7月至2021年3月间住院患者1 135份痰液样本,提取来自不同患者的Hi 30株,分别采用MALDI-TOF、全自动细菌鉴定仪(Vitek)及M-H琼脂药敏试验对所有受检标本进行细菌种属鉴定,记录并比较3种方法对Hi菌株的鉴定结果。结果 MALDI-TOF对Hi菌株的检出率为96.67%,高于Vitek的86.67%,但差异无统计学意义(χ^(2)=1.333,P=0.248);也高于M-H琼脂试验的73.33%,差异有统计学意义(χ^(2)=5.143,P=0.023)。3种方法检测用时分别为(0.15±0.01)h、(17.04±5.93)h和(36.78±9.58)h,差异有统计学意义(F=18.258,P<0.001);进一步用LSD-t检验对3种方法用时进行两两比较,差异均有统计学意义(P均<0.001)。结论 全自动快速微生物质谱检测系统可对Hi进行有效鉴定,具有成本低、准确率高、操作简便、检测用时短等明显优点,在临床Hi的鉴定中具有较高应用价值。

高原地区两种微生物鉴定系统对临床常见病原菌鉴定的一致性分析

目的比较MicroTyper MS微生物快速鉴定基质辅助激光解析飞行时间质谱和VITEK 2Compact全自动微生物分析系统对细菌的鉴定能力。方法950株临床分离的菌株,均采用MicroTyper MS和VITEK 2 Compact同时进行鉴定,以VITEK 2 Compact的结果为准,分析MicroTyper MS与VITEK 2Compact结果的一致性。结果同时鉴定950株细菌,与VITEK 2 Compact鉴定结果相比,MicroTyper MS可将841株(88.5%)鉴定至种,可将899株(94.6%)鉴定至属。鉴定不一致51株(5.4%)。MicroTyper MS与VITEK 2 Compact相比,鉴定至种的一致率为88.5%,鉴定至属的一致率为94.6%。695株革兰阴性细菌中,MicroTyper MS可将611株(87.9%)鉴定至种,可将649株(93.4%)鉴定至属。鉴定不一致46株(6.6%)。247株革兰阳性球菌中,MicroTyper MS可将222株(89.9%)鉴定至种,可将242株(98.0%)鉴定至属。鉴定不一致5株(2.0%)。8株酵母菌中,MicroTyper MS可将8株(100.0%)鉴定至种,鉴定不一致0株。结论MicroTyper MS与VITEK 2 Compact对临床常见细菌的鉴定结果具有较高的一致性,但MicroTyper MS相对VITEK 2 Compact来说具有耗时短、成本低等优点,提高了鉴定效率,为临床诊疗带来了便利。

AUTOF MS 1000质谱鉴定系统对临床实验室常见菌株鉴定能力的评估

目的评估Autof MS 1000质谱鉴定系统对临床实验室常见菌株的鉴定能力。方法参考CLSI M52标准对Autof MS 1000质谱鉴定系统进行评估。菌株鉴定的评估指标包括准确度和精密度。准确度评估以Bruker MALDI-TOF作为参比设备,以Autof MS 1000为待评估设备,选取231株能够涵盖实验室80%~90%的常见分离菌株及1株室间质评菌株作为检测标本,包括革兰氏阳性需氧菌77株,革兰氏阴性需氧菌95株,厌氧菌30株,酵母样真菌30株,待评估设备鉴定结果与参比设备鉴定结果一致时判断为相符,若结果不一致则以测序方法(细菌为16S RNA,真菌为ITS区测序)鉴定结果为准。精密度评估为选取12株室内质控菌株和临床分离菌株作为检测标本,在Autof MS 1000质谱鉴定系统上进行重复性测试,每株菌重复检测3次,判断其鉴定结果的一致性。以准确度大于90%、精密度大于95%为判断合格标准。结果232株临床实验室常见分离菌株鉴定结果准确度为100%;12株室内质控菌株和临床分离菌株重复性检测结果的精密度为100%。结论Autof MS 1000质谱鉴定系统对临床实验室常见菌株鉴定的准确度和精密度都很高,并且具有快速、低耗及易操作等优势,建议可在临床微生物实验室推广使用。

基质辅助激光解析电离飞行时间质谱Clin-TOF-Ⅱ系统对酵母菌鉴定效能评估

目的:评估国产Clin-TOF基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)系统对于临床酵母菌的鉴定效能。方法:纳入酵母菌25个菌种,总计156株菌株,均选自中国侵袭性真菌监测网。所有入组菌株均通过内转录间隔区(ITS)扩增测序,准确鉴定至种水平;采用Clin-TOF质谱系统对入组菌株进行直接涂抹法鉴定。结果:Clin-TOF质谱系统对酵母菌准确鉴定率达到95.5%(149/156);其中念珠菌属鉴定准确率为96.8%(122/126);有11株新型隐球菌中有1株鉴定错误。纳入的近平滑念珠菌复合体中的2株似平滑念珠菌(C.metapsilosis)以及光滑念珠菌复合体中的1株Candida nivariensis均能准确鉴定到了种水平。结论:Clin-TOF质谱系统在酵母样真菌鉴定方面已经可以基本满足临床需求。然而对于某些菌种的指纹图谱仍然需要进一步的优化和完善。

Autof MS 1000质谱鉴定系统对临床分离病原菌的鉴定能力评价

目的分析Autof MS 1000质谱鉴定系统和VITEK 2 Compact全自动微生物分析系统对临床分离病原菌鉴定的一致性和准确率,评价Autof MS 1000质谱鉴定系统对病原菌的鉴定能力。方法收集该院2020年9月至2021年5月分离自临床的非重复菌株共190株,分别采用Autof MS 1000质谱鉴定系统和VITEK 2 Compact全自动微生物分析系统两种细菌鉴定仪进行鉴定,鉴定结果不一致或未鉴定出结果的菌株以16SrDNA或真菌ITS区测序结果为准,分析比较两种仪器鉴定结果的一致性和准确率。结果190株临床分离株中,在种水平上鉴定一致的有166株(87.4%),不一致的有24株(12.6%)。鉴定结果不一致的菌株经16SrDNA或真菌ITS区测序确认,Autof MS 1000质谱鉴定系统准确率为70.8%(17/24),明显高于VITEK 2 Compact全自动微生物分析系统准确率[45.8%(11/24)],差异有统计学意义(P<0.05)。Autof MS 1000质谱鉴定系统鉴定总准确率为93.2%(177/190),略高于VITEK 2 Compact全自动微生物分析系统鉴定总准确率[90.0%(171/190)],但差异无统计学意义(P>0.05),其中Autof MS 1000质谱鉴定系统革兰阳性需氧菌鉴定准确率为94.8%(55/58),略高于革兰阴性需氧菌鉴定准确率(89.2%,83/93)。厌氧菌鉴定准确率为100.0%(6/6);酵母样真菌鉴定准确率为100.0%(33/33)。结论对于临床少见菌,Autof MS 1000质谱鉴定系统较VITEK 2 Compact全自动微生物分析系统具有更高的准确率,且快速、经济,适合用于临床分离病原菌的常规鉴定。

MALDI-TOF系统在鉴定流感嗜血杆菌中的应用价值

目的:探讨全自动快速微生物质谱检测系统(MALDI-TOF)对流感嗜血杆菌的鉴定价值。方法:随机选取2020年1—6月于医院住院或门诊就诊的呼吸系统感染患者的痰液标本或咽拭子标本1200份,分别采用MALDI-TOF检测系统、常规生化细菌鉴定系统、M-H琼脂药敏试验进行测定,比较三种方法对流感嗜血杆菌的检出率及检测时间。结果:MALDI-TOF检测系统对流感嗜血杆菌的检出率(97.78%)高于M-H琼脂药敏试验法(75.56%),差异有统计学意义(P<0.05),但与常规生化细菌鉴定系统检出率(88.89%)比较差异无统计学意义(P>0.05)。三种检测方法检测流感嗜血杆菌所需时间显示:MALDI-TOF检测系统<常规生化细菌鉴定系统<M-H琼脂药敏试验法,差异有统计学意义(P<0.05)。MALDI-TOF检测系统对检测时间、检测流程、检测结果判读、检测成本的满意度最高,其次是常规生化细菌鉴定系统、M-H琼脂药敏试验法,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:全自动快速微生物质谱检测系统鉴定流感嗜血杆菌的应用价值高,检测时间短,检出率高。

中药复方六神丸中多类成分的多维液质系统筛查和鉴定

中药复方中成分复杂,通常包含不同类别的多种化合物。因此,建立无靶标的筛查和鉴定中药复方的分析模式是十分必要的。本研究采用液相色谱/飞行时间质谱(HPLC/TOF-MS)和液相色谱/离子阱多级质谱(HPLC/IonTrapMSn)的多维液质联用系统筛查和鉴定中药复方六神丸中的多类化学成分。在优化的液质条件下,飞行时间质谱对六神丸质谱信息中的每个色谱峰进行了精确分子量测定,并匹配出可能的化学组成;再结合离子阱质谱提供的多级碎片结构信息对其进行结构解析,最后采用相应的标准品进行确证。本研究共鉴定出六神丸中分别来源于蟾酥、麝香和牛黄三味药材的25种化合物,为复杂体系的多类别成分分析提供了一种有效、可靠的新模式。

3种鉴定系统在微生物室间质量评价中的应用和比较

目的评价基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)、Vitek 2 Compact全自动微生物鉴定系统(简称Vitek 2 Compact)和MicroScan WalkAway 96 plus全自动微生物鉴定系统(简称MicroScan WalkAway 96 plus)在质量控制中的鉴定应用价值。方法采用MALDI-TOF MS、Vitek 2 Compact和MicroScan WalkAway 96 plus同时对61株不同批次的质控菌株进行鉴定并作比较。结果 MALDI-TOF MS、Vitek 2Compact和MicroScan WalkAway 96 plus对26株革兰阴性杆菌的鉴定准确率分别为88.4%、100.0%和84.6%,对15株革兰阳性球菌的鉴定准确率分别为100.0%、100.0%和86.7%,对8株酵母样真菌的鉴定准确率分别为100.0%、100.0%和87.5%,对12株其他细菌的鉴定准确率分别为100.0%、83.3%和41.7%。结论 MALDI-TOF MS、Vitek 2 Compact和MicroScan WalkAway 96 plus 3个鉴定系统对常见的革兰阳性球菌、革兰阴性杆菌、酵母样真菌的鉴定准确性较好。在苛养菌和革兰阳性杆菌方面,MALDI-TOF MS和Vitek 2 Compact的鉴定准确性较MicroScan WalkAway 96 plus好。

VITEK2 Compact与VITEK MS系统对细菌鉴定结果的比较研究

目的比较VITEK 2 compact和ⅥTEK MS两套系统对细菌鉴定的符合率。方法 分别应用VTEK 2 compact和VITEK MS对289株临床分离菌株、室间质评菌株和标准菌株同时进行鉴定,采用测序技术对两者鉴定结果不一致的菌株进行确认。结果 VITEK 2 compact对细菌"种"和"属"鉴定符合率分别为88.58%(256/289)和100%(289/289),VITEKMS对细菌"种"和"属"鉴定符合率分别为88.93%(257/289)和100%(289/289)。结论 VITEK MS对细菌"种"鉴定符合率高于VITEK 2 compact,且具有操作简便和检测快速等优势,使细菌鉴定更准确、快速和高效,可用于临床微生物实验室的细菌常规快速鉴定。

尿流式细胞术、MALDI-TOF MS及VITEK 2 XL全自动微生物鉴定系统联合试验对尿培养标本的药敏鉴定结果评价

目的评价尿流式细胞术、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)和VITEK 2 XL全自动微生物鉴定系统联合试验对中段尿培养标本直接鉴定结果的可靠性。方法收集2021年1-10月于苏州市第九医院住院的296例泌尿系统感染患者送检的尿培养阳性标本。采用UF-1000i进行尿液标本菌量计数,选择中段尿菌量计数>10^(5)个/毫升的标本,使用MALDI-TOF MS技术进行直接鉴定;再将中段尿菌量计数>10^(5)个/毫升的标本进行稀释,使用VITEK 2 XL全自动微生物鉴定系统进行直接药敏试验,将联合试验结果与常规药敏试验结果进行比较,评价其可靠性。结果MALDI-TOF MS直接法鉴定结果中鉴定到种水平为93.9%,鉴定到属水平为97.6%,MALDI-TOF MS没有提供可靠的鉴定结果占2.3%。次代培养后VITEK 2 XL鉴定结果符合率为100.0%。联合试验鉴定结果与常规药敏试验结果差异无统计学意义(P>0.05)。革兰阴性菌直接药敏最合适的尿液菌量计数在500~1100个/微升。革兰阳性菌直接药敏最合适的尿液菌量计数在500~1500个/微升。结论联合试验进行阳性尿培养标本的直接鉴定与直接药敏试验可快速、准确地得到鉴定及药敏结果。

代谢流系统水平分析鉴定脂肪酸生物合成

采用液相色谱-串联质谱定量分析由人类巨细胞病毒（HCMV）诱导的代谢物活性的变化。向哺乳动物细胞提供^13C标记的葡萄糖和谷氨酰胺，监测代谢物组标记的动力学常数，阐明其代谢流情况。细胞感染HCMV后，很多中间碳代谢途径（包括糖酵解）上调，通过TCA循环使代谢流向脂肪酸生物合成途径的变化尤为显著。脂肪酸生物合成的抑制使HCMV和另一种流感病毒A的复制也受到抑制。结果表明脂肪酸生物合成对病毒的复制很重要，代谢流系统水平分析可鉴定抗病毒治疗的新靶点。

程序升温大体积进样和解卷积气相色谱-质谱法测定蔬菜水果中32种农药残留量

建立了蔬菜、水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯等32种农药的气相色谱-质谱（GC-MS）检测方法。样品经乙腈提取,石墨碳黑串联丙氨基固相萃取柱净化,采用程序升温大体积进样,GC-MS全扫描模式采集,结合解卷积技术定性分析,内标法定量。分别对程序升温和大体积进样等条件进行了研究,并考察了方法选择性和耐用性。在最优条件下,32种农药的响应值与浓度呈良好的线性关系（r〉0.995）,各农药的方法检出限为2.0~5.0μg/kg,以菠菜、四季豆和黄瓜为代表基质,进行3个水平（0.010~0.50 mg/kg）的加标回收试验（n=6）,回收率为65.2%~120.3%,相对标准偏差（RSD）为4.1%~22.3%。该方法快速、灵敏、可靠、耐用,能满足蔬菜、水果中多类多残留痕量分析的要求。

蛇龙珠与卡曼娜葡萄酒主要呈香物质鉴定

利用自动质谱图解卷积和鉴定系统并结合标样和保留指数定性在蛇龙珠和卡曼娜葡萄酒中鉴定出116种挥发性风味物质,并根据定量结果和各物质的感官阈值对每种物质的香气活性值(OAV)进行计算,寻找出2种葡萄酒中的主要呈香物质并根据OAV值对这2种葡萄酒的香气轮廓进行了模拟计算。研究发现我国河西走廊的蛇龙珠葡萄酒和智利莫莱山谷的卡曼娜葡萄酒总体香气轮廓较为相似,蛇龙珠中的C6醇类、脂肪酸乙酯、脂肪酸、醛、萜烯、降异戊二烯和内酯类物质含量较高,而卡曼娜中的乙酸酯、高级醇和酮类物质含量较高。蛇龙珠的花香、焦糖味和橡木味相对较强,β-大马士酮、左旋-2,3-丁二醇、苯乙醛和己酸乙酯、己酸、异丁醇、异戊醇7种物质是2种葡萄酒共同的主要呈香物质。

气-质联用法(EI.PCI.NCI)在系统毒物分析中的应用

本文应用电子轰击质谱(EI),正、负化学电离质谱(PCI.NCI)技术,建立了315种常见毒,药物的气一质联用系统分析方法。并建立了 EIMS、PCIMS、NCIMS 质谱图谱库。司法鉴定实践表明使用气相保留指数,特征碎片和 EI、PCI、NCI 图谱库检索等多指标的系统分析方法,是未知物鉴定的强有力的工具。