缺失C8-K3片段重组天坛痘苗病毒的免疫策略研究

目的探索不同的DNA疫苗初免-重组痘苗病毒加强免疫策略的效果,为建立最佳免疫方案提供依据。方法对小鼠进行DNA疫苗初免,之后分别加强免疫一针、两针和三针重组痘苗病毒VTT△C8-K3-gag,在不同时间点采取血样及制备脾细胞,检测针对痘苗病毒和HIV特异性体液免疫及细胞免疫应答。结果三种免疫策略中,DNA疫苗初免-VTT△C8-K3-gag加强免疫两次的效果最佳,诱导的针对p55的结合抗体滴度达到106,分泌IFN-γ的T细胞数为342/106细胞。针对痘苗病毒的体液和细胞免疫应答显著低于加强免疫三针诱导的免疫反应。结论DNA疫苗初免-VTT△C8-K3-gag加强免疫两针可诱导较高水平的HIV免疫应答,同时保证了较低水平的载体免疫反应。

痘苗病毒天坛株C8L—K3L片段缺失表达载体的生物学性能研究

目的研究缺失C8L．K3L片段的痘苗病毒天坛株载体的生物学性能及外源基因的免疫原性。方法构建缺失C8L-K3L区域的重组痘苗病毒天坛株载体VrITT△c8-K3-gag。在4种细胞上检钡0了重组载体的增殖能力、在小鼠和家兔模型上进行毒力评价，并在BALB／c小鼠进行了免疫效果评价。结果与Vrrr相比，VTTAC8-K3-gag在CEF、BHK-21、HeLa细胞中复制能力显著下降，在Vero细胞中失去复制能力。VTYAC8-K3-gag在小鼠和家兔模型中毒力均有显著降低。VTT△C8-K3-gag免疫小鼠第4周后诱导的痘苗病毒特异结合抗体与中和抗体滴度分别达到5．6×10^3和1．0×10^4，第9周滴度弦到5．8×10^5和5．25×10^3，与VTKgpe相比均显著下降3～9倍，但E3刺激后的细胞免疫应答无显著变化。VTT△C8-K3-gag单独免疫或与DNA疫苗联合免疫诱导的HIV特异性抗体水平和细胞免疫应答均与VTKgpe无差异。结论VTrAC8-K3-gag是一个安全性较高且具有深入研究价值的HIV候选疫苗株。