磷酸鞘氨醇对胰腺癌PANC1细胞迁移、侵袭能力的影响

目的观察磷酸鞘氨醇（S1P）干预对胰腺癌PANC1细胞侵袭、转移能力的影响。方法采用20、40、80、100、150、200 nmol/L S1P干预PANC1细胞24 h，以未干预细胞作为对照组。另采用S1P特异性受体拮抗剂VPC23019 10 μmol/L预处理1 h后再应用100 nmol/L S1P干预PANC1细胞24 h（VPC＋S1P组），同时设单用S1P干预（S1P组）、单用VPC23019处理（VPC组）及未处理的对照组。采用荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测各组细胞N-Cadherin mRNA和蛋白表达，采用划痕实验和Transwell小室检测细胞的迁移、侵袭能力。结果对照组及20、40、80、100、150、200 nmol/L S1P干预组细胞N-Cadherin mRNA表达量分别为1.000±0.061、1.240±0.106、1.547±0.085、1.827±0.114、2.160±0.164、1.767±0.146、1.493±0.163，以100 nmol/L S1P干预组的表达量最高，各干预组均显著高于对照组，差异有统计学意义（P值均〈0.05）。对照组、S1P组、VPC组、VPC＋S1P组细胞N-Cadherin mRNA表达量分别为1.000±0.114、2.273±0.341、0.920±0.096、0.340±0.110；对照组、S1P组、VPC＋S1P组N-Cadherin蛋白表达量分别为1.000±0.176、2.167±0.242、0.510±0.151，细胞迁移率分别为（32.5±2.6）%、（57.5±3.3）%、（11.2±3.5）%，穿膜细胞数分别为（79±4.3）、（168±5.7）、（55±3.7）个/200倍视野。S1P组较对照组显著增加，VPC＋S1P组较S1P组及对照组显著减少，差异均有统计学意义（P值均〈0.05）。结论S1P干预可增强胰腺癌PANC1细胞的迁移、侵袭能力，应用S1P特异性受体拮抗剂VPC23019预处理可完全阻断S1P的作用，其机制可能与下调N-Cadherin基因表达有关。

高密度脂蛋白中的1-磷酸鞘氨醇对心肌细胞生存信号通路的影响

目的:观察高密度脂蛋白(HDL)不同组分中1-磷酸鞘氨醇(S1P)的含量对心肌细胞AKT和ERK1/2信号转导通路的影响,探讨HDL对心肌细胞的保护作用。方法:应用超速离心法和层析法,分离不同组分HDL;应用地高辛核素标记法检测各组分中S1P含量。给予小鼠心肌细胞不同S1P含量的HDL组分和S1P1、S1P3受体抑制剂VPC23019刺激后,用蛋白印迹法检测AKT和ERK1/2转导通路磷酸化水平的变化。结果 :与对照组比较,受不同HDL组分刺激后,成年小鼠心肌细胞AKT和ERK1/2磷酸化水平升高,且随着各组分中S1P含量升高,磷酸化水平呈上升趋势,而S1P1及S1P 3受体抑制剂VPC23019能明显阻断此种作用。结论:不同HDL组分通过细胞膜上的S1P受体,激活PI3K-AKT和MEK-ERK1/2信号通路,该作用通过S1P1和S1P3受体介导;HDL可能通过S1P发挥心肌保护作用。