期刊文献+
共找到9篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
抗溶藻弧菌独特型单克隆抗体可变区基因的克隆和序列分析 被引量:3
1
作者 付建芳 黄威权 +1 位作者 夏永娟 杨安钢 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期57-59,共3页
 目的: 克隆并分析抗溶藻弧菌独特型单克隆抗体(mAb)VH及VL基因。方法: 从分泌抗溶藻弧菌独特型mAb的杂交瘤细胞株 (AL1 )中提取总RNA。利用RT- PCR技术,克隆抗溶藻弧菌独特型mAbVH 和VL基因, 并将其重组入PMD18 Tvector中进行测序分...  目的: 克隆并分析抗溶藻弧菌独特型单克隆抗体(mAb)VH及VL基因。方法: 从分泌抗溶藻弧菌独特型mAb的杂交瘤细胞株 (AL1 )中提取总RNA。利用RT- PCR技术,克隆抗溶藻弧菌独特型mAbVH 和VL基因, 并将其重组入PMD18 Tvector中进行测序分析。结果: VH基因序列全长为369bp, 编码 123个氨基酸; VL基因序列全长为 339bp, 编码113个氨基酸。通过国际联机检索及Kabat库分析, 二者均符合小鼠IgGV区基因的特征, 含有 4个框架区 (FR), 3个抗原互补决定区 (CDR)及两个抗体特征性的半胱氨酸残基。结论: 抗溶藻弧菌独特型mAb的VH和VL基因的克隆成功,为抗溶藻弧菌独特型mAb基因工程疫苗的构建奠定了基础。 展开更多
关键词 溶藻弧菌 单克隆抗体 基因克隆 序列测定 vl基因
下载PDF
伴发副肿瘤性天疱疮的Castleman瘤B细胞免疫球蛋白基因重排与超变分析 被引量:4
2
作者 王京 卜定方 朱学骏 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期454-461,共8页
目的 :我科近来研究了副肿瘤性天疱疮 (PNP)患者肿瘤在发病中的作用 ,证明 1例Castleman瘤产生针对表皮连接蛋白的抗体。本文进一步探讨肿瘤和抗体在疾病发生过程中的作用和PNP的发病机制。方法 :对 1例副肿瘤性天疱疮伴发已经证明可分... 目的 :我科近来研究了副肿瘤性天疱疮 (PNP)患者肿瘤在发病中的作用 ,证明 1例Castleman瘤产生针对表皮连接蛋白的抗体。本文进一步探讨肿瘤和抗体在疾病发生过程中的作用和PNP的发病机制。方法 :对 1例副肿瘤性天疱疮伴发已经证明可分泌自身反应性抗体的Castleman瘤患者肿瘤B细胞进行培养 ,免疫组化分析其表面标志 ;扩增患者肿瘤组织的RNA ,将PCR产物克隆、测序。对B细胞克隆的免疫球蛋白可变区基因重排和超变区突变特点进行分析。结果 :培养肿瘤细胞多数为CD2 0、HLA DR、smIgM、smIgG阳性。克隆得到IgVH 与IGHV3 9 0 1胚系基因片段接近 ,IgVL与IGKV4 1 0 1胚系基因片段同源。VH和VL 基因CDRs区的核苷酸改变均明显多于FRs区 ,并且在VH和VL 基因观察到的CDRs区替换突变数目远大于可能发生随机突变的值。结论 :本例伴发Castleman瘤的副肿瘤性天疱疮患者的肿瘤中存在特殊B细胞克隆 ,其已重排的免疫球蛋白可变区基因CDRs超变区发生明显体细胞突变 ,可能是抗原选择的结果。该克隆经过免疫球蛋白类别转换 ,可能直接产生与表皮自身抗原特异性结合的自身反应性IgG。 展开更多
关键词 副肿瘤性天疱疮 B细胞 患者 免疫球蛋白 抗体 克隆 可变区基因 vl基因 PCR产物 随机突变
下载PDF
鸡脾细胞总RNA的提取及其V_H、V_L基因的扩增 被引量:4
3
作者 曲悦 邬向东 谌南辉 《畜牧兽医杂志》 2004年第1期5-6,共2页
由鸡脾脏淋巴细胞中提取总RNA,反围录合成cDNA第一链,以cDNA为模板,根据鸡抗体V_H、V_L基因中的5’端和J端序列,设计并合成体外扩增V_H、V_L基因的两对引物,进行RT-PCR,成功地扩增出V_H、V_L基因片段。为鸡源ScFv噬菌体库的构建打下基础。
关键词 脾细胞 RNA提取 VH基因 vl基因 聚合酶链反应
下载PDF
抗隐孢子虫子孢子表膜单链抗体4G4的基因克隆及序列测定
4
作者 尹继刚 张西臣 +2 位作者 郑印焕 王延钊 李建华 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2004年第4期198-202,共5页
应用RT PCR技术 ,从分泌抗隐孢子虫表膜单克隆抗体 (McAb)的杂交瘤细胞 4G4中 ,扩增出抗体VH 和VL 基因 ,用Linker (Gly4 Ser) 3基因 ,将VH 和VL 基因连接成ScFv基因 ,并将其克隆至pMD 18T载体中。经核甘酸序列分析证实 ,VH 和VL 基因及... 应用RT PCR技术 ,从分泌抗隐孢子虫表膜单克隆抗体 (McAb)的杂交瘤细胞 4G4中 ,扩增出抗体VH 和VL 基因 ,用Linker (Gly4 Ser) 3基因 ,将VH 和VL 基因连接成ScFv基因 ,并将其克隆至pMD 18T载体中。经核甘酸序列分析证实 ,VH 和VL 基因及Linker基因拼接正确 ,基因全长 717bp ,经计算机分析 ,VH和VL 基因均为新发现的基因序列 。 展开更多
关键词 隐孢子虫 单链抗体 ER基因 可变区基因 RT-PCR技术 序列测定 虫子 vl基因 T载体 基因克隆
下载PDF
抗肿瘤基因工程单链抗体及其免疫霉素的研究
5
作者 喻启桂 姜绍谆 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第2期150-154,98,共6页
抗体V_H基因和V_L基因经寡核苷酸接头连接成ScFv基因,转入原核或真核表达系统中表达ScFv.ScFv具有亲本抗体相同的抗原结合特性和能力,且抗原性大大减弱.ScFv分子量小,易穿入肿瘤和实体组织内部, 也易进入病毒峡谷.ScFv与药物、毒素、同... 抗体V_H基因和V_L基因经寡核苷酸接头连接成ScFv基因,转入原核或真核表达系统中表达ScFv.ScFv具有亲本抗体相同的抗原结合特性和能力,且抗原性大大减弱.ScFv分子量小,易穿入肿瘤和实体组织内部, 也易进入病毒峡谷.ScFv与药物、毒素、同位素或酶等偶联构成的导向治疗制剂在血中清除迅速,不残留于正常组织,尤其不在肾脏中积聚,因而毒副作用很小.PCR技术的应用,使制备单链兔疫毒素在二周内即可实现,大大缩短了导向药物的制备时间.改善培养条件,E.coli能表达并装配和折叠成具有生物活性的双价ScFv及其免疫毒素. 展开更多
关键词 免疫毒素 基因 抗肿瘤 单链抗体 正常组织 导向治疗 毒副作用 真核表达系统 vl基因 折叠
下载PDF
抗胃癌抗体轻链可变区序列测定和三维结构模建
6
作者 杨丽娟 白玉杰 +2 位作者 药立波 闫小君 苏成芝 《世界华人消化杂志》 CAS 2004年第8期1778-1780,共3页
目的:确定抗胃癌抗体轻链可变区(VL)的一级结构,并模建其三级结构. 方法:从抗人胃癌噬菌体抗体库中筛选出VL基因,并进行序列测定和分析.利用同源蛋白结构模建技术,采用计算机辅助分子设计系统模建VL的三维空间结构. 结果:所获得的VL序... 目的:确定抗胃癌抗体轻链可变区(VL)的一级结构,并模建其三级结构. 方法:从抗人胃癌噬菌体抗体库中筛选出VL基因,并进行序列测定和分析.利用同源蛋白结构模建技术,采用计算机辅助分子设计系统模建VL的三维空间结构. 结果:所获得的VL序列符合鼠抗体可变区特征,并成功构建了其三维空间结构. 结论:所测得的VL一级结构和构建的三维空间结构均有较高的可靠性. 展开更多
关键词 轻链可变区 噬菌体抗体库 人胃癌 序列测定 三维结构 一级结构 同源蛋白 三维空间结构 vl基因 计算机辅助分子设计
下载PDF
蛋白水解抗体酶的天生性
7
作者 周永新 《中国药理通讯》 2003年第2期67-67,共1页
关键词 蛋白水解抗体酶 D-VIP L-VI 胚细胞系 vl基因 丝氨酸蛋白酶
下载PDF
抗人核内不均一核糖核蛋白A2/B1抗体可变区基因克隆、串联和表达 被引量:2
8
作者 王霞 彭晓东 +2 位作者 黎光 胡丽娟 毕建虹 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2004年第6期548-551,共4页
目的克隆抗人核内不均一核糖核蛋白A2/B1(heterogeneousnuclearribonucleoproteinA2/B1,HnRNPA2/B1)单克隆抗体的重链可变区(variableregionofheavychain,VH)和轻链可变区(variableregionoflightchain,VL)基因,构建抗HnRNPA2/B1单链抗体... 目的克隆抗人核内不均一核糖核蛋白A2/B1(heterogeneousnuclearribonucleoproteinA2/B1,HnRNPA2/B1)单克隆抗体的重链可变区(variableregionofheavychain,VH)和轻链可变区(variableregionoflightchain,VL)基因,构建抗HnRNPA2/B1单链抗体(singlechainFv,ScFv)基因,并在大肠杆菌表达。方法采用斑点ELISA、Western印迹和免疫组化检测抗HnRNPA2/B1单克隆抗体3E8的特异性,并通过逆转录-聚合酶链反应、重叠延伸PCR来克隆、串联VH和VL基因,构建抗HnRNPA2/B1ScFv基因pET28(a+)表达载体,在大肠杆菌BL21中诱导表达,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳、竞争抑制ELISA检测表达产物。结果3E8抗体能特异性地与HnRNPA2/B1合成肽以及3株人肺癌细胞内HnRNPA2/B1结合;克隆的VH基因为345bp,VL基因为309bp,符合小鼠抗体可变区特性;抗HnRNPA2/B1ScFv蛋白以包涵体形式表达,分子量约28000,并具有与抗原结合活性。结论成功构建了抗HnRNPA2/B1ScFv基因克隆,并在大肠杆菌中获得了功能性表达,为阐明HnRNPA2/B1与肺癌相关性奠定了实验基础。 展开更多
关键词 HNRNPA2/B1 核内不均一核糖核蛋白A2/B1 单克隆抗体 诱导表达 可变区基因 克隆 特异性 vl基因 表达载体 抗原结合活性
原文传递
抗心肌肌凝蛋白重链的单链抗体V_H和V_L基因的合成
9
作者 宋娜玲 赵启仁 +6 位作者 张春明 刘家慧 刘洁 褚丽萍 王德芝 贺欣 王月英 《中国辐射卫生》 2012年第1期1-3,共3页
目的为研制心肌显像剂—抗人心肌肌凝蛋白重链(HCMHC)的单链抗体,合成抗HCMHC单链抗体的VH和VL基因。方法用TRIZOL试剂从抗HCMHC McAb杂交瘤细胞提取总RNA,合成第一链cDNA,以这第一链cDNA为模板,用合成的特异引物、DNA聚合酶和四种单核... 目的为研制心肌显像剂—抗人心肌肌凝蛋白重链(HCMHC)的单链抗体,合成抗HCMHC单链抗体的VH和VL基因。方法用TRIZOL试剂从抗HCMHC McAb杂交瘤细胞提取总RNA,合成第一链cDNA,以这第一链cDNA为模板,用合成的特异引物、DNA聚合酶和四种单核苷酸,对重链可变区(VH)基因和轻链可变区(VL)基因进行PCR扩增。对各步骤的产物进行鉴定,并做了对RNA的稳定性与贮存温度的关系,MgCl2浓度和循环温度的最优化的选择。结果合成的第一链cDNA纯度达95%;扩增产物的琼脂糖凝胶电泳带呈单一明亮泳带,VH和VL基因分子量分别为340bp和320bp,与文献相一致。结论成功合成了VH和VL基因,为心肌显像及其显像剂抗HCMHC单链可变区抗体的研究打下了基础。 展开更多
关键词 心肌肌球蛋白重链 可变区抗体 VH基因 vl基因
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部