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猪轮状病毒重组VP6*蛋白的原核表达及间接ELISA检测方法的建立
1
作者
高力国
申翰钦
+3 位作者
陈诒全
陈胜
蔺文成
陈峰
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第9期4021-4028,共8页
旨在建立猪轮状病毒(porcine rotavirus,PoRV)的抗体检测方法。本研究以PoRV截短的VP6*(aa149-332)蛋白作为检测抗原,建立PoRV抗体的间接ELISA检测方法。结果显示:截短的重组VP6*(aa149-332)以包涵体和可溶性两种形式存在,大小为22.5 k...
旨在建立猪轮状病毒(porcine rotavirus,PoRV)的抗体检测方法。本研究以PoRV截短的VP6*(aa149-332)蛋白作为检测抗原,建立PoRV抗体的间接ELISA检测方法。结果显示:截短的重组VP6*(aa149-332)以包涵体和可溶性两种形式存在,大小为22.5 ku。优化后的ELISA反应条件:VP6*(aa149-332)包被量为25 ng·孔^(-1),抗原4℃过夜包被,5%脱脂奶粉溶液37℃封闭2 h,待检血清1∶400稀释、37℃孵育30 min,酶标羊抗鼠IgG二抗1∶24000稀释、37℃孵育30 min,显色15 min。试验确定阴阳性临界值OD_(450 nm)=0.418,可检测到抗体的最大稀释度为1∶3200,批内和批间重复变异系数均小于10%,并具有较好的特异性。28份血清与Western blot结果符合率为96.42%。ELISA OD_(450 nm)值与中和抗体效价log2相关系数R^(2)=0.8785。综上所述,本研究建立的PoRV抗体间接ELISA具有较高的特异性和敏感性,可应用于PoRV的临床血清样本抗体检测。
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关键词
猪轮状病毒
vp
6
*
蛋白
间接ELISA
原核表达
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职称材料
题名
猪轮状病毒重组VP6*蛋白的原核表达及间接ELISA检测方法的建立
1
作者
高力国
申翰钦
陈诒全
陈胜
蔺文成
陈峰
机构
华南农业大学动物科学学院
广东精捷检验检测有限公司
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第9期4021-4028,共8页
基金
广东省乡村振兴战略专项资金(“大专项+任务清单”)项目(220628175593089)。
文摘
旨在建立猪轮状病毒(porcine rotavirus,PoRV)的抗体检测方法。本研究以PoRV截短的VP6*(aa149-332)蛋白作为检测抗原,建立PoRV抗体的间接ELISA检测方法。结果显示:截短的重组VP6*(aa149-332)以包涵体和可溶性两种形式存在,大小为22.5 ku。优化后的ELISA反应条件:VP6*(aa149-332)包被量为25 ng·孔^(-1),抗原4℃过夜包被,5%脱脂奶粉溶液37℃封闭2 h,待检血清1∶400稀释、37℃孵育30 min,酶标羊抗鼠IgG二抗1∶24000稀释、37℃孵育30 min,显色15 min。试验确定阴阳性临界值OD_(450 nm)=0.418,可检测到抗体的最大稀释度为1∶3200,批内和批间重复变异系数均小于10%,并具有较好的特异性。28份血清与Western blot结果符合率为96.42%。ELISA OD_(450 nm)值与中和抗体效价log2相关系数R^(2)=0.8785。综上所述,本研究建立的PoRV抗体间接ELISA具有较高的特异性和敏感性,可应用于PoRV的临床血清样本抗体检测。
关键词
猪轮状病毒
vp
6
*
蛋白
间接ELISA
原核表达
Keywords
porcine rotavirus
vp
6
*protein
indirect ELISA
prokaryotic expression
分类号
S852.659.4 [农业科学—基础兽医学]
S854.43 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪轮状病毒重组VP6*蛋白的原核表达及间接ELISA检测方法的建立
高力国
申翰钦
陈诒全
陈胜
蔺文成
陈峰
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
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