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Agranulocytosis following injection of inactivated Japanese encephalitis vaccine(Vero cell):A case report
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作者 Li Wang Xu Zhang Yan-Tao Liu 《World Journal of Clinical Cases》 SCIE 2021年第25期7468-7471,共4页
BACKGROUND Japanese encephalitis virus(JEV),a mosquito borne flavivirus,is the leading cause of viral encephalitis in Asia,in terms of frequency and severity.JEV infection is thought to confer lifelong immunity.With t... BACKGROUND Japanese encephalitis virus(JEV),a mosquito borne flavivirus,is the leading cause of viral encephalitis in Asia,in terms of frequency and severity.JEV infection is thought to confer lifelong immunity.With the near eradication of poliomyelitis,JEV is now the continent’s leading cause of childhood viral neurologic infection and disability.The most common clinical manifestation of JEV infection is acute encephalitis,and currently there is no specific antiviral therapy.Japanese Encephalitis Vaccine(JE-VC)is an effective prevention measure,including JE-VC,Live(JE-MB),and Inactivated JE-VC.CASE SUMMARY A 9-mo-old girl received injection of Inactivated JE-VC(Vero cell)(Liaoning Chengda,batch number 201611B17)on August 31,2017.On that night,she developed a fever with the body temperature up to 38.5°C,for which Ibuprofen Suspension Drops 1.25 mL was given as antipyretic treatment.On September 1,the patient developed apocleisis,and her parents noticed herpes in her oral cavity.The patient was sent to our hospital on September 3.Physical examination led to a diagnosis of herpetic stomatitis,for which Stomatitis Spray 1 puff,tid,Kangfuxin Liquid 2 mL,tid,and vitamin B20.5 tablet,tid,were prescribed.Routine blood tests for low fever on September 6,2017 revealed an absolute neutrophil count(ANC)of 0.62×109/L,hemoglobin(Hb)of 109 g/L,and platelet count(PLT)of 308×10^(12)/L,and the tests were monitored regularly thereafter.The patient was followed until July 26,2020,when routine blood tests revealed ANC 1.72×109/L,Hb 138 g/L,and PLT 309×1012/L,indicating that the neutropenia count had normalized.CONCLUSION This report attempts to bring to clinical attention that Inactivated JE-VC(Vero cell)might cause prolonged granulocytopenia or even agranulocytosis. 展开更多
关键词 Inactivated japanese encephalitis vaccine(vero cell) NEUTROPENIA AGRANULOCYTOSIS japanese encephalitis virus Case report
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应用微载体Vero细胞制备流行性乙型脑炎灭活疫苗最适条件的研究 被引量:4
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作者 庞成华 石慧颖 +2 位作者 常振彦 陈景才 丁志芬 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1993年第4期170-174,共5页
应用微载体培养Vero细胞研究制备流行性乙型脑炎(简称乙脑)灭活疫苗的最适条件,包括微载体的选择和细胞培养以及细胞日龄、细胞密度、毒种浓度、病毒维持液pH、种毒方式等。并按初步选择的最适条件试生产疫苗,其病毒滴度达log7.33~8.09... 应用微载体培养Vero细胞研究制备流行性乙型脑炎(简称乙脑)灭活疫苗的最适条件,包括微载体的选择和细胞培养以及细胞日龄、细胞密度、毒种浓度、病毒维持液pH、种毒方式等。并按初步选择的最适条件试生产疫苗,其病毒滴度达log7.33~8.09pfu/ml,其效力(ID_(50))为0.000017~0.000063毫升,均高于现行地鼠肾细胞培养疫苗的水平。 展开更多
关键词 微载体 vero细胞 乙脑 灭活疫苗
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精制Vero细胞狂犬病疫苗的灭活和纯化 被引量:4
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作者 吕宏亮 宋继萍 +4 位作者 段招军 邹勇 沈心亮 王玉琳 周书全 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期236-239,共4页
通过狂犬病病毒灭活和纯化试验 ,试制精制Vero细胞狂犬病疫苗。疫苗经检测残余小牛血清白蛋白含量、Vero细胞残余DNA含量、疫苗效价、安全试验均能达到WHO规程要求。
关键词 vero细胞狂犬病疫苗 灭活 纯化
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大规模区带离心纯化Vero细胞乙脑疫苗 被引量:6
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作者 石慧颖 丁志芬 +3 位作者 赵敏 庞成华 杨抗抗 李荆 《中国病毒学》 CSCD 1998年第3期208-213,共6页
本文报道一种适合疫苗生产的大规模纯化Vero细胞乙脑疫苗的方法。原疫苗经适当浓缩和去除DNA处理后,用不连续蔗糖梯度(36%和60%)。32600g,速率区带离心4h。纯化后疫苗的效力比中国参考疫苗高出6倍以上,补体... 本文报道一种适合疫苗生产的大规模纯化Vero细胞乙脑疫苗的方法。原疫苗经适当浓缩和去除DNA处理后,用不连续蔗糖梯度(36%和60%)。32600g,速率区带离心4h。纯化后疫苗的效力比中国参考疫苗高出6倍以上,补体结合抗原比中国参考疫苗高4~8倍。总蛋白含量低于30μg/mL,牛血清含量降至0.5μg/mL以下,细胞残余DNA低于100pg/0.5mL。用此法连续制备三批纯化疫苗,其纯度和效力均高于日本鼠脑纯化疫苗。此法对于制备其它纯化Vero细胞疫苗也具有一定的参考意义。 展开更多
关键词 乙脑疫苗 区带离心 vero细胞 纯化乙脑疫苗
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蔗糖梯度离心法纯化Vero细胞乙脑疫苗的纯度分析及与层析法的比较 被引量:5
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作者 杨立清 张晋 +2 位作者 卢立新 李红 石男 《微生物学免疫学进展》 2004年第4期11-13,共3页
通过对蔗糖梯度离心法纯化Vero细胞乙脑疫苗的纯化工艺进行分析,发现现行工艺中收取的病毒组分中,不同蔗糖浓度中病毒的纯度是不同的,而呈峰型且与病毒效力峰及蛋白浓度峰不重合。实验结果对今后工艺的改进具有指导意义。另外应用Sephac... 通过对蔗糖梯度离心法纯化Vero细胞乙脑疫苗的纯化工艺进行分析,发现现行工艺中收取的病毒组分中,不同蔗糖浓度中病毒的纯度是不同的,而呈峰型且与病毒效力峰及蛋白浓度峰不重合。实验结果对今后工艺的改进具有指导意义。另外应用Sephacry1s1000凝胶层析法对乙脑病毒进行了纯化研究和分析,发现蔗糖梯度离心法和层析法纯化的病毒的纯度及回收率分别为291.46u/mg、96.01%和309.41u/mg65.08%,Sephacry1s1000凝胶层析法同样可以获得较高的纯度和收率。 展开更多
关键词 乙脑疫苗 纯化 层析法 梯度离心
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流行性乙型脑炎病毒在Vero细胞上传代适应的研究 被引量:4
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作者 石慧颖 丁志芬 常振彦 《中国病毒学》 CSCD 1995年第4期273-277,共5页
通过乙脑病毒P_3株以不同方式在鼠脑和Vcro细胞间传代适应的研究,培育出适于工业化大生产制备乙脑疫苗的生产毒种。其毒力可达7.0±0.5lgLD50/0.04ml,空斑滴度为7.5±0.5PFU/ml,免疫... 通过乙脑病毒P_3株以不同方式在鼠脑和Vcro细胞间传代适应的研究,培育出适于工业化大生产制备乙脑疫苗的生产毒种。其毒力可达7.0±0.5lgLD50/0.04ml,空斑滴度为7.5±0.5PFU/ml,免疫原性ID50值为0.000016-0.000023ml;在含有适量人白蛋白的199营养液内,该毒种于-30℃至少可稳定一年;与鼠脑组织毒种相比,传代细胞毒种的毒力、免疫原性及稳定性均与其相当。然而,后者不含脑组织,至少降低了一种过敏的危险。另外,细胞毒种的制备无需手工解剖鼠脑,易于控制外源因子污染,易于标准化。对于大规模生产疫苗、提高疫苗产量和质量,传代细胞毒种比鼠脑组织悬液毒种具有明显的优点。 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒 流行性 传代适应 vero细胞
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Vero细胞膜上与日本脑炎病毒结合分子的初步筛选 被引量:3
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作者 李焱 时莹 +1 位作者 丁天兵 徐志凯 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期431-433,共3页
目的:寻找Vero细胞膜上可与JEV结合的分子。方法:采用免疫共沉淀(Co-IP)技术,分离出Vero细胞膜上可与日本脑炎病毒(JEV)结合的分子,做质谱(MS)分析针对特异结合分子进行检测。用流式细胞术(FCM)和免疫荧光实验(IFA)验证候选结合分子与JE... 目的:寻找Vero细胞膜上可与JEV结合的分子。方法:采用免疫共沉淀(Co-IP)技术,分离出Vero细胞膜上可与日本脑炎病毒(JEV)结合的分子,做质谱(MS)分析针对特异结合分子进行检测。用流式细胞术(FCM)和免疫荧光实验(IFA)验证候选结合分子与JEV结合的情况。结果:Co-IP产物经SDS-PAGE分离出3条可以与JEV分子特异性结合的条带。其中,MS分析只鉴定出相对分子质量(Mr)约为90000的分子为热休克蛋白90β(HSP90β)。FCM及IFA实验结果表明抗HSP90β单克隆抗体(mAb)可以明显阻断JEV与Vero细胞结合。结论:Vero细胞膜上的HSP90β能与JEV结合。 展开更多
关键词 日本脑炎病毒(JEV) 细胞膜蛋白 vero细胞 热休克蛋白90β 结合
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篮式生物反应器制备Vero细胞乙型脑炎灭活疫苗 被引量:5
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作者 张晋 张月兰 +5 位作者 赵玉秀 王辉 马乐 马可 牛志彬 梁宏阳 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第12期1085-1086,1093,共3页
目的建立篮式生物反应器制备Vero细胞乙型脑炎灭活疫苗的工艺。方法利用7.5L篮式生物反应器和片状载体培养Vero细胞,接种乙型脑炎病毒P3V2株毒种,根据葡萄糖的消耗量,分析细胞的生长情况及调节病毒培养时的灌流速度,每24h取样,检测病毒... 目的建立篮式生物反应器制备Vero细胞乙型脑炎灭活疫苗的工艺。方法利用7.5L篮式生物反应器和片状载体培养Vero细胞,接种乙型脑炎病毒P3V2株毒种,根据葡萄糖的消耗量,分析细胞的生长情况及调节病毒培养时的灌流速度,每24h取样,检测病毒滴度。收获的病毒液经纯化后,制备乙脑灭活疫苗,检测各项指标。结果Vero细胞培养至96h,葡萄糖消耗量达高峰,细胞密度达峰值;接种病毒后72h,葡萄糖消耗量达高峰,灌流量为7L/d,连续收获7~9d,共可收获(40±5)L病毒液;96h病毒滴度达高峰,为10.0LgLD50/ml;制备的乙型脑炎灭活疫苗各项指标均达到《中国药典》三部(2005版)要求。结论已建立了篮式生物反应器制备Vero细胞乙型脑炎灭活疫苗的工艺。 展开更多
关键词 篮式生物反应器 片状载体 vero细胞 乙型脑炎 灭活疫苗
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Vero细胞乙型脑炎纯化疫苗生产工艺参数的研究 被引量:4
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作者 王辉 过琴媛 +6 位作者 张月兰 张晋 白江 钟书声 韩霞 张颖 赵兰英 《微生物学免疫学进展》 2006年第3期15-17,共3页
疫苗的生产工艺对保证疫苗的质量起着重要的作用,尤其是对生产过程中一些指标的量化显得更为重要。试验的设计分别考察了细胞接种量,细胞培养时间和离心机纯化样品的蛋白含量等因素对疫苗质量所产生的影响。结果显示,对以上指标的控... 疫苗的生产工艺对保证疫苗的质量起着重要的作用,尤其是对生产过程中一些指标的量化显得更为重要。试验的设计分别考察了细胞接种量,细胞培养时间和离心机纯化样品的蛋白含量等因素对疫苗质量所产生的影响。结果显示,对以上指标的控制的最佳量化是接种量3~7×10^7/瓶,培养时间6d,样品蛋白含量2000~2500μg/ml。产品质量稳定。 展开更多
关键词 vero细胞乙型脑炎纯化疫苗 生产工艺
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猪乙型脑炎病毒在Vero细胞上的繁殖特性及其灭活疫苗的免疫原性研究 被引量:1
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作者 韩伟 周建民 +2 位作者 郝霖雨 潘文 潘京学 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第12期3572-3578,共7页
试验旨在对猪乙型脑炎病毒(JEV,SA14-14-2株)在传代细胞上的繁殖培养特性及其制备的灭活疫苗免疫原性进行研究,确定猪JEV在细胞培养瓶中培养的关键技术参数及其灭活疫苗的免疫原性。以Vero细胞培养病毒,通过接种时间、接毒量、吸附时间... 试验旨在对猪乙型脑炎病毒(JEV,SA14-14-2株)在传代细胞上的繁殖培养特性及其制备的灭活疫苗免疫原性进行研究,确定猪JEV在细胞培养瓶中培养的关键技术参数及其灭活疫苗的免疫原性。以Vero细胞培养病毒,通过接种时间、接毒量、吸附时间、吸附温度、维持液pH、维持培养温度及培养时间7个条件的优化,将繁殖的病毒液冻融一次,采用病毒蚀斑数测定方法测定病毒滴度。按照优化好的条件繁殖一批毒液,经β-丙内酯灭活,与双相佐剂混合,制备成猪乙型脑炎灭活疫苗。两次免疫(间隔14d)接种乙型脑炎抗体阴性仔猪,首次免疫前(0d)、免疫后第7、14、21、28、35、42天采集血清,检测血清中和抗体。二免后第28天进行乙型脑炎P3强毒的攻击,攻毒前(0d)、攻毒后第1、2、3、5、7、9天采集血浆,攻毒后第14天剖杀免疫猪,采集脑组织,检测血浆和脑组织中JEV。结果显示,用细胞培养瓶进行培养,将Vero细胞培养至48h进行病毒接种,接种量为1 000PFU/mL,病毒吸附温度为37℃,吸附时间为90min,吸附后用pH 7.6~8.8维持液继续培养,培养温度为35℃,培养96h后收获毒液,冻融一次,可获得较高滴度的病毒。仔猪免疫制备的灭活疫苗后血清抗体水平迅速升高,血浆和脑组织中均未检测出JEV,免疫组试验猪能抵抗强毒攻击,可获得有效免疫保护。本试验结果为猪乙型脑炎疫苗的生产提供了参考依据。 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒(JEV) vero细胞 繁殖特性 病毒滴度 灭活疫苗 免疫原性
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两种流行性乙型脑炎疫苗的安全性和免疫效果观察 被引量:17
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作者 李万军 王世清 +2 位作者 王志勇 张鄂宪 肖奇友 《实用预防医学》 CAS 2007年第3期699-701,共3页
目的观察乙型脑炎(乙脑)减毒活疫苗和Vero细胞乙型脑炎纯化疫苗(Vero细胞乙脑疫苗)的安全性和免疫效果。方法在湖南省沅江市和衡东县筛选8~20月龄无乙脑疫苗免疫史(基础免疫组)和1.5~3岁完成了基础免疫(加强免疫组)的二组健康儿童作... 目的观察乙型脑炎(乙脑)减毒活疫苗和Vero细胞乙型脑炎纯化疫苗(Vero细胞乙脑疫苗)的安全性和免疫效果。方法在湖南省沅江市和衡东县筛选8~20月龄无乙脑疫苗免疫史(基础免疫组)和1.5~3岁完成了基础免疫(加强免疫组)的二组健康儿童作为观察对象。沅江市的观察对象接种乙型脑炎减毒活疫苗,衡东县的观察对象接种Vero细胞乙脑疫苗。然后从每个市县的二组观察对象中抽取部分对象检测免疫前和免疫后1个月血清乙脑中和抗体滴度,并观察其接种不良反应。结果乙型脑炎减毒活疫苗接种不良反应总发生率为5.2%;Vero细胞乙脑疫苗接种不良反应总发生率为8.8%。两种疫苗的接种不良反应以全身发热为主,分别占不良反应的95.4%和92.3%,发热72h后恢复正常。乙型脑炎减毒活疫苗基础免疫后抗体阳性率为82.5%,抗体几何平均滴度(GMT)为1:23.1;加强免疫后抗体阳性率为93.2%,GMT为1:28.6。Vero细胞乙脑疫苗基础免疫后抗体阳性率为83.2%,GMT为1:25.1;加强免疫后抗体阳性率为93.7%,GMT为1:32.4。结论乙型脑炎减毒活疫苗和Vero细胞乙脑疫苗安全、有效,可在预防控制乙脑工作中推广使用。 展开更多
关键词 流行性乙型脑炎 乙型脑炎减毒活疫苗 vero细胞乙脑疫苗 免疫效果 不良反应
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用生物反应器制备乙脑灭活疫苗的研究 被引量:2
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作者 衡燮 温嘉纳 +7 位作者 李佳 李桂兰 奚光跃 周健 姬光 任邦彦 谭振国 孙明波 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期496-498,共3页
目的用生物反应器制备乙脑纯化灭活疫苗。方法用搅拌式生物反应器培养Vero细胞,接种并培养乙型脑炎病毒,将收获的病毒液进行灭活和纯化。结果细胞密度都增至2.4×106ml-1以上,病毒滴度都>7.25lgLD50/ml。结论用生物反应器制备乙... 目的用生物反应器制备乙脑纯化灭活疫苗。方法用搅拌式生物反应器培养Vero细胞,接种并培养乙型脑炎病毒,将收获的病毒液进行灭活和纯化。结果细胞密度都增至2.4×106ml-1以上,病毒滴度都>7.25lgLD50/ml。结论用生物反应器制备乙脑灭活纯化疫苗的工艺合理,可以生产出高滴度的乙型脑炎病毒液。 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒疫苗 生物反应器 纯化 灭活
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柱层析法制备乙型脑炎纯化疫苗的研究 被引量:1
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作者 宋宗明 岳立广 +5 位作者 钱依群 刘双军 李彤 赵红丽 洪成龙 韩亮 《微生物学免疫学进展》 2004年第3期9-11,共3页
为制备纯化乙型脑炎灭活疫苗 ,以地鼠肾细胞培养并经灭活的乙型脑炎病毒液 ,浓缩后上Sepharose 4FF凝胶层析柱 ,用紫外线 2 80nm波长检测得到三个吸收峰。ELISA法证实第一峰为病毒抗原峰 ,另两个峰为杂蛋白峰。试验证明Sepharose 4FF凝... 为制备纯化乙型脑炎灭活疫苗 ,以地鼠肾细胞培养并经灭活的乙型脑炎病毒液 ,浓缩后上Sepharose 4FF凝胶层析柱 ,用紫外线 2 80nm波长检测得到三个吸收峰。ELISA法证实第一峰为病毒抗原峰 ,另两个峰为杂蛋白峰。试验证明Sepharose 4FF凝胶过滤对于提纯乙型脑炎病毒是有效的 ,能去除 展开更多
关键词 乙型脑炎 柱层析 纯化 疫苗制剂
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乙型脑炎减毒活疫苗与灭活疫苗诱导小鼠免疫应答的比较 被引量:1
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作者 吕文利 田小凤 +1 位作者 袁国会 赵新华 《中国煤炭工业医学杂志》 2004年第6期577-578,共2页
目的 比较乙型脑炎 (乙脑 )减毒活疫苗和灭活疫苗在小鼠体液和细胞的免疫应答。方法 应用检测特异性细胞毒性T细胞(CTL)活性的方法检测乙脑减毒活疫苗的细胞免疫应答 ,并以灭活疫苗作对照。结果 减毒活疫苗免疫小鼠后诱导的CTL均值为... 目的 比较乙型脑炎 (乙脑 )减毒活疫苗和灭活疫苗在小鼠体液和细胞的免疫应答。方法 应用检测特异性细胞毒性T细胞(CTL)活性的方法检测乙脑减毒活疫苗的细胞免疫应答 ,并以灭活疫苗作对照。结果 减毒活疫苗免疫小鼠后诱导的CTL均值为79.2 % ,较灭活疫苗 (2 9% )高 50 .2 % ,表明减毒活疫苗具有较强的特异性CTL活性。用同批减毒活疫苗免疫小鼠后其中和抗体效价为 1∶5 ,而同批的灭活疫苗为 1∶2 0 ,减毒活疫苗的免疫效力 (ID50 ) 3 .6× 1 0 - 6 /ml,显著高于灭活疫苗的 (4.0~ 4 .2 )× 1 0 - 4/ml。 展开更多
关键词 乙型脑炎 减毒活疫苗 灭活疫苗 诱导 小鼠 免疫应答
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乙型脑炎DNA疫苗免疫BALB/c鼠诱导局部肌肉组织树突状细胞浸润的研究
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作者 周言 翟永贞 +3 位作者 李喜梅 王志峰 常彩芳 冯国和 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期436-438,共3页
目的研究流行性乙型脑炎DNA疫苗接种局部树突状细胞的形态与功能。方法将含流行性乙型脑炎病毒prM、E蛋白编码基因的DNA疫苗(pJME)肌注免疫BALB/c鼠,HE染色观察接种局部肌肉组织内浸润细胞形态学分布,免疫组化检测CD11b^+、CD11c^+树突... 目的研究流行性乙型脑炎DNA疫苗接种局部树突状细胞的形态与功能。方法将含流行性乙型脑炎病毒prM、E蛋白编码基因的DNA疫苗(pJME)肌注免疫BALB/c鼠,HE染色观察接种局部肌肉组织内浸润细胞形态学分布,免疫组化检测CD11b^+、CD11c^+树突状细胞浸润特点,流式细胞仪检测浸润的树突状细胞中CD80^+、CD86^+双阳性细胞的百分比。结果pJME肌注组浸润细胞簇分级(3.0^+)、浸润细胞中CD11b^+、CD11c^+树突状细胞百分比分级(2.0^+、2.0^+)均显著高于空载体肌注组和灭活疫苗肌注组(P<0.05)。CD80^+、CD86^+双阳性细胞的百分比pJME肌注组为(0.16±0.20)%,空载体组为(0.12±0.30)%,灭活疫苗肌注组为(0.15±0.25)%,树突状细胞CD80、CD86抗原表达无显著差异(P>0.05)。结论pJME可诱导接种局部多种免疫活性细胞参与,其中有髓样树突状细胞,呈非成熟状态。 展开更多
关键词 脑炎 日本 疫苗 DNA 树突状细胞
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乙脑病毒猪源分离株CSF.XZ-2D感染BHK-21细胞毒的浓缩及纯化
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作者 滕蔓 冯丽丽 +6 位作者 罗俊 樊剑鸣 王方雨 郅玉宝 李秀杰 邓瑞广 张改平 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2015年第12期117-120,139,共5页
研究了日本流行性乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)猪源分离株CSF.XZ-2D感染的BHK-21细胞培养物中JEV的浓缩及纯化方法,对浓缩及纯化后的病毒TCID_(50)效价分别进行测定。结果表明,经差速离心后病毒液在4℃条件下分别... 研究了日本流行性乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)猪源分离株CSF.XZ-2D感染的BHK-21细胞培养物中JEV的浓缩及纯化方法,对浓缩及纯化后的病毒TCID_(50)效价分别进行测定。结果表明,经差速离心后病毒液在4℃条件下分别以30 000 r/min、40 000 r/min、50 000r/min、60 000 r/min超速离心3 h,其中50 000 r/min超速离心可将绝大部分JEV病毒粒子充分沉淀至离心管底部,浓缩效果最佳;病毒沉淀用PBS重悬后进行不连续蔗糖密度梯度离心,病毒粒子主要集中在35%~50%的区带蔗糖层。 展开更多
关键词 乙脑病毒 BHK-21细胞 蔗糖密度梯度离心 浓缩 纯化
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ICAM-1编码基因对乙型脑炎DNA疫苗树突状细胞功能的影响
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作者 翟永贞 马力 冯国和 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期148-153,167,共7页
目的:研究细胞间粘附分子1(ICAM-1)编码基因对日本脑炎(JE)DNA疫苗脾脏树突状细胞功能的影响。方法:套式RT-PCR法获取BALB/c鼠ICAM-1编码基因,构建重组子pJME/ICAM-1和pICAM-1,脂质体法转染上述质粒于CHO细胞,Western blot法检测转染的... 目的:研究细胞间粘附分子1(ICAM-1)编码基因对日本脑炎(JE)DNA疫苗脾脏树突状细胞功能的影响。方法:套式RT-PCR法获取BALB/c鼠ICAM-1编码基因,构建重组子pJME/ICAM-1和pICAM-1,脂质体法转染上述质粒于CHO细胞,Western blot法检测转染的CHO细胞中目的蛋白表达。实验分5组,包括:pJME/ICAM-1、pJME+PICAM-1、pJME、JE灭活疫苗和pcDNA3.1(+)免疫组,以不同免疫原肌注免疫BALB/c小鼠,流式细胞仪检测经不同免疫原免疫鼠后脾脏DC表型、抗原吞噬功能以及混合淋巴细胞反应。结果:融合表达重组质粒pJME/ICAM-1和单质粒pICAM-1经鉴定构建正确。pJME/ICAM-1组CD11c+CD86+DC和CD11c+ICAM-1+DC比例分别为(6.92±1.40)%、(7.18±0.57)%,高于其它免疫组(均P<0.05);pJME/ICAM-1和pJME+pICAM-1组DC表面CD80和MHCⅡ表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05);pJME/ICAM-1与pJME+pICAM-1组内吞能力明显增强,平均荧光强度分别为437.11±47.60、416.67±29.12,显著高于其它组(P<0.05)。比较不同免疫原对细胞分裂的作用,以pJME/ICAM-1组最强,(73.69±7.32)%CD4+T细胞发生分裂,(45.40±2.57)%CD8+T细胞发生分裂,显著高于对照组(P<0.05)。结论:ICAM-1编码基因能够促进JE DNA疫苗脾脏树突状细胞的成熟,能够提供独立或放大B7分子的协同刺激信号。 展开更多
关键词 脑炎 日本 DNA疫苗 细胞间粘附分子1 树突状细胞 共刺激分子
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国产生物反应器及其在病毒培养中的应用 被引量:6
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作者 董树沛 顾小华 +6 位作者 陈因良 严春 姜壁贵 赵一鸣 宋家骊 陈列胜 陈文兰 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第2期137-141,共5页
本文简要介绍了华东化工学院研制的CellCul-20细胞培养生物反应器,报道了此反应器用于细胞和病毒培养的情况。经严格的无菌试验和一年多的培养表明:CellCul-20反应器具有优良的抗污染性能,其主要参数的控制完全满足细胞培养的要求,并能... 本文简要介绍了华东化工学院研制的CellCul-20细胞培养生物反应器,报道了此反应器用于细胞和病毒培养的情况。经严格的无菌试验和一年多的培养表明:CellCul-20反应器具有优良的抗污染性能,其主要参数的控制完全满足细胞培养的要求,并能根据培养过程的实际情况,随时对参数进行修正。用所开发的培养工艺进行Vero细胞和乙脑病毒培养,细胞在较短时间内达到高密度,乙脑病毒滴度和抗原效价均取得了较为满意的结果。在国际上第一次成功地应用vero细胞大规模培养乙脑病毒原制苗。 展开更多
关键词 生物反应器 细胞培养 病毒
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SA14-14-2乙型脑炎病毒Vero细胞疫苗候选株的筛选及其表型和基因型特征
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作者 刘晓辉 李淼 +4 位作者 刘欣玉 徐宏山 房恩岳 俞永新 李玉华 《国际生物制品学杂志》 CAS 2023年第6期315-322,共8页
目的研制以Vero细胞为生产基质的SA14-14-2乙型脑炎(乙脑)减毒活疫苗候选毒株。方法将SA14-14-2株原始病毒在Vero细胞上传代并进行空斑克隆,对克隆株病毒进行Vero细胞培养,使用3周龄小鼠及3日龄乳鼠对脑内致病力进行测定,并进行乳鼠脑... 目的研制以Vero细胞为生产基质的SA14-14-2乙型脑炎(乙脑)减毒活疫苗候选毒株。方法将SA14-14-2株原始病毒在Vero细胞上传代并进行空斑克隆,对克隆株病毒进行Vero细胞培养,使用3周龄小鼠及3日龄乳鼠对脑内致病力进行测定,并进行乳鼠脑内回传、弱毒稳定性实验及免疫力实验等。结果挑选到10个病毒克隆株,通过全面对比后,筛选到1株病毒滴度高(>6.0 lgPFU/ml)且稳定的毒株SA14-14-2 VC_(6)。将该株与SA14-14-2原始株进行主要指标对比,结果表明,VC_(6)株全基因序列与原株相比仅有1个位点发生突变(S66L),对小鼠和乳鼠脑内致病力、弱毒稳定性、免疫原性均与原株相同。结论筛选到的SA14-14-2 VC_(6)株符合中国药典乙脑减毒活疫苗生产毒种的要求。各项主要指标不劣于SA14-14-2生产用毒种,是可应用Vero细胞培养生产的乙脑疫苗候选株。 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒 SA14-14-2 乙型脑炎减毒活疫苗 vero细胞系
原文传递
Sartobind Q膜纯化乙型脑炎灭活疫苗的研究
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作者 李庆岸 于海 +3 位作者 杨兵 于宏跃 李梦祺 韩宁娟 《生物化工》 2022年第4期78-81,共4页
目的:提供一种应用Sartobind Q膜去除乙脑灭活疫苗中细胞残留DNA的方法。方法:使用传统的Sepharose 6 Fast Flow层析所获得的初步纯化液进行Sartobind Q膜层析,在一定的离子强度和pH下,使DNA吸附在Sartobind Q膜的配基上,而病毒蛋白不... 目的:提供一种应用Sartobind Q膜去除乙脑灭活疫苗中细胞残留DNA的方法。方法:使用传统的Sepharose 6 Fast Flow层析所获得的初步纯化液进行Sartobind Q膜层析,在一定的离子强度和pH下,使DNA吸附在Sartobind Q膜的配基上,而病毒蛋白不吸附直接从膜下流出,得到最终纯化液,通过抗原含量和宿主细胞残留DNA的含量评价纯化结果。结果:用Sartobind Q膜处理后疫苗残留DNA比初步纯化液减少95.4%~97.8%,而且病毒抗原含量无显著变化。结论:Sartobind Q膜可吸附乙脑疫苗中Vero细胞DNA残留,进一步降低疫苗杂质含量。 展开更多
关键词 乙型脑炎灭活疫苗 vero细胞残留DNA Sartobind Q膜
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