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Agranulocytosis following injection of inactivated Japanese encephalitis vaccine(Vero cell):A case report
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作者 Li Wang Xu Zhang Yan-Tao Liu 《World Journal of Clinical Cases》 SCIE 2021年第25期7468-7471,共4页
BACKGROUND Japanese encephalitis virus(JEV),a mosquito borne flavivirus,is the leading cause of viral encephalitis in Asia,in terms of frequency and severity.JEV infection is thought to confer lifelong immunity.With t... BACKGROUND Japanese encephalitis virus(JEV),a mosquito borne flavivirus,is the leading cause of viral encephalitis in Asia,in terms of frequency and severity.JEV infection is thought to confer lifelong immunity.With the near eradication of poliomyelitis,JEV is now the continent’s leading cause of childhood viral neurologic infection and disability.The most common clinical manifestation of JEV infection is acute encephalitis,and currently there is no specific antiviral therapy.Japanese Encephalitis Vaccine(JE-VC)is an effective prevention measure,including JE-VC,Live(JE-MB),and Inactivated JE-VC.CASE SUMMARY A 9-mo-old girl received injection of Inactivated JE-VC(Vero cell)(Liaoning Chengda,batch number 201611B17)on August 31,2017.On that night,she developed a fever with the body temperature up to 38.5°C,for which Ibuprofen Suspension Drops 1.25 mL was given as antipyretic treatment.On September 1,the patient developed apocleisis,and her parents noticed herpes in her oral cavity.The patient was sent to our hospital on September 3.Physical examination led to a diagnosis of herpetic stomatitis,for which Stomatitis Spray 1 puff,tid,Kangfuxin Liquid 2 mL,tid,and vitamin B20.5 tablet,tid,were prescribed.Routine blood tests for low fever on September 6,2017 revealed an absolute neutrophil count(ANC)of 0.62×109/L,hemoglobin(Hb)of 109 g/L,and platelet count(PLT)of 308×10^(12)/L,and the tests were monitored regularly thereafter.The patient was followed until July 26,2020,when routine blood tests revealed ANC 1.72×109/L,Hb 138 g/L,and PLT 309×1012/L,indicating that the neutropenia count had normalized.CONCLUSION This report attempts to bring to clinical attention that Inactivated JE-VC(Vero cell)might cause prolonged granulocytopenia or even agranulocytosis. 展开更多
关键词 Inactivated japanese encephalitis vaccine(vero cell) NEUTROPENIA AGRANULOCYTOSIS japanese encephalitis virus Case report
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应用微载体Vero细胞制备流行性乙型脑炎灭活疫苗最适条件的研究 被引量:4
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作者 庞成华 石慧颖 +2 位作者 常振彦 陈景才 丁志芬 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1993年第4期170-174,共5页
应用微载体培养Vero细胞研究制备流行性乙型脑炎(简称乙脑)灭活疫苗的最适条件,包括微载体的选择和细胞培养以及细胞日龄、细胞密度、毒种浓度、病毒维持液pH、种毒方式等。并按初步选择的最适条件试生产疫苗,其病毒滴度达log7.33~8.09... 应用微载体培养Vero细胞研究制备流行性乙型脑炎(简称乙脑)灭活疫苗的最适条件,包括微载体的选择和细胞培养以及细胞日龄、细胞密度、毒种浓度、病毒维持液pH、种毒方式等。并按初步选择的最适条件试生产疫苗,其病毒滴度达log7.33~8.09pfu/ml,其效力(ID_(50))为0.000017~0.000063毫升,均高于现行地鼠肾细胞培养疫苗的水平。 展开更多
关键词 微载体 vero细胞 乙脑 灭活疫苗
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大规模区带离心纯化Vero细胞乙脑疫苗 被引量:6
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作者 石慧颖 丁志芬 +3 位作者 赵敏 庞成华 杨抗抗 李荆 《中国病毒学》 CSCD 1998年第3期208-213,共6页
本文报道一种适合疫苗生产的大规模纯化Vero细胞乙脑疫苗的方法。原疫苗经适当浓缩和去除DNA处理后,用不连续蔗糖梯度(36%和60%)。32600g,速率区带离心4h。纯化后疫苗的效力比中国参考疫苗高出6倍以上,补体... 本文报道一种适合疫苗生产的大规模纯化Vero细胞乙脑疫苗的方法。原疫苗经适当浓缩和去除DNA处理后,用不连续蔗糖梯度(36%和60%)。32600g,速率区带离心4h。纯化后疫苗的效力比中国参考疫苗高出6倍以上,补体结合抗原比中国参考疫苗高4~8倍。总蛋白含量低于30μg/mL,牛血清含量降至0.5μg/mL以下,细胞残余DNA低于100pg/0.5mL。用此法连续制备三批纯化疫苗,其纯度和效力均高于日本鼠脑纯化疫苗。此法对于制备其它纯化Vero细胞疫苗也具有一定的参考意义。 展开更多
关键词 乙脑疫苗 区带离心 vero细胞 纯化乙脑疫苗
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篮式生物反应器制备Vero细胞乙型脑炎灭活疫苗 被引量:5
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作者 张晋 张月兰 +5 位作者 赵玉秀 王辉 马乐 马可 牛志彬 梁宏阳 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第12期1085-1086,1093,共3页
目的建立篮式生物反应器制备Vero细胞乙型脑炎灭活疫苗的工艺。方法利用7.5L篮式生物反应器和片状载体培养Vero细胞,接种乙型脑炎病毒P3V2株毒种,根据葡萄糖的消耗量,分析细胞的生长情况及调节病毒培养时的灌流速度,每24h取样,检测病毒... 目的建立篮式生物反应器制备Vero细胞乙型脑炎灭活疫苗的工艺。方法利用7.5L篮式生物反应器和片状载体培养Vero细胞,接种乙型脑炎病毒P3V2株毒种,根据葡萄糖的消耗量,分析细胞的生长情况及调节病毒培养时的灌流速度,每24h取样,检测病毒滴度。收获的病毒液经纯化后,制备乙脑灭活疫苗,检测各项指标。结果Vero细胞培养至96h,葡萄糖消耗量达高峰,细胞密度达峰值;接种病毒后72h,葡萄糖消耗量达高峰,灌流量为7L/d,连续收获7~9d,共可收获(40±5)L病毒液;96h病毒滴度达高峰,为10.0LgLD50/ml;制备的乙型脑炎灭活疫苗各项指标均达到《中国药典》三部(2005版)要求。结论已建立了篮式生物反应器制备Vero细胞乙型脑炎灭活疫苗的工艺。 展开更多
关键词 篮式生物反应器 片状载体 vero细胞 乙型脑炎 灭活疫苗
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Vero细胞乙型脑炎纯化疫苗生产工艺参数的研究 被引量:4
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作者 王辉 过琴媛 +6 位作者 张月兰 张晋 白江 钟书声 韩霞 张颖 赵兰英 《微生物学免疫学进展》 2006年第3期15-17,共3页
疫苗的生产工艺对保证疫苗的质量起着重要的作用,尤其是对生产过程中一些指标的量化显得更为重要。试验的设计分别考察了细胞接种量,细胞培养时间和离心机纯化样品的蛋白含量等因素对疫苗质量所产生的影响。结果显示,对以上指标的控... 疫苗的生产工艺对保证疫苗的质量起着重要的作用,尤其是对生产过程中一些指标的量化显得更为重要。试验的设计分别考察了细胞接种量,细胞培养时间和离心机纯化样品的蛋白含量等因素对疫苗质量所产生的影响。结果显示,对以上指标的控制的最佳量化是接种量3~7×10^7/瓶,培养时间6d,样品蛋白含量2000~2500μg/ml。产品质量稳定。 展开更多
关键词 vero细胞乙型脑炎纯化疫苗 生产工艺
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猪乙型脑炎病毒在Vero细胞上的繁殖特性及其灭活疫苗的免疫原性研究 被引量:1
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作者 韩伟 周建民 +2 位作者 郝霖雨 潘文 潘京学 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第12期3572-3578,共7页
试验旨在对猪乙型脑炎病毒(JEV,SA14-14-2株)在传代细胞上的繁殖培养特性及其制备的灭活疫苗免疫原性进行研究,确定猪JEV在细胞培养瓶中培养的关键技术参数及其灭活疫苗的免疫原性。以Vero细胞培养病毒,通过接种时间、接毒量、吸附时间... 试验旨在对猪乙型脑炎病毒(JEV,SA14-14-2株)在传代细胞上的繁殖培养特性及其制备的灭活疫苗免疫原性进行研究,确定猪JEV在细胞培养瓶中培养的关键技术参数及其灭活疫苗的免疫原性。以Vero细胞培养病毒,通过接种时间、接毒量、吸附时间、吸附温度、维持液pH、维持培养温度及培养时间7个条件的优化,将繁殖的病毒液冻融一次,采用病毒蚀斑数测定方法测定病毒滴度。按照优化好的条件繁殖一批毒液,经β-丙内酯灭活,与双相佐剂混合,制备成猪乙型脑炎灭活疫苗。两次免疫(间隔14d)接种乙型脑炎抗体阴性仔猪,首次免疫前(0d)、免疫后第7、14、21、28、35、42天采集血清,检测血清中和抗体。二免后第28天进行乙型脑炎P3强毒的攻击,攻毒前(0d)、攻毒后第1、2、3、5、7、9天采集血浆,攻毒后第14天剖杀免疫猪,采集脑组织,检测血浆和脑组织中JEV。结果显示,用细胞培养瓶进行培养,将Vero细胞培养至48h进行病毒接种,接种量为1 000PFU/mL,病毒吸附温度为37℃,吸附时间为90min,吸附后用pH 7.6~8.8维持液继续培养,培养温度为35℃,培养96h后收获毒液,冻融一次,可获得较高滴度的病毒。仔猪免疫制备的灭活疫苗后血清抗体水平迅速升高,血浆和脑组织中均未检测出JEV,免疫组试验猪能抵抗强毒攻击,可获得有效免疫保护。本试验结果为猪乙型脑炎疫苗的生产提供了参考依据。 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒(JEV) vero细胞 繁殖特性 病毒滴度 灭活疫苗 免疫原性
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Sartobind Q膜纯化乙型脑炎灭活疫苗的研究
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作者 李庆岸 于海 +3 位作者 杨兵 于宏跃 李梦祺 韩宁娟 《生物化工》 2022年第4期78-81,共4页
目的:提供一种应用Sartobind Q膜去除乙脑灭活疫苗中细胞残留DNA的方法。方法:使用传统的Sepharose 6 Fast Flow层析所获得的初步纯化液进行Sartobind Q膜层析,在一定的离子强度和pH下,使DNA吸附在Sartobind Q膜的配基上,而病毒蛋白不... 目的:提供一种应用Sartobind Q膜去除乙脑灭活疫苗中细胞残留DNA的方法。方法:使用传统的Sepharose 6 Fast Flow层析所获得的初步纯化液进行Sartobind Q膜层析,在一定的离子强度和pH下,使DNA吸附在Sartobind Q膜的配基上,而病毒蛋白不吸附直接从膜下流出,得到最终纯化液,通过抗原含量和宿主细胞残留DNA的含量评价纯化结果。结果:用Sartobind Q膜处理后疫苗残留DNA比初步纯化液减少95.4%~97.8%,而且病毒抗原含量无显著变化。结论:Sartobind Q膜可吸附乙脑疫苗中Vero细胞DNA残留,进一步降低疫苗杂质含量。 展开更多
关键词 乙型脑炎灭活疫苗 vero细胞残留DNA Sartobind Q膜
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两种流行性乙型脑炎疫苗的安全性和免疫效果观察 被引量:17
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作者 李万军 王世清 +2 位作者 王志勇 张鄂宪 肖奇友 《实用预防医学》 CAS 2007年第3期699-701,共3页
目的观察乙型脑炎(乙脑)减毒活疫苗和Vero细胞乙型脑炎纯化疫苗(Vero细胞乙脑疫苗)的安全性和免疫效果。方法在湖南省沅江市和衡东县筛选8~20月龄无乙脑疫苗免疫史(基础免疫组)和1.5~3岁完成了基础免疫(加强免疫组)的二组健康儿童作... 目的观察乙型脑炎(乙脑)减毒活疫苗和Vero细胞乙型脑炎纯化疫苗(Vero细胞乙脑疫苗)的安全性和免疫效果。方法在湖南省沅江市和衡东县筛选8~20月龄无乙脑疫苗免疫史(基础免疫组)和1.5~3岁完成了基础免疫(加强免疫组)的二组健康儿童作为观察对象。沅江市的观察对象接种乙型脑炎减毒活疫苗,衡东县的观察对象接种Vero细胞乙脑疫苗。然后从每个市县的二组观察对象中抽取部分对象检测免疫前和免疫后1个月血清乙脑中和抗体滴度,并观察其接种不良反应。结果乙型脑炎减毒活疫苗接种不良反应总发生率为5.2%;Vero细胞乙脑疫苗接种不良反应总发生率为8.8%。两种疫苗的接种不良反应以全身发热为主,分别占不良反应的95.4%和92.3%,发热72h后恢复正常。乙型脑炎减毒活疫苗基础免疫后抗体阳性率为82.5%,抗体几何平均滴度(GMT)为1:23.1;加强免疫后抗体阳性率为93.2%,GMT为1:28.6。Vero细胞乙脑疫苗基础免疫后抗体阳性率为83.2%,GMT为1:25.1;加强免疫后抗体阳性率为93.7%,GMT为1:32.4。结论乙型脑炎减毒活疫苗和Vero细胞乙脑疫苗安全、有效,可在预防控制乙脑工作中推广使用。 展开更多
关键词 流行性乙型脑炎 乙型脑炎减毒活疫苗 vero细胞乙脑疫苗 免疫效果 不良反应
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乙型脑炎减毒活疫苗与灭活疫苗诱导小鼠免疫应答的比较 被引量:1
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作者 吕文利 田小凤 +1 位作者 袁国会 赵新华 《中国煤炭工业医学杂志》 2004年第6期577-578,共2页
目的 比较乙型脑炎 (乙脑 )减毒活疫苗和灭活疫苗在小鼠体液和细胞的免疫应答。方法 应用检测特异性细胞毒性T细胞(CTL)活性的方法检测乙脑减毒活疫苗的细胞免疫应答 ,并以灭活疫苗作对照。结果 减毒活疫苗免疫小鼠后诱导的CTL均值为... 目的 比较乙型脑炎 (乙脑 )减毒活疫苗和灭活疫苗在小鼠体液和细胞的免疫应答。方法 应用检测特异性细胞毒性T细胞(CTL)活性的方法检测乙脑减毒活疫苗的细胞免疫应答 ,并以灭活疫苗作对照。结果 减毒活疫苗免疫小鼠后诱导的CTL均值为79.2 % ,较灭活疫苗 (2 9% )高 50 .2 % ,表明减毒活疫苗具有较强的特异性CTL活性。用同批减毒活疫苗免疫小鼠后其中和抗体效价为 1∶5 ,而同批的灭活疫苗为 1∶2 0 ,减毒活疫苗的免疫效力 (ID50 ) 3 .6× 1 0 - 6 /ml,显著高于灭活疫苗的 (4.0~ 4 .2 )× 1 0 - 4/ml。 展开更多
关键词 乙型脑炎 减毒活疫苗 灭活疫苗 诱导 小鼠 免疫应答
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SA14-14-2乙型脑炎病毒Vero细胞疫苗候选株的筛选及其表型和基因型特征
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作者 刘晓辉 李淼 +4 位作者 刘欣玉 徐宏山 房恩岳 俞永新 李玉华 《国际生物制品学杂志》 CAS 2023年第6期315-322,共8页
目的研制以Vero细胞为生产基质的SA14-14-2乙型脑炎(乙脑)减毒活疫苗候选毒株。方法将SA14-14-2株原始病毒在Vero细胞上传代并进行空斑克隆,对克隆株病毒进行Vero细胞培养,使用3周龄小鼠及3日龄乳鼠对脑内致病力进行测定,并进行乳鼠脑... 目的研制以Vero细胞为生产基质的SA14-14-2乙型脑炎(乙脑)减毒活疫苗候选毒株。方法将SA14-14-2株原始病毒在Vero细胞上传代并进行空斑克隆,对克隆株病毒进行Vero细胞培养,使用3周龄小鼠及3日龄乳鼠对脑内致病力进行测定,并进行乳鼠脑内回传、弱毒稳定性实验及免疫力实验等。结果挑选到10个病毒克隆株,通过全面对比后,筛选到1株病毒滴度高(>6.0 lgPFU/ml)且稳定的毒株SA14-14-2 VC_(6)。将该株与SA14-14-2原始株进行主要指标对比,结果表明,VC_(6)株全基因序列与原株相比仅有1个位点发生突变(S66L),对小鼠和乳鼠脑内致病力、弱毒稳定性、免疫原性均与原株相同。结论筛选到的SA14-14-2 VC_(6)株符合中国药典乙脑减毒活疫苗生产毒种的要求。各项主要指标不劣于SA14-14-2生产用毒种,是可应用Vero细胞培养生产的乙脑疫苗候选株。 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒 SA14-14-2 乙型脑炎减毒活疫苗 vero细胞系
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生物反应器制备Vero细胞乙型脑炎纯化疫苗 被引量:9
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作者 李薇 李振平 +4 位作者 孙燕 韩德胜 周丽娟 范秀娟 王玉琳 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第6期591-592,595,共3页
目的建立利用生物反应器制备Vero细胞乙型脑炎纯化疫苗的新工艺。方法以Vero细胞作为乙型脑炎病毒增殖的细胞基质,使用微载体Cytodex-Ⅰ在15L生物反应器中进行高密度培养,采用2.5~4.5g/L的载体浓度培养乙型脑炎病毒,制备3批纯化乙型脑... 目的建立利用生物反应器制备Vero细胞乙型脑炎纯化疫苗的新工艺。方法以Vero细胞作为乙型脑炎病毒增殖的细胞基质,使用微载体Cytodex-Ⅰ在15L生物反应器中进行高密度培养,采用2.5~4.5g/L的载体浓度培养乙型脑炎病毒,制备3批纯化乙型脑炎疫苗并进行检定。结果随着微载体浓度的增加,细胞密度升高。采用2.5~4.5g/L微载体培养的病毒收获液的平均滴度为7.38~7.56lgPFU/ml,收获量最高可达到12~15个有效罐体积。制备的3批疫苗各项质量指标均符合《中国药典》三部(2005版)相关要求。结论已建立了15L生物反应器制备Vero细胞乙型脑炎纯化疫苗的新工艺,为进一步放大生产规模奠定了基础。 展开更多
关键词 生物反应器 微载体 vero细胞 乙型脑炎疫苗
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不同剂量冻干精制Vero细胞流行性乙型脑炎灭活疫苗人体反应及血清学效果观察 被引量:1
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作者 殷纪牧 钱迟华 +6 位作者 徐桂英 孙丽燕 张军 顾辉 刁连东 陈海平 迮文远 《中国计划免疫》 2002年第5期245-247,共3页
为了解不同剂量冻干精制Vero细胞流行性乙型脑炎 (乙脑 )灭活疫苗 (Vero细胞乙脑疫苗 )接种后的人体反应和血清学效果 ,2 0 0 0年 3~ 4月在苏州市吴中区 ,将 2 4 3名 6~ 12月龄儿童分为A、B、C 3组 ,接种不同剂量的Vero细胞乙脑疫苗 ;... 为了解不同剂量冻干精制Vero细胞流行性乙型脑炎 (乙脑 )灭活疫苗 (Vero细胞乙脑疫苗 )接种后的人体反应和血清学效果 ,2 0 0 0年 3~ 4月在苏州市吴中区 ,将 2 4 3名 6~ 12月龄儿童分为A、B、C 3组 ,接种不同剂量的Vero细胞乙脑疫苗 ;以 114名同龄健康儿童接种地鼠肾乙脑灭活疫苗为对照。观察接种后 6h、2 4h、4 8h的发热反应和局部反应 ,并在免疫前和免疫后 1个月采血 ,检测中和抗体 ,以≥ 1∶5为阳性。首针接种后A组 (2针均为0 5ml疫苗 )中、强发热反应达 13 3% ,明显高于B组 (首针 0 2 5ml,第 2针 0 5ml)、C组 (2针均为 0 2 5ml)和对照组的 2 4 %、3 1%和 2 6 % ,B组、C组与对照组无明显差别 ;血清学检测A组和B组中和抗体阳转率达 10 0 0 %和95 2 % ,抗体几何平均滴度 (GMT)为 1∶2 7 7和 1∶12 9,明显高于C组和对照组的阳转率 81 7%、6 8 6 %和GMT1∶8 5 2、1∶7 0 7;A组与B组抗体阳转率无明显差异。说明Vero细胞乙脑疫苗全身反应和局部反应小 ,接种 2针后免疫学效果良好 ,但首针全量注射后中、强发热反应者较多 ,采用首针半量接种能大大减少发热反应 。 展开更多
关键词 流行性乙型脑炎 冻干精制vero细胞流行性乙型脑炎灭活疫苗 人体反应 血清学效果
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Vero细胞乙型脑炎灭活疫苗的接种反应及免疫效果观察 被引量:8
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作者 周荔葆 赵新 +6 位作者 吴栩涛 王立刚 廖晖 刘苗苗 殷建文 万艾玲 甄祖刚 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第8期809-811,共3页
目的观察Vero细胞乙型脑炎灭活疫苗的接种反应及免疫效果。方法选择乙脑低发区黑龙江省肇源县8月龄~10岁常住健康儿童为观察对象,按照免疫程序分别接种辽宁成大生物股份有限公司生产的Vero细胞乙脑灭活疫苗(A组∶水针剂型;B组:冻干剂型... 目的观察Vero细胞乙型脑炎灭活疫苗的接种反应及免疫效果。方法选择乙脑低发区黑龙江省肇源县8月龄~10岁常住健康儿童为观察对象,按照免疫程序分别接种辽宁成大生物股份有限公司生产的Vero细胞乙脑灭活疫苗(A组∶水针剂型;B组:冻干剂型)和市售乙脑灭活疫苗(对照组),观察接种后的不良反应,并采用蚀斑减少中和试验(PRNT)法检测血清乙脑中和抗体。结果A、B组疫苗的总不良反应率为2.81%,对照组为6.63%,3组均未出现严重不良反应,发热反应以轻度为主,局部不良反应较轻微,72h后全部消失。免疫后血清中和抗体阳转率A组为93.3%,B组为90.4%,对照组为81.8%;GMTA组为1∶24.0,B组为1∶21.8,对照组为1∶15.4。A组、B组的中和抗体阳转率和GMT均显著高于对照组,差异有统计学意义,3组之间中和抗体滴度的分布差异无统计学意义。结论辽宁成大生物股份有限公司生产的Vero细胞乙脑灭活疫苗不良反应率低,免疫效果良好。 展开更多
关键词 流行性乙型脑炎 Veto细胞 灭活疫苗 不良反应 免疫效果
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WAVE生物反应器制备Vero细胞乙型脑炎灭活疫苗 被引量:4
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作者 佟芳 赵玉秀 +7 位作者 王辉 梁宏阳 马可 马乐 牛志彬 杨阳 刘颖 张月兰 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第2期134-136,共3页
目的采用WAVE生物反应器培养Vero细胞制备乙型脑炎病毒灭活疫苗。方法利用2 L WAVE生物反应器和微载体经半连续方式培养Vero细胞,每24 h取样,观察细胞生长情况,实时监测葡萄糖浓度。待细胞长至单层时,以0.03~0.5 MOI接种乙型脑炎病毒... 目的采用WAVE生物反应器培养Vero细胞制备乙型脑炎病毒灭活疫苗。方法利用2 L WAVE生物反应器和微载体经半连续方式培养Vero细胞,每24 h取样,观察细胞生长情况,实时监测葡萄糖浓度。待细胞长至单层时,以0.03~0.5 MOI接种乙型脑炎病毒。待细胞病变率达25%时,开始收获病毒液,病毒收获液经纯化后,制备乙型脑炎灭活疫苗,按《中国药典》三部(2010版)要求检测各项指标。结果 Vero细胞培养至6 d在微载体上长成致密单层,接种病毒后2 d,细胞病变率达25%,开始收获病毒液,收获量为1 L/d,可连续收获5~7 d,总计5~7 L病毒原液;病毒培养至第4天滴度达峰值,为8.54 LgLD50/ml;制备的乙型脑炎灭活疫苗各项指标均达到《中国药典》三部(2010版)要求。结论初步建立了WAVE生物反应器培养Vero细胞制备乙型脑炎灭活疫苗的方法。 展开更多
关键词 WAVE生物反应器 微载体 vero细胞 乙型脑炎灭活疫苗
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应用7.5 L生物反应器制备Vero细胞乙型脑炎灭活疫苗 被引量:2
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作者 周荔葆 殷建文 +7 位作者 赵新 吴栩涛 廖辉 刘苗苗 曲格霆 甄祖刚 焦龙 吴琼 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第11期1414-1416,共3页
目的应用7.5 L生物反应器,培养Vero细胞和乙型脑炎病毒,规模化生产乙型脑炎灭活疫苗。方法应用7.5 L生物反应器,分别以5、10、15、20、25 g/L的微载体密度加装,采用灌流方式培养Vero细胞,分别将P3株乙型脑炎病毒按0.005 00、0.002 50、0... 目的应用7.5 L生物反应器,培养Vero细胞和乙型脑炎病毒,规模化生产乙型脑炎灭活疫苗。方法应用7.5 L生物反应器,分别以5、10、15、20、25 g/L的微载体密度加装,采用灌流方式培养Vero细胞,分别将P3株乙型脑炎病毒按0.005 00、0.002 50、0.001 60、0.001 25、0.001 00 MOI接种至生物反应器内,收获乙脑病毒液。经浓缩、灭活、纯化等工艺制备疫苗半成品,经疫苗灭活及纯化试验进行工艺验证,合格后分装为疫苗成品,按照《中国药典》三部(2010版)中《冻干乙型脑炎灭活疫苗(Vero细胞)》要求,进行疫苗全项检定。结果当微载体密度为20、25 g/L时,细胞密度可达1.2×107个/ml,病毒滴度平均达8.33~8.52 lgLD50/ml;当病毒接种量为0.001 25 MOI时,病毒最高滴度可达9.02 lgLD50/ml。经超滤浓缩后的病毒原液,使用1∶4 000β-丙内酯灭活72 h,可达到灭活效果;纯化后可去除90%以上杂蛋白。应用7.5 L生物反应器生产的6批乙型脑炎灭活疫苗,经检定各项指标均符合国家要求。结论应用7.5 L生物反应器培养Vero细胞和P3株乙型脑炎病毒,经连续灌流收获,可规模化生产Vero细胞乙型脑炎灭活疫苗。 展开更多
关键词 生物反应器 微载体 vero细胞 乙型脑炎灭活疫苗
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Vero细胞在无血清条件下制备乙型脑炎灭活疫苗
16
作者 贾锐 马可 +4 位作者 王红燕 李虎 朱楠 白亮 张晋 《国际生物制品学杂志》 CAS 2015年第3期112-115,120,共5页
目的探索Vero细胞在无血清条件下制备乙型脑炎灭活疫苗的工艺。方法用无血清培养基培养Veto细胞,并将乙型脑炎病毒P3V2株毒种接种于培养的Vero细胞,观察细胞和病毒的生长情况。收获病毒液,通过灭活、纯化制备乙型脑炎灭活疫苗,检测... 目的探索Vero细胞在无血清条件下制备乙型脑炎灭活疫苗的工艺。方法用无血清培养基培养Veto细胞,并将乙型脑炎病毒P3V2株毒种接种于培养的Vero细胞,观察细胞和病毒的生长情况。收获病毒液,通过灭活、纯化制备乙型脑炎灭活疫苗,检测疫苗各项指标,并与有血清培养工艺制备的疫苗(2013年生产的疫苗)进行比较。结果无血清培养基培养的Vero细胞生长良好,培养5d的细胞呈致密单层生长。3批无血清培养工艺制备的疫苗的第1、2和3次收获液的平均病毒滴度分别为8.847、8.319和7.194lgLD50/ml。3批无血清培养工艺制备的疫苗半成品的平均抗原含量(1.51Eu/ml)与有血清培养工艺制备的疫苗(1.41EU/ml)相当,但前者的宿主细胞蛋白含量(19.69μg/L)则明显低于后者(63.90btg/L)。结论乙型脑炎病毒可在无血清Vero细胞中良好生长,Vero细胞无血清培养工艺制备乙型脑炎灭活疫苗是可行的。 展开更多
关键词 培养基 无血清 vero细胞 脑炎病毒 日本 疫苗 灭活
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Vero细胞HCP试剂盒在冻干乙型脑炎灭活疫苗生产过程中的应用
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作者 张晋 张颖 +3 位作者 张乐 郝屿 康岚 崔子豪 《国际生物制品学杂志》 CAS 2013年第6期292-295,共4页
目的 通过检测冻干乙型脑炎灭活疫苗(Vero细胞)生产过程各道工序中的细胞残余蛋白,达到控制疫苗中Vero细胞残余蛋白的目的.方法 采用Vero细胞宿主细胞蛋白(host cell protein,HCP)试剂盒,对2009-2012年共65批冻干乙型脑炎灭活疫苗(... 目的 通过检测冻干乙型脑炎灭活疫苗(Vero细胞)生产过程各道工序中的细胞残余蛋白,达到控制疫苗中Vero细胞残余蛋白的目的.方法 采用Vero细胞宿主细胞蛋白(host cell protein,HCP)试剂盒,对2009-2012年共65批冻干乙型脑炎灭活疫苗(Vero细胞)在病毒液收获、浓缩、硫酸鱼精蛋白处理、纯化、脱糖和半成品配制阶段中的HCP含量进行检测.结果 2009-2012年,病毒液收获阶段Vero细胞HCP含量无明显差异.2010年工艺优化后,2010-2012年的HCP平均值与2009年相比,在浓缩、硫酸鱼精蛋白处理、纯化、脱糖、半成品配制阶段分别降低了78.83%、83.42%、78.62%、86.88%、86.40%.结论 通过Vero细胞HCP试剂盒的动态监测,可以对生产过程中Vero细胞的残余蛋白含量实施控制. 展开更多
关键词 日本脑炎疫苗 酶联免疫吸附测定 vero细胞 宿主细胞蛋白
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流行性乙型脑炎灭活疫苗(非洲绿猴肾细胞)和减毒活疫苗不同接种方案的安全性观察分析 被引量:13
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作者 尹遵栋 罗会明 +17 位作者 高君 张龙华 马福宝 周莉薇 石晓娟 鲁红莲 张振华 宁桂军 陈恩富 蒋征刚 张意坚 吴方 丁峥嵘 王金凤 岳丽 窦友剑 李军宏 李艺星 《中国疫苗和免疫》 CAS 2011年第3期195-200,共6页
目的对流行性乙型脑炎(乙脑)灭活疫苗(非洲绿猴肾细胞)[Japanese Encephalitis(JE)Inactivated Vaccine(Vero Cell),JEV-I(Vero)]和减毒活疫苗(JE Attenuated Live Vaccine,JEV-L)不同接种方案的安全性进行评价。方法对2453名8月龄、107... 目的对流行性乙型脑炎(乙脑)灭活疫苗(非洲绿猴肾细胞)[Japanese Encephalitis(JE)Inactivated Vaccine(Vero Cell),JEV-I(Vero)]和减毒活疫苗(JE Attenuated Live Vaccine,JEV-L)不同接种方案的安全性进行评价。方法对2453名8月龄、1074名2岁儿童随机分组,分别接种JEV-I(Vero)和JEV-L,观察接种后30min内、72h内和30d内的不良反应,并对JEV-I(Vero)和JEV-L进行比较。结果接种JEV-I(Vero)和JEV-L后,不良反应主要表现为轻(37.1~37.5℃)、中度(37.6~39.0℃)发热,局部反应主要为红肿,未观察到严重的或危及生命的不良反应。8月龄儿童30min内即时反应轻、中度合并发热率,JEV-I(Vero)(第1剂)和JEV-L分别为5.4%和6.4%;72h内分别为16.1%和14.1%;JEV-I(Vero)(第1剂)和JEV-L72h内重度(>39.0℃)发热率分别为0.4%和0.1%。2岁儿童30min内即时反应轻、中度合并发热率,JEV-I(Vero)和JEV-L分别为6.8%和7.7%;72h内分别为18.2%和19.0%;JEV-L72h内重度发热率为0.2%。JEV-I(Vero)和JEV-L不良反应发生率基本一致,30d内不良反应发生率与72h内不良反应发生率基本一致,差异无统计学意义。结论 8月龄儿童接种JEV-I(Vero)和JEV-L均有良好的安全性;曾在8月龄接种过JEV-L的2岁儿童,加强免疫JEV-I(Vero)或JEV-L也有良好的安全性。从安全性的角度,JEV-I(Vero)和JEV-L均可在预防控制JE中使用。 展开更多
关键词 流行性乙型脑炎灭活疫苗(非洲绿猴肾细胞) 流行性乙型脑炎减毒活疫苗 不同接种方案 安全性
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冻干流行性乙型脑炎灭活疫苗(非洲绿猴肾细胞)和减毒活疫苗序贯免疫的安全性评价 被引量:10
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作者 李永成 张之伦 +7 位作者 张颖 张怡宾 高志刚 陈德荣 孙安悦 黄海涛 孙静 李晓静 《中国疫苗和免疫》 CAS 2011年第2期155-157,共3页
目的观察接种冻干流行性乙型脑炎(乙脑)灭活疫苗(非洲绿猴肾细胞)[Japanese Encephalitis Vaccine(Vero Cell),Inactivated,Freeze-dried;JEV-I]后的临床反应,以及和乙脑减毒活疫苗(Japanese Encephalitis Attenuated Live Vaccine;JEV... 目的观察接种冻干流行性乙型脑炎(乙脑)灭活疫苗(非洲绿猴肾细胞)[Japanese Encephalitis Vaccine(Vero Cell),Inactivated,Freeze-dried;JEV-I]后的临床反应,以及和乙脑减毒活疫苗(Japanese Encephalitis Attenuated Live Vaccine;JEV-L)序贯免疫程序的安全性。方法以9月龄和2岁健康儿童为观察对象,分三种组合接种JEV,采取主动和被动监测相结合的方式观察接种后30d内的临床反应。结果 JEV-I和JEV-L的不良反应发生率分别为9.72%和9.59%,差异无统计学意义(χ2=0.024,P=0.876)。不良反应以Ⅰ级反应为主,占82.25%;需要治疗的发热反应占0.83%,未出现严重不良反应。三种免疫组合的不良反应发生率分别为10.50%、8.11%、9.59%,差异无统计学意义(χ2=4.267,P=0.118)。结论 JEV-I和JEV-L的不良反应发生率差异无统计学意义,JEV-I和JEV-L序贯免疫有良好的安全性。 展开更多
关键词 冻干流行性乙型脑炎灭活疫苗(非洲绿猴肾细胞) 流行性乙型脑炎减毒活疫苗 序贯免疫 安全性
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乙型脑炎病毒的生物反应器培养及其灭活和纯化 被引量:3
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作者 苑志刚 刘岩 +4 位作者 陈立新 韩慧丽 吴洋 李春艳 杨屹 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第10期1309-1312,共4页
目的利用NBS 14 L篮式生物反应器大规模培养乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV),并对病毒收获液进行灭活和纯化,为乙型脑炎灭活疫苗(Vero细胞)的大批量生产提供参考。方法用NBS 14 L篮式生物反应器,以片状载体FibralCel DIS... 目的利用NBS 14 L篮式生物反应器大规模培养乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV),并对病毒收获液进行灭活和纯化,为乙型脑炎灭活疫苗(Vero细胞)的大批量生产提供参考。方法用NBS 14 L篮式生物反应器,以片状载体FibralCel DISKⅠ为载体,进行Vero细胞高密度培养,分别按0.01、0.1和0.3 MOI接种JEV(P3V2)毒种,灌流培养,收获3批病毒液,检测病毒滴度;分别使用不同浓度的甲醛(100、200、400 ng/ml)于4、25℃和不同浓度的β-丙内酯(β-丙内酯︰病毒液分别为1︰2 000、1︰4 000、1︰8 000)于4℃对病毒收获液进行灭活,取灭活后的病毒液,接种昆明小鼠,验证病毒灭活效果;用截留相对分子质量为10万的超滤器对病毒收获液进行超滤浓缩,用Sepharose 4FF层析柱对病毒浓缩液进行层析纯化。结果共培养3批Vero细胞,平台期密度约为1.6×107个/ml。3批病毒收获液的滴度分别为8.4、8.1和7.9 lgLD50/ml。以甲醛为灭活剂,作用浓度为200 ng/ml,温度为4℃时,作用7 d可完全灭活病毒,且免疫原性合格;以β-丙内酯为灭活剂,作用浓度为1︰4 000,温度为4℃时,作用12 h可完全灭活病毒,且免疫原性合格。3批病毒浓缩液病毒液经Sepharose 4FF层析柱层析纯化后,蛋白去除率达99%以上,抗原回收率在95%以上,Vero细胞蛋白质残留量和DNA残留量均符合《中国药典》三部(2010版)的相关规定。结论成功实现了JEV的大规模生物反应器培养,层析纯化后病毒的抗原回收率较高,为乙型脑炎灭活疫苗(Vero细胞)的大批量生产提供了参考。 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒 灭活疫苗 vero细胞 生物反应器 柱层析
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