大鼠移植静脉再狭窄模型构建的标准化步骤及评价

目的·探讨缝合法建立移植静脉再狭窄动物模型的标准化步骤,并通过动物实验对其有效性进行验证。方法·32只雌性SD大鼠,采用颈外静脉移植颈动脉的方法构建移植静脉再狭窄模型,对建模步骤进行优化。应用电子显微镜观察、H-E染色光学显微镜观察及彩色多普勒超声检查评估建模成功率及建模效果。结果·32只SD大鼠均顺利完成桥静脉移植手术,术中无死亡。随访45 d,除1例发生术后桥静脉内血栓形成外,其余均通畅,无血栓形成及坏死,建模成功率达96.8%。电子显微镜观察显示:术后14 d,再生的血管内皮几乎完全覆盖吻合口及缝线,血管内膜可见不规则隆起,为内膜增生所致。彩色多普勒超声评估显示:术后第21、45 d移植静脉狭窄形成后,与对侧正常颈动脉相比,吻合口的收缩期流速峰值明显升高,术后45 d更为显著。H-E染色光学显微镜观察发现典型的移植静脉再狭窄病理改变,增生内膜厚度和面积明显增加。结论·建立的移植静脉再狭窄建模标准化步骤经实验评估验证,其建模成功率高且重复性好。

并行带瓣双静脉自体移植动物模型的建立

目的 :探讨并行带瓣双静脉自体移植模型的建立方法 ,为原发性下肢深静脉瓣膜关闭不全寻求新的手术方法和途径。方法 :用显微外科技术为 12只新西兰兔行并行带瓣双静脉自体移植 ,并行动态彩色多谱勒和静脉造影检查以观察其血流状态和血流动力学情况。结果 :12只兔带瓣静脉自体移植一次性成功 ,术后观察 4周 ,血栓形成 1只。其余血管无明显狭窄 ,形态满意 ,血流状态稳定 ,均为层流。结论 :通过显微技术建立兔并行带瓣双静脉自体移植模型是切实可行的。

大鼠自体移植静脉内膜增生模型的改进

目的改进大鼠自体移植静脉内膜增生模型。方法将36只SD大鼠随机分成实验组和对照组。实验组采用套管法将大鼠自体颈外静脉移植入同侧颈动脉系统。对照组采用吻合法行自体颈外静脉移植,术后均皮下注射肝素800 U/kg,2次/d,共5 d。观察术后不同时间点两组大鼠移植静脉通畅性、吻合口狭窄及内膜增生情况。结果实验组移植静脉自体移植静通畅性优于对照组,吻合口狭窄程度轻于对照组。结论实验组模型设计科学,操作简便,成功率高。

实验性自体移植静脉内膜增生模型的建立

目的 建立自体静脉移植模型 ,并观察其平滑肌细胞 ( SMC)增殖和内膜增厚的时空变化 .方法 用“Cuff”技术将兔自体颈外静脉移植入同侧颈动脉系统 ,观察 PCNA和 α-actin表达 ,并对自体移植静脉管腔、内膜、中膜面积定量分析 .结果 自体静脉移植后扩张 ,2 wk内最明显 ,同时 SMC增殖和迁移 ,1～ 2 wk达高峰 ,PCNA和 α- actin表达也明显增高 .结论 该模型设计科学 ,成功率高 .SMC增殖从术后 3 d即已开始 ,1～ 2 wk达高峰 ,是抑制细胞增殖的最佳时期 ,增生内膜主要是由中膜

大鼠自体移植静脉内膜增生模型的改进

目的改进大鼠自体移植静脉内膜增生模型,比较采用不同方法建立模型的效果。方法将36只SD大鼠随机分成2组:实验组和对照组。实验组采用“套管法”将大鼠自体颈外静脉移植入同侧颈动脉系统。对照组采用“吻合法”行自体颈外静脉移植,术后均给予肝素皮下注射5天。观察术后不同时间点两组大鼠移植静脉通畅性、吻合口狭窄及内膜增生情况。结果实验组移limit自体移植静脉通畅性优于对照组,吻合口狭窄程度轻于对照组。结论实验组模型设计科学,手术操作简便,成功率高。

两种自体静脉移植再狭窄大鼠模型的对比研究

目的对比研究两种大鼠自体静脉移植再狭窄的动物模型。方法 SD大鼠30只,体质量300~350g,分成A组和B组。2组大鼠均以右侧颈外静脉作为自体移植静脉,以Cuff套管法为吻合方法,A组将右侧颈外静脉移植至右侧颈总动脉,B组将右侧颈外静脉移植至腹主动脉。术后第1、2、4周分3次取材,对切片行HE染色,测量内膜和中膜的厚度。结果 B组手术时间、吻合时间较A组长,差异有统计学意义（P〈0.05）。两组大鼠在相对应时间点的内膜和中膜的厚度比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论两种模型均是研究自体移植静脉增生和狭窄的发病机制、病理变化及防治措施的理想的动物模型。

静脉桥狭窄实验动物模型的建立

目的建立一种与人冠状动脉旁路移植手术（coronary artery bypass graft，CABO）后大隐静脉桥狭窄病理过程相似的动物模型。方法20～25k普通长白猪8只．后腿外侧纵切口，“no-touch”技术剥取大隐静脉3cm，与颈总动脉进行端端吻合。术后口服肠溶阿司匹林150mg·d^-1抗凝。术后28d取下静脉桥，采用计算机图像处理系统分析新内膜厚度、新内膜面积，（新内膜＋中膜）面积（I／M）。结果肉眼观察，8只猪大隐静脉桥管壁均增厚，管腔狭窄；光镜下见静脉桥新内膜形成，新内膜厚度为（0．5009±0．1355）mm，I／M为（0．4651±0．0512）。结论猪大隐静脉-颈总动脉静脉桥模型可成功模拟人CABG术后大隐静脉桥的病理变化。

冠状动脉旁路术后静脉桥狭窄模型的建立

为建立一种与冠状动脉旁路术后移植静脉桥狭窄病理过程相似的动物模型 ,取一段游离兔颈外静脉 ,与一侧颈总动脉近心端及远心端行端侧吻合 ,两吻合口之间的颈总动脉予以结扎。术后一月取材 ,可见静脉桥管腔狭窄 ,病理切片示新内膜形成。本模型能真实反映冠状动脉旁路术后静脉桥狭窄的情况 ,是进一步研究防治静脉桥狭窄的理想模型。

自体心包外支架预防静脉移植物再狭窄的动物模型的建立

目的:建立自体心包外支架包裹静脉移植物减轻内膜增生的动物模型,探讨自体心包外支架预防静脉移植物再狭窄的可行性。方法:以“no-touch”方法取犬一侧颈外静脉,对半剪成两段后分别吻合在双侧股动脉上,其中一侧静脉移植物外包裹自体心包(实验组),另一侧为单纯的静脉移植(对照组)。术后2周、4周分别切取移植静脉,行HE和WEIGERT染色,图像分析系统测量和计算内膜厚度、内膜面积。免疫组化法检测静脉移植物平滑肌细胞增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平。结果:除1条犬死亡外,余12条成活,所有动静脉吻合口无狭窄。实验组静脉移植物术后2周、4周内膜厚度、内膜截面积和PCNA指数均明显低于对照组(P<0.01)。结论:该动物模型设计合理,自体心包可作为静脉外支架的材料,能明显减轻内膜的增生,减少平滑肌细胞的增生。

“套管法”建立大鼠自体静脉移植模型及其病理学观察

目的:探讨"套管法"建立大鼠颈静脉-颈动脉移植模型的可行性,并观察移植静脉早期的病理学变化。方法:采用套管法建立SD大鼠颈静脉-同侧颈动脉移植模型。分别在静脉移植后1、7和21 d取材,HE染色观察移植静脉血管壁组织血管结构变化特点,Digimizer图像处理分析软件测量内膜中膜增生厚度。结果:在18只模型中2只动物死亡,1只发现移植静脉内血栓形成,总成功率为83.3%。术后1 d移植静脉内膜中膜厚度为(48.47±11.28)μm,7 d内膜中膜开始增厚至(66.05±19.10)μm,术后21 d增生更加明显至(300.44±181.54)μm,三者相比具有统计学差异(χ2=125.2,P<0.01)。1、7及21 d两两之间相比均具有统计学差异。结论:采用套管法建立的大鼠颈静脉-颈动脉移植模型方法简单,成功率高。其能较确切的复制人体静脉移植的病理生理过程,可应用于人类移植静脉狭窄闭塞的实验研究。

改良“cuff”法建立大鼠自体静脉移植动脉化模型

目的建立冠状动脉旁路术后移植静脉桥狭窄的动物模型。方法采用改良"cuff"技术,建立大鼠颈外静脉移植到同侧颈总动脉模型50例。结果手术无死亡,14 d静脉桥通畅率96%,大体观静脉桥管腔不同程度的狭窄,病理示内膜不同程度增生。结论本模型能真实反映冠状动脉旁路术后静脉桥狭窄的情况,是进一步研究防治静脉桥狭窄的理想模型。

DAPT对大鼠自体移植静脉桥狭窄的抑制作用

目的观察DAPT对大鼠自体移植静脉桥狭窄的抑制作用。方法成年Wistar大鼠随机分为实验组、对照组和安慰剂组,每组12只。所有大鼠分离并切取0.5cm长颈外静脉,移植到自体同侧颈总动脉中。分别于术后第1天、第4天和第7天取各组动物各4只,完整取下移植静脉桥,常规石蜡包埋,切片行HE及PCNA和TUNEL免疫组化染色,计算静脉桥中膜增生的厚度和平滑肌细胞PCNA和TUNEL阳性指数,并用Western blot检测SM22和SM MHC变化。结果移植后第7天实验组静脉桥中膜厚度和PCNA阳性指数比对照组和安慰剂组明显较小(P<0.05),但实验组凋亡程度明显高于安慰剂组。Western blot显示静脉桥移植后SM22和SM MHC表达明显降低,syndecan-1表达降低,但DAPT能够促使其表达回复。结论 DAPT能够缓解静脉桥狭窄,并对移植静脉内平滑肌细胞增生有抑制作用。

小鼠下腔静脉移植模型的建立和改良

目的建立异体下腔静脉移植于颈动脉的动物模型,以模拟冠状动脉旁路移植术后静脉桥再狭窄的病理过程。方法游离供体小鼠下腔静脉,切断受体小鼠右颈总动脉,实验组采用"袖套式"结扎吻合法、对照组采用缝合法将下腔静脉两端分别与颈总动脉断端行端端吻合。术后对比两组血管通畅情况,于术后1周、2周、4周、6周对实验组小鼠取材,行HE染色及免疫组织化学染色观察桥血管病理变化情况。结果实验组1例麻醉过量死亡,手术完成即刻各吻合口均通畅,无出血、狭窄及血管扭曲等情况。术后2例急性血栓形成,手术平均耗时46.0±10.6 m in;对照组手术完成即刻2例近端吻合口出血死亡,术后2例急性血栓形成,手术平均耗时68.0±12.4m in;后期静脉桥管壁逐渐增厚,管腔逐渐狭窄,HE染色及免疫组织化学染色显示中膜、内膜不同程度增生及炎症细胞浸润。结论小鼠异体下腔静脉移植模型能真实反映冠状动脉旁路移植术后静脉桥狭窄的情况,是进一步研究移植静脉内膜增生的理想模型。"袖套式"结扎吻合法建立小鼠下腔静脉移植模型,较以往常用的吻合法时间短、出血少、通畅率高。

内皮源性吲哚胺2,3-过氧化酶对自体移植静脉桥狭窄的抑制作用

目的:观察内皮源性吲哚胺2,3-过氧化酶(IDO)对自体移植静脉桥狭窄的抑制作用。方法:成年长耳大白兔32只,随机分为实验组和对照组,每组16只。实验组利用建立内皮细胞高表达IDO的颈静脉作为血管桥,对照组则利用质粒载体建立静脉桥。分离并切取2cm长颈外静脉,移植到自体同侧颈总动脉中。分别于术后当天、第7天、第14天和第21天取两组动物各4只,完整取下移植静脉桥,常规石蜡包埋,切片后分别行HE染色及PCNA免疫组化染色,计算静脉桥中膜厚度和平滑肌细胞PCNA阳性指数。结果:两组移植静脉桥中膜均有不同程度增厚,且有随移植时间延长而增加的趋势。移植后第21天实验组静脉桥中膜厚度测值明显小于对照组(P<0.05),且平滑肌细胞PCNA阳性指数明显低于对照组(P<0.05)。结论:内皮源性IDO对移植静脉内平滑肌细胞增生有抑制作用。

大鼠自体静脉移植模型的建立

目的:建立一种与冠状动脉旁路移植术后静脉桥再狭窄病理过程相似的动物模型。方法:选取40只Wistar大鼠,采用2点定位间断全层外翻吻合法,取游离的大鼠颈外静脉与肾下腹主动脉行端端吻合。结果:手术成功33只,成功率为82.5%(33/40)。取静脉桥时间为10~20 min,平均15 min;游离腹主动脉时间为15~40 min,平均20 min;血管吻合时间为1~2 h,平均1.5 h。结论:成功建立大鼠颈外静脉移植腹主动脉模型,为进一步研究防治冠状动脉旁路移植术后静脉桥再狭窄提供实验模型。

改良的大鼠自体静脉移植模型的建立

目的:建立稳定、简便、内皮损伤小的大鼠自体静脉移植模型。方法:以36只雄性大鼠建立改良的简易大鼠颈外静脉移植模型,采用血管超声方法,观察大鼠颈外静脉移植后的血管超声显像,手术后血管的通畅率。病理学检查移植静脉血管内膜的情况。结果:成功地建立了改良的大鼠自体颈外静脉移植模型,手术时间较短,近期发生血栓栓塞的几率低,管腔通常率高、未发生吻合口漏,手术成功率高。超声检查可以显示移植静脉血管的通畅度及血管腔径大小,显示吻合口的延续情况。结论:采用改良血管套(cuff)法,可建立改良的大鼠颈静脉移植模型。该模型稳定、简便、内皮损伤小,手术时间缩短。超声检查可辅助评价模型的建立,检查移植静脉血管桥是否流通畅。

2型糖尿病相关静脉桥内膜增生的动物模型建立与机制分析

目的探讨2型糖尿病(T2DM)相关静脉桥内膜增生的建模方法,并初步分析T2DM导致静脉桥病变的机制。方法2019年9—11月于北京安贞医院动物实验室进行实验。36只新西兰雄性大白兔随机数字表法分为T2DM组(n=24)和对照组(n=12)。T2DM组用链脲佐菌素50 mg/kg,于第1、3、6 d给药3次,诱发T2DM。2组均用血管吻合轮法建立兔颈动脉旁路移植模型。饲养4周后病理观察2组颈静脉桥病变,以及IL-6和VCAM-1的表达。结果T2DM组18只和对照组12只成功存活4周。与对照组比较,T2DM组静脉桥炎性细胞浸润明显增多,内膜显著增厚[(137.8±19.2)μm vs.(116.2±15.5)μm,t=3.249,P<0.01)];T2DM组静脉桥中IL-6和VCAM-1的蛋白质表达显著增多(IL-6:12.5±2.2 vs.7.8±1.4,t=6.549,P<0.01;VCAM-1:48.3±7.9 vs.22.1±5.6,t=9.921,P<0.01)。结论链脲佐菌素诱发T2DM联合血管吻合轮法颈动脉旁路移植是一种建立T2DM相关静脉桥内膜增生兔模型的可靠方法,T2DM可通过调控致炎性细胞因子表达影响静脉桥病变。

冠状动脉搭桥术后静脉桥再狭窄动物模型的建立

目的建立冠心病冠状动脉搭桥术后移植静脉桥再狭窄的动物模型。方法 26只新西兰兔随机分成3组:高脂移植组(n=10)、单纯移植组(n=10)、正常对照组(n=6),分别给予自体颈外静脉移植加高脂饲料、自体颈外静脉移植加普通饲料、普通饲料喂养。移植组均进行颈外静脉反向吻合于颈动脉的搭桥手术,术后用彩色超声检测血流量,证明静脉桥通畅。2个月后,用多普勒检测静脉桥血流量及内膜厚度,取组织标本作病理切片检查,以了解静脉桥有无血栓,内皮细胞及平滑肌细胞有无增生迁移及血管基质有无增生等。结果 (1)术毕所有静脉桥均通畅。(2)术后2个月彩色超声检查示高脂移植组与单纯移植组和正常对照组相比,静脉桥内膜有斑块形成,狭窄明显,内膜明显增厚。(3)术后2个月病理切片显示高脂移植组的静脉桥内皮细胞脱落、内膜增生、平滑肌细胞移行增殖和脂质沉积等典型的粥样硬化变化,而单纯移植组和正常对照组则不明显。结论兔颈外静脉反向吻合于颈动脉的静脉搭桥动物模型是可靠的,其为研究静脉桥术后再狭窄提供了既简单又较理想的模型。

建立兔颈总动脉旁路移植模型的研究

目的采用3种不同的方法建立兔颈总动脉旁路移植的动物模型,比较建立各种动物模型的手术结果。方法将36例兔分为：P1组、P2组、C组,三组分别采用不同的方法建立兔颈总动脉旁路移植模型。P1组：将2~3 cm长的颈外静脉远近端倒转后端侧吻合移植至同侧颈总动脉上,结扎两吻合口间的颈总动脉。P2组：与P1组不同的是动脉离断后与倒置的静脉行端端连续吻合。C组：将同样长度的颈内静脉倒置后应用cuff管技术移植于颈总动脉。比较三组血管吻合技术的手术时间、吻合口术后即刻及4周时的通畅率,4周后静脉桥血管内,中膜增生情况。结果三种实验动物均无死亡。P1、2组动物手术时间相当,但较C组手术时间长（P〈0.05）。三组手术中出血量相当（P〉0.05）。Cuff技术制作的动静脉吻合口,大小相对固定,不容易形成手术技术的吻合口狭窄;缝合法,技术要求较高,缝合不当、打结过紧可直接导致吻合口狭窄,以端端吻合的狭窄率最高。4周后缝合法比cuff技术的吻合口管壁增生更加明显,吻合口发生狭窄的比率升高,cuff技术与端端吻合差异明显（P〈0.05）。静脉桥血管体部的内膜及中膜增生程度相似,无统计学差异（P〉0.05）。结论 Cuff技术制作兔颈总动旁路移植模型容易掌握,吻合口不易狭窄,适用于研究静脉桥血管体的病例生理变化。而缝合法手术要求高,吻合口狭窄的发生率高,但更近于临床,对研究吻合口狭窄具有重要意义。

新西兰兔静脉移植内膜增生模型的构建

目的·构建新西兰兔自体静脉移植模型,观察移植术后不同时间段桥静脉内膜增生的变化情况。方法·取10周龄雌性新西兰兔35只,随机分成5组,即术后7 d组、术后14 d组、术后28 d组、术后60 d组、正常对照组,每组7只。建立颈外静脉颈总动脉旁路移植手术动物模型,并对模型构建的步骤进行优化。应用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,H-E)染色及免疫荧光染色观察静脉移植术后内膜增生情况及平滑肌细胞标志蛋白——α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达情况,评估模型构建效果。结果·除正常对照组外,其余28只新西兰兔均顺利完成静脉移植手术。术后桥静脉取材发现,除术后7 d组内有1例发生桥静脉坏死,其余新西兰兔的桥静脉均通畅,成功率为96.4%(27/28)。H-E染色及免疫荧光染色结果显示,与正常对照组相比,静脉移植术后各时间组桥静脉内膜厚度均明显增加(均P=0.000),α-SMA荧光表达强度均明显增强。结论·新西兰兔静脉移植内膜增生模型构建的成功率较高、重复性较好,其为静脉移植术后再狭窄机制的研究及防治提供了理想的实验模型。