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甘肃省苹果树腐烂病菌Valsa mali培养性状及致病力研究 被引量:2
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作者 王卫雄 徐秉良 +2 位作者 薛应钰 韩健 陈臻 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期666-671,F0002,共7页
【目的】明确甘肃省苹果树腐烂病菌(Valsa mali)致病力分化情况。【方法】采用平板培养法和离体枝条接种法对Valsa mali两变种的培养性状和致病力进行了研究。【结果】Valsa mali在PDA上有褐色类群和乳白色类群,褐色类群为Valsa mali va... 【目的】明确甘肃省苹果树腐烂病菌(Valsa mali)致病力分化情况。【方法】采用平板培养法和离体枝条接种法对Valsa mali两变种的培养性状和致病力进行了研究。【结果】Valsa mali在PDA上有褐色类群和乳白色类群,褐色类群为Valsa mali var.mali菌株,乳白色类群为Valsa mali var.pyri菌株。Valsa mali var.mali不同菌株之间存在致病力分化,菌株PL-1致病力最强,第7天病斑面积为9.54 cm2,菌株TS-5致病力最弱,第7天时病斑面积为4.7 6cm2。Valsa mali var.pyri不同菌株之间也存在致病力分化,菌株WW-1致病力最强,第7天病斑面积为2.72 cm2,菌株WW-2致病力最弱,第7天病斑面积为1.40 cm2。Valsa mali在不同品种间致病力不同,在‘新红星’致病力强,在‘富士’致病力弱。Valsa mali不但侵染苹果树还可以侵染梨树和桃树,Valsa mali var.pyri菌株在梨树上的致病力强于Valsa mali var.mali。【结论】Valsa mali两变种间致病力差异显著,褐色类群菌株Valsa mali var.mali致病力强于乳白色类群菌株Valsa mali var.pyri,Valsa mali两变种内各菌株之间也存在致病力差异显著。 展开更多
关键词 苹果 valsa mali 培养性状 致病力
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陕西杨凌地区苹果树腐烂病菌(Valsa mali)基因多态性的SRAP分析 被引量:3
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作者 李正力 黄丽丽 +1 位作者 康振生 臧睿 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期190-195,共6页
利用SRAP标记对陕西省杨凌地区36株苹果树腐烂病菌(Valsa mali)基因多态性进行分析。从150对SRAP引物中筛选得到8对多态性高、稳定性好的引物组合对供试菌株进行扩增,共得到多态性条带56条,占总带数的75.68%,36株菌株的相似系数为0.33... 利用SRAP标记对陕西省杨凌地区36株苹果树腐烂病菌(Valsa mali)基因多态性进行分析。从150对SRAP引物中筛选得到8对多态性高、稳定性好的引物组合对供试菌株进行扩增,共得到多态性条带56条,占总带数的75.68%,36株菌株的相似系数为0.339 6-0.962 2。其中,菌株167和165ZJG之间相似系数最大,亲缘关系最近。菌株SXYL24与SXYL135之间的相似系数最小。UPGMA聚类分析显示,在相似系数为0.846处36株供试菌株被划分为4个类群,与菌株采集来源及致病力不存在相关性。 展开更多
关键词 苹果树腐烂病菌 DNA多态性 相关序列扩增多态性 致病力
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几种药用植物内生细菌对苹果腐烂病菌(Valsa mali)抑菌效果研究 被引量:1
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作者 郭薇 殷辉 +5 位作者 周建波 吕红 张志斌 赵晓军 刘慧平 韩巨才 《山西农业大学学报(自然科学版)》 CAS 2017年第6期402-407,共6页
[目的]为明确已分离的13株药用植物内生细菌对苹果腐烂病菌(V.mali)的抑菌效果。[方法]采用平板对峙法和生长速率法测定了13株供试菌株活菌及其发酵液对苹果腐烂病菌(V.mali)的抑菌率,并对其进行了聚类分析。[结果]依据活菌抑菌率聚类... [目的]为明确已分离的13株药用植物内生细菌对苹果腐烂病菌(V.mali)的抑菌效果。[方法]采用平板对峙法和生长速率法测定了13株供试菌株活菌及其发酵液对苹果腐烂病菌(V.mali)的抑菌率,并对其进行了聚类分析。[结果]依据活菌抑菌率聚类分析结果可将13株菌分为两类:第Ⅰ类为DS-1、CJ-2、DS-3、ZY-1、MY-1、DS-9、MH和MY-4,抑菌率范围为81.88%~83.65%;第Ⅱ类为ZJ-2、L-23、ZJ-1、ZJ-3和CJ-1,抑菌率范围为79.76%~81.29%。依据发酵液抑菌率聚类分析结果可将13株菌分为两类:第Ⅰ类为MY-1、MY-4、CJ-1、CJ-2、ZJ-1、DS-3和ZJ-3,抑菌率范围为60.00%~81.53%;第Ⅱ类为ZJ-2、MH、DS-9、L-23、ZY-1和DS-1,抑菌率范围为12.94%~43.24%。对13株菌的活菌及其发酵液抑菌率进行综合聚类分析,可将13株菌分为四类。其中第Ⅰ类抑菌活性最强,抑菌率范围为68.29%~83.65%,包含所有拮抗菌活菌和MY-4、MY-1的发酵液。[结论]因此,对拮抗菌MY-4和MY-1可以开发其活菌及发酵液来防治苹果树腐烂病;对于其余11株菌,可开发其活菌来防治苹果树腐烂病。 展开更多
关键词 药用植物 内生细菌 腐烂病 黑腐皮壳菌 抑菌效果
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Two NIS1-like proteins from apple canker pathogen(Valsa mali)play distinct roles in plant recognition and pathogen virulence
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作者 Jiajun Nie Wenjing Zhou +3 位作者 Yonghui Lin Zhaoyang Liu Zhiyuan Yin Lili Huang 《Stress Biology》 2022年第1期606-620,共15页
Conserved effectors produced by phytopathogens play critical roles in plant-microbe interactions.NIS1-like proteins represent a newly identified family of effectors distributed in multiple fungal species.However,their... Conserved effectors produced by phytopathogens play critical roles in plant-microbe interactions.NIS1-like proteins represent a newly identified family of effectors distributed in multiple fungal species.However,their biological functions in a majority of pathogenic fungi remain largely elusive and require further investigation.In this study,we characterized two NIS1-like proteins VmNIS1 and VmNIS2 from Valsa mali,the causal agent of apple Valsa canker.Both of these two proteins were predicted to be secreted.Using agroinfiltration,we found that VmNIS1 induced intense cell death,whereas VmNIS2 suppressed INF1 elicitin-triggered cell death in Nicotiana benthamiana.Treatment of N.benthamiana with VmNIS1 recombinant protein produced by Escherichia coli activated a series of immune responses and enhanced plant disease resistance against Phytophthora capsici.In contrast,VmNIS2 suppressed plant immune responses and promoted P.capsici infection when transiently expressed in N.benthamiana.Both VmNIS1 and VmNIS2 were shown to be highly induced at late stage of V.mali infection.By individually knocking out of these two genes in V.mali,however,only VmNIS2 was shown to be required for pathogen virulence as well as tolerance to oxidative stress.Notably,we further showed that C-terminal extension of VmNIS1 was essential for plant recognition and VmNIS2 may escape plant detection via sequence truncation.Our data collectively indicate that VmNIS1 and VmNIS2 play distinct roles in plant recognition and pathogen virulence,which provided new insights into the function of NIS1-like proteins in plant-microbe interactions. 展开更多
关键词 valsa mali Effector protein Cell death Plant immunity VIRULENCE
原文传递
梨树腐烂病病原菌种群结构分析
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作者 唐丽 李春艳 +2 位作者 孟紫微 李亚鹏 张王斌 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期681-689,共9页
【目的】分析新疆生产建设兵团第一师阿拉尔市库尔勒香梨园梨树腐烂病病原菌的种群分类,通过6对保守基因序列,研究库尔勒香梨腐烂病病原菌序列之间相关性及差异性。【方法】在库尔勒香梨园内采集具有典型症状的腐烂病病样,经科赫氏法则... 【目的】分析新疆生产建设兵团第一师阿拉尔市库尔勒香梨园梨树腐烂病病原菌的种群分类,通过6对保守基因序列,研究库尔勒香梨腐烂病病原菌序列之间相关性及差异性。【方法】在库尔勒香梨园内采集具有典型症状的腐烂病病样,经科赫氏法则验证获取腐烂病病原菌纯培养。采用CTAB法提取腐烂病病原菌基因组DNA,通过PCR扩增ITS、β-tubulin、EF-1α、ACT、LSU、RBP2基因并测序,利用分子系统学分析不同基因片段的系统发育关系。【结果】在阿拉尔周边混交园内库尔勒香梨腐烂病菌种为Valsa mali var.pyri(V.ambiens、Valsa mali)。种内差异与地理位置有关,国内与国外梨腐烂病分离株差异较明显。EF-1α、ACT、LSU、RBP2在进化过程中更能够体现种间差异,系统发育树分支多,存在种间差异。【结论】新疆生产建设兵团第一师阿拉尔市库尔勒香梨腐烂病病原菌种群分布和种间差异性,库尔勒香梨园的腐烂病病原菌主要为Valsa mali var.pyri、Valsa sordida。新疆南疆绿洲特色果园种植模式,以杨树等为主防护林最为常见,存在着林果树木腐烂病交叉侵染的可能。 展开更多
关键词 基因序列 valsa mali var.pyri valsa sordida 分子鉴定
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Vm-milRN7调控苹果树腐烂病菌致病的功能及机理
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作者 张健 赵彬森 +1 位作者 冯浩 黄丽丽 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1930-1942,共13页
【背景】microRNA-like RNA(milRNA)是真菌中普遍存在的一类与动植物microRNA具有相似生成和作用机制的调控因子,广泛参与其生长、发育,以及植物病原真菌的侵染致病等生命活动。苹果树腐烂病菌(苹果黑腐皮壳Valsamali)引起的腐烂病是影... 【背景】microRNA-like RNA(milRNA)是真菌中普遍存在的一类与动植物microRNA具有相似生成和作用机制的调控因子,广泛参与其生长、发育,以及植物病原真菌的侵染致病等生命活动。苹果树腐烂病菌(苹果黑腐皮壳Valsamali)引起的腐烂病是影响苹果生产的最具毁灭性的病害。【目的】探究Vm-milRN7调控苹果树腐烂病菌致病的功能及机理,为苹果树腐烂病的靶向性抗病育种提供理论依据。【方法】以03-8菌株基因组DNA为模板扩增Vm-milRN7前体序列并构建Vm-milRN7前体过表达载体;扩增Vm-milRN7前体上下游序列并利用Double-joint PCR技术构建Vm-milRN7前体敲除盒。利用PEG介导的原生质体转化法构建Vm-milRN7前体过表达及敲除突变体。通过培养皿内生长试验及离体枝条、叶片接种试验分析Vm-milRN7前体过表达及敲除突变体对病菌营养生长及致病的功能。利用qRT-PCR以及烟草共转化试验验证Vm-milRN7对其靶标基因Vm-09496的调控作用;使用生物信息学软件对Vm-09496进行蛋白序列特征和系统发育分析。为解析其功能,创制Vm-09496的敲除突变体以及回补菌株,并鉴定其表型。【结果】利用PEG介导的遗传转化技术获得Vm-milRN7过表达转化株以及敲除突变体。营养生长观察发现,与野生型菌株相比,Vm-milRN7过表达转化株生长表型无明显差异,而敲除突变体营养生长速率显著降低;致病力检测发现,Vm-milRN7过表达转化株对苹果叶片的致病力显著增强,敲除突变体对苹果叶片和枝条的致病力均显著降低。qRT-PCR和烟草共转化试验分析发现,Vm-milRN7能够抑制其候选靶标基因Vm-09496的表达。生物信息学分析发现该基因编码一个假想蛋白,且与梨黑腐皮壳(V.pyri)中的VP1G_09956进化关系最近。创制Vm-09496的敲除突变体和回补菌株,发现与野生型菌株相比,敲除突变体对枝条和叶片的致病力均显著提高,而回补菌株营养生长速率及致病力恢复至野生型水平。【结论】Vm-milRN7通过调控靶标基因Vm-09496的降解参与苹果树腐烂病菌致病过程。靶标基因Vm-09496是影响腐烂病菌侵染的重要内源基因,在苹果树腐烂病菌内负向调控致病力。 展开更多
关键词 苹果黑腐皮壳 milRNA 敲除突变体 致病力 转录后调控
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7种杀菌剂对3种林木腐烂病菌的毒力测定及活性评价
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作者 潘子豪 张义智 +3 位作者 刘朋飞 齐鹤 李辉玲 楼兵干 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期338-349,共12页
林木腐烂病是苹果树、梨树和杨树等林木枝干的重要真菌性病害。为了筛选出对苹果树腐烂病菌Valsa mali var.mali、梨树腐烂病菌V.mali var.pyri和杨树腐烂病菌V.sordida等3种不同寄主腐烂病菌都能有效防控的杀菌剂,本研究开展室内毒力... 林木腐烂病是苹果树、梨树和杨树等林木枝干的重要真菌性病害。为了筛选出对苹果树腐烂病菌Valsa mali var.mali、梨树腐烂病菌V.mali var.pyri和杨树腐烂病菌V.sordida等3种不同寄主腐烂病菌都能有效防控的杀菌剂,本研究开展室内毒力试验比较了7种杀菌剂对3种腐烂病病原菌菌丝生长和分生孢子萌发的抑制效果,并进一步通过田间活性测定试验比较7种杀菌剂对梨树腐烂病病斑扩展和分生孢子发生的防治效果,同时测定了增效剂8.6%聚乙二醇(PEG)对7种杀菌剂的增效作用。毒力测定结果表明,苯醚甲环唑、戊唑醇、吡唑醚菌酯和丙唑·多菌灵对3种腐烂病病原菌菌丝生长和分生孢子萌发的抑制作用较强,其中EC_(50)平均值最低的是苯醚甲环唑,而戊唑醇的MIC平均值最低,在0.33 mg/L浓度下对3种腐烂病病原菌的菌丝生长和分生孢子萌发抑制率均达到100%。田间试验结果表明,45%苯醚甲环唑SC、43%戊唑醇SC和35%丙唑·多菌灵SE对梨树腐烂病病斑扩展和分生孢子萌发的防治效果突出,其中45%苯醚甲环唑SC 30.00 mg/L对病斑扩展防治效果达到82.23%,孢子萌发抑制效果达到85.96%,田间防治效果最好。10%丙硫唑SC+8.6%PEG处理组对病斑扩展防治效果提高了15.39百分点,达到73.46%,分生孢子萌发抑制率提高了23.75百分点,达到83.06%,增效作用显著。本研究为苹果树、梨树和杨树等3种寄主腐烂病的化学防控提供了科学依据。 展开更多
关键词 林木腐烂病 梨树腐烂病菌 毒力测定与活性评价 增效剂
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苹果树腐烂病生防链霉菌A144的鉴定及其代谢产物的抑菌活性 被引量:3
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作者 王宁 黄伟 +4 位作者 鲁致远 罗义 马昊翔 张丽娟 王玮 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期440-449,共10页
旨在明确菌株A144的分类地位及其代谢产物的抑菌活性。基于形态学观察、生理生化特征以及16S rDNA序列分析将菌株A144鉴定为娄彻氏链霉菌(Streptomyces rochei)。采用含药平板法测定菌株A144的抑菌谱,结果表明其发酵滤液对苹果树腐烂病... 旨在明确菌株A144的分类地位及其代谢产物的抑菌活性。基于形态学观察、生理生化特征以及16S rDNA序列分析将菌株A144鉴定为娄彻氏链霉菌(Streptomyces rochei)。采用含药平板法测定菌株A144的抑菌谱,结果表明其发酵滤液对苹果树腐烂病菌(Valsa mali var.mali)、西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum)、水稻恶苗病菌(Fusarium moniliforme)以及番茄早疫病菌(Alternaria solani)均有抑菌活性,抑菌率分别为68.15%±2.62%、28.90%±1.79%、33.77%±2.59%和11.43%±0.81%。以苹果树腐烂病菌为指示菌,从12种不同培养基中筛选出ISP2培养基为菌株A144的最佳发酵培养基,其发酵滤液的抑菌率达85.06%±0.86%。平板涂抹法和平板对扣法试验结果表明,其脂肽粗提物、蛋白粗提物和挥发性物质对苹果树腐烂病菌均有抑菌活性,抑菌率分别为81.44%±0.92%、47.92%±2.25%和22.87%±4.40%。可见,菌株A144在苹果树腐烂病的生物防治中具有良好的开发潜力。 展开更多
关键词 娄彻氏链霉菌 苹果树腐烂病菌 代谢产物 抑菌活性
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7种杀菌剂与拮抗菌SJ1606发酵代谢物配合对苹果树腐烂病菌的抑制活性
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作者 王猛 段海明 +2 位作者 李之硕 孟祥涛 陆文杰 《西昌学院学报(自然科学版)》 2023年第3期15-20,共6页
[目的]明确7种杀菌剂和拮抗菌SJ1606对苹果树腐烂病菌防治效果、筛选出高效混配剂,为传统化学杀菌剂的减量增效使用提供参考方向。[方法]采用菌丝生长速率法测定了7种杀菌剂和拮抗菌SJ1606发酵代谢物以及新型混剂对苹果树腐烂病菌的抑... [目的]明确7种杀菌剂和拮抗菌SJ1606对苹果树腐烂病菌防治效果、筛选出高效混配剂,为传统化学杀菌剂的减量增效使用提供参考方向。[方法]采用菌丝生长速率法测定了7种杀菌剂和拮抗菌SJ1606发酵代谢物以及新型混剂对苹果树腐烂病菌的抑制效果。[结果]苹果树腐烂病菌对咪鲜胺、戊唑醇、丙环唑、多菌灵、苯醚甲环唑表现为高度敏感,以上5种化学杀菌剂对病原菌的EC_(50)分别为0.12、0.33、0.57、0.64、1.14μg/mL;对吡唑醚菌酯表现为中度敏感EC_(50)为6.92μg/mL;对福美双表现为不敏感,EC_(50)为149.99μg/mL。SJ1606发酵上清液和脂肽粗提物对病菌的EC_(50)分别为40.36、14.75μL/mL。采用体积混配方法,脂肽粗提物对部分化学药剂表现出较强的增效作用,其中与多菌灵混配以7∶3增效最为明显,毒性比达1.72;与吡唑醚菌酯以6∶4的毒性比最高为1.58,与咪鲜胺混配以6∶4的混配毒性比最高为1.50;与丙环唑混配以5∶5毒性比最高为1.48。[结论]成功筛选出脂肽粗提物对化学杀菌剂混配增效比例,这对后续生防菌SJ1606的开发利用、杀菌剂的减量使用以及新型混剂的创制提供技术支撑。 展开更多
关键词 苹果树腐烂病 拮抗菌 杀菌剂 脂肽
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苹果树腐烂病的发生与防治
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作者 胡静宜 《果树资源学报》 2023年第1期70-72,共3页
苹果树腐烂病分布广、危害重、防治难,果园遭受苹果树腐烂病的侵害会导致严重减产,甚至树体死亡,给果农带来巨大的经济损失。综述了苹果树腐烂病的发生规律、症状表现以及发病原因等,提出了合理施肥、加强果园管理、清除病原、做好伤口... 苹果树腐烂病分布广、危害重、防治难,果园遭受苹果树腐烂病的侵害会导致严重减产,甚至树体死亡,给果农带来巨大的经济损失。综述了苹果树腐烂病的发生规律、症状表现以及发病原因等,提出了合理施肥、加强果园管理、清除病原、做好伤口保护、药剂防治方法等一系列综合防治技术,以期为苹果生产提供参考。 展开更多
关键词 苹果 腐烂病 发病规律 发病原因 防治方法
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苹果树腐烂病菌多聚半乳糖醛酸酶基因Vmpg7和Vmpg8的功能 被引量:18
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作者 许春景 吴玉星 +3 位作者 戴青青 李正鹏 高小宁 黄丽丽 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1489-1498,共10页
【目的】前期转录组分析表明苹果树腐烂病菌(Valsa mali)两个多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)基因Vmpg7和Vmpg8在病菌侵染定殖过程中显著上调表达。论文旨在分析Vmpg7和Vmpg8在病菌营养生长、致病力、果胶酶活性、对果胶的利用... 【目的】前期转录组分析表明苹果树腐烂病菌(Valsa mali)两个多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)基因Vmpg7和Vmpg8在病菌侵染定殖过程中显著上调表达。论文旨在分析Vmpg7和Vmpg8在病菌营养生长、致病力、果胶酶活性、对果胶的利用等方面的作用及基因双敲除对同家族内其他基因表达水平的影响,明确Vmpg7和Vmpg8在病菌致病过程中的生物学功能,为进一步解析苹果树腐烂病菌致病分子机理提供基础。【方法】通过q RT-PCR检测基因在病菌侵染过程中的表达水平及基因双敲除后PG家族内其他PG基因的表达量;利用double-joint PCR构建基因敲除载体并通过PEG介导的原生质体转化技术进行基因敲除,经4对引物PCR检测及Southern blot验证获得基因单敲除和双敲除突变体,并利用gap-repair技术对基因进行回复;利用PDA培养基常规培养法观察突变体营养生长状况;通过离体接种富士苹果叶片及枝条的方法检测基因缺失对病菌致病力的影响;通过3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法检测各突变体胞外果胶酶活性;利用Czapek培养基培养法分析突变体对果胶的利用情况。【结果】q RT-PCR分析表明,Vmpg7和Vmpg8在病菌侵染3 d后分别上调表达27.73和8.19倍。通过基因敲除技术,分别获得3个Vmpg7基因单敲除突变体、1个Vmpg8基因单敲除突变体和3个Vmpg7/Vmpg8基因双敲除突变体,并获得了Vmpg7和Vmpg8单敲除突变体的回复突变体。将突变体接种到PDA培养基上,菌落形态和生长速率均没有发生变化;接种到苹果叶片和枝条上,Vmpg7单敲除突变体及Vmpg7/Vmpg8双敲除突变体在叶片和枝条上的致病力显著降低,而Vmpg8单敲除突变体在叶片上的致病力显著降低;进一步对果胶酶活性及对果胶的利用分析,发现Vmpg8单敲除突变体及Vmpg7/Vmpg8双敲除突变体胞外果胶酶活性均显著降低,且所有突变体在果胶培养基上生长均明显减慢。此外,基因回复后突变体的致病力、果胶酶活性及在果胶上的生长速率均回复到野生型菌株03-8水平。重要的是,Vmpg7/Vmpg8双敲除后影响了PG家族中其他PG基因的表达水平,3个基因显著上调表达。【结论】多聚半乳糖醛酸酶基因Vmpg7和Vmpg8可能与同家族内其他基因协同作用,通过调节果胶酶活性参与苹果树腐烂病菌致病过程。 展开更多
关键词 苹果树腐烂病菌 多聚半乳糖醛酸酶 果胶酶 基因敲除 致病力
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银杏提取液对四种植物病原菌的抑菌作用 被引量:80
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作者 孟昭礼 吴献忠 +1 位作者 高庆霄 魏华 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期357-360,共4页
银杏根、茎、叶、果肉(外种皮)及果仁的石油醚和丙酮提取液,对玉米小斑病菌(Helminthosporium maydis)和苹果轮纹病菌(Physaclospora piricola)具有抑菌作用,其中以叶部提取液抑菌效果较好。银杏果实的乙醇提取液,对苹果干腐病菌(Botryo... 银杏根、茎、叶、果肉(外种皮)及果仁的石油醚和丙酮提取液,对玉米小斑病菌(Helminthosporium maydis)和苹果轮纹病菌(Physaclospora piricola)具有抑菌作用,其中以叶部提取液抑菌效果较好。银杏果实的乙醇提取液,对苹果干腐病菌(Botryosphaeria ribis)抑菌作用明显,10倍和25倍液抑菌率分别达68.5%和44.4%;对苹果腐烂病菌(Valsa mali)的抑菌作用更明显,10倍和25倍液抑菌率分别达100%和50%。 展开更多
关键词 银杏提取液 苹果树 玉米 病原菌 抑菌作用
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虎杖提取物对苹果腐烂病菌的抑菌机制 被引量:13
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作者 王远遐 姬兰柱 +2 位作者 刘艳 张悦 易雪梅 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2015年第1期148-156,共9页
本文采用乙醇热回流法提取虎杖,以苹果腐烂病菌为指示菌,利用固体培养方法研究虎杖乙醇提取物对病菌的抑制率,通过液体培养方法研究其对菌丝形态、菌丝干重等的影响,同时探究其对菌丝体内几丁质酶活性、β-1,3-葡聚糖酶活性、蛋白酶活... 本文采用乙醇热回流法提取虎杖,以苹果腐烂病菌为指示菌,利用固体培养方法研究虎杖乙醇提取物对病菌的抑制率,通过液体培养方法研究其对菌丝形态、菌丝干重等的影响,同时探究其对菌丝体内几丁质酶活性、β-1,3-葡聚糖酶活性、蛋白酶活性、可溶性蛋白含量及还原糖含量等一些生理生化指标的影响。结果表明,虎杖乙醇提取物对苹果腐烂病菌有明显的抑制作用。当虎杖提取物浓度达800 mg/L时,对菌丝干重的抑制率高达96.5%;抑制蛋白、葡萄糖等菌体细胞内物质的合成,其含量最高可降低为对照的45.2%和23.0%,从而使病菌代谢速度减慢,抑制其生长;使2种细胞壁相关水解酶,几丁质酶和β-1,3葡聚糖酶的活性分别升高3.36和7.98倍,降解细胞壁,破坏菌体结构,使菌体自溶。 展开更多
关键词 虎杖 苹果腐烂病菌 抑菌机制
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黄腐酸处理对苹果树腐烂病菌的抑制作用及对苹果树防御酶活性的影响 被引量:14
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作者 陈臻 侯宝宏 +1 位作者 王卫雄 徐秉良 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期81-86,103,共7页
黄腐酸作为一种广谱性植物生长调节剂,具有稳定可靠的抗逆增产效果。本试验以黄腐酸为生长调节剂,研究其对苹果树腐烂病菌(Valsa mali)的抑制作用及对苹果树皮抗腐烂病的影响。试验结果表明,黄腐酸能抑制苹果树腐烂病菌菌丝的生长,浓度... 黄腐酸作为一种广谱性植物生长调节剂,具有稳定可靠的抗逆增产效果。本试验以黄腐酸为生长调节剂,研究其对苹果树腐烂病菌(Valsa mali)的抑制作用及对苹果树皮抗腐烂病的影响。试验结果表明,黄腐酸能抑制苹果树腐烂病菌菌丝的生长,浓度越大抑制效果越明显。经黄腐酸处理后,苹果树腐烂病组织中SOD、POD、PAL和CAT均呈现先升高后降低的趋势。其中黄腐酸处理后SOD活性于14d达到峰值,而其他酶活性均在21d达到最大值。说明黄腐酸能显著提高苹果树体内相关防御酶系的活性,很大程度上提高了植物的免疫力,即增强了苹果树的抗病性。 展开更多
关键词 黄腐酸 苹果树腐烂病菌 抑制作用 防御酶
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龙胆内生菌的分离鉴定及其对苹果腐烂病菌的拮抗作用 被引量:8
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作者 黄海东 李晓雁 +2 位作者 杨红澎 卢显芝 韩影 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期215-218,共4页
从云雾龙胆中分离到内生菌LD-b1,通过形态观察、生理生化实验和16SrDNA系统进化分析,鉴定其为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)。该菌株的发酵上清液对苹果腐烂病菌的生长有显著的拮抗作用,拮抗活性物质对80℃以下的温度有一定耐受能力;... 从云雾龙胆中分离到内生菌LD-b1,通过形态观察、生理生化实验和16SrDNA系统进化分析,鉴定其为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)。该菌株的发酵上清液对苹果腐烂病菌的生长有显著的拮抗作用,拮抗活性物质对80℃以下的温度有一定耐受能力;在pH5~10之间均有一定活性,对低pH更敏感;50μg/mL的蛋白酶K在37℃条件下处理1h可以使其抑菌活性完全丧失。抑菌曲线测定结果表明,摇瓶发酵48h时内生菌LD-b1的抑菌活性最高,在苹果果实上对腐烂病斑也具有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 龙胆 内生菌 苹果腐烂病菌 拮抗作用
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我国梨树腐烂病菌致病力分化分析 被引量:11
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作者 张美鑫 翟立峰 +4 位作者 周玉霞 陈晓忍 贾娜娜 洪霓 王国平 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期657-664,共8页
【目的】研究明确我国梨树腐烂病菌致病力的分化状况。【方法】梨离体枝条经打孔法造成伤口后接种梨树腐烂病菌,通过接种在5个梨系统(白梨、沙梨、秋子梨、西洋梨和新疆梨)不同品种上观测和比较不同来源菌株的致病力差异,并根据各菌株... 【目的】研究明确我国梨树腐烂病菌致病力的分化状况。【方法】梨离体枝条经打孔法造成伤口后接种梨树腐烂病菌,通过接种在5个梨系统(白梨、沙梨、秋子梨、西洋梨和新疆梨)不同品种上观测和比较不同来源菌株的致病力差异,并根据各菌株的综合致病力强弱划分为不同类型,分析致病力分化与菌株来源间的相关性。【结果】研究发现来源于我国14省市5个梨系统的91份梨树腐烂病菌株在不同梨品种上的致病力均存在显著性差异,但同一菌株在5个梨品种上的症状反应程度有异。根据各供试菌株在不同梨品种上的综合致病力强弱可将其划分为3个类型,其中强致病力菌株16份,占17.6%;中致病力菌株70份,占76.9%;弱致病力菌株5份,占5.5%。来源于不同地区和梨系统的菌株之间其致病类型的分布比例存在明显的差异,这种差异可能与其梨系统的抗病性相关。【结论】来源于我国不同地区和梨系统的梨树腐烂病菌存在明显的致病力分化,其综合致病力可划分为强、中、弱3个致病类型,以中等致病力菌株为优势群体。 展开更多
关键词 梨树腐烂病菌 菌株 致病力分化
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苹果树腐烂病菌果胶裂解酶基因Vmpl4的致病功能研究 被引量:9
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作者 许春景 孙迎超 +3 位作者 吴玉星 冯浩 高小宁 黄丽丽 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期19-25,共7页
【目的】通过研究苹果树腐烂病菌果胶裂解酶(pectate lyase,PL)基因Vmpl4敲除突变体的致病力、对果胶的利用和基因敲除后家族内其他基因的表达水平变化,探明Vmpl4在致病过程中的作用。【方法】采用q RT-PCR技术检测Vmpl4在野生菌株03-8... 【目的】通过研究苹果树腐烂病菌果胶裂解酶(pectate lyase,PL)基因Vmpl4敲除突变体的致病力、对果胶的利用和基因敲除后家族内其他基因的表达水平变化,探明Vmpl4在致病过程中的作用。【方法】采用q RT-PCR技术检测Vmpl4在野生菌株03-8与寄主互作过程中的表达水平及Vmpl4敲除后PL家族内其他基因的表达水平,通过Doublejoint PCR构建基因敲除载体,并通过PEG介导原生质体遗传转化获取转化子、PCR及Southern blot验证基因敲除突变体。利用苹果叶片和枝条离体接种方法检测突变体致病力;接种至PDA及果胶培养基,观察突变体的营养生长和对果胶的利用情况。【结果】Vmpl4在病菌侵染过程中上调表达高达10.20倍;通过验证得到1个基因敲除突变体,其在叶片和枝条上的致病力均显著降低,在果胶培养基上生长速率也明显降低,Vmpl4敲除后家族内4个基因在病菌侵染过程中表达水平显著上调。【结论】果胶裂解酶基因Vmpl4通过降解果胶参与致病过程,PL家族内其他基因与Vmpl4在病菌致病性方面共同发挥作用。 展开更多
关键词 苹果树腐烂病菌 果胶裂解酶 基因敲除 致病力
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补骨脂抑菌活性成分分析及鉴定 被引量:10
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作者 关丽杰 赵礼慧 +1 位作者 邵双 李海燕 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2013年第4期655-660,共6页
本文以苹果腐烂病菌为指示菌,采用菌丝生长速率方法测定补骨脂的抑菌活性,其中提取物采用浸渍法提取,通过反复柱层析、薄层层析等分离纯化方法,对补骨脂粗提物的活性成分进行系统的分离,最终得到5种活性物质,经波谱分析法鉴定5种化合物... 本文以苹果腐烂病菌为指示菌,采用菌丝生长速率方法测定补骨脂的抑菌活性,其中提取物采用浸渍法提取,通过反复柱层析、薄层层析等分离纯化方法,对补骨脂粗提物的活性成分进行系统的分离,最终得到5种活性物质,经波谱分析法鉴定5种化合物分别为补骨脂酚(bakuchiol)、呋喃香豆素精(bakuchicin)、补骨脂查尔酮(bavachalcone)、补骨脂定(psoralidin)和补骨脂二氢黄酮(bavachin)。经过室内毒力试验,5种化合物的EC50分别为6.117、60.441、3.420、36.815和6.144 mg·L 1,EC90分别为204.480、97.795、15.334、221.860和89.631 mg·L 1,表明5种化合物对苹果腐烂病菌均具有很高的抑制活性。 展开更多
关键词 补骨脂 抑菌活性 苹果腐烂病菌 分离 鉴定 波谱分析法
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苹果树腐烂病菌GTP-环化水解酶II基因敲除载体构建及其突变体的表型分析 被引量:16
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作者 宋娜 戴青青 +2 位作者 宋娜 黄丽丽 韩青梅 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第15期2980-2989,共10页
【目的】利用反向遗传学方法构建苹果树腐烂病菌(Valsa mali)中表达GTP-环化水解酶II基因Vmgtp1的敲除载体,通过同源重组的方法进行基因敲除分析目标基因的功能,为全面解析苹果树腐烂病菌致病的分子机制奠定基础,并为有效控制苹果树腐... 【目的】利用反向遗传学方法构建苹果树腐烂病菌(Valsa mali)中表达GTP-环化水解酶II基因Vmgtp1的敲除载体,通过同源重组的方法进行基因敲除分析目标基因的功能,为全面解析苹果树腐烂病菌致病的分子机制奠定基础,并为有效控制苹果树腐烂病的方法技术和药剂研制提供理论依据。【方法】通过对笔者实验室苹果树腐烂病菌转录组数据的分析比对得到GTP-环化水解酶II基因Vmgtp1(暂命名),该基因在接种5 d后,在病组织中表现出一定的上调表达,推测该基因可能与苹果树腐烂病菌致病相关。采用Double-joint PCR方法,将目标基因Vmgtp1的上游片段UP、下游片段DOWN及筛选标记潮霉素磷酸转移酶基因(hph)进行片段融合。对得到的PCR产物及质粒pHIG2RHPH2-GFP-GUS进行双酶切,通过T4连接酶,将片段UP-HPH-DOWN连接到质粒pHIG2RHPH2-GFP-GUS上,转化到JM109菌株中,挑取阳性克隆,提取质粒,得到含有hph的Vmgtp1敲除载体,再利用PEG介导的遗传转化获得抗潮霉素的突变体,然后用4对引物对突变体进行PCR检测及Southern Blot验证得到敲除突变体,最后对敲除突变体及野生型菌株03-8进行菌落颜色、菌落大小、繁殖体产生情况等表型分析和接种在离体苹果烫伤枝条上观察病斑大小的致病性检测,对检测数据用SPSS软件进行差异显著性分析。【结果】通过上述方法成功构建了表达GTP-环化水解酶II基因的Vmgtp1敲除载体,并利用PEG介导的遗传转化方法在苹果树腐烂病菌中进行了转化,共获得101个能够在含潮霉素PDA培养基上生长的突变菌株,经过PCR及Southern Blot对101个突变菌株进行分析验证,得到1个敲除突变体,编号为ΔVmgtp1-90。在PDA培养基上,敲除突变体ΔVmgtp1-90与野生型菌株03-8相比,ΔVmgtp1-90菌落平均生长速率为11.33 mm·d-1,03-8平均生长速率为24.67 mm·d-1,突变体菌落生长速率明显变慢,颜色变浅,气生菌丝稀疏;ΔVmgtp1-90光照培养40 d仍无繁殖体的产生,而03-8光照条件下培养15 d后就能产生繁殖体,30 d后有分生孢子从繁殖体上溢出。致病性检测试验发现,接种ΔVmgtp1-90菌株7 d后,富士苹果枝条上病斑的平均直径为9.3 mm,与之相比,接种03-8的苹果枝条病斑平均直径为24.8 mm,ΔVmgtp1-90致病性显著减弱。【结论】通过基因敲除和遗传转化获得苹果树腐烂病菌中表达GTP环化水解酶II Vmgtp1的敲除突变体ΔVmgtp1-90,比较Vmgtp1突变体与野生型菌株的表型及致病性差异,发现Vmgtp1可能参与调控苹果树腐烂病菌菌丝生长和繁殖体的产生过程,并且可能在苹果树腐烂病菌致病过程中起作用,但是是否起主要作用还有待进一步研究。 展开更多
关键词 苹果黑腐皮壳 同源重组 PEG 致病性
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0.6%苦·小檗碱杀菌水剂研制及在苹果树上的应用 被引量:20
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作者 佟树敏 李学静 杨先芹 《农业环境保护》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期67-69,共3页
通过实验室和田间优选抑菌实验得出有效成分为0.6%(苦参碱0.15%、小檗碱0.45%)时,苦·小檗碱杀菌水剂效果最佳。通过室内生物测定及两处大规模田间药效实验得出苦·小檗碱杀菌水剂对苹果腐烂病、苹果轮纹病和黄瓜霜霉病的有效... 通过实验室和田间优选抑菌实验得出有效成分为0.6%(苦参碱0.15%、小檗碱0.45%)时,苦·小檗碱杀菌水剂效果最佳。通过室内生物测定及两处大规模田间药效实验得出苦·小檗碱杀菌水剂对苹果腐烂病、苹果轮纹病和黄瓜霜霉病的有效抑菌稀释度。 展开更多
关键词 苦·小檗碱杀菌水剂 苦参碱 小檗碱 苹果腐烂病 苹果轮纹病 黄瓜霜霉病 抑菌 杀菌剂
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