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组织工程血管构建过程中平滑肌细胞增殖变化及代谢模式
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作者 梅静怡 刘江 +3 位作者 肖聪 刘鹏 周浩浩 林展翼 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第7期1043-1049,共7页
背景:将种子细胞接种于三维支架材料上然后在生物反应器中进行三维培养是一种常见的体外组织工程培养手段,但是生物工程血管构建过程中的细胞增殖变化及代谢模式尚不清楚。目的:探究利用体外生物反应器进行生物血管组织构建过程中细胞... 背景:将种子细胞接种于三维支架材料上然后在生物反应器中进行三维培养是一种常见的体外组织工程培养手段,但是生物工程血管构建过程中的细胞增殖变化及代谢模式尚不清楚。目的:探究利用体外生物反应器进行生物血管组织构建过程中细胞耗氧等代谢变化及其原因。方法:以自主搭建的血管生物反应器系统为平台,牛血管壁平滑肌细胞为种子细胞,常规CO_(2)培养箱提供培养过程的外部气体环境。将种子细胞接种于管状多孔隙的聚乙醇酸支架材料上进行三维培养,全过程包括1周的静置期和7周脉动张应力刺激加载期。搭建一套非侵入式监测体系,采用光学溶解氧贴片法监测反应器中培养液溶解氧变化,并通过定期取样测定葡萄糖消耗量及乳酸生成量。采用CCK-8检测平滑肌细胞在聚乙醇酸三维支架材料上增殖情况,通过烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的氧化态与还原态比值(NAD^(+)/NADH)了解培养早期阶段细胞增殖与代谢状况,采用RT-qPCR、Western blot方法检测增殖相关基因(Ki67)及糖酵解相关基因(GLUT-1、LDHA)的表达。结果与结论:(1)从细胞加注到静置期结束(第1周)培养液的溶解氧水平为(4.314±0.380)mg/L,张应力刺激加载后(后7周)溶解氧水平逐步稳定在(1.960±0.866)mg/L,两者有明显变化(P<0.05);(2)细胞培养液中乳酸生成量与葡萄糖消耗量的比值Y_(L/G)在加注细胞后快速升高,第5天最高值高于1,随后缓慢下降至0.5(静置期Y_(L/G)均值为0.89,加压期均值为0.57,P<0.05);(3)CCK-8检测显示A_(450)值在细胞加注之后逐渐增大,第5天达到最高值3.17,之后缓慢下降;同时发现Ki67 mRNA在培养第3天上调最显著,之后下降,Ki67蛋白在第3-5天的相对表达量较高;(4)细胞加注后第5-7天NAD~+/NADH明显升高,糖酵解相关基因(GLUT-1、LDHA)表达上调同步改变,前5 d相对表达量较高;(5)结果提示:利用血管生物反应器构建组织工程血管早期,平滑肌细胞以增殖为主并呈现一种低耗氧的代谢特征,在脉动张应力刺激阶段呈现耗氧较高的代谢特征。 展开更多
关键词 生物反应器 组织工程 血管平滑肌细胞 聚乙醇酸 溶解氧 细胞增殖 有氧糖酵解
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一种血管生物反应器相关参数的量化分析 被引量:2
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作者 刘艳秋 黄楠 +3 位作者 邹远文 黄学进 李晋川 樊瑜波 《西南交通大学学报》 EI CSCD 北大核心 2012年第1期139-143,150,共6页
为了模拟血管的在体环境,由北京航空航天大学与四川大学联合为西南交通大学研制了血管生物反应器,采用流体力学理论与正交实验极差分析的方法对生物反应器的剪切力、层流状态及脉压差调节等性能指标进行了量化分析.结果表明:该套系统针... 为了模拟血管的在体环境,由北京航空航天大学与四川大学联合为西南交通大学研制了血管生物反应器,采用流体力学理论与正交实验极差分析的方法对生物反应器的剪切力、层流状态及脉压差调节等性能指标进行了量化分析.结果表明:该套系统针对不同半径的血管,可提供的最小剪切力为0.08 Pa,最大剪切力为70.51 Pa;为保证灌流液为层流状态,在灌流液粘度系数、流体密度确定的前提下,培养腔入口端输入管长度为18 cm时,装置提供的5种管径的最大流量均不可超过4.36 cm3/s;脉动发生器的行程对收缩压与舒张压的压差影响最大,对流量和频率的影响次之,对压力的影响最小. 展开更多
关键词 血管生物反应器 剪切力 层流 雷诺数 压差 正交实验
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利用脱细胞血管基质体外构建小口径组织工程血管 被引量:9
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作者 武欣 谷涌泉 +6 位作者 段红永 陈兵 李建新 吴英锋 张淑文 汪忠镐 张建 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2010年第5期377-382,I0002,I0003,共8页
目的探讨利用犬的间充质干细胞诱导分化种子细胞,以异种脱细胞血管基质为基础体外构建小口径血管移植物。方法采用密度梯度离心和贴壁培养的方法从犬骨髓中分离出间充质干细胞并体外培养,诱导分化成内皮样细胞和平滑肌样细胞;采用非离... 目的探讨利用犬的间充质干细胞诱导分化种子细胞,以异种脱细胞血管基质为基础体外构建小口径血管移植物。方法采用密度梯度离心和贴壁培养的方法从犬骨髓中分离出间充质干细胞并体外培养,诱导分化成内皮样细胞和平滑肌样细胞;采用非离子型去垢剂和胰蛋白酶去除猪颈动脉血管壁结构细胞,对脱细胞基质进行组织学、力学检测及孔隙率评估。在生物反应器内采用旋转种植的方法将犬骨髓间充质干细胞诱导的内皮样细胞种植到脱细胞基质上,体外构建小口径组织工程血管。结果犬的骨髓间充质干细胞体外能够定向诱导分化为平滑肌样细胞和内皮样细胞,可以作为血管组织工程的种子细胞。经过脱细胞处理后,光镜和电镜观察证实血管壁的细胞成分完全去除。具有良好的孔径和孔隙率。支架在生物力学、孔隙率等方面符合构建组织工程血管支架的要求。在生物反应器内剪切力条件下可以初步构建出组织工程血管。结论小口径血管移植物可以将间充质干细胞诱导种子细胞,以异种脱细胞血管支架作为基质,在搏动性生物反应器内培养的方法进行构建。 展开更多
关键词 间充质干细胞 脱细胞 支架 生物反应器 组织工程
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血管生物反应器中的血流动力学及其应用
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作者 李正美 鲁雯 郑浩 《中国医学装备》 2008年第3期15-18,共4页
血管生物反应器是血管组织体外培养过程中血管重建的关键设备,为血管组织的体外培养提供稳定的、与生物体内相似的体外环境。目前许多血管生物反应器在组织工程血管重建中得到广泛应用。血流动力学是新近引入血管生物反应器的重要研究... 血管生物反应器是血管组织体外培养过程中血管重建的关键设备,为血管组织的体外培养提供稳定的、与生物体内相似的体外环境。目前许多血管生物反应器在组织工程血管重建中得到广泛应用。血流动力学是新近引入血管生物反应器的重要研究理论。分析血流动力学在血管重建中的作用,探讨血管生物反应器中力学环境的相关问题及其在不同血管重建中的具体应用。 展开更多
关键词 血管生物反应器 脉动流 血管重建
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生理脉动流模拟系统设计与仿真 被引量:3
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作者 刘双双 黄学进 +2 位作者 李晋川 陈君楷 邹远文 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 2009年第5期369-373,共5页
目的为了给体外血管组织培养提供生理脉动环境,实现血管组织培养装置中压力、流量接近生理脉动变化,简化循环液路系统参数设定,建立一个压力流量可调的血管组织培养装置。方法在血流动力学研究基础上,构建生理脉动流系统混合参数模型及... 目的为了给体外血管组织培养提供生理脉动环境,实现血管组织培养装置中压力、流量接近生理脉动变化,简化循环液路系统参数设定,建立一个压力流量可调的血管组织培养装置。方法在血流动力学研究基础上,构建生理脉动流系统混合参数模型及其模拟电路网络,运用Matlab Simulink/GUI仿真电路模型,通过仿真出的器件参数指导脉动流装置的设计。结果利用电路仿真模拟了脉动流循环系统,在仿真和实验中实现了生理脉动压力和流量,并完成了实验装置的设计与制作。结论电路系统仿真应用于体外脉动流循环系统的构建,可以简化血管组织培养装置的设计,指导系统调节。 展开更多
关键词 血管生物反应器 生理脉动流 MATLAB Simulink/GUI仿真 脉动流
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利用转基因番茄表达血管内皮生长因子的研究
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作者 李洪志 刘洁婷 +3 位作者 郭冉 金立波 李海燕 李校堃 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2012年第1期141-146,共6页
【目的】应用基因工程技术,获得表达血管内皮生长因子(VEGF)的转基因番茄植株,为以番茄作为生物反应器生产药用蛋白奠定基础。【方法】利用植物偏好的密码子改造合成VEGF基因全长,构建植物表达载体p1390R-VEGF,通过农杆菌菌株EHA105介... 【目的】应用基因工程技术,获得表达血管内皮生长因子(VEGF)的转基因番茄植株,为以番茄作为生物反应器生产药用蛋白奠定基础。【方法】利用植物偏好的密码子改造合成VEGF基因全长,构建植物表达载体p1390R-VEGF,通过农杆菌菌株EHA105介导将其T-DNA区转入到番茄细胞中,再生后获得转基因番茄植株,对其进行分子和蛋白水平检测。【结果】成功构建了植物整株表达载体p1390R-VEGF,建立了高频的番茄再生培养体系;PCR检测、Southern blot和Western blot检测结果表明,VEGF基因已经转入番茄中,并成功得到了表达。【结论】得到了转基因番茄植株和果实,且VEGF蛋白有良好的抗原性。 展开更多
关键词 转基因番茄 血管内皮生长因子 植物生物反应器 农杆菌
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新西兰家兔颈动脉体外应力培养研究
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作者 付海洋 李敏 +2 位作者 于浩 付步芳 王召旭 《中国医药导报》 CAS 2021年第31期4-6,16,F0003,共5页
目的通过调节液体流量、流速及周期性脉动等参数,研究新西兰家兔颈动脉体外应力培养时血管结构的变化。方法取SPF级新西兰家兔颈动脉置于生物反应器上,构建血管体外培养模型。共分四组,静态组为静态培养,动态组(80、50、25组)在脉冲泵... 目的通过调节液体流量、流速及周期性脉动等参数,研究新西兰家兔颈动脉体外应力培养时血管结构的变化。方法取SPF级新西兰家兔颈动脉置于生物反应器上,构建血管体外培养模型。共分四组,静态组为静态培养,动态组(80、50、25组)在脉冲泵运行位移与频率相同的条件下,保持培养液流速分别为80、50、25 ml/min,维持应力状态培养,培养结束后通过HE、Masson、EVG染色对血管结构的变化进行评价。结果静态组15 d血管内皮细胞保持完整,平滑肌细胞排列混乱,弹性纤维收缩剧烈,胶原纤维基本没有变化;80组弹性纤维未见明显变化,内皮细胞不可见,第8天平滑肌较第4天排列整齐,第8天胶原纤维明显减少。50组内皮细胞不可见,平滑肌排列整齐,15 d时弹性纤维疏松且趋于平直,血管胶原纤维明显减少;25组内皮细胞可见,弹性纤维和胶原纤维改变较50组轻微。结论在模拟动物体内各参数的条件下,血管体外动态培养有助于维持血管的生理结构,培养的难点在于防止污染和补充胶原。高应力条件下,会导致血管内皮细胞受损,进而造成平滑肌细胞增殖,胶原纤维流失更为严重。 展开更多
关键词 血管体外培养 应力 生物反应器 弹性纤维 胶原纤维 血管内皮细胞
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血管生物反应器流场的数值分析
8
作者 朱肃敬 郑庭辉 +3 位作者 邹远文 李晋川 黄学进 樊瑜波 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 2010年第5期352-356,368,共6页
目的研究一种新型小口径血管生物反应器在不同工况下的流场分布。方法采用数值方法模拟反应器外筒单独旋转、内筒单独旋转和内外筒同向等速旋转情况下其内部的流场分布,对流速和切应力等参数进行比较分析。结果血管生物反应器工作时,培... 目的研究一种新型小口径血管生物反应器在不同工况下的流场分布。方法采用数值方法模拟反应器外筒单独旋转、内筒单独旋转和内外筒同向等速旋转情况下其内部的流场分布,对流速和切应力等参数进行比较分析。结果血管生物反应器工作时,培养液随内外筒的旋转而旋转流动,速度分布均匀;可为培养液内的细胞提供非破坏性的低切应力环境;并且反应器内部的切应力大小与转速呈二次函数关系。结论该反应器能为血管培养提供良好的培养环境,本研究可为其实验研究提供指导意见和理论基础。 展开更多
关键词 血管生物反应器 数值模拟 流速 切应力 旋转流
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组织工程血管脉动生物反应器的研制 被引量:1
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作者 李祯 张磊 孙伟 《新技术新工艺》 2019年第7期47-50,共4页
心脑血管疾病是当今威胁人类生命与健康的最主要疾病之一,对人工血管有着较大需求。其中组织工程血管被认为是制备人工血管的理想方法,而生物反应器在组织工程血管的构建中有着关键作用。针对上述问题,设计了一种用于血管组织工程研究... 心脑血管疾病是当今威胁人类生命与健康的最主要疾病之一,对人工血管有着较大需求。其中组织工程血管被认为是制备人工血管的理想方法,而生物反应器在组织工程血管的构建中有着关键作用。针对上述问题,设计了一种用于血管组织工程研究用的新型结构脉动生物反应器。该反应器采用了音圈电机作为脉动发生装置,模拟成人的心室功能,可产生与人体自然压差相近的脉动液流,较好地模拟了体内真实的血液流动环境。此外采用弹性可降解的聚氨酯材料以及涂覆工艺设计并制备了小口径的组织工程血管,并将该反应器用于小口径组织工程血管的体外模拟降解的研究中,以验证生物反应器的有效性。 展开更多
关键词 组织工程 人工血管 生物反应器 脉动 音圈电机 体外培养
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血液流体动力学研究与生物反应器在组织工程血管构建的应用 被引量:2
10
作者 许志成 商庆新 +1 位作者 刘伟 曹谊林 《国外医学(生物医学工程分册)》 2004年第1期30-32,共3页
利用生物反应器构建组织工程化血管是近年来诞生的一项新技术。本文综述了其理论基础即血液流体动力学的研究进展,生物反应器的原理、结构、应用及评估,同时提出存在的问题并展望其应用前景。
关键词 血液流体动力学 生物反应器 组织工程 血管构建 人工血管
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Engineering skeletal muscle tissue in bioreactor systems
11
作者 An Yang Li Dong 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2014年第23期4130-4139,共10页
Objective To give a concise review of the current state of the art in tissue engineering (TE) related to skeletal muscle and kinds of bioreactor environment.Data sources The review was based on data obtained from th... Objective To give a concise review of the current state of the art in tissue engineering (TE) related to skeletal muscle and kinds of bioreactor environment.Data sources The review was based on data obtained from the published articles and guidelines.Study selection A total of 106 articles were selected from several hundred original articles or reviews.The content of selected articles is in accordance with our purpose and the authors are authorized scientists in the study of engineered muscle tissue in bioreactor.Results Skeletal muscle TE is a promising interdisciplinary field which aims at the reconstruction of skeletal muscle loss.Although numerous studies have indicated that engineering skeletal muscle tissue may be of great importance in medicine in the near future,this technique still represents a limited degree of success.Since tissue-engineered muscle constructs require an adequate connection to the vascular system for efficient transport of oxygen,carbon dioxide,nutrients and waste products.Moreover,functional and clinically applicable muscle constructs depend on adequate neuromuscular junctions with neural calls.Third,in order to engineer muscle tissue successfully,it may be beneficial to mimic the in vivo environment of muscle through association with adequate stimuli from bioreactors.Conclusion Vascular system and bioreactors are necessary for development and maintenance of engineered muscle in order to provide circulation within the construct. 展开更多
关键词 tissue engineering regenerative medicine skeletal muscle bioreactor vascularIZATION
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体内生物反应器在骨组织工程血管化中的研究进展 被引量:1
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作者 张海峰 韩冬 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1173-1176,共4页
目的总结体内生物反应器在促进组织工程骨血管化方面的应用以及研究进展。方法查阅国内外近年有关体内生物反应器在促进组织工程骨血管化方面的相关文献,并进行综合分析。结果体内生物反应器可由骨膜、肌肉、肌层膜、筋膜瓣及生物材料构... 目的总结体内生物反应器在促进组织工程骨血管化方面的应用以及研究进展。方法查阅国内外近年有关体内生物反应器在促进组织工程骨血管化方面的相关文献,并进行综合分析。结果体内生物反应器可由骨膜、肌肉、肌层膜、筋膜瓣及生物材料构建,它能有效促进组织工程骨血管化,尤其对于较大骨缺损的修复重建具有重要意义。但目前相关研究以动物实验为主,临床试验有待进一步开展。结论随着骨组织工程相关技术的发展,体内生物反应器有望解决组织工程骨血管化这一问题,具有潜在的临床应用价值。 展开更多
关键词 骨组织工程 体内生物反应器 血管化 骨缺损
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用于骨组织工程的体内生物反应器研究进展
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作者 王建 王晓 +1 位作者 甄平 樊博 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期627-635,共9页
目的对用于骨组织工程的体内生物反应器(in vivo bioreactor,IVB)的研究进展进行综述,为后续研究提供参考。方法查阅近年来骨组织工程IVB相关文献,从IVB构建原则、构建IVB的组织类型、部位及方法,以及IVB用于构建组织工程骨的优劣等方... 目的对用于骨组织工程的体内生物反应器(in vivo bioreactor,IVB)的研究进展进行综述,为后续研究提供参考。方法查阅近年来骨组织工程IVB相关文献,从IVB构建原则、构建IVB的组织类型、部位及方法,以及IVB用于构建组织工程骨的优劣等方面进行综述。结果 IVB是利用机体自我再生能力,把身体作为生物反应器在损伤部位或能够支持新组织再生的异位部位再生新组织或器官。IVB可由组织瓣(皮下袋、肌瓣/袋、筋膜瓣、骨膜瓣、大网膜瓣/腹腔)和轴向血管蒂(轴向血管束、动静脉环)单独或联合构建。使用IVB能预构与骨缺损形状、大小匹配的血管化组织工程骨。预构的骨组织可作为游离骨移植物、带蒂骨瓣或游离骨瓣修复骨缺损。IVB解决了传统骨组织工程血管化不足的问题。结论 IVB是一种有临床应用前景的血管化组织工程骨预构和骨缺损修复重建的方法,在修复大型复杂骨缺损方面有着独特优势。但因IVB存在构建复杂以及手术并发症等问题影响了其临床应用,后续需致力于开发一种简单、安全、高效的IVB。 展开更多
关键词 体内生物反应器 骨组织工程 血管化 预构
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