抗MDV-1 VP22羧基端单克隆抗体的制备与免疫学特性鉴定

目的:制备抗血清I型马立克氏病病毒(MDV-1)VP22的单克隆抗体(mAb),并鉴定其免疫学特性。方法:在原核系统中表达VP22羧基端区域(94-243aa),获得融合表达产物GST-VP22C。将该表达产物切胶免疫小鼠,利用杂交瘤技术制备抗MDV-1 VP22C的mAb,并通过ELISA、间接免疫荧光(IFA)、Western blot鉴定其特性。结果:获得了2株可稳定分泌抗MDV-1 VP22C的mAb的杂交瘤细胞,命名为3F7、4E4。IFA鉴定表明,两株mAb均能与感染MDV-1的成纤维细胞反应,其中,3F7 mAb染色呈现MDV空斑,而4E4mAb呈现整个单层的细胞核荧光。ELISA和Western blot分析表明,3F7能与杆状病毒表达的VP22反应,4E4不具备该特性。对3F7 mAb进一步鉴定,确定了该mAb针对的具体位置在94-193aa处,是蛋白转导域的预测位置。结论:成功地制备了抗MDV-1 VP22C的mAb,为深入研究VP22蛋白的转导功能提供了有用的试剂。