嵌入式超声肿瘤温热治疗仪联合聚乙二醇化脂质体阿霉素干预后的兔VX2肿瘤模型中药物浓度的研究

目的 观察嵌入式超声肿瘤温热治疗仪联合聚乙二醇化脂质体阿霉素（PLD）干预后的兔VX2肿瘤模型中药物浓度的变化。方法 12只后肢浅层肌肉荷瘤新西兰雌兔于肿瘤各径线均大于10 mm时,随机分为超声热疗＋PLD组、PLD组和阿霉素组,每组4只。其中超声热疗＋PLD组在PLD药物注射完毕,即刻利用嵌入式超声肿瘤温热治疗仪给予肿瘤部位超声热疗（42℃~43℃）30 min。采用高效液相色谱法（HPLC）确定肿瘤组织中阿霉素的浓度。结果 在超声热疗＋PLD组,肿瘤加热区域获得精确的温度控制,为（42.5±0.2）℃;肿瘤组织中阿霉素浓度分别为PLD组和阿霉素组的2.0倍和11.2倍,差异均有统计学意义（P〈0.05）。PLD组肿瘤组织中阿霉素浓度为阿霉素组的5.5倍,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 嵌入式超声肿瘤温热治疗仪联合PLD能有效地提高兔VX2肿瘤模型中的药物浓度。

开腹及超声引导下深植入法和浅植入法建立兔肝VX2肿瘤模型的比较

目的比较开腹和超声引导下深植入法和浅植入法建立兔肝VX2肿瘤模型的成功率和异位种植率。方法选取80只新西兰白兔,按植入组织块或其悬液及穿刺深、浅分为4组,超声引导下将VX2肿瘤组织块或其悬液穿刺接种于兔左肝内(浅≤20mm,深>20mm),接种后第1、2、3周行超声检查。第3周检查后处死实验兔,行原位、异位肿瘤肉眼及病理检查。结果开腹及超声引导下运用深植入法及浅植入法造模,成模率均为100%。开腹组及超声组织块组肿瘤体积明显大于组织块悬液组。组织块深植入法,开腹组及超声组无异位种植。组织块浅植入法,超声组1例腹腔种植,开腹组未见腹腔种植。组织块悬液深植入法,开腹组无腹腔种植,超声组2例腹腔种植。组织块悬液浅植入法,开腹组2例腹腔种植;超声组5例腹腔种植,其中1例同时腹腔和腹壁种植。结论超声引导下穿刺组织块及组织块悬液接种制作兔肝VX2瘤模型方法简单,创伤小,成功率高。组织块穿刺植入法优于组织块悬液穿刺植入法,深植入法优于浅植入法。

兔肝VX2肿瘤模型MSCT灌注成像与血管生成的关系研究

目的研究兔肝VX2肿瘤多层螺旋CT(MSCT)增强表现,以及其与肿瘤微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子(VEGF)之间的变化关系。方法选取25只实验兔,分为对照组和实验组,采用MSCT灌注成像和免疫组化方法对对照组、实验组、兔肝VX2肿瘤模型组于建模后的7、14、21和28 d进行检查,测定分析MSCT灌注参数值:肝动脉灌注量(HAP)、门静脉灌注量(HPP)、肝动脉灌注指数(HPI)以及VEGF和MVD表达的变化,并分析MSCT灌注参数值和VEGF、MVD表达的相关性。结果实验组的HAP、HPI、VEGF和MVD值显著高于对照组,HPP明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),实验组兔肝VX2模型组的HAP、HPP和HPI值以及其VEGF和MVD值在模型建立后不同时间段的差异均有统计学意义(P<0.05),HAP的变化与VEGF、MVD的变化具有显著正相关性(P<0.05),HPP、HPI的变化与VEGF、MVD变化无明显相关性(P>0.05)。结论 MSCT灌注成像可以提供肝动脉和门静脉灌注的量化信息,HAP与MVD、VEGF表达有明显正相关性,可间接反映肝肿瘤的血管生成。

超声介入植入法在兔肝VX2肿瘤模型制作中的应用

目的：逆穿刺活检法在兔肝肿瘤模型制作中的应用。方法：取60只新西兰大白兔，随机分为A、B、C3组，每组20只，超声引导下瘤块悬液注射法和逆穿刺活检法制作兔肝VX2肿瘤模型，术后超声观察28d。每组取3例肿瘤模型瘤体标本进行病理验证；每组取3例进行肿瘤的125I介入治疗实验。结果：兔肝VX2肿瘤模型制作方法中，A组兔肝模型肝内单发VX2肿瘤10只；B组兔肝模型肝内单发VX2肿瘤12只；C组兔肝模型肝内单发VX2肿瘤全部种植成功，未见腹壁浸润及腹腔种植。与A、B组相比，C组模型制作时间短，肝内单发VX2肿瘤种植成功率高。肿瘤病理显示三组病例均为兔肝VX2肿瘤，三组兔肿瘤模型均能满足125I介入治疗实验要求。结论：逆穿刺活检法制作兔肝VX2肿瘤模型能够满足实验要求，并且具有成功率高、损伤小。该法在兔肝VX2肿瘤模型制作中具有很高的应用价值。

兔肝VX_2肿瘤移植模型的复制及其意义

目的 探讨建立兔肝VX2 肿瘤模型 ,为该模型的应用提供实验依据。方法 采用VX2 细胞株复制兔肝肿瘤模型 ,并改进其制作方法 ,观察其肿瘤的生长过程 ,并检测肝功能谷丙转氨酶 (ALT)、谷草转氨酶 (AST)及总胆红素 (TB)在模型制作前、后不同时相的变化 ,同时观察脏器转移、组织病理学改变、影像学表现及实验动物的自然生存时间。结果 接种后 3周均可见到肿瘤生长 ,肿瘤直径为 1.5～ 2 .0cm左右 ,肿瘤接种成功率为 10 0 % ;彩超检查显示肝脏有结节样增强回声 ,CT示肿瘤为低密度病灶 ,增强扫描见病灶不均匀强化。移植肿瘤外观呈灰白色 ,扪之质地较硬 ,无明显的包膜 ,剖开肿瘤中心可见灶性坏死 ;光镜下见肿瘤细胞核浆比例大 ,细胞排列紊乱 ,呈浸润性生长 ;动物接种后的自然生存时间为 4 0～ 5 3d ,死亡原因主要为肿瘤生长及转移引起的多脏器功能衰竭。结论 兔肝VX2 肿瘤从病理表现、病理过程及转移均与人肝癌相似 ,该模型具有容易复制、生长周期短、成功率高及模型稳定等特点 ,是一种较理想的肝肿瘤实验动物模型。

射频消融联合激活的树突状细胞疫苗对新西兰大白兔肝脏原位种植VX2肿瘤治疗的实验研究

目的明确RFA联合激活的DC疫苗在对新西兰大白兔肝脏VX2种植瘤疗效以及生存率的影响。方法 24只雄性新西兰大白兔公分为2组(每组12只),分别为RFA+PBS以及RFA+DC组;建立新西兰大白兔肝脏VX2原位种植瘤模型,分离新西兰大白兔骨髓单核细胞体外培养并给予GM-CSF,IL-4诱导分化,加由VX2肿瘤组织制备的热休克抗原孵育加LPS刺激成熟,收集DC细胞接种至新西兰大白兔的爪垫处,3天后给予原位种植VX2肿瘤的新西兰大白兔进行超声引导下的射频消融治疗,观察90天后的存活率。结果 RFA对于肝脏原位种植VX2肿瘤的新西兰大白兔疗效确切,RFA联合激活的DC疫苗能够显著改善其生存率。

41℃及43℃温热疗联合聚乙二醇化脂质体阿霉素治疗兔VX2肿瘤的疗效对比研究

目的探讨41℃及43℃温热疗(MH)触发聚乙二醇化脂质体阿霉素(PLD)释放阿霉素治疗兔VX2肿瘤的疗效差异。方法 12只VX2移植瘤兔随机分为2组:PLD+41℃MH组(n=6)和PLD+43℃MH组(n=6)。为达到完全的肿瘤缓解,进行多次高剂量耳缘静脉推注给药(5 mg/kg,每周1次,共治疗3次),使用嵌入式超声温热治疗仪对肿瘤部位进行30 min局部MH。结果在观察终点,PLD+41℃MH组血管形成指数(VI)、瘤体质量、外周血谷草转氨酶(GOT)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CPK)值均明显低于PLD+43℃MH组。结论同43℃下30 min MH相比,41℃下30 min MH联合PLD可以明显提高抗肿瘤疗效,降低系统毒性。

不同浓度^(131)I-ELP近距离放射治疗兔VX2肝癌模型的实验研究

背景近距离放射治疗是治疗癌症的靶向放射疗法,类弹性蛋白多肽(elastin-like peptide, ELP)是一种人工合成的弹性蛋白,其具有的自组装性、温度响应性和非免疫原性等独特优势,为其成为放射性核素^(131)I的载体提供了可能.目的制备放射性核素^(131)I标记的ELP,研究不同放射性浓度^(131)I-ELP对兔VX2肝癌模型近距离放射治疗的有效性及差异性,为其临床应用提供依据.方法应用Iodogen法对ELP进行^(131)I碘化标记,制备100 mCi/mL和50 mCi/mL放射浓度的^(131)I-ELP;在B超引导下将不同浓度^(131)I-ELP药物及ELP溶液随机注入15只VX2模型兔的肝肿瘤内进行近距离放射性治疗及空白对照观察,以注入100 m Ci/mL ^(131)I-ELP为高放射浓度治疗组(H组, n=5);注入50 mCi/mL ^(131)I-ELP为低放射浓度治疗组(L组, n=5)及注入ELP溶液为空白对照组(C组, n=5).治疗后,定期行B超及血液学检查以观察治疗效果,治疗组行单光子发射计算机断层扫描/计算机断层扫描(single-photon emission computed tomography/computedtomography,SPECT/CT)检查,观察三组动物的自然生存时间和病理学检查.结果 H组的动物生存期最长(61.4d±10.50d),L组的动物生存期为(52.6 d±8.85 d), C组的动物生存期最短(39.2d±5.63d),三组之间有显著差异(P <0.05).治疗后7 d、14 d, SPECT/CT示治疗组的放射性持续位于肿瘤内部.H和L组的肿瘤生长率显著低于C组(P <0.05).H和L组治疗后7 d、14 d肝功能指标丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase, ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, AST)显著低于C组(P<0.05),治疗后7 d L组的ALT水平显著低于H组(P <0.05);治疗后14d,L组AST数值显著低于H组(P <0.05),提示H组的肝功能受损更严重.治疗后7 d、14 d三组Hb、RBC计数无显著差异.病理组织学检查示H组癌旁正常肝组织存在小叶中央静脉淤血、肝窦及汇管区小胆管扩张、肝内纤维增生,在肿瘤组织内发现大片状坏死.L组的癌旁正常组织则仅见少量纤维增生.结论 ^(131)I-ELP近距离放射疗法可杀伤肝癌细胞,放射性浓度为100 mCi/mL的^(131)I-ELP较50mCi/mL的杀伤作用更强,但其放射性损伤也更大.

兔VX2肝癌TACE前后MRDWI与病理对照研究

目的:本研究利用兔VX2肝癌模型,探讨肝癌化疗栓塞后MR弥散加权成像及病理表现,为肝癌化疗栓塞后的疗效评价提供理论基础。方法:新西兰大白兔15只,制成VX2肿瘤模型。随机分为3组,分别为TACE术前、术后三天、术后一周组。种植3周,进行肝动脉化疗栓塞。采用sendinger穿刺技术,将3F微导管超选入肿瘤供血动脉,注射碘油、MMC(1mg)及表阿霉素(1mg)混合物0.5～lmL,至碘油沉积良好、肿瘤血管消失停止。各组在TACE术前、术后三天、术后一周分别进行MR弥散加权成像。DWI采用单次激发平面回波成像序列,弥散因子b值取0s/mm^2和300s/mm^2,TR 6000ms,TE 49ms,FOV 150mm,层厚3mm,层间距0mm,矩阵112×112,重建矩阵256×256,翻转角90°,扫描时间2分36秒,NSA为6次.成像之后动物处死,切取肝脏肿瘤组织块,进行HE染色、病理观察。结果:化疗栓塞前,MR DWI可见高信号肿瘤灶。光镜下肿瘤组织细胞体积增大,胞浆丰富,淡红染色,核肥大,核分裂像多见,可见少量坏死,周边区和中央区未见明显区别。栓塞后3天,肝左叶肿瘤DWI上为高信号区,出现斑片状低信号区。光镜下出现大量核碎裂、核溶解,肿瘤坏死较多。栓塞后1周,在DWI上低信号的坏死区增加。光镜下核碎裂、核溶解、肿瘤坏死增多。结论:MR弥散加权成像与病理表现一致,较好地体现了肝癌化疗栓塞后的转归。

ALA光动力诊断导向显微手术与光动力治疗兔脑VX2转移瘤的比较研究

背景与目的:光动力治疗脑胶质瘤是新的疗法之一。实验比较研究光敏剂ALA(5-氨基乙酰丙酸)在光动力诊断(photodynamic diagnosis,PDD)导向显微手术和(或)光动力治疗(photodynamic therapy,PDT)兔脑VX2转移瘤的疗效。方法:50只新西兰大白兔脑内植入VX2瘤块形成移植瘤模型后,随机分为对照组(不治疗)、普通光源显微手术组、单次PDT组、PDD导向显微手术组及PDD导向显微手术辅以PDT组。重点观察比较各组荷瘤动物平均生存期。结果:平均生存期分别为对照组25.20±2.53天、普通光源显微手术组51.40±3.63天、单次PDT组47.40±2.63天、PDD导向显微手术组56.40±3.31天、PDD导向显微手术辅以PDT组58.90±3.28天;与对照组相比,各治疗组的生存期明显延长,以PDD导向显微手术辅以PDT治疗最为显著。结论:单次ALA-PDT可明显延长荷瘤动物生存期;PDD导向显微手术组较普通光源显微手术组显著延长动物生存期;ALA可用于VX2鳞癌脑转移瘤的PDD导向显微手术而且还可用于PDT,ALA-PDD+PDT可能更有效地治疗VX2脑转移瘤。

PET与CT对兔肝VX_2肿瘤模型放疗疗效评价的对比研究

【目的】研究18F-FDG PET与CT对兔肝VX2肿瘤模型放疗后疗效评价的差异。【方法】48只肝右叶荷VX2肿瘤的新西兰兔随机分成4组,每组12只,分别为对照组(非放疗组)、10、15和20 Gy放疗组,所有试验兔于放疗前及放疗后1、7、14 d行18FFDG PET/CT扫描,测定肿瘤体积和最大标准化摄取值(SUVmax)。【结果】放疗前各组肿瘤体积及SUVmax值均无统计学差异(P>0.05);此后对照组肿瘤的体积及SUVmax均持续上升。3个放疗组放疗1 d后SUVmax均较放疗前下降,差异有统计学意义(P<0.05);而肿瘤体积均无明显变化(P>0.05)。3个放疗组放疗7 d后SUVmax及肿瘤体积均较1 d时下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。3个放疗组放疗14 d后SUVmax均较7 d时无明显变化(P>0.05);而肿瘤体积均有明显下降(P<0.05)。【结论】VX2肿瘤放疗后1 d时18F-FDG PET检查即可出现SUVmax的显著下降,可在肿瘤体积改变之前早期评估其对放疗的反应。

兔VX2结直肠癌模型CT与大体病理的对比研究

目的建立活体兔CT-大体病理切片的VX2结直肠癌模型，以期为临床CT影像对细小转移灶（直径〈10mm）和淋巴结的评价积累经验，提供帮助。方法11只新西兰大白兔于开腹下将VX2细胞瘤块分别接种于结肠（9只）和直肠（2只）。接种后第4周以准直0．5mm×320，螺距因子0．828，球管转速0．5s／周，120kV，自动毫安，范围80-100mAs，采用高压注射器经耳缘静脉注入优维显（370mgl／m1）作胸、腹、盆进行3期CT增强扫描以了解成瘤及转移情况。一旦成瘤、或最迟于第6周处死实验兔。其中1只予以大体解剖观察，其余处死后置于木盒，-80℃冰冻24h后采用1．2mm厚电锯片予以冠状位大体病理切割，切割厚度为3mm。所有大体解剖和切片标本作编号摄影，如确认或怀疑病灶存在，即标记该部位后采样作病理检查进一步确定。CT图像后处理以实验兔切面为参考作进一步重组分析后，与病理作对比确定。结果11只实验兔中成瘤8只。病理结果显示，其中伴有单发肺转移（直径7～10mm）2只、肝转移（直径9mm）1只；接种瘤旁、肠系膜血管旁淋巴结共35枚：位于接种瘤灶周围22枚，肠系膜血管周围13枚，直径2-16mm；其中9枚为阳性位于接种瘤灶周围7枚：系膜血管旁2枚，直径3-16mm。CT准确识别原位成瘤8只及肺、肝转移3只，检出率为100％；8只成瘤兔中识别接种瘤旁、系膜血管旁淋巴结共27枚，检出率77．1％（27／35）；提示阳性淋巴结6枚，其中4枚环形强化伴中央低密度坏死，位于接种瘤旁，诊断为转移性淋巴结，直径5-16mm。另2枚最大径分别为12mm和15mm，诊断为转移性淋巴结，分别位于接种瘤旁及肠系膜血管根部．阳性淋巴结检出率为6／9。结论活体兔CT-大体病理切片的VX2结直肠癌模型可以作为为临床CT影像对细小转移灶和淋巴结的评价积累经验的实验模型。

^(18)F-FDG PET/CT早期监测小剂量顺铂在体化疗敏感性的实验研究

42只双侧前胸壁荷瘤的VX2兔模型(共计84个肿瘤)随机分为治疗组(n=32)和对照组(n=10)。治疗组静脉给予4mg/kg顺铂前(Pre-therapy)和给药后95–100min(Day0)、Day1、Day7、Day14行PET/CT显像;对照组不给化疗药物,其余与实验组相同。取葡萄糖摄取最大值(SUVmax)进行分析,CT测量肿瘤大小。按肿瘤体积分组,Day7时治疗组肿瘤体积增长>1倍则为不敏感,反之为敏感。结果显示:(1)Day0敏感组SUVmax减低率为(?48.96±12.27)%,而不敏感组和对照组为(21.26±18.26)%和(7.16±13.47)%,三组SUVmax变化有显著差异(P<0.05)。(2)Pre-therapy、Day0、Day1、Day14两组肿瘤体积无显著性差异(P>0.05),但Day7敏感组肿瘤体积小于不敏感组及对照组,差异有显著性(P<0.05)。(3)Day7、Day14敏感组肿瘤坏死率大于不敏感组及对照组,差异有显著性(P<0.05)。(4)HE染色观察不同时间点切除的肿瘤标本发现:Day7、Day14时敏感组肿瘤细胞数少而炎性和坏死细胞数增加。表明根据化疗药物给予后FDG减低程度,18F-FDGPET/CT能在体、早期、灵敏检出肿瘤对化疗药物的敏感性。

^(18)F-FDG PET/CT与CT在评价兔实体瘤早期顺铂化疗反应的比较

目的评价PET/CT能否用于早期检测化疗的敏感性,探讨化疗后行PET/CT进行疗效评价的理想时间。方法 28只右后腿接种VX2实体瘤的兔模型随机分成治疗组和对照组,每组7只兔子,治疗组分3组在静脉给予顺铂前进行第1次PET/CT显像,36h后行第2次PET/CT显像,治疗组分别在第2次显像前4h、前24h与前36h静脉给予6mg/kg顺铂;对照组不给予化疗药物,显像时间与实验组相同。取葡萄糖摄取最大值(SUVmax)进行分析,利用CT测量肿瘤的体积。结果化疗4h后显像组SUVmax减低率为(-11.11±13.13)%,化疗24h后显像组SUVmax减低率为(-37.33±12.58)%,化疗48h后显像组SUVmax减低率为(-34.21±12.93)%。3个实验组与对照组间SUVmax变化率均有显著性差异(P<0.05)。3个实验组与对照组间体积变化率均无显著性差异(P>0.05)。结论在兔VX2移植瘤动物模型建立的基础上,给予顺铂化疗后不同时间点进行PET/CT显像,发现化疗后很早期(4h)瘤体SUVmax即有明显变化,而此时利用CT测量的肿瘤体积变化不明显。表明PET/CT优于传统影像方法,能够在体、早期、灵敏检出肿瘤对化疗药物的敏感性。

兔胰头癌动物模型的建立

目的:建立稳定可靠的兔胰头癌动物模型,选择最佳的模型制作方法。方法:48只兔采用随机区组方法分为两组,每组24只,分别采用瘤块悬液法、瘤块植入法将肿瘤细胞注射至胰头内制作兔胰腺癌动物模型,计量数据比较采用双因素完全随机设计方差分析,分别于1、2、3和4周处死大白兔行移植组织解剖和病理学检查,观察2种不同建模方式的肿瘤生长情况及生物学形态。结果:建模过程中,2种方法成瘤率均为100%。瘤块植入法术后1周肿瘤体积为(0.90±0.13)cm3,离散系数为0.14;第2周肿瘤体积为(3.44±0.41)cm3,离散系数为0.12;第3周肿瘤体积为(7.53±0.69)cm3,离散系数为0.09;第4周肿瘤体积为(36.75±5.93)cm3,离散系数为0.16。瘤块悬液法术后1周肿瘤体积为(1.15±0.21)cm3,离散系数为0.18;第2周肿瘤体积为(4.94±1.64)cm3,离散系数为0.33;第3周肿瘤体积为(9.47±4.26)cm3,离散系数为0.45;第4周肿瘤体积为(46.31±16.77)cm3,离散系数为0.36。对术后肿瘤体积进行比较:1)瘤块植入法离散系数较小,生长相对稳定;2)生长时间对肿瘤生长体积具有显著影响,F=78.569 4,P=0.002 4;而生长时间与建模方法的交互作用对肿瘤生长体积无显著影响,P>0.05。术后第1周两组动物均未发现转移,瘤块植入法第2周未见种植性转移,第3周5只大白兔(83.33%)大网膜出现转移,瘤块悬液法第2周1只大白兔(16.67%)出现结肠、肓肠及腹壁种植转移,第3周4只大白兔(66.67%)出现结肠、盲肠及腹壁种植转移,2只大白兔(33.33%)出现大网膜转移。微观病理显示,瘤块与种植前瘤块病理形态基本一致,大部分瘤块悬液法HE染色下图像可见中间有较多坏死组织。瘤块植入法较瘤块悬液法肿瘤生长更为稳定。结论:成功建立了兔胰头癌动物模型,瘤块植入法是建立兔胰头癌动物模型的较佳方法。