基于HPLC法及UPLC-MS法测定芫花饮片炮制前后7种成分的含量变化

目的:建立HPLC法及UPLC-MS法测定芫花中银椴苷、木犀草素、芹菜素、绿原酸、羟基芫花素、芫花素及芫花酯甲7种化学成分含量的方法,分析芫花炮制前后化学成分的变化。方法:采用HPLC法,测定银椴苷、木犀草素、芹菜素、绿原酸、羟基芫花素和芫花素6种成分的含量,色谱柱为Agilent Eclipse Plus C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸(B)梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(-1),进样量10μL。同时采用UPLC-MS方法测定芫花酯甲的含量,色谱柱为ACQUITY UPLC HSS T3 C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸(B)梯度洗脱,流速0.3 mL·min-1,柱温35℃,进样量1μL。结果:7种成分的含量由高到低依次为芫花素>绿原酸>银椴苷>芹菜素>羟基芫花素>木犀草素>芫花酯甲。芫花炮制后7种成分的含量均发生一定程度的变化,其中绿原酸成分在炮制后含量有升高有降低,变化不明显;对于银椴苷和芹菜素成分,炮制后含量降低;对于木犀草素、羟基芫花素和芫花素3个成分,炮制后含量升高;对于芫花酯甲成分,炮制后含量降低。结论:该方法简便、灵敏、高效,为考察芫花饮片炮制前后的质量变化提供了技术支持。

芫花叶片和茎段离体再生体系的构建

【目的】芫花(Daphne genkwa Sieb.et Zucc.)是野生名优乡土花木和传统药用植物,具有很高的生态、观赏和药用价值。研究和解决芫花的快速繁殖技术,是对其进行资源保护和开发利用的首要条件。【方法】以芫花健壮植株的叶片和茎段为外植体,研究不同消毒方法对芫花外植体的消毒效果,以及不同激素配比对其愈伤组织的诱导、不定芽增殖和生根的影响,从而构建其高效的离体组织再生体系。【结果】分别用75%乙醇溶液消毒25~35 s,2%NaClO、0.1%HgCl_(2)溶液处理芫花外植体15 min,芫花茎段外植体的污染率为52.7%,芫花叶片外植体的污染率为49.0%。MS+0.8 mg/L 6-BA+0.35 mg/L NAA为芫花茎段外植体最佳初代诱导培养基,愈伤组织诱导率达79.7%,不定芽诱导率达96.4%;MS+0.8 mg/L IBA+0.85 mg/L NAA为芫花叶片外植体最佳初代诱导培养基,愈伤组织诱导率达99.8%,不定芽诱导率达94.5%。MS+0.35 mg/L 6-BA+0.35 mg/L IBA为芫花茎段和叶片最佳继代增殖培养基,增殖系数最高达7.36,平均芽高最高为2.47 cm;MS+0.6 mg/L IBA+1.0 mg/L NAA+0.08 g/L抗坏血酸为芫花茎段外植体最佳生根培养基,平均生根3.67条,根长2.16 cm;MS+0.6 mg/L IBA+0.6 mg/L NAA+0.07 g/L抗坏血酸为芫花叶片外植体最佳生根培养基,平均生根1.33条,根长1.95 cm。【结论】建立了以芫花叶片和茎段为外植体的离体组织再生体系,其愈伤组织诱导率、不定芽诱导率、增殖系数和生根率均较高,有效的解决了芫花的苗木高效繁殖技术难题。

芫花花蕾中一个新的瑞香烷二萜类化合物

为了研究中药芫花(Daphne genkwa)的干燥花蕾化学成分及其抑制皮肤病原真菌活性,采用正相硅胶及半制备HPLC等多种色谱技术对芫花花蕾95%乙醇提取物进行分离纯化得到2个瑞香烷型二萜类化合物,并通过MS、NMR和ECD等波谱技术和文献数据比对鉴定化合物结构,分别为daphgenin A(1)和yuanhuakine B(2),其中化合物1为新的瑞香烷型二萜类化合物。同时,结合MIC法测定该化合物对皮肤真菌犬小孢子菌、红色毛癣菌、须癣毛癣菌和马拉色菌的抑制活性,结果表明化合物1和2对皮肤病原真菌有一定的抑制活性,化合物1对红色毛癣菌和须癣毛癣菌的抑制活性与阳性对照组相当(MIC值4.0μg/mL),化合物2对红色毛癣菌显示显著的抑制活性,其MIC值为2.0μg/mL。

基于物质基础探析十八反中“藻戟遂芫俱战草”配伍禁忌

目的基于物质基础探析十八反中“藻戟遂芫俱战草”配伍禁忌,为完善中药配伍禁忌理论和指导临床应用提供依据。方法通过检索近年来国内外文献,从物质基础角度分析“藻戟遂芫俱战草”甘草组反药组合配伍前后物质基础变化和其对毒效作用的影响。结果海藻、大戟、甘遂、芫花与甘草配伍对反药组合的毒、效成分溶出有影响,配伍后,可能通过促进毒性成分溶出、抑制毒性成分代谢、抑制有效成分溶出、产生新的物质、破坏物质结构等途径产生增毒减效的“毒”或增效减毒的“效”作用。结论甘草组反药组合并非绝对的配伍禁忌,还需继续基于物质基础,结合药物毒理基因组学和代谢组学等方法及高效技术进行研究。

炮制对芫花毒性和药效的影响

芫花为毒性较强的中药，为保证临床用药安全有效，须炮制后供用。本文探讨炮制对芫花毒性和药效的影响。结果表明：醋炙品毒性较小，利尿作用较强。芫花素及其模拟醋炙品均有镇咳祛痰作用，作用强度二者无显著差异。芫花酯甲及其模拟醋炙品１∶１×１０－５～１×１０－６浓度均可引起离体子宫及肠管收缩，但二者作用强度未见明显差异。对未孕大鼠及妊娠子宫作用比较。

芫花条中抗炎活性成分

目的:对芫花条的抗炎活性成分进行研究。方法:采用药理活性追踪下的化学成分分离手段,从芫花条中发现抗炎活性成分。药理实验采用二甲苯致小鼠耳肿胀药理模型。运用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱等方法对芫花乙醇提取物的石油醚及氯仿萃取部分进行化学成分研究,并利用UV、IR、1HNMR、13CNMR、MS等光谱技术鉴定其化学结构。结果:从芫花条中分离得到了19个化合物,分别鉴定为十六烷酸1-甘油酯(1)、β-谷甾醇(2)、咖啡酸正二十烷酯(3)、咖啡酸正二十二烷酯(4)、咖啡酸正十八烷酯(5)、胡萝卜苷(6)、芫花素(7)、木犀草素(8)、(+)落叶松脂醇(9)、芹菜素(10)、山柰酚(11)、瑞香黄烷素B(12)、染料木素(13)、二氢山柰酚(14)、对羟基苯甲酸(15)、槲皮素(16)、丁香苷(17)、丁香醛(18)、对羟基苯甲酸乙酯(19)。结论:化合物1、3～5、7、15、17～19为首次从芫花条中分离得到。芫花条乙醇提物的石油醚萃取部位高剂量组(400mg/kg)、氯仿萃取部位高剂量组(200mg/kg)及咖啡酸正二十二烷酯对二甲苯致小鼠耳肿胀有显著的抑制作用。

甘草与芫花对P-糖蛋白底物罗丹明123经空肠黏膜透过性的影响

目的:观察甘草与芫花合用前后对P-糖蛋白(P-gp)的调控作用,探讨甘草、芫花及其合用影响药物经胃肠道渗透的可能作用机制。方法:将25只Wistar大鼠分为5组,分别给大鼠口服甘草液、芫花液、甘草芫花合煎液、合并液以及生理盐水,1周后用体外扩散池法(ussing chamber)评价各种药液对罗丹明123(R123)和荧光素钠(CF)经空肠黏膜透过性的影响,用荧光分光光度法测定R123和CF的浓度,并分析各组表观渗透系数(Papp)差异。结果:4种药液均具有增加R123经吸收方向的透过性,与生理盐水组比较,P<0.05,且芫花液、合煎液以及合并液还可减少分泌方向的透过(P<0.05,与生理盐水组比较),甘草对分泌方向透过影响无统计学意义。甘草对CF透过无影响,而其他3组药液则可减少CF吸收和分泌方向的透过性。结论:甘草和芫花对P-gp均有抑制作用,但后者作用较强。芫花某些化学成分抑制P-gp,而另一些成分可能使细胞之间紧密连接加强,引起旁细胞途径药物CF渗透的降低。甘草与芫花合用后对P-gp抑制作用增强,可能是甘草对芫花有协同作用,使一些毒性成分吸收增加,这可能是两者配伍产生毒性的机制之一。

芫花的化学成分及药理作用研究进展

目的对芫花的化学成分及其药理作用的研究进展作一综述,提供有关芫花研究的相对较为全面的借鉴资料。方法查阅国内外公开发表的文献28篇,对从芫花中得到的多种化学成分及其药理作用进行论述。结果芫花中主要含有黄酮、香豆素等酚苷类成分及二萜原酸酯类、绿原酸类成分。在镇痛抗炎、抗白血病、抗肿瘤、妊娠中期引产、杀虫等方面有较好疗效。结论为芜花的进一步研究提供了依据。

芫花乙醇粗提物对菜粉蝶幼虫消化酶系的影响

菜粉蝶 (Pierisrapae)幼虫取食芫花粗提物 2 4h后 ,中肠淀粉酶、蛋白酶、酯酶、转化酶的活力增强 ,其中肠组织中淀粉酶及肠腔中蛋白酶活力增强的程度达显著水平 ;粗提物使海藻糖酶活力下降 ,差异达显著水平。石蜡切片表明 ,芫花引起细胞核向肠腔内侧移动 ,围食膜逐渐消失 ,肠壁细胞中的空泡显著增多、增大 ,肠组织结构变得没有层次性。电镜观察表明 ,芫花粗提物处理 2 4h后 ,引起细胞内粗糙内质网上的核糖体数量明显增多 ,线粒体内嵴开始模糊、肿胀。因而认为 ,粗提物刺激肠组织超量分泌消化酶 ,加之抑食作用使取食量减少 ,导致体重减轻 。

芫花花蕾化学成分的分离与鉴定

目的对中药生品芫花(Daphne genkwaSieb.et Zucc.)花蕾中的化学成分进行研究。方法运用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱、ODS柱色谱、制备HPLC、重结晶等分离手段进行化学成分的分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定其结构。结果从芫花花蕾体积分数95%乙醇提取物中分离得到10个化合物。分别鉴定为8-甲氧基山奈酚(8-methoxykaempferol,1)、柚皮素(naringenin,2)、芫花素(genkwanin,3)、5,4′-二羟基-7,3′-二甲氧基黄酮(velutin,4)、芫花素-5-O-β-D-葡萄糖苷(genkwanin-5-O-β-D-glucoside,5)、芫花素-5-O-β-D-茜黄樱草糖苷(genkwanin-O-β-D-pri-meveroside,6)、(-)-松脂素((-)-pinoresinol,7)、(-)-落叶松脂素((-)-lariciresinol,8)、(-)-双氢芝麻脂素((-)-dihydrosesamin,9)、瑞香烷型二萜酯-7(daphnane-type diterpene ester-7,10)。结论化合物1为首次从瑞香属植物中分离得到,化合物2,9,10为首次从芫花中分离得到。

芫花杀虫活性成分的结构鉴定

芫花乙醇粗提物经石油醚及氯仿萃取 ,萃取物经柱层析、薄层层析和生测后分别获得较纯组分 .以这两种组分进行结构鉴定及返回生物测定 (试虫卫矛尺蠖 Abraxes miranda) ,结果证明 ,β-谷甾醇是芫花中具有强烈拒食活性的组分之一 .这两个组分中均有雪松醇 ,其杀虫活性有待于进一步研究证实 .

芫花中芫花素的提取工艺与杀虫试验

The effective insecticide component of natural growth Daphne genkwa Sieb.et Zucc.was extracted.The obtained material was preliminarily proved to have a favorable insecticidal effect by nonstandard insecticidal experiments,which used Chinese blister beetle.The effective component was determined as 5,4’-dihydroxy-7-methoxylflavone by UV,NMR and chemical methods.

芫花化学成分的分离与鉴定

目的对芫花(Daphne genkwa Sieb.et Zucc.)的化学成分进行研究。方法采用减压硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、聚酰胺柱色谱、开放ODS柱色谱及制备高效液相色谱等方法对芫花干燥花蕾体积分数为95%的乙醇溶液提取物进行提取分离,通过理化常数测定、波谱数据分析等方法对化合物进行结构鉴定。结果共分离得到8个化合物,分别鉴定为(-)-杜仲树脂酚[(-)-medioresinol,1]、(-)-丁香树脂醇[(-)-syringaresinol,2]、(-)-松脂醇[(-)-pinoresinol,3]、3',4',7-三甲氧基木犀草素(luteolin-3',4',7-trimethyl ether,4)、6,8-二羟基山柰酚(6,8-dihydroxykaempferol,5)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(kaempferol-3-O-β-D-glucoside,6)、椴苷(tiliroside,7)和椴苷-7-O-β-D-葡萄糖苷(tiliroside-7-O-β-D-glucoside,8)。结论化合物1、4、5、8为首次从瑞香属植物中分离得到。

瑞香科植物芫花杀虫有效成分研究

通过水煮沸、热苯萃取、95 %乙醇重结晶方法从野生植物芫花中提取到一种黄色结晶 ,生测实验证明该物质具有良好的杀虫效果。使用柱层析法对这种物质进行再提纯 ,进而通过UV、NMR及化学方法 ,证明这种黄色结晶为 5 ,4′-二羟基 - 7-甲氧基黄酮 (芫花素 )

芫花叶中的新木脂素内酯

前文已从芫花Daphne genkwa Sieb.et Zucc.的干燥叶中分离鉴定了七个黄酮类化合物,本文报道晶ⅩⅤ的化学结构。晶ⅩⅤ,mp118～119.5℃,峰匹配法测定其分子式为C_(20)H_(16)O_7(M^+,368.08631),[α]_D-64.8°。红外光谱中1760cm^(-1)吸收峰和核磁共振碳谱中δ176.

芫花醋炙品中黄酮类成分的分离与鉴定

目的更好地开发利用芫花（Daphne genkwa Sieb．et Zucc）药用植物资源。方法用硅胶、羟丙基葡聚糖凝胶LH-20柱色谱、HPLC分离纯化；根据理化性质和NMR谱数据鉴定其结构。结果从醋炙芫花的乙醇提取物中分离得到9个黄酮类化合物，分别鉴定为芫花素（genkwanin，1）、3′-羟基芫花素（3′-hydroxy-genkwanin，2）、芹菜素（apigenin，3）、洋芹素-4′，7-二甲醚（4′，7-dimethylapigenin，4）、椴苷（kaempferol-3-β-D-（6-O-trans-p-coumaroyl）glucopyranoside，5）、4′，5-二羟基-3′，7-二甲氧基黄酮（4′，5-dihydroxy--3，7-dimethoxyflavone，6）、4′，5，7-三甲氧基黄酮（4′，5，7-trimethoxyflavone，7）、山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷（kaempferol-3-O-β-D-glucoside，8）、3′，4′，5，7-四甲氧基黄酮（3′，4′，5，7-tetramethoxyflavone，9）。结论化合物1～9均为首次从芫花醋炙品中分离得到，化合物7、8为首次从瑞香属植物中分离得到，化合物9为首次从芫花中分离得到。

芫花活性物质对昆虫取食和生长的影响

室内生测表明不同浓度芫花乙醇粗提物 (YAE)处理叶饲养卫矛尺蠖 2 4 h后 ,导致试虫食量 减少 ,体重下降 ,且浓度与效果呈正相关。如 1 0 %芫花处理组食叶量比 CK减少 53.78% (重量计 ) ,虫重比原来下降 1 4.81 % ,而 CK体重增加 1 9.51 %。β-谷甾醇对试虫食叶量影响虽不明显 ,但1 .0 % ,0 .5% ,0 .1 %处理仍可使试虫体重显著下降。 YAE的拒食中浓度为 2 .76% ,β-谷甾醇为0 .34%。 YAE及β-谷甾醇对

芫花花蕾中甾醇类化合物的分离与鉴定

目的对瑞香科瑞香属植物芫花（Daphne genkwa Sieb.et Zucc.）花蕾中的甾醇类化学成分进行分离与结构鉴定。方法运用硅胶﹑Sephadex LH-20柱色谱﹑重结晶等分离手段进行甾醇类化合物的分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定其化学结构。结果从芫花花蕾的体积分数95%乙醇提取物中分离得到6个化合物,分别鉴定为：豆甾-5-烯-3β,7α-二醇（stigmasta-5-ene-3β,7α-diol,1）、豆甾-5-烯-3β,7β-二醇（stigmasta-5-ene-3β,7β-diol,2）、豆甾-4-烯-3β,6β-二醇（stigmasta-4-ene-3β,6β-diol,3）、7-ketositosterol（3β-hydroxysitost-5-ene-7-one,4）、过氧化麦角固醇（ergosterol peroxide,5）和β谷甾醇-3β-吡喃葡萄糖苷-6＇-O-棕榈酸酯（β-sitosteryl-3β-glucopyranoside-6＇-O-palmitate,6）。结论化合物2~6为首次从瑞香属植物中分离得到,化合物1为首次从芫花植物中分离得到。

芫花枝条化学成分的研究

本文研究了芫花(Daphne genkwa Sieb.et Zucc)枝条的化学成分.芫花枝条的95%乙醇提取物分成石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取部位,经反复硅胶柱层析分离得到15个化合物。采用理化及波谱分析方法,分别鉴定为十八碳酸单甘油酯(1)、邻苯二甲酸二丁酯(2)、棕榈酸(3)、β-谷甾醇(4)、咖啡酸十八烷酯(5)、山奈酚(6)、西瑞香素(7)、西瑞香内酯(8)、木樨草素(9)、落叶松脂醇(10)、β-胡萝卜苷(11)、木犀草素7-O-β-D-葡萄糖苷(12)、刺五加苷B(13)、刺五加苷B1(14)、松脂醇二葡萄糖苷(15),其中7个化合物(1、2、3、5、13、14、15)为首次从该植物中分离得到.

芫花条中香豆素类成分研究

目的:对芫花条的化学成分进行研究。方法:采用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱等方法对芫花乙醇提取物的氯仿萃取部分进行化学成分研究,并利用UV,IR,~1H-NMR,^(13)C-NMR,MS等光谱技术鉴定其化学结构。结果:从芫花条中分离得到了6个香豆素类化合物,经鉴定为伞形花内酯(1)、双白瑞香素(2)、瑞香素(3)、edgeworthin(4)、结香素(5)、伞形花内酯7-O-β-D-葡萄糖苷(6)。结论:化合物3～6为首次从芫花条中分得的香豆素类化合物。