鲨鱼软骨制剂对人不同细胞生长抑制作用及其机制的探讨

目的 研究鲨鱼软骨制剂 (SCP)对人胃癌细胞 (MGC80 3)、红白血病细胞 (K5 6 2 )、人结肠高分化腺癌细胞 (THC 890 8)、人乳腺癌细胞 (MCF 7)和人脐静脉血管内皮细胞 (VEC340 )的生长抑制作用 ,探讨其作用机制。方法 采用盐酸胍抽提 ,丙酮分级沉淀 ,烘干 ,微孔滤膜过滤等步骤从鲨鱼软骨粉中提取鲨鱼软骨制剂 (SCP) ;MTT法检测不同浓度的SCP对体外培养的MGC80 3细胞系、K5 6 2细胞系、THC 890 8细胞系、MCF 7细胞系和VEC340细胞系的生长抑制作用 ;Hoechst33342 /PI荧光双染法检测细胞凋亡。结果 SCP明显抑制MGC80 3、K5 6 2、THC 890 8、MCF 7和VEC340五种细胞系的生长 ,其IC50 值分别为 0 5mg/ml、0 7mg/ml、1mg/ml、1 5mg/ml和 2mg/ml。凋亡细胞比例在用药后 4 8h分别达 79 9%、4 4 6 %、78 9%、6 3 3%和 4 4 8%。结论 SCP能直接抑制不同肿瘤细胞生长 ,又能抑制血管内皮细胞的生长 ,其作用机制与细胞凋亡有关。

鲨鱼软骨制剂对三种细胞系的抑制效应

目的 :研究鲨鱼软骨制剂 ( SCP)对人胃癌细胞 ( MGC80 -3 )、红白血病细胞( K562 )、人脐静脉血管内皮细胞 ( VEC3 4 0 )的生长抑制作用 ,探讨其抗癌作用机制。方法 :采用盐酸胍抽提、丙酮分级沉淀、烘干、微孔滤膜过滤等步骤从鲨鱼软骨粉中提取鲨鱼软骨制剂 ;采用 MTT法检测不同浓度 SCP对体外培养的 MGC80 -3细胞系、K562细胞系和 VEC3 4 0细胞系的生长抑制作用。结果 :SCP明显抑制 MGC80 -3、 K562和 VEC3 4 0三种细胞系的生长 ,其 IC50值分别为 1 mg/ml、 0 .75～ 1 .5mg/ml和 3 mg/ml。结论 :SCP能直接抑制肿瘤细胞生长 ,又能抑制血管内皮细胞的生长 。

血管内皮细胞生长因子诱导大肠癌LOVO细胞粘附作用

目的 观察血管内皮生长因子 (VascularEndothelialGrowthFactor ,VEGF)对大肠癌LOVO细胞粘附作用。方法 采用3H-TdR掺入鼠尾胶粘附实验测定VEGF诱导大肠癌LOVO细胞同质性和异质性粘附作用。结果 1ng/mL、5ng/mLVEGF诱导LOVO细胞 6 0分钟、90分钟3H -TdR掺入实验 (dpm/min)分别为 1380 .0 3± 198.0 5 ,130 2 .2± 2 0 1.0 4和 2 6 41.6± 473 .2 4、2 797.5± 413 .2 4,10ng/mLVEGF诱导LOVO细胞 6 0分钟、90分钟、12 0分钟3H TdR掺入实验分别为 2 75 3 .0 3± 310 .31、1891.5 9± 2 2 3 .80、2 0 6 6 .79±187.97,显著低于对照组 6 0、90、12 0分钟的 1948.14± 2 16 .74、336 1± 175 .2 7、4173 .4± 373 .98,P <0 .0 5或 0 .0 1;5ng/mL、10ng/mLVEGF诱导LOVO细胞 6 0分钟鼠尾胶粘附实验OD值为 0 .2 5 0± 0 .0 18、0 .2 3± 0 .0 36 ,1ng/mL、5ng/mL、10ng/mLVEGF诱导LOVO细胞 90分钟、12 0分钟鼠尾胶粘附实验OD值分别为 0 .2 6 3± 0 .0 2 1、0 .373± 0 .0 83、0 .378± 0 .0 79和 0 .32 9± 0 .0 5 6、0 .389± 0 .0 95、0 .419± 0 .10 2 ,分别高于对照组的 0 .130± 0 .0 2 5、0 .14 3± 0 .0 36、0 .2 10± 0 .0 2 8,P <0 .0 5或 0 .0 1。

阻断血管内皮细胞生长因子表达并诱导视网膜色素上皮细胞转分化成为神经元样细胞

目的探讨阻断培养的成人视网膜色素上皮(retinalpigmentepithelium,RPE)细胞产生血管内皮细胞生长因子(vascularendotheliumgrowthfactor,VEGF)后对RPE细胞形态及生长的影响。方法利用脂质体将编码反义VEGF的表达质粒导入RPE细胞,再利用新霉素(neomycin,又称G418)筛选稳定转导反义VEGF的RPE细胞克隆,采用倒置显微镜观察、免疫荧光及免疫组化染色、酶联免疫吸附(ELISA法)技术,观察细胞形态、产生VEGF的能力及细胞标志物的变化。结果持续阻断成人RPE细胞产生VEGF后,RPE细胞的生长受到抑制,同时细胞外基质分泌增加,形态发生转变,酷似神经细胞。RPE细胞产生VEGF减少后,细胞标志物表达也发生变化,视网膜神经元样细胞特异性标志物Thy11及神经丝蛋白转变为阳性,VEGF的受体Flk1表达也明显上调。结论VEGF信号传导通路在调控RPE细胞转分化方面起重要作用。