miR-100-5p对甲状腺癌细胞增殖与凋亡调控作用的实验研究

目的通过实验探讨微小核糖核酸(microRNA,miR)-100-5p在甲状腺癌细胞中的表达情况及其对细胞增殖与凋亡的调控作用。方法使用荧光定量PCR检测miR-100-5p在甲状腺癌细胞系(TPC-1,KTC-1)与甲状腺正常细胞系(Nthy-ori3-1)中的相对表达情况。TPC-1细胞分别转染miR-100-5p模拟物(miR-100-5p mimic)、抑制物(miR-100-5p inhibitor)及相应阴性对照(miR-mimic NC,miR-inhibitor NC)后,用CCK-8检测TPC-1细胞增殖情况,流式细胞仪检测TPC-1细胞凋亡情况。通过miRTarBase和TargetScan7.2数据库对miR-100-5p的靶基因进行预测和功能富集分析,用蛋白印迹实验与双荧光素酶报告基因实验验证miR-100-5p对成纤维细胞生长因子受体3(fibroblast growth factor receptor 3,FGFR3)的靶向调控作用。结果与Nthy-ori3-1细胞相比,miR-100-5p在TPC-1细胞中表达水平(1.87±0.03 vs 1.00±0.03)与KTC-1细胞中表达水平(6.33±0.47 vs 1.00±0.03)均上调,差异具有统计学意义(t=-34.220,-19.588,均P<0.05)。转染miR-100-5p mimic组在24,48,72h细胞450nm吸光度(A_(450nm))均高于miR-mimic NC组,差异具有统计学意义(t=-7.516,-17.828,-8.445,均P<0.05);转染miR-100-5p inhibitor组在24,48,72h A_(450nm)均低于miR-inhibitor NC组,差异具有统计学意义(t=6.720,6.782,6.073,均P<0.05)。与miR-mimic NC组相比,转染miR-100-5p mimic后凋亡率(7.43%±0.49%vs 10.55%±0.80%)下降(t=5.767,P=0.004),与miR-inhibitor NC组相比,转染miR-100-5p inhibitor后凋亡率(3.19%±0.22%vs 2.64%±0.15%)上升(t=-3.606,P=0.023),差异均有统计学意义。蛋白印迹实验显示,与miR-mimic NC组相比,FGFR3在miR-100-5p mimic组蛋白表达水平(0.78±0.12 vs 1.00±0.00)下调(t=3.071,P=0.037),与miR-inhibitor NC组相比,FGFR3在miR-100-5p inhibitor组蛋白表达水平(1.17±0.07 vs 1.00±0.00)上升(t=-4.509,P=0.046),差异均有统计学意义。与miR-mimic NC相比,miR-100-5p mimic没有降低FGFR33’UTR野生型组荧光素酶活性(1.01±0.17 vs 1.00±0.00)与突变型组荧光素酶活性(0.99±0.11 vs 1.00±0.00),差异无统计学意义(t=-0.057,0.181,P=0.96,0.873)。结论miR-100-5p在甲状腺癌细胞中表达上调,可促进甲状腺癌细胞增殖、抑制细胞凋亡,其可能成为甲状腺癌诊疗中新的生物标志物与调控靶点。

妊娠糖尿病患者血清S100A4、FNDC5水平及其与妊娠结局的关系

目的 探究妊娠糖尿病(GDM)患者血清S100钙结合蛋白A4(S100A4)、Ⅲ型纤连蛋白结构域包含蛋白5(FNDC5)水平及其与妊娠结局的关系。方法 选取2020年6月至2022年6月该院126例GDM患者作为GDM组,选取同期孕检的126例健康孕妇作为对照组。根据GDM患者妊娠结局情况分为妊娠结局良好组(76例)和妊娠结局不良组(50例)。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清S100A4、FNDC5水平,采用Logistic回归分析GDM孕妇妊娠结局,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清S100A4、FNDC5预测GDM孕妇妊娠不良结局的价值,采用Spearman相关性分析血清S100A4、FNDC5与不良妊娠结局的相关性。结果 GDM组血清S100A4水平明显高于对照组(P<0.05),血清FNDC5水平明显低于对照组(P<0.05)。妊娠结局良好组血清S100A4水平明显低于妊娠结局不良组(P<0.05),血清FNDC5水平明显高于妊娠结局不良组(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,GDM患者血清S100A4水平与不良妊娠结局呈正相关(P<0.05),FNDC5水平与不良妊娠结局呈负相关(P<0.05)。Logistic回归分析表明,血清S100A4、空腹血糖、HOMA-IR是GDM患者发生不良妊娠结局的危险因素(P<0.05),FNDC5是GDM患者发生不良妊娠结局的保护因素(P<0.05)。血清S100A4、FNDC5联合预测GDM妊娠结局的曲线下面积大于S100A4(Z=2.045,P=0.041)及FNDC5单项检测(Z=2.010,P=0.044)。结论 GDM患者血清S100A4水平升高,FNDC5水平降低,二者对评估GDM孕妇妊娠结局具有一定的参考价值。

食管鳞状细胞癌病人血清miR-21-5p和miR-100-5p水平与临床特征和预后的相关分析

目的 分析食管鳞状细胞癌(ESCC)病人血清miR-21-5p和miR-100-5p的表达对ESCC鉴别诊断、临床特征和预后的影响。方法 2018年1月~2022年1月于我院放疗科接受放射治疗的158例晚期ESCC病人为实验组,150例健康体检志愿者为对照组。实时定量PCR(RT-qPCR)检测miR-21-5p和miR-100-5p表达水平。利用t检验比较miR-21-5p和miR-100-5p在实验组和健康对照组间的表达差异,采用ROC曲线分析其诊断价值。利用Kaplan-Meier法Log-Rank检验进行预后生存分析。多因素Cox回归分析ESCC病人预后的影响因素。结果 与对照组比较,ESCC病人血清miR-21-5p和miR-100-5p表达水平显著升高(P<0.001)。ROC曲线分析提示,二者联合诊断ESCC的AUC为0.918,灵敏度为93.2%,特异度为87.1%。ESCC病人血清miR-21-5p和miR-100-5p表达升高与更晚的TNM分期和更差的无进展生存期和总体生存期显著相关(P<0.05)。多因素Cox分析显示,TNM分期为Ⅲ期、血清中miR-21-5p高表达和miR-100-5p低表达是ESCC病人无进展生存期和总体生存期的独立危险因素(P均<0.05)。结论 血清miR-21-5p和miR-100-5p表达水平在ESCC病人中显著升高,且提示更差的预后。血清miR-21-5p和miR-100-5p,有望成为ESCC诊断和预后预测的生物标志物。

调神解郁针法结合康复训练治疗卒中后抑郁的疗效及对S100β、5-HT的影响

探究调神解郁针法结合康复训练治疗脑卒中后抑郁(PSD)的疗效及对S100钙结合蛋白β(S100β)、5-羟色胺(5-HT)的影响。方法 随机将海南省中医院2021年11月-2023年3月接收的PSD患者60例分为两组,各30例。将实施基础治疗的患者纳入对照组,将实施基础治疗+调神解郁针法+康复训练的患者纳入观察组。比较两组治疗效果。结果 治疗4周,观察组总有效率较对照组高(P<0.05)。两组治疗4周汉密尔顿抑郁量表24项(HAMD-24)评分、血清S100β降低,观察组较低,改良Barthel指数(ADL)评分、5-HT升高,观察组较高(P<0.05)。结论 调神解郁针法结合康复训练治疗PSD效果显著,可改善其血清S100β及5-HT水平,减轻其抑郁症状,提高日常生活能力。

金银花多酚粗提物调控miR-100-5p参与非小细胞肺癌细胞NCI-H1299侵袭迁移

目的:探讨金银花多酚粗对非小细胞肺癌NCI-H1299细胞恶性生物学行为的影响及分子机制。方法:将非小细胞肺癌NCI-H1299细胞分为NC组、紫杉醇组、金银花多酚粗提物低、中、高剂量组、miR-100-5p组、miR-NC组、anti-miR-100-5p+高剂量组、anti-miR-NC+高剂量组;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活性;Transwell检测细胞迁移和侵袭;蛋白质印迹法检测E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin和Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-100-5p表达水平。结果:不同浓度金银花多酚粗提物处理后,NCI-H1299细胞活性降低,细胞迁移和侵袭数量减少,E-Cadherin、miR-100-5p表达水平升高,N-Cadherin、Vimentin表达水平降低(P<0.05)。过表达miR-100-5p后,NCI-H1299细胞活性升高,细胞迁移[(226±20.03)个]和侵袭数量[(171±15.03)个]增加,E-Cadherin表达水平(0.34±0.03)降低,N-Cadherin(0.88±0.08)、Vimentin表达水平(0.95±0.09)升高(P<0.05)。下调miR-100-5p可逆转金银花多酚粗提物对NCI-H1299细胞增殖、迁移侵袭及Wnt/β-catenin通路的影响。结论:金银花多酚粗提物可能通过上调miR-100-5p表达,抑制Wnt/β-catenin通路活化,进而抑制非小细胞肺癌NCI-H1299细胞增殖、迁移和侵袭。

血清APRIL、SOCS5、S100A9水平与过敏性紫癜患儿西咪替丁疗效的关系

目的分析血清APRIL、SOCS5、S100A9水平与过敏性紫癜患儿西咪替丁疗效的关系。方法将2021年5月至2023年7月我院收治的过敏性紫癜患儿106例作为观察组,同期选择健康患儿100例,作为对照组。检测患儿血清APRIL、SOCS5、S100A9水平。观察组在入院后使用西咪替丁治疗,分析治疗前后血清APRIL、SOCS5、S100A9水平变化,并根据治疗效果分为有效组(n=67)和无效组(n=39)。比较两组患儿血清APRIL、SOCS5、S100A9水平,分析三者与过敏性紫癜患儿西咪替丁疗效的相关性,利用ROC曲线分析三者与过敏性紫癜患儿西咪替丁治疗效果的预测价值。结果与对照组比,观察组治疗前APRIL、SOCS5、S100A9水平较高(P<0.05);观察组患儿治疗后,APRIL、SOCS5、S100A9水平均降低(均P<0.05)。对比有效组和无效组一般资料发现,关节痛、皮疹反复发作、腹痛、HDL、PLT、FIB具有统计学意义(P<0.05)。与有效组相比,无效组血清APRIL、SOCS5、S100A9水平更高(P<0.05)。利用Pearson分析得出,血清APRIL、SOCS5、S100A9水平与过敏性紫癜患儿西咪替丁疗效呈正相关(P<0.05)。Logistic回归分析显示,关节痛、腹痛、皮疹反复发作、FIB、HDL、PLT、APRIL、SOCS5、S100A9是影响过敏性紫癜患儿西咪替丁疗效的危险因素(OR>1)。通过ROC曲线分析显示,血清APRIL、SOCS5、S100A9联合诊断的敏感度高于单项诊断(P<0.05)。结论APRIL、SOCS5、S100A9水平在过敏性紫癜患儿体内呈高表达趋势,其变化与患儿使用西咪替丁治疗的效果相关。APRIL、SOCS5、S100A9水平可以预测患儿的治疗效果,改善患儿预后。

5-Br-PADAP-TritonX-100-β-环糊精体系分光光度法测定电镀废水中镉

在β-环糊精（β-CD）和TritonX-100存在下，基于镉与2-（5-溴吡啶-2-偶氮）-5-二乙氨基苯酚（5-Br-PADAP）的显色反应，建立了分光光度法测定电镀废水中镉的新方法。络合物的最大吸收波长为570nm，表观摩尔吸光系数为2．40×10^5L·mol^-1·cm^-1，镉量在10～800μg／L范围内服从比尔定律，线性回归方程为A=0．0856 ρ＋0．0012，r=0．9991。方法用于电镀废水中微量镉的测定，相对标准偏差为2．5％～3．2％，加标回收率为98．0％～102．0％，测定结果同原子吸收光谱法的测定结果相吻合。

5-Br-PADAP-TritonX-100双峰双波长分光光度法测定微量钒

以H2SO4为介质，在TritonX-100存在下，5-Br-PADAP与钒（V）生成紫色络合物。采用双峰双波长分光光度法进行测定，结果表明，试剂和络合物的最大吸收波长分别为470nm和600nm，钒（V）的含量在0～30μg／25mL范围内符合朗伯-比耳定律，表观摩尔吸光系数ε=3．76×10^4L·mol^-1·cm^-1，比单波长法（t=1．77×10^4L·mol^-1·cm^-1）提高2．1倍，用于钢样中微量钒的测定，结果令人满意．

俄罗斯提升大学国际化水平“5-100计划”的措施与成效分析

新时期,俄罗斯根据国内外形势在高等教育领域推行"5-100计划"。该计划以提升大学国际化水平为目标,以大学及学科世界排名、留学生数量、科研成果的国际影响力为衡量指标,以专项资金、建设国际化课程、引进国际师资为举措。计划取得一定成效,但项目大学世界排名和国际教师数量方面尚未达到预期。分析计划成效及问题原因,对我国"双一流"建设有一定的启示及借鉴意义。

葛根素治疗急性脑梗死老年患者的疗效及对血清中Fibulin-5、IL-18和S100B的影响

目的观察葛根素对急性脑梗死老年患者的疗效及对血清中Fibulin-5、IL-18、和S100B的影响。方法选择128例确诊为急性脑梗死的老年患者,分为两组,每组64例。对照组应用常规治疗,观察组在常规治疗基础上加用葛根素进行治疗。患者在治疗前、治疗1周后抽取静脉血,应用ELISA法检测血清中Fibulin-5、IL-18和S100B的表达。结果治疗后,观察组的总有效率、NIHSS评分的变化值明显高于对照组(P<0.05)。两组治疗1周后血清中Fibulin-5、IL-18和S100B的表达均有变化,观察组患者Fibulin-5的升高值、IL-18和S100B的下降值均明显高于对照组(P<0.05)。结论葛根素对急性脑梗死的老年患者的疗效明显,且能更有效地上调血清中Fibulin-5的表达,下调血清中IL-18和S100B的表达,有效调节机体的内环境,临床中可以积极应用。

山羊卵巢富集chi-miR-100f-5p的鉴定与表达分析

【目的】探讨山羊卵巢中富集的miR-100及预测的靶基因与山羊卵巢功能及卵泡发育的潜在关系,为山羊繁殖机理研究提供数据。【方法】以山羊卵巢组织为材料,通过miRNA的分离、克隆及测序得到山羊卵巢中表达的miR-100,采用RT-qPCR进行表达检测,用生物信息学方法预测miR-100的靶基因及其功能。【结果】①山羊卵巢的测序结果中,一段成熟体为21nt的序列与果蝇dan-miR-100高度同源,将其命名为chi-miR-100f-5p,其前体位于基因组负(-)链上,长度为59 bp,定位于山羊CM000899.1:33 997 894—33 997 914序列;②chi-miR-100f-5p在山羊卵巢、垂体及心脏等组织中均有表达,说明此miRNA不是卵巢组织所特有;心脏和垂体组织中均有较高表达,其次是卵巢,而在肝脏、脾脏、肺及肾脏中表达显著低于卵巢(P<0.01);在单产羔内蒙古绒山羊卵巢中chi-miR-100f-5p的表达极显著高于高繁殖力大足黑山羊卵巢(P<0.01);③chi-miR-100f-5p主要靶作用于整合蛋白β1亚基基因及垂体特异性转录因子1基因,可能参与整合蛋白信号通路,促进垂体内分泌细胞的生长与分化,调节下丘脑-垂体-性腺轴激素分泌。【结论】山羊卵巢中新发现的chi-miR-100f-5p可能是与繁殖调控有关的重要候选miRNAs之一。

血清5-羟色胺与S100-β蛋白水平在评估创伤性脑损伤后认知功能障碍中的应用价值

目的探讨血清5-羟色胺(5-HT)和S100-β蛋白水平在评估创伤性脑损伤(TBI)后认知功能障碍中的应用价值。方法回顾性分析80例TBI患者的临床资料,以伴有认知障碍为观察组(53例),不伴有认知障碍为对照组(27例)。比较两组患者血清5-HT和S100-β水平,以及不同严重程度认知障碍患者血清5-HT与S100-β水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清5-HT、S100-β及二者联合预测TBI后认知功能障碍的效能。结果观察组患者血清5-HT和S100-β蛋白水平均高于对照组;认知障碍程度越重,患者血清5-HT和S100-β蛋白水平越高(均P<0.05)。相关性分析结果显示,血清5-HT和S100-β蛋白水平与蒙特利尔认知评估量表评分均呈负相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清5-HT与S100-β蛋白水平预测TBI患者发生认知功能障碍的曲线下面积(AUC)分别为0.741、0.715,二者联合预测的AUC为0.832。结论TBI后认知功能障碍患者的血清5-HT与S100-β蛋白水平较高,且与认知功能障碍的发生、严重程度密切相关;血清5-HT与S100-β蛋白在预测TBI患者发生认知功能障碍方面具有一定价值。

5-Br-PADAP-TritonX-100分光光度法连续测定血清中铜和铁

建立了一种快速、灵敏、连续测定血清中铜和铁含量的分光光度法。铜、铁与 5-Br -PADAP及TritonX - 10 0在pH 4 0缓冲溶液中生成红色配合物 ,测定吸光度 (A1) ,加入掩蔽剂后再测定吸光度 (A2 ) ,A2 值与铁离子浓度成正比 ,吸光度下降值 (△A =A2 -A1)与铜离子浓度正比。铜、铁配合物表观摩尔吸收系数分别为 6 4 4× 10 4 、 6 53× 10 4 L·mol- 1·cm - 1,铜、铁含量分别在 0～ 80、 0～ 70 μmo1·L- 1范围内性线良好 ,变异系数分别为 2 7%、 2 2 % ,平均回收率为10 0 8%、 10 0 7% ;铜、铁含量测定分别与双环己酮草酰二腙法、亚铁嗪法相比较 ,无显著性差异 (P >0 0 5)。

立式连铸高速钢W6Mo5Cr4V2 φ100mm坯的工艺试验

采用150 kg中频感应炉-150 kg过渡钢包在设计的中100 mm立式连铸机以结晶器振动频率1.2 Hz和振幅±3 mm,拉速0.4 m/min,二冷水压力0.2 MPa进行高速钢W6Mo5Cr4V2连铸试验,并测定了在不同工艺条件下高速钢莱氏体网的厚度和冷却速率。结果表明,与15 kg锭普通模铸高速钢W6Mo5Cr4V2相比,Φ100 mm立式连续铸造得到的高速钢铸坯低倍组织致密无缺陷,莱氏体网明显变薄,铸坯心部莱氏体网平均厚度≤16μm,晶粒明显细化;M2C和MC型碳化物的析出量增多,M_6C型碳化物的析出量减少,碳化物更加细小、均匀和弥散;铸坯边部的冷却速率为3.33×10^4K/s,r/2处为9.4×10^3K/s,心部为8.1×10^2K/s,冶金质量明显优于普通模铸。

miR-100-5p下调mTOR抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移与侵袭

目的观察miR-100-5p对前列腺癌(prostate cancer,PCa)细胞增殖、迁移与侵袭的影响,并探讨其相关调控机制。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测前列腺癌细胞系LNCaP和人前列腺上皮细胞系RWPE-1中miR-100-5p的表达。分别用脂质体转染法将NC-mimics和miR-100-5p mimics转染LNCaP细胞,用CCK-8增殖实验、细胞划痕实验和Transwell小室法检测miR-100-5p对细胞增殖、迁移和侵袭的影响。用生物信息学方法预测miR-100-5p的可能作用靶基因;用qRT-PCR和Western blot检测miR-100-5p对mTOR mRNA和蛋白水平的影响。结果miR-100-5p在LNCaP细胞中的表达较RWPE-1细胞明显降低(P<0.01)。转染miR-100-5p mimics后,LNCaP细胞中miR-100-5p表达水平显著增高(P<0.01),细胞增殖能力、迁移能力及侵袭能力明显降低(P<0.01)。生物信息学结果显示,mTOR可能是miR-100-5p的作用靶基因。miR-100-5p mimics组LNCaP细胞中mTOR mRNA的表达明显低于NC-mimics组(P<0.01)。结论miR-100-5p在PCa细胞系LNCaP中呈现低表达,体外实验发现miR-100-5p能够抑制LNCaP细胞的增殖、迁移及侵袭能力,其机制与下调mTOR基因的表达有关。

100t EAF-LF-VD-CC流程生产SK5弹簧钢的工艺实践

SK5弹簧钢(/%:0.75~0.84C,≤0.35Si,≤0.40Mn,≤0.035P,≤0.0305)经100 t EAF-LF-VD-CC流程生产。通过EAF出钢加硅锰合金和铝铁进行预脱氧,LF精炼过程添加80~150 kg铝镁钙和少量硅锰合金进行复合铝脱氧,精炼渣碱度11.13,(CaO)/(Al_2O_3)=4.98等工艺措施,脱氧效果较明显,铸坯中平均全氧含量达到11×10^(-6),铸坯中氮含量达到35×10^(-6)。冶炼过程夹杂物种类按纯Al_2O_3、硫化物→MgO·Al_2O_3·CaO→MgO·Al_2O_3.CaO.SiO_2变化,铸坯中夹杂物主要为CaO·Al_2O_3·SiO_2·MgO系,其塑性化程度可通过调整精炼渣成分、降低精炼渣熔点实现进一步优化。

百忧解联合针刺治疗对脑卒中后抑郁症5-HT、S100β水平以及HAMD、NIHSS评分的影响

目的探索百忧解联合针刺治疗对脑卒中后抑郁症5-HT、S100β水平以及HAMD、NIHSS评分的影响研究。方法选取2013年1月-2015年12月杭州市江干区人民医院康复科以脑卒中后抑郁症为诊断的患者72例,根据随机数字表法随机分为2组：对照组36例,予针刺治疗;实验组36例,在对照组基础上,予以口服百忧解治疗,1粒/次,1次/日,共治疗8周。分别在治疗前及第2、4、8周末观察2组患者5-HT、S100β水平以及抑郁程度和神经功能的变化。结果治疗后,2组患者较治疗前5-HT水平升高（P〈0.05）,S100β水平降低（P〈0.05）,抑郁程度和神经功能缺损状况减轻（P〈0.05）;且实验组效果优于对照组（P〈0.05）;实验组的显效率及总有效率均高于对照组（P〈0.05）。结论百忧解联合针刺治疗能改善脑卒中后抑郁症患者抑郁情绪、改善神经功能、促进患者康复。

TritonX-100-5-Br-PADAP光度法测定发样中铁

在表面活性剂TritonX - 10 0存在下 ,以 5-Br -PADAP作显色剂 ,光度法测定发样中铁 ,结果在所选浓度范围内线性关系良好 ,稳定时间长 ,回收率平均为 98 14%。

钪—5—Br—PADAP—TritonX—100显色体系的研究

本文研究了钪-5-Br-PADAP-Triton X-100显色体系的光度特性,并确定了钪测定的最佳条件.用单双波长法测定时,钪浓度均在0—11μg/10ml范围内遵循比尔定律,其表现摩尔吸光系数分别为5.9×10~4和7.5×10~4.Triton X-100的加入未能增敏,但能增溶,并显著提高了体系的选择性.从而建立了在水相中测定钪的新方法.用于镁基合成试样中钪的测定,结果满意.