抗VacA^+CagA^+幽门螺杆菌IgY的抗感染作用研究

为研究抗VacA+CagA+幽门螺杆菌(Hp)IgY的抗感染作用,以VacA+CagA+Hp为抗原免疫蛋鸡,聚乙二醇法和水稀释法从鸡卵黄中提取抗-VacA+CagA+Hp-IgY,酶联免疫吸附实验(ELISA)测定IgY抗体效价。建立胃腔感染VacA+CagAHp的昆明系小鼠模型,观察抗-VacA+CagA+Hp-IgY对小鼠胃腔感染VacA+CagA+Hp的防治效果。ELISA法测定IgY效价均为1∶20,480;抗-VacA+CagA+Hp-IgY防治小鼠胃腔感染VacA+CagAHp效果较理想,IgY高、中剂量组效果优于阳性对照组(P<0.05);低剂量组效果等同于阳性对照组(P>0.05)。抗-VacA+CagA+Hp-IgY较好的体内抗感染作用,提示该IgY有望成为较理想的治疗VacA+CagA+Hp感染的生物制剂。

CagA^+幽门螺杆菌裸鼠感染模型的建立

目的用携带ｃａｇＡ基因的Ｈｐ成功感染ＢＡＬＢ／ｃ裸鼠。方法分别采用ｃａｇＡ基因阳性和阴性的具有较强动力的新鲜Ｈｐ分离菌株，通过灌胃方式感染ＢＡＬＢ／ｃ裸鼠，感染后４周和８周分两批处死，进行微生物学和病理组织学检查。结果灌喂８周后，ｃａｇＡ＋实验组和ｃａｇＡ－实验组均成功定植Ｈｐ（１６／１６）；ｃａｇＡ＋组胃粘膜表现明显炎症及坏死病变，而ｃａｇＡ－组仅有轻微炎症发生。结论建立典型的Ｈｐ动物感染模型应选择ｃａｇＡ＋菌株。

幽门螺杆菌VacA^+ BCS致胃上皮细胞基因表达谱的改变

目的 :通过观察VacA+ BCS作用胃癌来源的SGC790 1细胞后 ,细胞基因表达谱的改变 ,分析Va cA等分泌性细胞毒力因子的致病性和致病意义。方法 :利用常规方法获得VacA+ BCS和VacA-BCS ,然后作用细胞 ,最后利用cDNA基因表达谱芯片技术观察细胞基因表达谱的变化。结果 :发生明显表达差异的基因占基因总数的 5 %左右 ,其中已经明确功能的表达差异基因涉及许多重要的细胞功能和生命活动 ,如基因表达调控、信号转导相关基因的差异表达、细胞骨架相关蛋白表达的变化、细胞凋亡相关因子编码基因表达的变化、以及肿瘤发生相关基因的表达变化等。结论 :VacA+ BCS可致细胞基因表达谱发生多层次和多方面的改变 ,几乎涉及H .pylori相关疾病所有重要病理过程 ,提示其在H .pylori致病机制中具有重要作用。

幽门螺杆菌亚型cagA^+基因株与胃癌的关系

目的 :探讨幽门螺杆菌 ( Hp)细胞毒素相关基因 A阳性株 ( cag A+ 株 )与胃癌的关系。方法 :通过多聚酶链反应 ( PCR)检测 92例胃癌和 2 4例浅表胃炎组织石腊标本 Hp和 cag A+亚型株的感染。结果 :1Hp感染在胃癌和慢性浅表胃炎间无差异 ,而 cag A+株感染是前者高于后者 ( P<0 .0 5 ) ;2 Hp感染早期胃癌高于进展期癌、胃窦癌高于贲门癌、肠型胃癌高于弥漫型癌 ( P<0 .0 5 )。然而只有肠型胃癌 cag A+ 株感染显著高于弥漫型癌 ( P=0 .0 0 13 5 )。结论 :胃癌不同组织类型感染 Hp亚型的程度不同 ,Hp- cag A+ 株感染率在肠型胃癌中显著增高。从而推测产生细胞毒素的 Hp菌株 。

幽门螺杆菌VacA^+BCS对上皮细胞骨架的影响

目的 为了观察VacA+ BCS对上皮细胞骨架的作用 ,并分析这种致细胞骨架病变的作用特点 ,从而明确VacA等分泌性毒力因子的致病意义。方法 利用cDNA基因表达谱芯片技术研究VacA+ BCS作用细胞中细胞骨架蛋白相关基因的表达变化 ,同时利用免疫荧光染色以及共聚焦显微镜观察细胞骨架的形态结构变化。结果 同VacA-BCS作用细胞和空白对照相比 ,VacA+ BCS作用细胞引起了细胞骨架蛋白相关基因表达的改变 ,同时 ,显微镜观察结果也从形态和结构方面证实了上皮细胞骨架的改变。结论 VacA+ BCS可以引起上皮细胞骨架的结构和功能的改变 ,VacA等细菌分泌性毒力因子可能在H pylori致病中发挥重要作用。

CagA^+和CagA^-幽门螺杆菌致病作用的实验研究

目的用三种幽门螺杆菌菌株感染 C57BL/C 小鼠,观察不同菌株在小鼠胃内集落形成能力及感染后对小鼠胃粘膜组织学影响。方法:野生型 CPY3401株(CagA^+)与野生型 CPY3401株同源并去掉 CagA 的突变株(CagA^-)以及悉尼株(CagA^+),分别以0.5ml,10~9CFU/ml 细菌悬液通过胃管注入鼠胃。用 ELISA 法检测感染前后血清 IgG抗体水平。8周后处死小鼠,留取胃标本行组织病理检查。结果:(1)悉尼株和野生型株在鼠胃粘膜集落形成良好,突变株较差;(2)感染野生型株和悉尼株鼠胃粘膜固有层可见中到重度炎细胞浸润;(3)血清 IgG 抗体在感染后2周开始升高,5周达到高峰,2周、5周 t 值分别为悉尼株组7.41和17.44,野生型株组5.41和7.90,与对照组比较有极显著差异(P<0.01)。结论 CagA^+的悉尼株和野生型株在 C57BL/C 小鼠胃内集落形成良好,并引起明显的炎细胞浸润及产生高水平血清 IgG 抗体,对理解 CagA^+菌株在人胃感染中的致病作用及临床治疗有指导意义。C57BL/C 小鼠模型可用于 H.pylori 感染及相关疾病的研究。

CagA^+幽门螺杆菌与胃粘膜病理变化的关系

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染与慢性胃炎、消化性溃疡及胃癌的发生密切相关,研究认为Hp的毒力基因CagA与Hp的致病密切相关。CagA^+Hp也是癌前病变萎缩性胃炎、肠上皮化生和异型增生的重要病因和促进因子,可增加胃癌发生的危险性。我们于2005年在胃癌高发区兰州地区开展了^(14)C-UBT和血清Hp-CagA抗体测定及胃粘膜组织病理学检查,旨在探讨CagA^+Hp感染与胃粘膜肠上皮化生、异型增生及胃癌发生的关系。发现CagA^+Hp具有较强的促进胃粘膜萎缩、肠型化生和异型增生作用,感染CagA^+Hp可能是胃癌发生的危险因素之一。

cagA^+、babA2^+幽门螺杆菌临床分离株在台湾高度流行

幽门螺杆菌(Hp)是革兰阴性菌,可定植于人胃黏膜,导致胃炎、消化性溃疡、胃腺癌和胃黏膜相关性淋巴瘤。世界上约有半数以上的人被感染,1994年被世界卫生组织确定为第1类致癌因子。在台湾,它是居第4位的致癌因素。同一致病菌可引起不同的结局,细菌毒力、环境因素、宿主因素被认为是三大主要原因。Hp能长期定植于人胃黏膜,是由于Hp分泌一系列毒力决定因子,协助其黏附、定植和适应胃酸性环境的变化。在这些因素中,细胞空泡毒素(VacA)。

幽门螺杆菌及其CagA基因株感染与胃癌的相关性

目的 :探讨幽门螺杆菌 (Hp)及其 Cag A+ 基因株感染与胃癌的相关性。方法 :选取胃癌 4 6例 ,萎缩性胃炎 35例 ,正常对照 30例 ;应用组织学方法检测 Hp感染率 ,以 EL ISA法检测血清 Hp Cag A+ 基因株感染率 ;根据 L auren病理分型将胃癌组分为肠型 30例 (6 5 .2 % )和弥散型 16例 (34.8% )。结果 :胃癌组、萎缩性胃炎组的 Hp及其 Cag A+ 基因株感染率均显著高于正常对照组 (P <0 .0 5～ 0 .0 0 0 0 1) ,胃癌组 Hp Cag A+ 基因株感染率显著高于萎缩性胃炎组 (P <0 .0 5 )。结论 :萎缩性胃炎和胃癌的发生与 Hp及其 Cag A+基因株感染有关 ,动态随访 Hp Cag

幽门螺杆菌感染与胃癌的关系

目的 :探讨幽门螺杆菌 (简称 Hp)感染与胃癌的关系。方法 :43例胃癌患者的新鲜癌手术标本及血清标本、36例十二提肠溃疡患者 (对照组 )的胃窦粘膜组织及血清标本入本组研究。分别采用 PCR及血清学试验检测其 Hp感染状况 ,两项检测均为阳性者即确立为 Hp感染。结果 :(1) 4 3例胃癌中 ,Hp阳性 30例 ,阳性率 6 9.77% ;36例十二指肠溃疡中 ,Hp阳性 30例 ,阳性率 83.33% ,两组阳性率相比差异无显著性。Hp阳性患者中 ,胃癌及对照组 cag A基因阳性分别为 2 4例、2 5例 ,阳性率分别为 80 .0 0 %、83.33% ,两组阳性率相比差异无显著性。(2 ) 4 3例胃癌中 ,高中分化腺癌组 Hp及 cag A检出率分别为 6 2 .5 0 %及 70 .0 0 % ,低未分化癌组 Hp及 cag A检出率分别为 74.0 7%及 85 .0 0 % ,但两组 Hp及 cag A检出率统计学上均无显著性差异。结论 :(1) Hp感染及 cag A+ 菌株感染不是胃癌发生的唯一或必须因素。 (2 )胃癌的分化程度与 Hp及cag A+菌株感染无明显相关性。

胃癌高发区高危人群血清HpCagA毒素相关蛋白检测的意义

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染与浅表性胃炎、胃溃疡、萎缩性胃炎乃至胃癌的发生密切相关。近年来研究指出,Hp毒素在Hp致病性中起重要作用,并证明作为Hp的重要致病因素而参与了较严重的胃粘膜病变的发生,并与胃癌的发生有密切关系。目前,根据其CagA^+蛋白的有无将Hp分为两型:Ⅰ型菌(Hp-CagA^+):有CagA,表达CagA蛋白,具有毒素活性;Ⅱ型菌(Hp-CagA^-):无CagA,不表达CagA蛋白,无毒素活性。我们通过胃癌高发区高危人群流行病学,血清学及病理学研究,探讨Hp-CagA^+菌株与有关胃疾病的相关性及其与胃癌发生的可能的病因学联系。