竹叶青(Trimeresurus stejnegeri)蛇毒五种磷脂酶A_2的分离纯化和氨基酸序列分析

用超细SephadexG 75凝胶色谱和C4反相高效液相色谱从竹叶青(Trimeresurusstejnegeri)蛇毒中分离纯化5种磷脂酶A2,并分别命名为PLA2 Ⅰ(SWISS PROT,P82892)、Ⅱ(SWISS PROT,P82893)、Ⅲ(SWISS PROT,P82894)、Ⅳ(SWISS PROT,P82895)、Ⅴ(SWISS PROT,P82896).SDS PAGE测定它们的分子量分别为14.0、15.8、15.0、14.0和14.0kDa.等电聚焦电泳测得PLA2 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ呈碱性,等电点大于8.8;PLA2 Ⅳ和Ⅴ呈酸性,等电点分别为5.2和4.7.PLA2 Ⅳ和Ⅴ有水解卵磷脂活性.用自动Edman降解法测定了PLA2 Ⅴ的全部氨基酸序列和PLA2 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的N 端部分氨基酸序列.PLA2 Ⅴ由122个氨基酸残基组成,有14个Cys,并与其它来源的PLA2的氨基酸序列进行了比较.

医院制剂蛇药酒抑制眼镜蛇毒酶活性的实验研究

目的探讨医院制剂蛇药酒抗眼镜蛇毒中4种主要酶活性的效果。方法采用不同浓度蛇药酒与蛇毒共孵育作为蛇药酒组,同时设置无蛇药酒的蛇毒对照组。通过琼脂平板法比较蛇药酒组及蛇毒对照组产生透明圈的直径,以检测不同浓度蛇药酒对眼镜蛇毒中磷脂酶A_(2)(PLA_(2))、纤维蛋白原溶酶(以下简称纤溶酶)的抑制作用;分别以福林法和浊度法检测两组的蛋白水解酶和透明质酸酶活性,观察蛇药酒对眼镜蛇毒中蛋白水解酶、透明质酸酶的抑制作用。结果蛇药酒浓度为0.0008、0.004、0.02、0.1、0.5 mg/ml时,对眼镜蛇毒中的PLA_(2)有较强的抑制作用;蛇药酒浓度为1.3、13、130 mg/ml时,可明显抑制纤溶酶活性;蛇药酒浓度为0.5、2、8、32 mg/ml时,对蛇毒中蛋白水解酶抑制作用显著;蛇药酒浓度为0.0625、0.125、0.25、0.5、1 mg/ml时,对眼镜蛇毒中透明质酸酶抑制作用呈剂量依赖性。结论医院制剂蛇药酒在体外有直接抑制眼镜蛇毒中PLA_(2)、纤溶酶、蛋白水解酶及透明质酸酶的作用。

花生四烯酸代谢在甲状腺癌发生发展中作用机制的研究进展

甲状腺癌(TC)是发病率最高的内分泌恶性肿瘤,目前具体发病机制尚不清楚,诊断及治疗手段较为局限。随着代谢组学在TC中的不断应用,发现TC患者在脂质代谢方面差异明显,以花生四烯酸(AA)代谢通路最为显著。目前,AA的关键酶磷脂酶A_(2)和AA代谢通路已被证明参与直肠癌、肺癌、乳腺癌等恶性肿瘤的发生发展过程,且其代谢产物可作为肿瘤诊断的生物标志物,但其在TC诊疗中的意义尚缺乏具体研究证实。TC患者血清中的AA水平明显低于健康人群,环加氧酶在甲状腺乳头状癌组织中高表达,其产物可导致肿瘤进展,这可能是TC潜在的致病机制之一。此外,AA相关代谢组学的研究也为TC未来的免疫治疗探索提供了更多可能。