淋巴瘤特异性高效基因表达载体survivin-VISA的构建与鉴定

目的构建含survivin启动子及VP16-GAL4-WPRE整合型系统性放大系统(VISA)的淋巴瘤特异性高效基因表达载体survivin-VISA(S-VISA)。方法应用基因重组技术构建含survivin启动子与土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件(WPRE)、二步转录放大系统(TSTA)和VISA系统分别构成的表达载体S-WPRE、S-TSTA和S-VISA,经PCR法及酶切鉴定。用脂质体法转染淋巴瘤细胞株Ramos、U937、Raji及人肝细胞株Chang Liver,检测荧光素酶活性。结果表达载体S-WPRE、S-TSTA和S-VISA通过PCR法及酶切鉴定证明构建正确,荧光素酶活性检测表明S-VISA载体在淋巴瘤细胞中实现了目的基因特异性高效表达。结论成功构建了含survivin启动子及VISA系统的淋巴瘤特异性高效基因表达载体S-VISA,为淋巴瘤基因治疗的进一步研究奠定了良好的基础。