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HSV-1 UL18基因重组载体的构建及其编码蛋白VP23的表达 被引量:1
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作者 杨攀 金富军 +3 位作者 夏敏 侯志波 王一飞 任哲 《中国卫生检验杂志》 CAS 北大核心 2013年第7期1639-1640,1664,共3页
目的:构建含有单纯疱疹病毒1型(HSV-1)UL18基因的原核表达载体。方法:先将UL18基因进行全序列PCR扩增,再将PCR产物克隆进pET-28a(+)质粒,最后将重组质粒转化进入原核表达系统E.coli BL21(DE3)中表达出带有6个组氨酸标签的重组VP23蛋白... 目的:构建含有单纯疱疹病毒1型(HSV-1)UL18基因的原核表达载体。方法:先将UL18基因进行全序列PCR扩增,再将PCR产物克隆进pET-28a(+)质粒,最后将重组质粒转化进入原核表达系统E.coli BL21(DE3)中表达出带有6个组氨酸标签的重组VP23蛋白。结果:UL18基因正确重组进pET-28a(+)质粒,并在E.coli BL21(DE3)中表达。结论:成功构建单纯疱疹病毒1型(HSV-1)UL18基因的重组载体,并在原核表达系统表达出其编码的衣壳蛋白VP23且带有组氨酸标签,为进一步优化VP23在发酵中的最佳表达条件,纯化并大量制备VP23,以及制备VP23的多克隆抗体奠定了基础。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒1型(HSV-1) vp23 三聚体 原核表达
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A型塞内卡病毒抗体ELISA检测方法的建立与应用
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作者 柴茂 马震原 +8 位作者 王淑娟 赵雪丽 刘影 王东方 杨海波 谢彩华 王翠 王华俊 闫若潜 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第2期133-139,共7页
为建立基于VP2蛋白、VP3蛋白检测猪塞内卡病毒A(SVA)抗体血清学方法。本研究扩增SVA VP2基因和VP3基因(VP23基因),基因全长1569 bp,并与原核表达载体pGEX-6p-1构建重组载体,IPTG诱导表达可溶性rVP23蛋白,经蛋白酶切除标签蛋白得到sVP23... 为建立基于VP2蛋白、VP3蛋白检测猪塞内卡病毒A(SVA)抗体血清学方法。本研究扩增SVA VP2基因和VP3基因(VP23基因),基因全长1569 bp,并与原核表达载体pGEX-6p-1构建重组载体,IPTG诱导表达可溶性rVP23蛋白,经蛋白酶切除标签蛋白得到sVP23蛋白,分子量约为58 kDa。通过矩阵优化、确定临界值、敏感性分析、特异性鉴定,建立了SVA抗体间接ELISA方法。该方法的S/P临界值标准为0.35,批内批间变异系数均小于7%,与中和试验结果符合率为95.49%。上述结果表明,该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可用于塞内卡病毒血清抗体检测和流行病学调查。 展开更多
关键词 塞内卡病毒 vp23基因 间接ELISA方法 血清学
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ESCRT-I Component VPS23A Sustains Salt Tolerance by Strengthening the SOS Module in Arabidopsis 被引量:10
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作者 Lijuan Lou Feifei Yu +7 位作者 Miaomiao Tian Guangchao Liu Yaorong Wu Yujiao Wu Ran Xia Jose M.Pardo Yan Guo Qi Xie 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2020年第8期1134-1148,共15页
The Salt-Overly-Sensitive(SOS)signaling module,comprising the sodium-transport protein SOS1 and the regulatory proteins SOS2 and SOS3,is well known as the central salt excretion system,which helps protect plants again... The Salt-Overly-Sensitive(SOS)signaling module,comprising the sodium-transport protein SOS1 and the regulatory proteins SOS2 and SOS3,is well known as the central salt excretion system,which helps protect plants against salt stress.Here we report that VPS23A,a component of the ESCRT(endosomal sorting complex required for transport),plays an essential role in the function of the SOS module in conferring plant salt tolerance.VPS23A enhances the interaction of SOS2 and SOS3.In the presence of salt stress,VPS23A positively regulates the redistribution of SOS2 to the plasma membrane,which then activates the antiporter activity of SOS1 to reduce Na+accumulation in plant cells.Genetic evidence demonstrated that plant salt tolerance achieved by the overexpression of SOS2 and SOS3 dependeds on VPS23A.Taken together,our results revealed that VPS23A is a crucial regulator of the SOS module and affects the localization of SOS2 to the cell membrane.Moreover,the strong salt tolerance of Arabidopsis seedlings conferred by the engineered membrane-bound SOS2 revealed the significance of SOS2 sorting to the cell membrane in achieving its function,providing a potential strategy for crop salt tolerance engineering. 展开更多
关键词 SOS pathway ESCRTs VPS23a SALT cell membrane
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