环状RNA UBAP2和环状RNA VRK1在子痫前期患者血清中的表达及其与妊娠结局的关系

目的探讨环状RNA UBAP2(circUBAP2)、环状RNA VRK1(circVRK1)在子痫前期(PE)患者血清中的表达水平及其与妊娠结局的关系。方法选取2019年10月至2022年8月于石家庄市第四医院分娩的134例PE患者作为PE组,另选取同期分娩的134例健康孕妇作为健康组。比较PE组、健康组血清circUBAP2、circVRK1表达水平及不良妊娠结局发生率。依据PE患者妊娠结局,将其分为妊娠良好组(n=94)和妊娠不良组(n=40);比较血清circUBAP2、circVRK1表达水平;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清circUBAP2、circVRK1预测PE患者妊娠结局的价值;采用Logistic回归分析PE患者妊娠结局的影响因素。结果PE组患者血清circUBAP2表达水平低于健康组(P<0.05),circVRK1表达水平及总不良妊娠结局发生率高于健康组(P<0.05)。妊娠不良组PE患者收缩压、重度PE占比、血清circVRK1表达水平高于妊娠良好组(P<0.05)。血清circUBAP2、circVRK1预测PE患者妊娠结局的曲线下面积(AUC)分别为0.869、0.686,截断值分别为0.39、2.50,灵敏度分别为77.5%、70.0%,特异度分别为84.0%、63.8%。重度PE、低表达circUBAP2、高表达circVRK1与PE患者妊娠不良结局密切相关(P<0.05)。结论PE患者血清circUBAP2表达水平较低,circVRK1表达水平较高,与PE患者妊娠结局密切相关,且circUBAP2或可成为临床预测PE患者妊娠结局的辅助指标。

siRNA干扰VRK1表达对食管癌细胞BANF1蛋白表达及增殖迁移能力的抑制作用

目的探讨小干扰RNA干扰VRK1表达对食管癌细胞株BANF1蛋白的表达及其增殖迁移能力的影响。方法将VRK1 siRNA转染EC109和EC1细胞系干扰VRK1的表达, Western blot法检测VRK1siRNA干扰效率及siRNA干扰后食管癌细胞BANF1的表达。CCK-8实验和流式细胞术检测干扰VRK1表达后对细胞增殖能力的影响,Transwell细胞体外侵袭实验观察干扰前后细胞迁移能力的改变。结果两株食管癌细胞VRK1 siRNA转染后,转染实验组VRK1蛋白表达分别下调62.40%和52.14%,同时BANF1蛋白表达分别下调24.51%和52.87%。转染12 h后,细胞增殖开始受到抑制,36 h抑制率最高,分别达19.41%、20.10%。VRK1和BANF1表达下调后,G_1、G_2期细胞比例下降,S期细胞比例上升。实验组细胞迁移个数下降,细胞迁移数和对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论 siRNA干扰VRK1表达后可降低食管鳞癌细胞BANF1蛋白的表达,使食管鳞癌细胞增殖周期阻滞在DNA合成期,分裂期细胞比例下降,抑制其增殖及迁移能力。

2个第1、2腮弓综合征家系的vrk1基因突变检测

目的：探讨vrk1基因在2个第1、2腮弓综合征家系中的作用。方法：收集2个第1、2腮弓综合征家系6例（患者3例，表型正常者3例）的血样，抽提基因组DNA，然后对vrk1基因编码蛋白质的外显子2～13进行PCR扩增，测序分析PCR产物。结果：山东家系先证者vrk1基因的外显子6第156碱基出现A改变为G，经查询未发现编码的蛋白质改变，为单核苷酸多态位点（SNP），目前此SNP尚未有相关文献报道。北京家系未见SNP改变。结论：排除vrk1基因在2个第1、2腮弓综合征家系中的作用。

宫颈癌放射治疗中DNA损伤修复相关基因

宫颈癌是全世界女性最常见的恶性肿瘤之一,也是女性癌症死亡的第二大常见原因。放射治疗可在宫颈癌患者的所有阶段进行。辐射抗性是肿瘤放射治疗中的关键问题。因此,研究宫颈癌放射治疗过程中DNA损伤修复相关基因,有利于寻找新的治疗靶点以进一步提高宫颈癌放疗疗效。

黄芪多糖调控细胞DNA损伤修复发挥抗非小细胞肺癌活性的机制研究

目的探讨黄芪多糖通过DNA损伤修复发挥抗非小细胞肺癌(NSCLC)活性的作用及机制。方法通过ip氨基甲酸酯(0.8 mg/g)建立NSCLC小鼠模型,观察肺组织表面结节的数量及形态在体评价黄芪多糖(300 mg/kg)的抗肿瘤活性;CCK8法评价黄芪多糖体外抗人NSCLC细胞系A549(40.00、20.00、10.00、5.00、2.50、1.25μmol/L)和HCC827(100、50、25μmol/L)增殖活性;并通过单细胞凝胶电泳测定(彗星试验)评价黄芪多糖对A549(40μmol/L)和HCC827(50μmol/L)细胞DNA损伤的影响;通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、Western blotting、RNA干扰、免疫荧光染色实验研究黄芪多糖对VRK1/P53BP1信号通路的作用。结果与模型组小鼠比较,黄芪多糖和吉非替尼(阳性药)组的结节数目显著减少(P<0.05、0.01);黄芪多糖组的肿瘤结节呈近似圆形,与紧密排列的肿瘤结节边界清晰,模型和吉非替尼组的结节呈现不规则结构,细胞排列松散,更具侵略性。黄芪多糖呈剂量相关性地抑制A549和HCC827细胞增殖,显著缩短的彗尾和橄榄炬(P<0.05、0.001),保护DNA完整性;显著增加NSCLC细胞中VRK1 mRNA和蛋白表达水平(P<0.05、0.01),同时免疫荧光分析发现P53BP1和VRK1蛋白表达水平升高,且VRK1蛋白可在细胞核和细胞质之间移位;通过VRK1敲低反向验证上述结果。结论黄芪多糖通过激活VRK1/P53BP1信号转导途径增强DNA损伤修复,进而抑制NSCLC细胞增殖。