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细胞内单域抗体的研究及应用进展
1
作者
潘永刚
刘晓志
+1 位作者
高健
王志明
《实用药物与临床》
CAS
2018年第4期457-463,共7页
来自骆驼或鲨鱼的单域抗体(Single domain antibodies,sd Ab)仅包含抗体的重链可变区,而从人抗体中筛选到的人sd Ab中包含重链(Heavy chain,VH)或轻链(Light chain,VL)的可变区。与完整抗体和sc Fv(Single chain antibody fragment)相比...
来自骆驼或鲨鱼的单域抗体(Single domain antibodies,sd Ab)仅包含抗体的重链可变区,而从人抗体中筛选到的人sd Ab中包含重链(Heavy chain,VH)或轻链(Light chain,VL)的可变区。与完整抗体和sc Fv(Single chain antibody fragment)相比,sd Ab是体外和体内都稳定的非聚合分子。与sc Fv片段不同,sd Ab是细胞质/细胞核蛋白质的新型抑制剂,并可以在细胞质中正确折叠。sd Ab能特异性抑制翻译后修饰,如磷酸化位点,构象异构体或蛋白质的相互作用区域,这些区域不适合使用基因敲除及RNAi技术进行研究。作为细胞质/细胞核蛋白质的抑制剂,使用sd Ab的研究数量持续增加,同时使用无需免疫动物的合成单域抗体文库中,研究者筛选出一些有成药应用前景的药物分子。目前,研究涉及的抗原靶点包括病毒蛋白、癌相关蛋白、毒素、神经系统相关蛋白、植物和果蝇蛋白等,可以针对几乎所有的细胞质/细胞核中的抗原表位,进行功能性sd Ab的筛选。逃逸蛋白结构和细胞穿透肽的高效转染的研究,拓宽了sd Ab的应用领域。新一代细胞特异性纳米颗粒,将携带细胞质/细胞核sd Ab作为蛋白抑制剂,开拓病毒感染及癌症新的治疗领域。
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关键词
胞内抗体
单域抗体
scFv片段
细胞质/细胞核内抗体
骆驼源VHH
鲨鱼源
vnar
人重链可变区
人轻链可变区
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职称材料
条纹斑竹鲨的抗乙肝表面抗原的单域抗体筛选与重组抗体活性探究
被引量:
1
2
作者
王婵
钟波
+2 位作者
吕正兵
王磊
陈剑清
《浙江理工大学学报(自然科学版)》
2022年第1期115-122,共8页
对免疫HBsAg-ad亚型抗原的条纹斑竹鲨中血清、脾脏和淋巴细胞进行多组学测序结果综合分析筛选出特异性序列,构建重组表达质粒pET-Duet-his-sumo-Anti-HBsAg-S1、pET-Duet-his-sumo-Anti-HBsAg-S2,分别转化大肠杆菌BL21(DE3),并诱导表达...
对免疫HBsAg-ad亚型抗原的条纹斑竹鲨中血清、脾脏和淋巴细胞进行多组学测序结果综合分析筛选出特异性序列,构建重组表达质粒pET-Duet-his-sumo-Anti-HBsAg-S1、pET-Duet-his-sumo-Anti-HBsAg-S2,分别转化大肠杆菌BL21(DE3),并诱导表达以及纯化重组单域抗体,通过ELISA和细胞水平检测重组单域抗体的活性。结果表明:通过生物信息学分析筛选出2条特异性序列,在16℃、0.5 mmol/L诱导剂条件下可获得2 mg/mL以上的重组蛋白;ELISA检测显示均与HBsAg具有较好的结合力,细胞水平活性分析得到Anti-HBsAg-S1具有较好的病毒抑制效果和生物学活性。该研究结果为其他抗原的特异性抗体筛选提供理论参考。
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关键词
单域抗体
条纹斑竹鲨
乙肝表面抗原
新抗原受体可变区
重组表达
下载PDF
职称材料
题名
细胞内单域抗体的研究及应用进展
1
作者
潘永刚
刘晓志
高健
王志明
机构
华北制药集团新药研究开发有限责任公司
出处
《实用药物与临床》
CAS
2018年第4期457-463,共7页
基金
国家重大新药创制项目(2017ZX09306010)
文摘
来自骆驼或鲨鱼的单域抗体(Single domain antibodies,sd Ab)仅包含抗体的重链可变区,而从人抗体中筛选到的人sd Ab中包含重链(Heavy chain,VH)或轻链(Light chain,VL)的可变区。与完整抗体和sc Fv(Single chain antibody fragment)相比,sd Ab是体外和体内都稳定的非聚合分子。与sc Fv片段不同,sd Ab是细胞质/细胞核蛋白质的新型抑制剂,并可以在细胞质中正确折叠。sd Ab能特异性抑制翻译后修饰,如磷酸化位点,构象异构体或蛋白质的相互作用区域,这些区域不适合使用基因敲除及RNAi技术进行研究。作为细胞质/细胞核蛋白质的抑制剂,使用sd Ab的研究数量持续增加,同时使用无需免疫动物的合成单域抗体文库中,研究者筛选出一些有成药应用前景的药物分子。目前,研究涉及的抗原靶点包括病毒蛋白、癌相关蛋白、毒素、神经系统相关蛋白、植物和果蝇蛋白等,可以针对几乎所有的细胞质/细胞核中的抗原表位,进行功能性sd Ab的筛选。逃逸蛋白结构和细胞穿透肽的高效转染的研究,拓宽了sd Ab的应用领域。新一代细胞特异性纳米颗粒,将携带细胞质/细胞核sd Ab作为蛋白抑制剂,开拓病毒感染及癌症新的治疗领域。
关键词
胞内抗体
单域抗体
scFv片段
细胞质/细胞核内抗体
骆驼源VHH
鲨鱼源
vnar
人重链可变区
人轻链可变区
Keywords
Intrabody
Single domain antibody
scFv fragment
Cytosolic/nuclear intrabody
Camelid VHHs
Shark
vnar
s
Human VH
Human VL
分类号
R961 [医药卫生—药理学]
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职称材料
题名
条纹斑竹鲨的抗乙肝表面抗原的单域抗体筛选与重组抗体活性探究
被引量:
1
2
作者
王婵
钟波
吕正兵
王磊
陈剑清
机构
浙江理工大学生命科学与医药学院
出处
《浙江理工大学学报(自然科学版)》
2022年第1期115-122,共8页
基金
国家级大学生创新创业训练项目(201910338029)。
文摘
对免疫HBsAg-ad亚型抗原的条纹斑竹鲨中血清、脾脏和淋巴细胞进行多组学测序结果综合分析筛选出特异性序列,构建重组表达质粒pET-Duet-his-sumo-Anti-HBsAg-S1、pET-Duet-his-sumo-Anti-HBsAg-S2,分别转化大肠杆菌BL21(DE3),并诱导表达以及纯化重组单域抗体,通过ELISA和细胞水平检测重组单域抗体的活性。结果表明:通过生物信息学分析筛选出2条特异性序列,在16℃、0.5 mmol/L诱导剂条件下可获得2 mg/mL以上的重组蛋白;ELISA检测显示均与HBsAg具有较好的结合力,细胞水平活性分析得到Anti-HBsAg-S1具有较好的病毒抑制效果和生物学活性。该研究结果为其他抗原的特异性抗体筛选提供理论参考。
关键词
单域抗体
条纹斑竹鲨
乙肝表面抗原
新抗原受体可变区
重组表达
Keywords
single-domain antibody
Chiloscyllium plagiosum
Hepatitis B surface antigen
vnar
recombinant expression
分类号
Q51 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
细胞内单域抗体的研究及应用进展
潘永刚
刘晓志
高健
王志明
《实用药物与临床》
CAS
2018
0
下载PDF
职称材料
2
条纹斑竹鲨的抗乙肝表面抗原的单域抗体筛选与重组抗体活性探究
王婵
钟波
吕正兵
王磊
陈剑清
《浙江理工大学学报(自然科学版)》
2022
1
下载PDF
职称材料
已选择
0
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参考文献
引证文献
统计分析
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