I型内皮素受体反义寡聚核苷酸抑制VSMC增殖及内膜增生

目的 观察 型内皮素受体 (ETA)反义寡核苷酸(ODN)对血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖和内膜增生的抑制作用 .方法 1细胞培养 :取家兔主动脉中膜消化后培养传代 ,经抗 α- actin鉴定后使用第 4～ 6代传代细胞 ;2人工合成ODN:经 Genbank检索筛选 ,合成含 18bp ETA- ODN片段 ,再对 5 端硫代修饰以增加稳定性 ,同时行地高辛标记以检测反义片段的细胞膜穿透性 ;3 MTT分光光度法检测 ETA-ODN对 VSMC增殖的抑制作用 ;4运用放射受体结合分析法 (1 2 5I- ET- 1)了解 ODN对 ETA蛋白表达的抑制作用 ,以探讨其反义作用 ;5兔颈动脉空气干燥模型在体研究 ODN对血管内膜增生的抑制作用 :应用 F- 12 7凝胶载体携带 ETA-ODN(3.0μmol· L- 1 )导入血管周围 ,术后不同时间观察增生内膜相对厚度 .结果 ODN于培养后 12 h进入细胞内 ,并逐渐增加 ;15 μmol· L- 1 ETA- ODN对 VSMC增殖具有抑制作用 ,2 4h后即有显著作用 ;ETA- ODN对 ETA表达亦有明显的抑制作用 ,表现为 CPM于 2 4h逐渐减少 ;ETA- ODN导入后 ,血管增生内膜相对厚度减少 .结论 ETA- ODN以浓度和时间依赖方式抑制 ETA蛋白表达以及 VSMC的增殖 ;反义寡核苷酸是通过反义机制实现对 ETA蛋白和

长期高糖血症对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

糖尿病（ＤＭ）患者易伴发由动脉粥样硬化（ＡＳ）所引起的微血管病变并发症，是造成ＤＭ预后不良的重要原因。本研究复制了高糖血症动物模型，旨在探讨在体内条件下高糖对ＶＳＭＣ增殖的影响及其机制。健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠１６只，分成两组：①高糖组：葡萄糖１００...

肾上腺髓质素对血管紧张素II的促血管平滑肌细胞增殖作用的影响

观察肾上腺髓质素前体N端20肽（PAMP）和肾上腺髓质素（ADM ）对血管紧张素II（AngII）诱导的血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响。用测定培养的大鼠VSMC3H-TdR掺入和蛋白激酶C（PKC）活性的方法。结果发现：10-8mol/L AngII刺激培养的VSMCs 3H-TdR掺入增加2.68倍（P＜0.01）、PKC活性增加1.02倍（P＜0.01）。而10-9mol/L-10-7mol/L的PAMP或ADM与10-8mol/L AngII同时孵育，则显著抑制AngII的上述作用（P＜0.01）。且两者的抑制作用无明显差异。PAMP和ADM均有抑制AngII所致的VSMC增殖作用，可能是通过抑制信号传导系统中的PKC活性来实现的。PAMP和ADM 与AngII相互作用，共同调节VSMC的增殖，从而维持循环系统功能的稳态。

几种扩血管多肽对bFGF促血管平滑肌细胞增殖作用的影响

目的和方法 :研究肾上腺髓质素 (Adm)、降钙素基因相关肽 (CGRP)及C 型心房利钠肽 (CNP)对碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)促血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖作用的影响及其机制。结果 :孵育 2 4h后 ,bFGF刺激VSMC增殖较对照组增加 2 1倍 (P <0 0 1) ,细胞内蛋白磷酸化程度增加 1 4倍 (P <0 0 1) ,PKC及MAPK活性分别增加 1 5和 2 5倍 (P <0 0 1) ;Adm .CGRP和CNP对静止期VSMC生长无显著影响 ,亦未引起细胞内蛋白磷酸化、PKC及MAPK活性发生显著改变 (P >0 0 5 ) ,10 -8、10 -9和 10 -10 mmol/L、Adm、CGRP和CNP均呈浓度依赖性抑制bFGF刺激的VSMC增殖 (均P <0 0 1) ,降低VSMC内PKC和MAPK活性 (均P <0 0 1) ,减轻bFGF促进的VSMC内蛋白磷酸化程度 (均P <0 0 1)。结论 :Adm、CGRP和CNP可抑制bFGF刺激的大鼠VSMC增殖 。

超声造影剂对血管平滑肌细胞增殖、迁移和凋亡的影响

目的探讨超声波联合超声造影剂对平滑肌细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法体外培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)。采用MTT法、Millicell小室、AnnexinV-FITC/PI双标染色和流式细胞仪,检测VSMC的增殖、迁移能力和凋亡,观察血小板衍生生长因子———BB(PDGF-BB)对VSMC增殖、迁移和凋亡的影响,频率1MHz、声强0·3W/cm2的连续波超声联合声学造影剂辐照VSMC后上述指标的变化。结果PDGF-BB对VSMC的凋亡无影响,但可促进VSMC增殖和迁移。超声联合造影剂辐照VSMC30s即可显著抑制PDGF-BB所致的VSMC增殖(P<0·05),同时细胞凋亡比例显著增高(P<0·01),辐照60s可显著抑制PDGF-BB所致的VSMC迁移(P<0·05),随着辐照时间延长,以上作用增强,辐照60s时对VSMC增殖的抑制程度最强。结论低强度超声波辐照联合超声造影剂可抑制VSMC增殖、迁移,并促进细胞凋亡。

增殖型血管平滑肌细胞模型的培养改良

以往使用的血管平滑肌细胞（VSMC）模型是直接用正常血管贴壁培养传代细胞，并认为传至第5代以后即为分泌型。但我们通过检测特异性表型表达基因SM22a发现，按以往传代培养的VSMC仍有表达。因此，有必要探讨一种在原有基础上更为可靠培养VSMC模型的方法。为此我们利用本实验室建立VSMC增殖器官模型的方法，用于改进以往VSMC的培养方法，并探讨其应用价值，为研究增殖性血管疾病提供一个更为理想的实验平台。

我国抑制血管平滑肌细胞增殖中草药物的研究现状

我国抑制血管平滑肌细胞增殖中草药物的研究现状李秀才（青岛大学医学院附属心血管病医院，青岛２６６０７１）ＰｒｅｓｅｎｔＳｔａｔｕｓｏｎＣｈｉｎｅｓｅＨｅｒｂａｌＭｅｄｉｃｉｎｅＩｎｈｉｂｉｔｉｎｇＶａｓｃｕｌａｒＳｍｏｏｔｈＭｕｓｃｌｅＣｅｌＰｒｏｌｉ...

血管内膜损伤后血管平滑肌细胞表型转化及增殖相关信号转导通路的研究进展

完整的血管内皮是血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cell，VSMC）增殖的关键抑制物。VSMC是血管壁重要的构成部分，与骨骼肌和心肌细胞分化后即失去增殖能力不同，VSMC在胚胎发育过程中逐渐由未分化表型分化为分化表型。根据VSNC形态、功能及细胞标志蛋白的不同，可分为两种表型，即收缩表型和合成表型。正常情况下，VSMC表型主要为收缩表型，处于高分化状态，其特征为细胞内肌丝丰富、收缩能力较强、含α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、平滑肌肌球蛋白重链（SM—MHC）、血管机动蛋白相关蛋白基因220L（SM220L）等特征性蛋白，几乎无分裂增殖能力，主要参与维持动脉壁的机械性能；如果血管受到损伤，收缩表型的VSMC受内外因素刺激转化为未分化状态的合成表型，其特征为肌丝含量较少、收缩功能消失、分裂增殖能力强、合成分泌功能旺盛，参与血管壁的形成和损伤修复，如果过度合成则会导致VSMC增殖。本文主要综述血管内膜损伤后，VSMC表型转化所致细胞增殖以及相关信号转导通路的研究。

吡格列酮对2型糖尿病大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

应用高脂高糖饮食以及腹腔注射小剂量链脲佐菌素的方法建立2型糖尿病大鼠模型,采用吡格列酮进行干预4周。结果:糖尿病组大鼠血糖、血胰岛素、血脂、MDA、TNF-α水平均明显增高,血管平滑肌细胞增殖程度也增高(P<0.01)。干预后均明显降低。结论:吡格列酮可能成为治疗2型糖尿病大血管并发症的新途径。

苯基呋喃-2-甲酮类化合物的合成及其抑制血管平滑肌细胞(VSMC)增殖活性

目的合成系列新型苯基呋喃-2甲-酮类化合物,测定其体外血清诱导血管平滑肌细胞(VSMC)增殖抑制活性并初步探讨其构效关系。方法以取代苯甲酸和呋喃甲酸为原料,经多步反应制得目标化合物,通过标准胚胎血清(FBS)诱导的VSMC增殖模型测定化合物抑制VSMC增殖活性。结果与结论合成了18个化合物,其中9个为未见文献报道的新化合物,其结构经ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR确证,总收率70%～95%。体外活性实验表明,18个目标化合物中,有15个在质量浓度为5.0μg.mL-1时有一定的抑制活性,其中新化合物7b、11a及化合物3 c表现出较强的抑制活性,新化合物11a的IC50值为2.52μg.mL-1。

转染t-PA基因对防治血管重建术后再狭窄的研究

目的观察在血管局部转染t-PA基因对血管损伤和重建术后早期再狭窄的影响,旨在为防治血管重建术后再狭窄(RS)提供试验依据。方法损伤日本大白兔髂外动脉复制动脉再狭窄模型,术后随机分为3组(每组n=20):A组,假弓术组;B组,生理盐水;C组,局部转染真核表达质粒pcDNA3.1(+)/t-PA。每组按预定的时间(3d,1w,2w,4w,8w)分为5个亚组,于相应时间点作B超检查兔右髂外动脉(REIA)内径,并取标本行病理学检查,IHC检测t-PA蛋白表达。结果B超提示:C组吻合口内径显著大于B组(P<0.01),病理学检查,C组的内膜面积,狭窄率比B组显著降低(P<0.05),C组管腔狭窄率比B组降低70%,IHC检测t-PA蛋白表达C组3d即开始,1w达峰值,2w开始下降,至8w恢复正常。结论血管局部转染t-PA基因,早期能显著抑制血管重建术后血栓形成,并抑制VSMC增殖。对控制血管重建术后RS发生有明显作用。

钩藤碱和异钩藤碱对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞[Ca^(2+)]i浓度的影响

目的:探讨钩藤碱和异钩藤碱对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞[Ca2+]i浓度的抑制作用。方法:建立血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞[Ca2+]i超载模型,通过激光共聚焦显微镜技术观察钩藤碱和异钩藤碱对[Ca2+]i浓度的影响。结果:血管紧张素Ⅱ显著刺激血管平滑肌细胞[Ca2+]i超载,钩藤碱和异钩藤碱抑制血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖[Ca2+]i浓度。结论:钩藤碱和异钩藤碱对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞[Ca2+]i超载有显著抑制作用。

转录因子E2F与血管再狭窄的研究进展

2F是调控细胞周期进程一个关键的转录因子 ,而且在血管再狭窄的病理过程中也起着非常重要的作用。对上述问题的了解 ,将有助于血管再狭窄防治的研究。

uPA及其受体激活与血管重建后再狭窄

尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及其受体(uPAR)在血管壁中是一类多功能物质,在血管重建再狭窄中uPA与uPAR可以促进血管平滑肌细胞VSMC黏附和迁移,增强VSMC增殖和血管内膜增生,并可调控血管重建后血管收缩性重塑。因此,针对其在血管重建后血管内膜中的过度表达进行干预,将可能成为一个有前途的治疗手段。

小蘖碱（黄连素）改善大鼠血管内皮损伤后血管重构

小蘖碱（BB）是中药提取的一种生物碱，长期以来中医用于抗菌，治疗各种感染性疾病。该文系南韩学者研究小蘖碱是否可能抑制血管平滑肌（VSMC）增殖。研究结果表示VSMC体外培养时，血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）与肝素结合表皮生长因子（HB-EGF）可引起VSMC增殖。BB明显抑制这一不良作用。这种抑制作用部分通过阻断Akt径路，而非通过ERK径路。

血管内皮细胞功能研究进展

随着研究的不断深入,人们对血管内皮细胞(VEC)的功能认识不再局限于分隔血液与组织,维持血管壁的完整,调解血管壁的通透性等方面。越来越多的研究发现,血管内皮细胞还具有许多其它重要功能。这些研究成果不仅有助于对多种心血管疾病的认识,而且对新药的开发也具有重要意义。

血管活性肽对同型半胱氨酸刺激平滑肌细胞增殖的实验研究

目的观察对兔主动脉平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖起负调节作用的Ｃ型利钠利尿肽（ＣＮＰ）、肾上腺髓质素（Ａｄｍ）、降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）、生长抑素（ＳＳＴ）和甲状旁腺素相关蛋白（ＰＴＨｒＰ）等活性肽对同型半胱氨酸（Ｈｃｙ）刺激的ＶＳＭＣ增殖的影响。方法６只大耳白兔胸主动脉贴块法离体培养平滑肌细胞；分对照及Ｈｃｙ加不同处理因素组；３ＨＴｄＲ掺入测定ＶＳＭＣ增殖；差速离心分离细胞膜、胞浆及胞核并分别测定细胞膜、胞浆及胞核的蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）活性。结果Ｈｃｙ可显著刺激平滑肌细胞增殖，１０－４ｍｏｌ／ＬＨｃｙ使ＶＳＭＣ３ＨＴｄＲ掺入较对照组增加１．８倍。单用Ａｄｍ、ＣＮＰ、ＣＧＲＰ、ＳＳＴ和ＰＴＨｒＰ对３ＨＴｄＲ掺入无显著影响，但可呈剂量依赖的抑制Ｈｃｙ诱导的平滑肌细胞ＤＮＡ合成。蛋白激酶Ｃ活性抑制剂Ｈ７和Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ显著抑制Ｈｃｙ诱导的ＶＳＭＣ的增殖，分别使ＶＳＭＣ３ＨＴｄＲ掺入下降５０％（Ｐ＜０．０１）和５６％（Ｐ＜０．０１）。１０－４ｍｏｌ／ＬＨｃｙ使ＶＳＭＣ总ＰＫＣ活性较对照组增加４０％（Ｐ＜０．０１），其中细胞膜和细胞核活性分别增加２００％（Ｐ＜０．０１）和５７％（Ｐ＜０．０１）?