CHOP联合口服VP-16强化方案治疗非霍奇金淋巴瘤临床观察

目的 探讨在小剂量粒细胞集落刺激因子 ( G- CSF)支持下 ,CHOP联合低剂量、长时间口服 VP- 16强化方案治疗中、高度恶性非霍奇金淋巴瘤 ( NHL )的疗效及临床可行性。方法 选择经病理证实的中、高度恶性NHL 39例 (中度恶性 2 6例 ,高度恶性 13例 ) ,在保持标准的 CHOP方案剂量的基础上 ,联合口服 VP- 16胶囊 ( VP-16 10 0 m g,po,d1～ 1 0 ) ,继用 G- CSF 75μg,d1 1～ 2 0 ,疗程每 3周重复。结果 全组 CR 2 4例 ,PR 12例 ,S 2例 ,PD 1例 ,CR率 6 1.5 % ,总缓解率 ( CR+ PR) 92 .3%。全组随访 2年以上 35例 ,2年总生存率 6 5 .7% ( 2 3/ 35 ) ,2年无病生存率 4 5 .7% ( 16 / 35 ) ,中位生存期 5 4 .3个月。不良反应主要为骨髓抑制及胃肠道反应 ,白细胞及血小板降低分别为87.2 % ( 34/ 39)及 33.3% ( 13/ 39) ,恶心、呕吐为 6 1.5 % ( 2 4 / 39) ,方案给药的相对剂量强度为 90 .5 %。结论 本方案对中、高度 NHL能获得优越的近期疗效及远期生存 ,尤其对一些不良预后患者仍能获得良好的效果。骨髓抑制反应较重 ,在小剂量 G- CSF支持下毒性可耐受 ,并能保持较高的剂量强度 。

携带pdcd5基因的增殖型腺病毒与VP-16杀伤K562细胞的协同作用

程序性细胞死亡因子5(programmed celldeath5,PDCD5)在多种肿瘤细胞中表达明显降低。携带pdcd5基因的靶向增殖型腺病毒SG611-pdcd5对白血病细胞具有杀伤作用,对正常细胞具有相对保护作用。本研究旨在观察联合应用SG611-pdcd5与低剂量化疗药物依托泊甙(etoposide,VP-16)对白血病细胞系K562的作用。以不同浓度梯度的药物或不同感染复数(multiplicity of infection,MOI)的病毒液作用于K562细胞,培养48小时后用MTT法检测细胞存活率。结果表明,与SG611-pdcd5(MOI=40)或VP-16(0.5μg/ml)单独作用组相比,SG611-pdcd5(MOI=40)+VP-16(0.5μg/ml)组细胞存活率明显降低(p均<0.05),分别为(59.45±4.12)%、(82.91±3.41)%及(42.00±5.75)%。SG611-pdcd5与VP-16的协同作用强于PDCD5蛋白或携带pdcd5基因的非增殖型腺病毒Ad-pdcd5与VP-16的协同作用(p均<0.05);VP-16浓度为4.0μg/ml时,VP-16+SG611-pdcd5(MOI=40)组、VP-16+proPDCD5(40μg/ml)组及VP-16+Ad-pdcd5(MOI=80)组细胞存活率分别为(37.09±1.89)%、(52.36±1.64)%及(73.64±4.33)%。结论:SG611-pdcd5具有促进低剂量VP-16杀伤K562细胞的作用,二者联合可增强对白血病细胞的杀伤作用。

VP-16与DNA分子间电子转移的光谱学研究

运用脉冲辐解和圆二色谱技术,对用于治疗肿瘤的依托泊甙(VP-16)与鸟苷酸(GMP)和小牛胸腺DNA分子间电子转移的光谱进行了探讨。用脉冲辐解技术发现了VP-16与GMP之间的电子转移,测得两者之间的反应速率常数为3.16×107L.mol-1.s-1,并对它们的吸收光谱进行了归属,同时用圆二色谱技术发现了VP-16与小牛胸腺DNA之间相互作用。从而为医学工作者进一步了解和探讨VP-16的抗肿瘤机理提供了直接的理论依据。

MiR-18a通过靶定ATM调节白血病细胞HL-60对VP-16和VCR化疗敏感性

目的:研究miR-18a调控白血病细胞HL-60对VP-16和VCR化疗敏感性的分子机制。方法:构建稳定过表达miR-18a的HL-60-pc DNA3.1-miR-18a细胞系,检测其对VP-16和VCR的敏感性;构建ATM 3'UTR区的荧光素酶报告载体,验证miR-18a对ATM的靶向作用;Western blot检测过表达miR-18a的HL-60细胞内ATM的表达水平;siRNA敲减HL-60细胞中ATM水平,CCK-8检测细胞对VP-16和VCR的敏感性;在稳定过表达miR-18a的HL-60细胞内转染miR-18a inhibitor,Western blot检测ATM的表达水平,并检验细胞对VP-16和VCR的敏感性变化。结果:过表达miR-18a后,用相同浓度的VP-16和VCR处理时HL-60细胞存活率降低;荧光素酶活性检测表明,miR-18a能够抑制ATM的荧光素酶活性;过表达miR-18a后HL-60细胞内ATM的表达降低;敲减ATM后的HL-60细胞经VP-16和VCR处理后存活率降低;转染miR-18a inhibitor后,ATM表达水平显著上调,经VP-16和VCR处理的细胞存活率明显高于对照组。结论:miR-18a能够通过靶定ATM而调控白血病细胞HL-60对VP-16和VCR的敏感性。

荷能^(12)C离子对抗癌药物VP_(16)的效应

本文采用 5 5MeV u1 2 C6+离子注入鬼臼衍生物之一———鬼臼乙叉甙 (VP1 6) ,针对它在临床上的缺点 ,试图利用重离子的能量转移和质量沉积对其分子组成与结构进行改造 ,以增加它的水溶性 ,提高疗效 ,减小毒性。实验样品在离子注入后 ,先后进行了紫外 (UV)、高效液相 (HPLC)和液质联用 (HPLC -MS)分析 ,并对癌细胞K5 6 2和HL- 6 0分别进行了药理活性测定 ,取得了初步结果和进行了简短讨论。

GRP94表达在肺癌细胞对VP-16化疗耐药中的作用

[目的]检测在Ca2＋拮抗剂A23187诱导下,人肺腺癌细胞SPCA1中GRP94的表达水平,并分析其表达在肺癌细胞对VP-16耐药中的作用。[方法]采用RT-PCR、免疫荧光细胞化学方法检测不同浓度A23187处理组细胞的GRP94核酸及蛋白表达,用MTT法测定细胞在VP-16作用下的生存率。[结果]A23187可明显诱导SPCA1细胞GRP94核酸和蛋白表达,且表达水平随A23187呈浓度依赖性增加。MTT法测定结果显示：诱导组细胞（A23187浓度为0.5~6μmol/L）对VP-16的IC50值明显高于对照组,而且IC50值的升高亦对A23187呈一定的浓度依赖性,当A23187浓度为6μmol/L时IC50值最大。[结论]GRP94的表达与肺腺癌细胞SPCA1对VP-16的耐药性有关,有针对性地抑制GRP94基因表达或功能可能成为肺癌治疗的新方法。

钙离子在VP-16诱导HL-60细胞凋亡的作用

为了研究Ca2 + 在VP 16(etoposide)诱导HL 60细胞凋亡中的作用 ,采用流式细胞术 ,激光共聚焦显微镜和Western印迹方法进行观察。结果显示 ,VP 16可诱导HL 60细胞凋亡 ,并可引起细胞内Ca2 + 浓度的增加 ;细胞外钙离子螯合剂EGTA不抑制其诱导的细胞凋亡 ,而细胞内钙离子螯合剂BAPTA AM可抑制此过程 ,并且可抑制细胞色素C的释放。实验结果提示 ,Ca2 +

铁超载与铁剥夺对VP-16诱导HL-60细胞凋亡的影响

目的 :探讨铁超载与铁剥夺对依托泊甙 (VP 1 6)诱导HL 60细胞凋亡的影响。方法 :选择 1 0 0 μmol/LFeCl3和 1 0 μmol/L去铁胺 (DFO)与VP 1 6共同作用于HL 60细胞 ,并以单用VP 1 6作对照。光镜观察HL 60细胞形态学变化、DNA琼脂糖电泳及流式细胞仪 (FCM )等方法检测HL 60细胞凋亡。观察铁超载与铁剥夺对VP 1 6诱导HL 60细胞凋亡的影响。结果 :①FeCl3(1 0 0 μmol/L) +VP 1 6 (1 0 0mg/L) 6h ,1 2h ,2 4h ,细胞凋亡率(APO % )和亚二倍体峰 (Sub G1 ) ,低于单用VP 1 6(1 0 0mg/L)组 ,2组相比差异有统计学意义 (P <0 .0 5)。DNA电泳显示ladder出现时间滞后、数目减少。②DFO(1 0 μmol/L) +VP 1 6 (1 0 0mg/L )组APO %、DNA电泳ladder数目、Sub G1均比单用VP 1 6高 (P <0 .0 1 )。③等量的DFO与FeCl3和VP 1 6(1 0 0mg/L)与单用VP 1 6(1 0 0mg/L)结果相同。结论 :铁超载抑制化疗药物VP 1 6诱导HL 60细胞凋亡作用 ,铁剥夺可促进VP 1 6诱导HL 60细胞凋亡作用。临床上可采用铁剥夺的方法协同治疗白血病 。

Vp—16与DDP联合治疗23例晚期肺癌疗效观察

目前我国的肺癌发病率和死亡率仍在上升,男性肺癌占常见恶性肿瘤的首位,非小细胞肺癌(NSCLC)即鳞状细胞癌、腺癌和未分化癌约占所有肺癌病例数的70％～80％,对于NSCLC手术切除现仍为获长期生存的主要手段,但病变播散者化疗为最常用治疗方法,虽然NSCLC对放疗和化疗均不及SCLC(小细胞肺癌)敏感,但是由于新抗肿瘤药物的出现,加之采用新的联合用药方法,取得了一定的治疗效果。本文报道我院近年来应用鬼臼乙叉甙(Vp—16),顺氯氨铂(DDP)治疗NSCLC 23例疗效观察。

口服VP_(16)联合DDP方案治疗非小细胞肺癌

作者自１９９３年１月采用口服ＶＰ１６联合ＤＤＰ方案治疗非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）３５例，所有病例均由组织学检查证实。结果ＣＲ１例、ＰＲ１６例、Ｓ８例、Ｐ１０例，有效率（ＣＲ＋ＰＲ）４８．６％。全组中位生存期９．８个月。恶心、呕吐发生率为７８．３％，粘膜炎为１０．４％，白细胞和血小板降低发生率分别为５８．１％和１５．２％，大多为轻、中度。作者认为ＶＰ１６对小细胞肺癌（ＳＣＬＣ）的疗效有显著的时间依赖性，长时间、低剂量口服ＶＰ１６对ＳＣＬＣ有较好的疗效，但对ＮＳＣＬＣ的疗效是否更好，本文尚未证明。然而，方便给药，利于门诊化疗是其优点。

rhGM-CSF对VP-16诱导的HL-60细胞凋亡的影响

为探讨rhGM CSF对VP 16诱导的HL 60细胞凋亡的影响 ,我们观察了预先应用rhGM CSF孵育的HL 60细胞由VP 16诱导的凋亡过程及凋亡相关基因bcl 2和fas的表达变化。应用光学显微镜和电子显微镜观察细胞形态和超微结构的变化 ,凝胶电泳检测DNA的碎片 ,流式细胞术检测细胞凋亡率、bcl 2和fas的表达。实验结果显示 ,rhGM CSF可抑制VP 16诱导的HL 60细胞的凋亡 ,它加强了VP 16对bcl 2表达的下调作用 ,抑制了VP 16对fas表达的上调作用。由此推测 ,rhGM CSF可能是通过下调fas表达降低HL 60细胞对VP

抗癌药物VP-16-213及其类似物圆二色谱的研究

本文测定了抗癌药物 VP—16—213及11个不同立体构型的鬼臼毒衍生物的圆二色谱.研究了鬼臼糖甙类化合物的立体构型与其圆二色谱及抗癌活性之间的关系.

VP-16对Tca8113的作用及维拉帕米增效作用的研究

目的在实验室条件下观察VP-16对舌癌细胞株Tca8113的生长抑制作用及维拉帕米是否能增强VP-16对肿瘤细胞的抗癌活性。方法采用MTT法研究VP-16对Tca8113的细胞毒性作用,并尝试加入维拉帕米,评价其对VP-16的影响作用。结果VP-16可显著抑制舌癌细胞株Tca8113的生长,维拉帕米本身对Tca8113细胞的生长抑制作用较小,5 mg/L维拉帕米预作用1 h可明显提高VP-16的作用效果。结论VP-16对舌癌细胞株Tca8113有良好的生长抑制作用。维拉帕米对VP-16有化疗增敏作用。

异环磷酰胺和Vp-16治疗小细胞肺癌疗效观察

目的 观察异环磷酰胺、Vp 16联合化疗治疗小细胞未分化肺癌的疗效 ,探讨其副作用及影响预后的因素。方法 采用异环磷酰胺、Vp 16对 4 1例小细胞未分化肺癌进行化疗 ,Mesna、生理盐水水化。结果 完全缓解 (CR) 2 8例 ,占 6 8.3% ;部分缓解 (PR) 10例 ,占 2 4 .4 % ;进展 (PD) 3例 ,占7.3% ,总有效率为 92 .7%。 2例生存 5年 ,5例生存 3年以上。 13例出现不同程度的骨髓抑制 ,2例肾功损害 ,3例肝功损害 ,经间歇期及对症治疗均恢复正常。结论 异环磷酰胺、Vp 16联合化疗符合小细胞未分化肺癌治疗应大剂量、联合用药的特点 ,化疗效果好 ,毒副作用轻。

VP-16诱导PC-3细胞凋亡和bcl-2及c-myc基因表达的研究

目的 研究 VP- 1 6诱导 PC- 3细胞凋亡和癌基因 bcl- 2及 C- myc表达的关系。方法 用末端标记法(TUNEL )和流式细胞术 (FCM)研究 PC- 3细胞凋亡 ,以免疫组化方法研究 bcl- 2及 C- myc蛋白的表达。结果 TUNEL和FCM检测表明 ,PC- 3细胞的凋亡率随 VP- 1 6作用浓度增加和作用时间延长而升高 ;免疫组化结果显示 :bcl- 2和 c- myc基因表达的阳性百分率随 VP- 1 6作用浓度增加和作用时间延长而降低。结论 VP- 1 6能够诱导 PC- 3细胞凋亡和抑制其bcl- 2和 c- myc基因的表达 ,且具有作用浓度和作用时间依赖性。

圆二色谱研究VP-16在溶液中的构型构象变化及与DNA的作用

本文测定了抗癌药物VP-16及其在体内的代谢产物苦VP-16,苦VP-16羟基酸的第一偶合圆二色谱。研究了在不同pH条件下VP-16在溶液中的异构化和水解现象。通过圆二色谱的改变讨论了不同浓度的药物VP-16对小牛胸腺DNA的作用。

不同浓度 VP_(16)诱导 HL-60 细胞程序化死亡的作用

目的研究ＶＰ１６诱导ＨＬ－６０急性早幼粒白血病细胞程序化死亡。方法用４种不同浓度的ＶＰ１６诱导ＨＬ－６０细胞程序化死亡，ＤＮＡ电泳、电镜及苔盼蓝活细胞拒染试验测定实验结果。结果４种浓度ＶＰ１６均能诱导ＨＬ－６０细胞程序化死亡。结论ＶＰ１６是一种稳定可靠的细胞凋亡诱导剂。苔盼蓝拒染试验不能用于判定细胞是否发生了程序化死亡。ＤＮＡ电泳是确定细胞程序化死亡的简单可靠的方法。

GRP78表达下调可降低肺腺癌细胞对VP-16的耐药

背景与目的GRP78(Glucose-regu lated protein78)是GRPs家族的成员之一,其高表达与某些肿瘤细胞化疗耐药相关。本研究旨在探讨在BAPTA-AM作用下肺腺癌SPCA-1细胞GRP78表达水平的变化及GRP78表达下调与细胞对VP-16耐药的相关性。方法将SPCA-1细胞随机分为BAPTA-AM处理组、A23187处理组及对照组。采用RT-PCR和免疫荧光细胞化学方法分别检测各组细胞中GRP78在核酸和蛋白水平的表达。采用流式细胞仪测定细胞在化疗药物足叶乙甙(VP-16)作用下的细胞生存率。结果与对照组和A23187处理组相比,BAPTA-AM处理组细胞GRP78在核酸和蛋白水平的表达均明显降低,而其在VP-16作用下的细胞凋亡率则明显升高(细胞凋亡率:BAPTA-AM处理组为10.84±0.86;对照组为6.85±0.20;A23187处理组为4.95±0.19;P<0.01)。结论BAPTA-AM能够抑制SPCA-1细胞GRP78的表达,GRP78表达下调能够提高SPCA-1细胞对VP-16的敏感性。因此,采用化学药物或反义RNA等方法抑制GRP78的表达可能成为未来治疗肺癌的新手段。

TNF-α、VP-16联合诱导人结肠癌细胞凋亡株SW480细胞及其bcl-2表达的研究

目的 研究TNF α、VP 16联合诱导人结肠癌细胞株SW 480细胞凋亡及其对bcl 2基因表达的影响。方法 采用末端标记法 (TNUEL)检测结肠癌SW 480细胞凋亡情况 ;采用MTT法检测TNF α、VP 16对SW 480的细胞毒作用 ;采用免疫组化方法检测bcl 2基因的表达。结果 3 0 0 0U /ml的rhTNF α及不同浓度的VP 16作用于SW 480细胞 48h后能够抑制SW 480细胞生长 ,联合应用具有协同作用 ;与对照组比较 ,联合应用TNF α、VP 16作用于SW 480细胞 48h后 ,凋亡细胞数显著增加 (P <0 .0 5 ) ;免疫组化结果检查显示 ,随着VP 16浓度的增加及与TNF α联合作用 ,bcl 2基因表达阳性的细胞百分率逐渐降低。结论 联合应用TNF α、VP 16有协同诱导SW 480细胞凋亡及抑制bcl