VEGF-C/VEGFR3通路对肿瘤患者外周血来源DC的影响

目的:通过体外培养肿瘤患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)来源的DC,探讨VEGF-C/VEGFR3信号通路对DC功能的影响。方法:采用GM-CSF和IL-4共同诱导的方法培养DC,分别采用VEGF-C(VEGF-C-DC),LPS(LPS-DC)或LPS+VEGF-C(LPS+VEGF-C-DC)诱导,同时设未处理组即未成熟DC细胞(imDC);流式细胞术检测DC表面CD80、CD83、VEGFR3和TLR4的表达情况,同时采用免疫荧光法检测VEGFR3在DC的表达;ELISA方法检测不同处理组的DC上清中IL-6、TNF-α、IL-12的分泌情况。结果:LPS-DC高表达VEGFR3;LPS-DC和LPS+VEGF-C-DC高表达CD80和CD83,明显高于imDC(18.56%vs 8.52%,P<0.05),显示出成熟DC的表型特征;与LPS-DC相比,LPS+VEGFC-DC表面TLR4的表达下调,LPS+VEGF-C-DC上清液中细胞因子IL-6、TNF-α和IL-12的分泌减少。结论:VEGF-C/VEGFR3通路通过降低DC表面TLR4的表达减少其细胞因子的分泌,对DC起负向免疫调控作用。

乳腺癌NF-κBHER2 VEGF-C与VEGFR3表达及其意义

目的:探讨HER2、NF-kB、VEGF-C及其受体VEGFR-3在乳腺癌组织中的表达及相互关系。方法:应用免疫组化方法检测40例人乳腺癌组织和10例癌旁组织HER2、ER、NF-kB、VEGF-C及VEGFR-3的表达情况。结果:乳腺癌组织和癌旁组织NF-kB的阳性率分别为45.0%(18/40)和30.0%(3/10),差异无显著性(P>0.05),NF-kB与HER2蛋白的表达呈正相关(r=0.442,P=0.004)。Ⅲ级乳腺癌的NF-kB表达显著增强(P=0.018)。VEGF-C和VEGFR-3的表达显著增强,阳性率分别为70.0%(28/40)和57.5%(23/40),两者呈正相关(r=0.761);NF-kB和HER2与VEGF-C呈正相关(r值分别为0.373和0.342)。淋巴结转移组VEGF-C和VEGFR-3的阳性率分别等于90.0%和82.4%,明显高于无淋巴结转移组(56.5%和39.1%)。VEGFR-3阳性脉管数平均为8.44±2.58,明显高于无淋巴结转移组(5.12±3.75)。结论:NF-kB与HER2的表达为正相关,NF-kB和HER2蛋白与VEGF-C的表达呈正相关。

Endostatin VEGF-C和VEGFR-3在非小细胞肺癌及其淋巴结组织中的表达与意义

目的:探讨内皮抑素(endostatin)、血管内皮生长因子-C(VEGF-C)和血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)在癌组织及其淋巴结组织中的表达与非小细胞肺癌(NSCLC)生物学行为之间的关系,了解endostatin、VEGF-C和VEGFR-3三者之间的内在联系。方法:使用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)连接法对98例肺癌根治手术后癌组织和淋巴结组织标本的endostatin、VEGF-C和VEGFR-3的表达情况进行研究。结果:endostatin、VEGF-C、VEGFR-3在癌组织中的阳性表达率分别为30.6%、79.6%、61.2%。其中endostatin的表达与VEGF-C的表达呈正相关(P=0.025),VEGF-C的表达与VEGFR-3的表达呈正相关(P=0.007)。不同N分期及不同淋巴结转移枚数分组的患者,其endostatin和VEGF-C的阳性表达率均有显著性差异(P<0.05),且两者之间的变化呈相反趋势。VEGFR-3的表达与分化程度相关(P=0.013)。VEGF-C的表达情况与脉管癌栓相关(P=0.050)。在转移性淋巴结中,VEGF-C和VEGFR-3的阳性表达率均达88.0%,未转移淋巴结中,两者的阳性表达率分别为32.7%和57.1%,差异有统计学意义(P<0.001)。转移性淋巴结中微淋巴管密度(MLVD)明显高于非转移淋巴结(P<0.001)。结论:endostatin和VEGF-C的表达与肺癌淋巴结转移密切相关,endostatin可能通过下调VEGF-C的表达来抑制淋巴结转移,VEGF-C/VEGFR-3通路通过促进微淋巴管的增生直接参与淋巴结转移,对寻找治疗肺癌的新途径有重要意义。

食管鳞状细胞癌VEGF-C、VEGFR-3的表达及其与淋巴结转移的关系

目的 :研究食管鳞状细胞癌组织中血管内皮细胞生长因子 -C(VEGF -C)及其受体VEGFR - 3的表达。方法 :免疫组织化学SABC法研究 72例食管鳞状细胞癌根治术组织中VEGF -C和VEGFR - 3的表达、与淋巴结转移的关系。结果 :(1)癌细胞VEGF -C阳性组VEGFR - 3脉管数为 5 .0 2± 2 .2 4 /高倍视野 (HPF) ,明显高于VEGF -C阴性组 (2 .82± 0 .16 /HPF ,P <0 .0 1) )。 (2 )转移组中VEGF -C表达“ ++～ +++”比率明显高于无转移组 (P <0 .0 1)。转移组VEGFR - 3脉管数 6 .2 0± 2 .77/HPF ,无转移组为 3.4 0± 1.0 9/HPF ,有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。 (3)VEGF -C阴性组 5年生存率为 6 3.6 7% ,而VEGF -C阳性组 5年生存率为 14 .92 % ,明显差异 (P <0 .0 1)。结论 :食管鳞状细胞癌高表达VEGF -C ,能诱导淋巴管生成、促进癌细胞转移。VEGF -C是食管癌预后的因素之一。

血清ANGPT2、VEGFR-3、抵抗素水平在寻常型银屑病中的临床意义

目的:探讨血清血管生成素样蛋白2(ANGPT2)、血管内皮细胞特异性受体VEGF受体(VEGF receptors,VEGFR)-3、抵抗素(Resistin)水平在寻常型银屑病中的临床意义。方法:选择2017年9月—2020年6月在本院皮肤科就诊的寻常型银屑病患者60例作为病例组,同期选择本院体检的健康人员60例作为对照组。检测所有入选者的血清ANGPT2、VEGFR-3、抵抗素水平,调查病例组的银屑病面积与严重性指数(Psoriasis area and severity index,PASI)评分并进行相关性分析。结果:病例组的ANGPT2、VEGFR-3、抵抗素含量[(4.69±0.44)ng/ml、(10.83±1.47)ng/ml、(267.02±45.10)ng/ml]均高于对照组[(1.83±0.30)ng/ml、(8.02±2.15)ng/ml、(98.27±10.47)ng/ml],病例组的PASI评分高于对照组(P<0.05)。在病例组中,Pearson分析显示PASI评分与血清ANGPT2、VEGFR-3、抵抗素含量都存在相关性(P<0.05)。Cox比例风险回归模型分析显示血清ANGPT2、VEGFR-3、抵抗素含量都为影响PASI评分的影响因素(P<0.05)。结论:血清ANGPT2、VEGFR-3、抵抗素水平在寻常型银屑病中呈现高表达状况,与患者的PASI评分存在相关性,可反映患者的病情状况。

热打击诱导血管内皮细胞NOD样受体蛋白3信号通路激活可被丙酮酸乙酯抑制

目的探讨热打击所致血管内皮细胞中NOD样受体蛋白3(NLRP3)信号通路激活能否被丙酮酸乙酯(EP)抑制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),取对数生长期细胞进行实验。分别设置不同温度梯度(39、41、43℃热打击4 h)及不同时间梯度(43℃分别持续热打击2、3、4 h)的热打击条件,并将HUVEC分别置入相应条件的细胞培养箱内实施热打击,然后选取43℃持续热打击4 h为最终实验条件,作为热打击组;在实施热打击时加入10 mmol/L的EP进行干预;同时设置常温对照组,将细胞同步置于37℃细胞培养箱中培养。采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测HUVEC中NLRP3的蛋白表达及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)的活性;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中白细胞介素(IL-18、IL-1β)的释放水平。结果经不同条件热打击后,HUVEC中NLRP3的蛋白表达水平随着热打击温度不断升高或热打击时间不断延长而逐渐升高,以43℃热打击4 h时升高最为显著,与常温对照组比较差异均有统计学意义〔NLRP3蛋白表达(NLRP3/GAPDH):1.54±0.08比0.97±0.17,P<0.05〕;而在EP干预后,HUVEC中NLRP3的表达水平及caspase-1的活化水平均较热打击组明显下降〔NLRP3蛋白表达(NLRP3/GAPDH):1.15±0.07比1.57±0.09,caspase-1活性:40.87±6.54比59.75±9.92,均P<0.05〕,且细胞上清液中IL-18及IL-1β的释放也较热打击组明显下降〔IL-18(ng/L):1.09±0.08比1.41±0.13,IL-1β(ng/L):1.38±0.10比2.02±0.10,均P<0.05〕。结论热打击所致血管内皮细胞中NLRP3信号通路激活可以明显被EP抑制;EP的干预有助于减少热打击所诱导的血管内皮细胞中炎性因子的释放。