山奈酚对子宫肌瘤体外抑制作用的实验研究

目的：研究山奈酚对离体人子宫肌瘤细胞增殖的影响，为其用于子宫肌瘤的临床药物治疗进行前期的摸索。方法：进行人子宫肌瘤细胞原代、传代培养及鉴定。取用第3～5代子宫肌瘤细胞，3个浓度的山奈酚（12μmol／L、24μmol／L、48μmol／L）干预24小时、48小时、72小时，并设溶剂对照组（无水乙醇，体积比为0.1％）。采用CKK-8法检测子宫肌瘤细胞的增殖变化；并通过荧光定量RT-PCR法和Western-blot法检测雌激素受体（ER）、胰岛素样生长因子-1（IGF-1）、血管内皮生长因子（VEGF）的mRNA和蛋白表达。结果：不同时间和浓度组间的A_450值比较，差有统计学意义（P〈0.05），山奈酚对子宫肌瘤有一定抑制增殖作用。山奈酚可抑制ERmRNA、IGF-1mRNA表达，且该作用随山奈酚浓度增加而有所增强（P〈0.05）。山奈酚可抑制VEGFmRNA，该作用与山奈酚浓度无明显关系（P〉0.05）。山奈酚可抑制ER、VEGF、IGF-1蛋白的表达，且该作用随山奈酚浓度增加而有所增强（P〈0.05）。结论：山奈酚能抑制离体人子宫肌瘤细胞增殖，下调ER、IGF-1和VEGFmRNA和蛋白的表达。

bFGF、VEGF在大鼠创伤脑组织中的表达及关系

目的 研究碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)、血管内皮细胞生长因子 (VEGF)在大鼠创伤脑组织中不同时间的表达及其它们之间的关系 ,从分子水平探讨颅脑损伤后的病理机制 ,为临床治疗脑损伤的新途径提供实验基础。方法 改进 Marm arou大鼠加速弥漫性脑损伤模型 ,制作成弥漫性轴索损伤同时合并局灶性脑挫伤的新的动物模型。 SD雄性大鼠 48只 ,随机分为 8组 ,每组 6只。取挫伤灶周围脑组织免疫组化染色观察 b FGF、VEGF基因表达情况。结果 脑挫伤灶周围脑组织 ,b FGF基因表达在伤后 1h明显增加 ,伤后 12 h达高峰 ;VEGF基因表达伤后逐渐增加 ,2 4h达高峰 ,72 h恢复到对照水平。结论 b FGF、VEGF基因表达与脑损伤密切相关 ,作为生长因子 ,b FGF。

HIF-α、VEGF和DLL4在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨Delta样配体4(Delta-like ligand 4,DLL4)、低氧诱导因子α(hypoxia inducible factor alpha,HIF-α)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及其临床意义。方法选取河北省胸科医院胸外科2012年10月—2015年11月经手术治疗NSCLC患者的手术切除标本72例作为NSCLC组,另选距离原发肿瘤5 cm以上的肺组织标本(经HE染色病理证实无肿瘤浸润)72例作为正常对照组。通过免疫组化染色的方法检测DLL4、HIF-α及VEGF的表达情况,并结合患者的临床病理资料进行分析。结果 NSCLC组DLL4、HIF-α及VEGF阳性表达率显著高于正常对照组(P<0.01);DLL4、HIF-α及VEGF表达与NSCLC肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05),而与患者年龄、性别、病理类型及肿瘤长径无关(P>0.05);DLL4、HIF-α与VEGF表达两两之间均呈显著正相关(r=0.320、0.366、0.335,P<0.01)。结论DLL4、HIF-α及VEGF在NSCLC发生、发展和转移中可能起协同作用,检测DLL4、HIF-α及VEGF的表达对临床判断非小细胞肺癌发生、发展、预后及研发新的靶向治疗药物有一定的价值。

达肝素对载脂蛋白E基因缺陷小鼠肾动脉粥样硬化病变的影响

目的在动脉粥样硬化模型鼠中,观察达肝素对肾动脉粥样硬化病变进展及对植物血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达影响,探讨达肝素可能的抗动脉粥样硬化机制。方法以6周龄雄性C57BL/6J小鼠24只为对照,随机分为普通饲料组及高脂饲料组。雄性6周龄载脂蛋白E基因缺陷(Apo E-/-)小鼠36只,均予高脂饲料喂养至12周龄,随机分为模型组、低剂量肝素组[达肝素钠100 IU/(kg.d)]、高剂量肝素组[达肝素钠200 IU/(kg.d)],皮下注射连续4周(16周龄)后各组随机取6只处死。分离肾动脉,制成石蜡切片行HE及免疫组织化学染色,观察斑块情况及LOX-1蛋白的表达。用RT-PCR方法,检测肾动脉LOX-1 mRNA及VEGF mRNA的表达。用Western Blot分析法,检测肾动脉中LOX-1蛋白的表达。剩余小鼠继续原方案喂养4周(20周龄)后处死,肾动脉石蜡切片行HE染色,观察斑块情况。结果 Apo E-/-模型组在16周龄时出现轻度肾动脉粥样硬化。低剂量及高剂量达肝素均抑制肾动脉粥样硬化的形成(P<0.05)。Apo E-/-模型组LOX-1 mRNA、VEGF mRNA及LOX-1蛋白的表达水平较C57BL/6J普通饲料组的表达水平明显升高(P<0.05)。低剂量及高剂量达肝素治疗后,LOX-1 mRNA、VEGF mRNA及LOX-1蛋白的表达水平表达较模型组明显下降(P<0.05)。结论达肝素钠可能通过抑制LOX-1蛋白及VEGF表达的途径,抑制肾动脉粥样硬化的进展。

核因子-κB和血管内皮生长因子在胃癌中的表达及其意义

目的:探讨核因子-κB(NF-κB)和血管内皮生长因子(VEGF)在胃癌中的表达及其临床意义.方法:选取68例胃癌组织为实验对象,各对应的癌旁组织为对照组,并选取20例正常胃组织为正常对照组.采用免疫组织化学法(SABC)检测各样本的NF-κB和VEGF,并对相关的临床病理资料进行统计分析.结果:正常胃组织中未见NF-κB阳性表达及VEGF表达,胃癌细胞中阳性表达率均明显高于癌旁组织中(63.2% vs 2.9%,76.5% vs 14.7%,均P=0.000).NF-κB及VEGF在胃癌组织中的表达均与性别、年龄、组织学类型无关;NF-κB及VEGF在TNM分期(Ⅲ+Ⅳ期)、有淋巴结转移、累及浆膜、有远处转移组阳性表达均明显高于TNM(Ⅰ+Ⅱ期)、无淋巴结转移、未累及浆膜、无远处转移组(P<0.05).胃癌中NF-κB与VEGF表达显著正相关(r=0.512,P=0.000).结论:NF-κB和VEGF在胃癌中呈现高表达,且两者存在明显相关,NF-κB可能通过上调VEGF的表达促进胃癌的发生发展.

胃癌MSCT征象与VEGF-C、VEGFR-3表达关系的研究

目的分析MSCT征象与胃癌组织中VEGF-C、VEGFR-3基因表达的关系。方法收集行全胃或部分胃切除术的胃癌患者MSCT平扫及动态增强扫描图像。在术后立即取肿瘤组织及对应正常组织放置液氮及低温冰箱中冷冻,然后再行RT-PCR检测组织中VEGF-C、VEGFR-3 mRNA的表达。结果肿瘤组织中VEGF-C、VEGFR-3阳性率分别为74.14%(43/58)、58.62%(34/58),高于正常组织50.00%(15/30)、33.33%(10/30)。肿瘤组织中VEGF-C与VEGFR-3表达呈正相关(P<0.05)。在肠型组、弥漫型组、淋巴结转移组、无淋巴结转移组间VEGF-C阳性表达率分别为59.26%(16/27)、87.10%(27/31)、87.80%(36/41)、41.18%(7/17);VEGFR-3阳性表达率分别为44.44%(12/27)、70.97%(22/31)、68.29%(28/41)、35.29%(6/17),以上各组间VEGF-C、VEGFR-3表达率相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胃癌中VEGF-C、VEGFR-3基因高表达与MSCT征象上淋巴结转移及Lauren分型相关,二者能促进胃癌淋巴结转移。

中药川贝含药血清对支气管平滑肌细胞及血管内皮细胞生长因子的影响

目的观察中药川贝含药血清对支气管平滑肌细胞(BSMC)增殖,管道形成及血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响。方法卵蛋白(OVA)复制哮喘小鼠模型,制备川贝含药血清。体外培养BSMC,随机分为空白血清组,低剂量组和高剂量组。检测BSMC增殖率,管道形成长度,VEGF及VEGF m RNA的表达。结果与空白血清组比较,低剂量组和高剂量组显著降低BSMC增殖,管道形成长度,VEGF和VEGF m RNA的表达(P<0.05)。结论中药川贝含药血清可抑制BSMC增殖,管道形成长度,其机制可能与其抑制VEGF的表达有关。

表阿霉素免疫纳米微粒靶向抗肝癌作用的研究

目的制备表阿霉素(E-ADM)免疫纳米微粒(NPs),观察其对荷人肝癌裸鼠模型的靶向治疗效应。方法利用聚电解质复合法合成载表阿霉素纳米微粒(E-ADM-NPs),化学交联法合成载表阿霉素的抗血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)单克隆抗体纳米微粒(E-ADM-Ab-NPs),观察E-ADM-Ab-NPs在荷人肝癌裸鼠模型体内的分布特点,观察药物的靶向抗肿瘤效应及其毒副作用。结果 E-ADM-Ab-NPs保留了抗VEGFR2单克隆抗体的活性;E-ADM-Ab-NPs组肿瘤组织中的E-ADM浓度为(31.85±4.78)mg/kg,显著高于E-ADM-NPs组(P<0.05);E-ADM-Ab-NPs组的瘤体积抑制率及瘤重抑制率为60.69%和58.54%,较E-ADM-NPs组和E-ADM原药组均明显增强(P<0.05);且E-ADM-Ab-NPs组的血白细胞计数、谷丙转氨酶及肌酐水平与空白对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05);而E-ADM原药组的血白细胞计数较空白对照组下降42.68%,血清谷丙转氨酶水平则升高88.06%(P<0.05)。结论 E-ADM-Ab-NPs具有免疫活性,其在动物模型体内呈导向性分布,可提高E-ADM的疗效并有效降低E-ADM的毒副作用,是一种安全的新型药物纳米靶向制剂。

血管内皮生长因子受体抑制剂SU5614对甲苯二异氰酸酯诱导哮喘模型小鼠治疗作用的研究

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)受体抑制剂SU5614对甲苯二异氰酸酯(TDI)诱导哮喘模型小鼠的治疗作用。方法:BALB/C小鼠随机分为3组:对照组,模型组和SU5614组。采用TDI制备哮喘小鼠模型,观察SU5614对模型小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)VEGF的表达情况、肺组织病理学变化,气道反应性和气道血浆渗出的变化。结果:免疫细胞学分析结果表明,模型组小鼠BALF中VEGF表达明显增加,而SU5614组VEGF表达则明显降低;病理组织学发现模型组肺组织病理学炎症反应明显,而SU5614组炎症反应则明显减轻;模型组气道反应性明显增高,而SU5614组则明显降低(P<0.05);模型组气道血浆渗出明显增加,而SU5614组则明显减少(P<0.05)。结论:SU5614不仅抑制BALF中VEGF活性,也能抑制炎性细胞的迁移,降低气道高反应性和减少气道血浆渗出。

兔肝肿瘤介入栓塞后血清VEGF早期改变的实验研究

目的:探讨对兔VX2肝肿瘤模型进行胃十二指肠动脉介入栓塞术,早期血清VEGF的改变及意义。方法:将40只接种VX2肿瘤组织2周的荷瘤兔随机分为两组:碘油组(n=20)和对照组(n=20),通过超选择插管胃十二指肠动脉分别给予超液化碘油(0.3 mL/只)、生理盐水(1 mL/只)。1周后,应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定兔血清VEGF的变化,免疫组织化学法(ABC)检测残余肿瘤组织的蛋白表达,定量PCR检测VEGF mRNA的表达改变。结果 :介入栓塞后,碘油组血清VEGF1.42±0.29 ng/mL,对照组1.12±0.21 ng/mL,二者相比差异有统计学意义(P<0.01)。碘油组残余肿瘤细胞VEGF的表达明显高于对照组(P<0.01),VEGF mRNA表达也高于对照组(P<0.05)。结论:应用碘油介入栓塞兔VX2肝肿瘤术后,残余肿瘤组织表达VEGF明显升高,可作为预测残余肿瘤细胞转移复发的有效指标之一。

灵杞黄斑颗粒治疗视网膜静脉阻塞继发黄斑水肿的疗效观察

目的探讨灵杞黄斑颗粒与联合抗血管内皮生长因子(VEGF)药物玻璃体腔内注射治疗视网膜静脉阻塞(RVO)继发黄斑水肿(ME)的临床疗效。方法 RVO继发ME患者90例(90只眼),随机分为3组。中药治疗组30例(30只眼),予口服灵杞黄斑颗粒;西医治疗组30例(30只眼),予玻璃体腔注射雷珠单抗;中西医治疗组30例(30只眼),予口服灵杞黄斑颗粒联合雷珠单抗玻璃体腔注射。治疗观察6个月,治疗前后进行视力、眼底照相、光学相干断层扫描(OCT)、闪光视网膜电图(F-ERG)及荧光素眼底血管造影(FFA)检查,评价疗效。结果治疗6个月后,中药治疗组30只眼,显效5只眼,有效12只眼,无效13只眼,总有效率56.7%;西医治疗组30只眼,显效9只眼,有效9只眼,无效12只眼,总有效率60.0%;中西医治疗组30只眼,显效15只眼,有效9只眼,无效6只眼,总有效率80.0%。中西医治疗组疗效好于其他两组(与中药治疗组比较,P=0.023,与西医治疗组比较,P=0.177),中药治疗组与西医治疗组的疗效接近(P=1.000)。中西医治疗组在视力改善、眼底出血吸收及降低中央视网膜厚度(CRT)方面明显好于其他两组(P<0.05);中医治疗组的眼底出血吸收情况好于西医对照组(P<0.05),在改善视力、减少CRT方面与西医治疗组大致相当(P>0.05)。各组治疗后ERG视锥细胞反应b波振幅均较治疗前明显增加(P<0.05),但组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论灵杞黄斑颗粒治疗RVO继发的ME有一定的临床疗效,联合抗VEGF药物治疗可更好的达到标本兼治、多靶点治疗的效果。

黄连纱条对压疮患者局部组织中碱性成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子的影响

目的观察黄连纱条对压疮患者局部组织中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和血管内皮生长因子(VEGF)的影响,并探讨其作用机制。方法将109例压疮患者随机分为治疗组57例和对照组52例。2组在均予西医常规治疗及护理的基础上,治疗组采用黄连纱条引流、外敷治疗,对照组采用雷佛奴尔纱条引流、外敷治疗。2组均1个月为1个疗程,2个疗程后进行疗效比较,观察溃疡面愈合情况,并通过免疫组织化学方法检测治疗前及治疗1、2个疗程后患者压疮局部溃疡组织中bFGF、VEGF的表达情况。结果治疗组总有效率为93.0%,对照组总有效率为73.9%,2组比较差异有统计学意义(P<0.05),治疗组疗效优于对照组;2组治疗1、2个疗程后bFGF、VEGF表达情况与本组治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗组治疗1、2个疗程后bFGF、VEGF表达情况与对照组同期比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论黄连纱条外敷治疗可以明显促进压疮溃疡创面局部组织中bFGF和VEGF的表达,促进溃疡创面坏死组织的脱落和新生组织及血管的生长,从而促进压疮溃疡创面的愈合。

缺氧对人微血管内皮细胞HIF-VEGF-Notch信号通路的影响

目的观察缺氧对人微血管内皮细胞(HMVEC)中HIF-VEGF-Notch信号通路相关分子表达的影响。方法常规方法培养HMVEC细胞,低氧培养箱制备HMVEC缺氧模型,正常细胞作为对照组。采用Western Blot法检测HMVEC中HIF-1α及Notch-1的蛋白表达,ELISA法检测细胞培养上清液中VEGF蛋白表达水平。结果缺氧组和对照组细胞中Notch1蛋白表达分别为2.07±0.16和0.91±0.04,两者差异有显著意义(P<0.05);HIF-1α蛋白表达缺氧组为2.53±0.19,对照组为0.67±0.08,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组上清液中VEGF表达量为50.04±5.92 ng/L,缺氧组上清液中VEGF表达量为238.04±19.29 ng/L,两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论缺氧可上调HMVEC细胞中HIF-VEGF-Notch信号通路相关分子的表达,此可能与重要脏器缺血缺氧性损伤后诱导的血管新生有关。

血管特异性生长因子与缺血性脑血管病的治疗

单一应用血管内皮生长因子(VEGF)治疗缺血性脑血管病有一定疗效,但也存在一些问题。VEGFF和血管生成素可在局灶性脑缺血中共同发挥作用。因此,在缺血性脑血管病中的治疗中,综合应用这些血管特异性生长因子可能更有前景。

HIF-1α和VEGF蛋白及其mRNA在猪胆肠吻合口组织中的表达及意义

为了观察猪胆肠吻合术模型的吻合口愈合过程中HIF-1α和VEGF的表达及其意义,建立猪的胆肠吻合手术模型,大体及组织HE观察吻合口的愈合情况,用免疫组化和Real-time PCR法检测胆肠吻合口组织中HIF-1α和VEGF蛋白及其mRNA分别在术后7、30、90和180d的表达。结果显示:1例术后胆瘘死亡外,其余29例均存活。术后7、30、90和180d组胆肠吻合口均有不同程度的狭窄,180d狭窄最严重;HE染色观察180d组狭窄的吻合口均有瘢痕组织增生。术后7d吻合口组织中HIF-1α和VEGF的蛋白及其mRNA的表达量最高(P<0.05),30d及90d表达量降至很低水平,180dHIF-1α和VEGF的表达略有增高。结论:HIF-1α和VEGF参与了胆肠吻合口早期愈合过程及后期的瘢痕形成。

介入配合骨复活汤对激素性股骨头缺血性坏死股骨头局部血管内皮生长因子表达的影响

目的:观察股动脉药物灌注配合骨复活汤治疗实验性激素性股骨头缺血性坏死(SANFH)股骨头局部血管内皮生长因子(VEGF)的表达。探讨介入配合骨复活汤对骨坏死再血管化和再骨化的机理。方法:新西兰兔24只,利用大肠杆菌内毒素和大剂量甲基强的松龙造成兔股骨头坏死模型,造模后第2周随机分为3组:介入组:经左侧股动脉注射尿激酶3万U和丹参注射液2mL;介入配合骨复活汤组:给药同介入组,同时每天给予骨复活汤灌胃给药;对照组:经股动脉注射生理盐水4mL。在治疗后4周,对股骨头标本进行VEGF免疫组化染色。计数VEGF阳性成骨细胞率、阳性软骨细胞率和阳性血管率,并进行统计学分析。结果:介入配合骨复活汤组比介入组能提高VEGF阳性成骨细胞率、阳性软骨细胞率和阳性血管率(P<0.05),改善骨坏死。结论:介入配合骨复活汤能改善骨坏死,其机理在于促进VEGF等细胞因子的分泌从而加速股骨头的再血管化和再骨化进程。

食管癌患者手术治疗前后血清TGF-α、TGF-β_1和VEGF测定的临床评价

目的:探讨了食管癌患者手术治疗前后血清TGF-α、TGF-β_1和VEGF水平的变化及临床意义。方法:应用放射免疫分析和酶联法对31例食管癌患者进行了血清TGF-α、TGF-β_1和VEGF测定,并与35名正常人作比较。结果:食管癌患者在术前TGF-α、TGF-β_1和VEGF水平非常显著地高于正常人组(P<0.01),术后3个月则与正常人组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:检测食管癌患者血清TGF-α、TGF-β_1和VEGF水平的变化与肿瘤的发生、发展密切相关。

携hVEGF_(165)基因的重组腺病毒载体的构建及鉴定

目的 构建携带人血管内皮生长因子 16 5 (hVEGF165)基因的重组腺病毒载体。方法 将hVEGF165cDNA亚克隆到腺病毒中间载体pACCMV·pLpA ,再与pJM17共转染人胚肾 2 93细胞 ,获得载hVEGF165基因的复制缺陷型重组腺病毒 ,感染体外培养的兔主动脉血管平滑肌细胞 (VSMC) ,通过RT PCR和Westernblot检测VEGF表达情况 ,并观察表达产物VEGF对人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)增殖的影响。结果 重组腺病毒感染VSMC 4 8h后有VEGFmRNA转录及蛋白质的表达 ,并呈剂量依赖性地促进HUVEC增殖。结论 构建的重组腺病毒载体在VSMC中能够有效表达目的基因 ,且能有效促进HUVEC增殖 ,为hVEGF165基因的实际应用奠定了基础。

HIF-1α在RAD001联合DDP下调胃癌SGC7901/DDP细胞株VEGF分泌中的作用

目的 研究缺氧诱导因子（HIF-1α）在mTOR特异性抑制剂RAD001联合DDP下调胃癌细胞株SGC7901/DDP VEGF表达中的作用,并探讨其相关作用机制.方法 体外培养胃癌SGC7901/DDP细胞株,分别给予RAD001、DDP及RAD001＋DDP干预48 h后,免疫细胞化学染色及Western-blot法检测HIF-1α、血管内皮生长因子（VEGF）蛋白的表达情况,RT-PCR法检测HIF-1α mRNA、VEGF mRNA的合成情况.结果 RAD001单独作用于SGC7901/DDP细胞48 h后,HIF-1α、VEGF蛋白的表达和HIF-1α 、VEGF mRNA的合成下降,且呈剂量依赖性.联合用药组比单独用药组作用增强,差异有统计学意义（P〈0.05）.VEGF和HIF-1α蛋白呈正相关（r=0.993,P〈0.01）,HIF-1α mRNA和VEGF mRNA呈正相关（r=0.994,P〈0.01）.结论 RAD001能够抑制细胞体外VEGF、HIF-1α的蛋白表达及mRNA的合成,RAD001联合DDP作用后,效果增强,其机制可能与mTOR/HIF-1α/VEGF信号通路有关.

得力生通过调节血管蛋白抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖并促凋亡

目的探讨得力生注射液对肝癌SMMC-7721细胞的作用机制。方法用不同浓度的得力生作用肝癌SMMC-7721细胞后,MTT方法检测肝癌SMMC-7721细胞不同时间(24、48、72h)的增殖情况,流式细胞技术检测细胞凋亡及细胞周期,免疫细胞化学方法检测肝癌SMMC-7721细胞中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)和内皮抑素(endostadin,ENS)的表达。结果得力生作用于肝癌SMMC-7721细胞后,随着作用时间的延长和药物浓度的增加,细胞增殖逐渐减少,细胞凋亡逐渐增加,而对正常肝细胞HL-7702的作用很轻微。得力生将肝癌SMMC-7721细胞主要阻滞在G1期,且VEGF和OPN表达下调,ENS表达上调。结论得力生抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖及诱导凋亡,呈现时间和浓度依赖效应,并可能通过调节血管蛋白而实现,这为得力生治疗肝癌提供了理论依据。