Advances in Research of Components,Pharmacological Activity and Clinical Application of Vicatia thibetica de Boiss

Vicatia thibetica de Boiss is a Tibetan medicinal herb and mainly contains chemical components such as flavonoids,β-sitosterol and ferulic acid.It has good pharmacological effects such as anti-inflammatory,analgesic,anti-fatigue,anti-oxidation,anti-aging and enhancing immunity.Based on relevant domestic and foreign literature,this paper comprehensively reviews the main components,pharmacological activity and clinical prescription application of V.thibetica de Boiss,to provide a reference for the in-depth research and comprehensive development and utilization of V.thibetica de Boiss.

西藏凹乳芹多糖的分离纯化、结构表征及抗氧化活性研究

该文以西藏凹乳芹为原料,超声辅助酶法提取多糖,经DEAE-52纤维素和Sephadex G-100凝胶柱分离纯化,得到水溶性西藏凹乳芹多糖(Vicatia thibetica de Boiss polysaccharide,VTP)的纯化组分VTP-1。通过高效凝胶渗透色谱、离子色谱、紫外可见光谱、傅立叶红外光谱、刚果红等实验对其分子质量、单糖组成、空间结构、理化性质和体外抗氧化活性进行研究。结果表明,VTP-1相对分子质量为96.81 kDa,由阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖组成,物质的量之比为5.63∶2.79∶86.36∶3.02∶1.59。VTP-1是以α和β-型糖苷键共同连接的中性杂多糖且无三螺旋结构。VTP-1对DPPH自由基、ABTS阳离子自由基、·OH清除率的半抑制浓度值分别为1.808、1.845、4.634 mg/mL,抑制率均表现为依赖剂量性增加,表明其具有良好的抗氧化活性。综上,该实验对西藏凹乳芹多糖首次开展研究,证明了其体外抗氧化活性,为西藏凹乳芹多糖在功能性食品以及医药行业的应用提供了理论依据。

基于UPLC-Q-TOF-MS技术分析西藏凹乳芹的化学成分及定量分析研究

目的:采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术,对凹乳芹中的主要酚类成分进行分析鉴定,并建立高效液相色谱(HPLC)定量分析方法。方法:采用Waters BEH C_(18),以0.1%甲酸水(A)-乙睛(B)为流动相进行色谱分离,流速0.3 mL/min,检测波长为320 nm,负离子模式下扫描采集数据,快速识别和鉴定凹乳芹中的化学成分。根据鉴定的结果建立HPLC定量分析方法以用于凹乳芹的质量评价。结果:从凹乳芹中鉴定出19个化学成分,并建立了新绿原酸、绿原酸、阿魏酸和异绿原酸A的定量分析方法。结论:该方法为凹乳芹的化学成分质谱裂解规律和质量评价提供了科学依据。

HPLC法同时测定西藏凹乳芹根中4种成分的含量

建立同时测定西藏凹乳芹中伞形花内酯、佛手柑内酯、芹菜素以及阿魏酸等含量的方法。采用SinoChrom ODS-BP柱(250.0 mm×4.6 mm,5μm);检测波长320 nm;柱温30℃;流动相为0.05%磷酸-甲醇,进行梯度洗脱;流速为1 mL/min。结果显示,伞形花内酯、佛手柑内酯在0.0050~0.5000 mg/mL范围内,阿魏酸在0.0100~0.5000 mg/mL范围内,芹菜素在0.0025~0.5000 mg/mL范围内有良好的线性关系,平均回收率分别为102.00%、96.00%、96.58%、104.40%。本试验建立的方法可行性较高,可以用于同时测定西藏凹乳芹中伞形花内酯、佛手柑内酯、芹菜素以及阿魏酸4种成分的含量。

西归的化学成分研究

从云南特产菜蔬西归 (伞形科植物西藏凹乳芹VicatiathibeticadeBoiss 的根 )中分离鉴定了 8个化合物 ,分别为伞形花内酯 (umbelliferone ,1) ,佛手柑内酯 (bergapten ,2 ) ,阿魏酸 (ferulicacid ,3) ,芹菜素 (api genin ,4 ) ,β 谷甾醇 (β sitosterol,5 ) ,胡萝卜甙 (daucosterol,6 ) ,d 甘露醇 (d mannitol,7) ,蔗糖 (sucrose ,8) ,这 8个化合物均为首次从该植物中分离得到。

超声辅助提取西藏凹乳芹总黄酮工艺的优化

目的优化超声辅助提取西藏凹乳芹总黄酮工艺。方法在单因素试验基础上,以液料比、乙醇体积分数、超声功率为影响因素,总黄酮含量为评价指标,Box-Behnken响应面法优化提取工艺。结果最佳条件为液料比5∶1,乙醇体积分数82%,超声功率200 W,总黄酮含量7.74 mg/g。结论该方法合理可行,操作简便,可用于超声辅助提取西藏凹乳芹总黄酮。

西归多糖的提取及含量测定研究

目的:研究白族药西归中多糖的提取和含量测定方法。方法:采用单因素试验对多糖的提取条件进行选择,采用硫酸-苯酚法测定多糖的含量,显色后检测波长为492nm。结果:西归多糖的最佳提取条件为100℃,料液比为1∶30,提取时间3h,提取次数3次。标准曲线方程Y=10.691X-0.082 9,r=0.999 1,葡萄糖含量在10～60μg/ml范围内线性关系良好。平均回收率为99.64%,RSD为0.83%(n=9)。结论:最佳提取条件得率高,测定方法准确,为西归药材的质量控制提供了一个定量方法和参考依据。

西归药理作用的初步实验研究

目的:观察西归(seselopsis)乙醇提取物对小鼠的抗疲劳作用、常压耐缺氧和耐热作用。方法:①小鼠的抗疲劳作用实验:小鼠经西归乙醇提液灌胃7d,剂量3.3、6.6、13.4g.kg-1.d-1,qd,阳性对照组经人参浸膏液灌胃7d,剂量2.0g.kg-1.d-1,qd。然后进行游泳实验,记录小鼠游泳持续时间;②常压耐缺氧和耐热实验:小鼠经西归乙醇提液灌胃5d,剂量6.6g.kg-1.d-1,qd,阳性对照组经人参浸膏液灌胃5d,剂量2.0g.kg-1.d-1,qd。然后进行常压耐缺氧和耐热实验,记录各组小鼠存活时间。结果:与生理盐水组比较,西归组小鼠游泳持续时间明显提高(P<0.01);在缺氧和高温环境中西归组小鼠存活时间明显提高(P<0.01)。这些指标均与人参组相当。结论:西归对小鼠具有与人参类似的抗疲劳作用,且可以明显提高小鼠的耐缺氧和耐热能力。

西归对D-半乳糖致衰老模型小鼠的抗衰老作用

探究西归对D-半乳糖所致衰老模型小鼠的抗衰老作用。将72只雄性昆明种小鼠随机分成正常对照组、衰老模型组、维生素E组、西归高剂量组、西归中剂量组、西归低剂量组,除正常对照组给以外,其余各组均皮下注射80 mg/(kg·d)D-半乳糖建立衰老小鼠模型,同时正常对照组、衰老模型组灌胃等量的1%CMC-Na,维生素E组及西归高剂量、中剂量、低剂量组分别以35 mg/(kg·d)、80.88 g/(kg·d)、40.44 g/(kg·d)、20.22 g/(kg·d)灌胃给药,连续30 d。于末次给药后24 h,测定小鼠血清、肝脏中SOD活性及MDA含量,并记录胸腺、脾脏指数。与衰老模型组比较,维生素E组及西归中剂量、低剂量组能显著增加小鼠胸腺、脾脏指数(P<0.05或P<0.01),并能显著提高小鼠血清、肝脏中SOD活性(P<0.05或P<0.01),显著降低小鼠血清、肝脏中MDA含量(P<0.05或P<0.01)。说明西归有一定的抗衰老作用。

独脚当归阿魏酸和多糖含量的测定

首次对独脚当归中阿魏酸和多糖的含量进行了研究。用70%甲醇回流提取独脚当归中的阿魏酸,采用高效液相色谱法(HPLC)对其含量进行测定;用水提醇沉的方法提取独脚当归中的多糖,使用紫外分光光度计(UV spectrophotometry),采用苯酚-硫酸法对其含量进行测定。结果表明:独脚当归中阿魏酸和多糖的含量分别为86.10μg/g、34.60 mg/g。该测定方法简单、快速、准确,为独脚当归药材的质量控制提供了一个定量方法和参考依据。从独脚当归阿魏酸和多糖含量方面,说明了独脚当归代替当归使用,其药效会明显弱于当归。

西藏凹乳芹根、叶提取物的急性及亚急性毒性研究

对西藏凹乳芹根、叶提取物进行急性毒性及亚急性毒性实验研究,先经预试验确定给药组数和剂量,然后灌胃给药,测试西藏凹乳芹根、叶提取物的半数致死量(LD50)及最大耐受量(MTD);再分别以LD50的1/20和1/40剂量连续灌胃给药做亚急性毒性实验。结果显示,西藏凹乳芹根和叶提取物的LD50分别为154.81和58.27 g/kg,MTD分别为108.28和32.62 g/kg。西藏凹乳芹根、叶提取物的亚急性毒性实验各组的血液生化指标、脏器指数、体重及摄食量与对照组相比均没有明显变化。因此,西藏凹乳芹根、叶提取物属无毒级,长期服用未发现毒性反应,有较高的食用安全性。

西归对小鼠免疫与造血功能的影响

目的:研究西归乙醇提取物对环磷酰胺致免疫抑制小鼠免疫功能与造血功能的影响。方法:通过腹腔注射环磷酰胺建立免疫抑制小鼠模型,每日按各剂量组灌胃给予西归,治疗后,测定小鼠脏器质量、脏器指数、碳粒廓清能力、肝脏SOD和MDA的含量以及外周血血常规和血清溶血素含量。结果:与模型组相比,西归提取物高、中、低剂量组能不同程度增加小鼠脏器质量、脏器指数、提高其碳粒廓清能力、肝脏SOD和MDA的含量以及外周血白细胞、血小板含量和血清溶血素含量。结论:西归乙醇提取物对环磷酰胺处理的免疫低下小鼠具有增强免疫力与提高造血功能的作用。

藏药西藏凹乳芹及近似种HPLC指纹图谱对比研究

目的:建立藏药西藏凹乳芹的HPLC指纹图谱方法,并与其近似种进行对比分析,寻找各品种间成分的共性和差异性。方法:收集主产区具有代表性的26批西藏凹乳芹样品,建立其HPLC指纹图谱方法。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012.130723版)对西藏凹乳芹及其近似种(迷果芹、西藏棱子芹、刺果峨参、羽苞藁本、凹乳芹、峨参、东当归、松潘棱子芹)的指纹图谱进行相似度评价分析。同时以共有峰面积量化数据为变量,采用SIMCA软件对临床常用的3个加哇基原药材(西藏凹乳芹、迷果芹、西藏棱子芹)进行主成分分析(PCA)和偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)。结果:HPLC指纹图谱共标定了西藏凹乳芹17个共有峰,并指认了L-色氨酸、绿原酸、阿魏酸、异绿原酸A、异绿原酸C、洋川芎内酯I及藁本内酯7个共有峰。通过相似度比较分析,西藏凹乳芹与近似种具有明显差异。PCA及PLS-DA结果显示西藏凹乳芹、迷果芹及西藏棱子芹具有显著差异性,并筛选出6个种间差异的标志物。结论:建立的HPLC指纹图谱结合多元统计学分析可鉴别西藏凹乳芹及其近似种,各品种间成分上存在着较大的差异性,所指认的7个共有峰均为其主要有效成分,为其质量标准的制定打下基础。

西藏凹乳芹叶绿体基因组密码子偏好性分析

为揭示影响西藏凹乳芹叶绿体基因组中同义密码子使用偏好和使用模式的因素,本研究利用CUSP在线程序和Codon W 1.4.2、Microsoft Excel、SPSS 19等软件,计算并分析西藏凹乳芹叶绿体基因组53个蛋白质编码基因序列(coding sequences,CDS)的密码子使用偏性指标和碱基组成。结果表明,与G/C相比,同义密码子更偏好使用以A/U结尾的密码子。53条CDS的有效密码子数(effective number of codon,ENC)以及各项偏性指标分析均表明密码子偏好性较弱。GC_(1)和GC_(2)极显著相关,但两者与GC_(3)相关性均不显著,GC_(3)与ENC极显著相关,表明第3位碱基与第一、二位碱基的组成不同,同时GC_(3)会影响密码子的使用偏性。通过中性绘图、ENC-plot、PR2-plot、对应性分析发现自然选择可能在西藏凹乳芹叶绿体基因组同义密码子使用偏性中发挥重要作用,同时也受到突变压力、碱基组成等其他因素的影响;经过筛选得到4个最优密码子AGU、CGU、GGA和UUG。本研究结果为西藏凹乳芹的遗传修饰提供了理论基础,亦有助于丰富其遗传资源。