VITEK系统筛选耐甲氧西林葡萄球菌的可靠性

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）与耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌fMRCNS）是目前导致医院感染的重要病原菌。该两类葡萄球菌对常用抗菌药物大多耐药。惟有对万古霉素敏感。因此临床实验室必须对该类菌株认真筛选和尽快确认。我们从2003年起．用VITEK-32的GPS-109药敏卡做药敏试验（以下简称试卡法）的同时，采用美国国家临床实验室标准化委员会（NCCLs）推荐的6μg/ml苯唑西林＋4％NaCl盐平板（以下简称盐平板法）进行葡萄球菌甲氧西林耐药（MRS）的表型筛选试验。以此探讨试卡法筛选MR的可靠性以及与盐平板法的符合率。

VITEK药敏系统与Kirby-Bauer纸片法药敏结果的评价

目的 通过 VITEK药敏系统与 Kirby- Bauer纸片法药敏结果符合率的比较 ,评价 VITEK药敏系统的可靠性。方法 将 4 5 7株临床分离的菌株分别采用 Vitek- 32全自动微生物分析仪进行药敏测试 ,同时用 Kirby- Bauer纸片法作为平行对照。结果 2 2 5株肠杆菌科细菌对头孢他啶、头孢噻肟、氨曲南、头孢唑林、庆大霉素、亚胺培南、左氧氟沙星的符合率高达 94 .3% - 99.6 % ;在 12 3株非发酵菌对环丙沙星、庆大霉素、亚胺培南、左氧氟沙星的药敏试验中 ,两法符合率超过 95 .0 % ;10 9株葡萄球菌对环丙沙星、克林霉素、庆大霉素、青霉素、四环素、万古霉素的药敏试验 ,两法的符合率高达 93.6 % - 10 0 .0 % ,但对苯唑西林和复方新诺明 ,两法的符合率低于 89.0 %。结论 VITEK药敏系统较少受人为因素的影响 ,与 K- B法有极好的关联且无 K- B法复方新诺明假耐药问题。方法简单、快速 ,适用于临床微生物室 ,可作为实验室常规药敏试验方法。

食品中沙门菌污染状况调查及VITEK微生物分析系统的应用效果评价

目的了解肇庆市食品中沙门菌的污染状况,建立食品中沙门菌的快速检验方法。方法采用国标法(GB/T4789.4)对样品进行沙门菌检测,并应用VITEK32全自动微生物分析系统对分离的可疑菌株进行鉴定。结果监测4类120份样品,共检出沙门菌9株,检出率为7.5%,其中生肉类沙门菌检出率为20.0%,蔬菜类沙门菌检出率为5.0%,熟肉制品及水产品中均未检出沙门菌,VITEK与常规法鉴定结果相一致。结论肇庆市生肉制品的沙门菌污染情况较严重,优势菌型为德尔卑沙门菌。VITEK全自动微生物分析系统可用于食品中沙门菌的快速检测。

食品中沙门氏菌污染状况分析及VITEK微生物鉴定系统的应用

多年来,沙门氏菌一直是全球范围内普遍存在的引起人类食源性疾病的肠道病原菌,在国内外报道的食物中毒事件中,沙门氏菌食物中毒占首位[1]。为了解黑龙江省居民消费食品中沙门氏菌的污染状况,查明沙门氏菌污染的重点食品、分布特点及主要血清型,为我省进一步开展食品安全性研究和预防食源性沙门氏菌病的发生提供科学依据，我们于2010年选择了主要包括哈尔滨市、齐齐哈尔市、牡丹江市、佳木斯市、尚志县和勃利县作为开展食品中沙门氏菌污染监测哨点，对7大类12种食品进行了监测，并用VITEK全自动微生物分析系统进行快速鉴定。现将监测结果报告如下：

Vitek32自动化微生物分析系统检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌方法的评估

为了评估自动化系统检测耐药性的可靠性,研究以纸片法为参考方法采用头孢西丁纸片法和Vitek32自动化微生物分析系统对95株凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS)进行苯唑西林敏感性的测定。结果表明:两种方法的一致性达84.2%;Vitek32自动化微生物分析系统可在8 h之内检测出耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCoNS),其敏感性高达100%;对于检测MIC值处于耐药折点的某些种的CoNS,Vitek32自动化微生物分析系统的特异性稍低,为79.9%。说明Vitek32自动化微生物分析系统自动化系统具有一定的可靠性,适合于在临床实验室推广使用。

应用VITEK全自动微生物鉴定系统检测婴儿配方奶粉中阪崎肠杆菌

基于对婴儿配方奶粉中微生物安全性问题的关注,本实验对婴儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的检测方法进行了初步研究。应用VITEK32全自动微生物鉴定系统对人工污染的婴儿配方奶粉中的阪崎肠杆菌进行检测,获得与美国食品药品管理局(FDA)推荐的API 20E生化鉴定方法一致的结果。

用VITEK全自动细菌分析系统检测产超广谱β-内酰胺酶细菌

[目的 ]了解肠杆菌科产超广谱 β-内酰胺酶细菌的分布情况、耐药特征 ,指导临床用药。 [方法 ]用 VITEK- 32全自动细菌分析系统以及 GNS- 5 0 6药敏检测卡检测。 [结果 ]30 7株肠杆菌科细菌以大肠埃希菌 (4 1.0 % )、肺炎克雷伯菌(2 4.1% )和阴沟肠杆菌 (11.7% )为主 ,产 ESBL s的只有 39株大肠埃希菌和 2 1株肺炎克雷伯菌。产 ESBL s菌对所有青霉素类和头孢菌素类抗生素耐药 ,对氨基糖甙类、喹诺酮类、磺胺类交叉耐药性较高 ,耐药性分别为 5 3.8%～ 10 0 %、85 .7%～ 10 0 %和 92 .3%～ 95 .2 %。 [结论 ]该分析系统能快速地检测肠杆菌科中的产 ESBL s菌 ,可为指导临床医生用药提供依据。

基于16S rDNA序列、MALDI-TOF-MS和VITEK的沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的鉴定

沙门氏菌和金黄色葡萄球菌广泛存在于食品及环境中,对食品安全造成一定的威胁。在食源性致病菌检测过程中,选择合适的方法不仅可以缩短时间,节省人力物力,还能更好地溯源。选取210株沙门氏菌和18株金黄色葡萄球菌,使用16S rDNA序列测定、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和VITEK全自动细菌鉴定系统对其鉴定,使用R软件包(v3.6.1)对鉴定结果进行统计和相关性分析,比较3种方法的鉴定水平和效率。结果表明:3种方法均可将210株沙门氏菌(100.0%)鉴定到属水平;16S rDNA序列测定方法可将18株(100.0%)金黄色葡萄球菌鉴定到属水平,可将其中15株(83.3%)菌鉴定到种水平;MALDI-TOF-MS和VITEK可将18株金黄色葡萄球菌(100.0%)鉴定到种水平。除16S rDNA序列测定方法外,其余2种方法对金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的鉴定水平相同,而MALDI-TOF-MS鉴定所需时间最短、效率最高。

高原地区两种微生物鉴定系统对临床常见病原菌鉴定的一致性分析

目的比较MicroTyper MS微生物快速鉴定基质辅助激光解析飞行时间质谱和VITEK 2Compact全自动微生物分析系统对细菌的鉴定能力。方法950株临床分离的菌株,均采用MicroTyper MS和VITEK 2 Compact同时进行鉴定,以VITEK 2 Compact的结果为准,分析MicroTyper MS与VITEK 2Compact结果的一致性。结果同时鉴定950株细菌,与VITEK 2 Compact鉴定结果相比,MicroTyper MS可将841株(88.5%)鉴定至种,可将899株(94.6%)鉴定至属。鉴定不一致51株(5.4%)。MicroTyper MS与VITEK 2 Compact相比,鉴定至种的一致率为88.5%,鉴定至属的一致率为94.6%。695株革兰阴性细菌中,MicroTyper MS可将611株(87.9%)鉴定至种,可将649株(93.4%)鉴定至属。鉴定不一致46株(6.6%)。247株革兰阳性球菌中,MicroTyper MS可将222株(89.9%)鉴定至种,可将242株(98.0%)鉴定至属。鉴定不一致5株(2.0%)。8株酵母菌中,MicroTyper MS可将8株(100.0%)鉴定至种,鉴定不一致0株。结论MicroTyper MS与VITEK 2 Compact对临床常见细菌的鉴定结果具有较高的一致性,但MicroTyper MS相对VITEK 2 Compact来说具有耗时短、成本低等优点,提高了鉴定效率,为临床诊疗带来了便利。

对饮用水中疑似铜绿假单胞菌的复核鉴定

铜绿假单胞菌是一种不允许在饮用水中检出的条件致病菌,本文对10株分离自饮用水样品的菌株进行了菌落形态观察及生化反应确证,并使用HK-MID细菌鉴定系统、VITEK 2全自动微生物鉴定系统和16S rRNA基因测序等多种手段进行进一步鉴定。鉴定结果表明,部分菌株并非铜绿假单胞菌,但均为条件致病菌,从食品安全的角度考虑,不应出现在饮用水、矿泉水中。本文除了探讨以往的研究普遍关注的检验方法的准确性与时效性,还对这些菌株进行了分析,为相关管理部门进行质量监督、制定标准提供了研究依据和借鉴。

北京地区健康人大肠埃希菌耐药性与药敏方法评价

[目的]了解北京地区健康人大肠埃希菌耐药性,评价Vitek鉴定/药敏系统的可靠性。[方法]Vitek系统和K-B法测150株大肠埃希菌耐药性及产ESBLs率,平行试验比较两方法符合率。[结果]四环素耐药率最高63.3%,多重耐药率(耐受3种以上药物)53.3%,ESBLs阳性率3.3%。细菌多重耐药情况与年龄分布无关,两方法符合率较高。[结论]健康人大肠埃希菌对常用抗菌药物存在普遍抗性,应开展持续监测。

临床分离金黄色葡萄球菌对20种抗菌药物耐药性及耐药机制分析

目的 了解临床分离金黄色葡萄球菌对常用抗菌药物耐药性及产生机制。方法 4 2株金黄色葡萄球菌先用PCR检测mecA基因 ,再用VITEK2高级专家系统 (AES)检测并分析对 2 0种抗菌药物耐药性及耐药机制。结果 19株金黄色葡萄球菌mecA基因检测阳性 ,2 3株阴性 ;VITEK2AES耐药机制分析 ,对 β 内酰胺类耐药涉及青霉素结合蛋白 (PBP)改变、获得性青霉素酶 ;氨基糖苷类耐药包括磷酸转移酶 (2”) +乙酰转移酶 (6 ')双功能酶、磷酸转移酶 (3') Ⅲ、腺苷转移酶 (4') (4”) ;大环内酯类 /林可霉胺类 /链阳菌素B(MLSB)与MLSB固有耐药或诱导耐药有关 ;对四环素类耐药包括TETK蛋白导致药物外排和 (或 )TETM蛋白导致靶位改变 ;利福霉素类耐药主要为高水平耐药 ;MRSA对喹诺酮类均耐药 ,而MSSA除 1株外均敏感 ;其余抗菌药物如呋喃妥因、糖肽类(万古霉素、替考拉宁 )、复方新诺明、夫西地酸等均敏感。结论 临床分离金黄色葡萄球菌 ,尤其是MRSA具有多种耐药机制 ,因而对常用抗菌药物产生多重耐药性 ,VITEK2AES能可靠推测分析耐药菌所具有的耐药机制 ,将为临床抗感染治疗提供更加准确的依据。

金黄色葡萄球菌的3种凝固酶鉴定方法研究比较

目的评价3种鉴定金黄色葡萄球菌方法的敏感度和特异性。方法临床分离的651株革兰阳性球菌,经革兰染色、触酶试验、VITEK2鉴定后,对试管法、玻片法、乳胶血凝法(slidexstaph-kit),鉴定葡萄球菌3种实验方法进行评价。3种实验方法结果不一致的菌株进行重复试验。用VITEK2作为"金标准",比较其他3种凝固酶方法的敏感度、特异性、准确性。结果试管法1株菌鉴定假阳性;玻片法有8株菌鉴定假阳性,乳胶血凝法有株4假阳性。结论试管法敏感度和特异性最好,其次是乳胶血凝法,玻片法的假阳性较高。

临床评价VITEK2高级专家系统对常见细菌β内酰胺耐药表型的检测和分析

目的 评价VITEK2高级专家系统 (AES)对临床常见细菌 β内酰胺耐药表型的检测和分析。方法 用VITEK2AES检测并分析已知耐药表型的葡萄球菌、大肠埃希菌、克雷伯菌和阴沟肠杆菌共 12 4株。结果 VITEK2AES耐甲氧西林葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌产超广谱 β内酰胺酶 [ESBLs(TEM型、SHV型或CTX M型 ) ]、阴沟肠杆菌产诱导型AmpC酶或高产AmpC酶、ESBLs均能正确检测。对 9株同时产ESBLs和高产AmpC酶阴沟肠杆菌检测 ,其中 1株正确 ,其余 8株只报告高产AmpC酶。结论 VITEK2AES能够对临床菌株中重要的 β内酰胺耐药表型准确检测 ,并能根据所测耐药表型对某些影响临床抗菌药物治疗的药敏结果进行修订。对阴沟肠杆菌某些耐药表型的分析、判断有待进一步改进。

温暖月份零售带壳牡蛎中副溶血性弧菌的定量研究

为了解温暖月份零售带壳牡蛎中副溶血性弧菌 (VP)的污染情况 ,2 0 0 3年 4～ 8月在福建省福州和厦门两地共收集带壳牡蛎 113份 ,样品分别来自水产品批发市场 (18% ) ,零售市场 (4 6 % )和饭店 (36 % )。采用Vitek鉴定系统和最可能数法进行VP的定量分析。结果显示 ,带壳牡蛎中VP密度的几何均数为 6 0MPN 10 0g ,4 1 6 %的样品VP密度低于 30MPN 10 0g的最低检出限 ,仅厦门2个样品菌量超过 2 4 0 0 0MPN 10 0g。两个地区、不同采样点和不同月份之间样品VP密度的几何均数差别均有统计学意义 (P <0 0 1)。厦门样品污染菌量高于福州 ;批发市场样品菌量最高 ;5月份样品菌量最高 ,为 14 9MPN 10 0g ,而 6～ 8月样品菌量约为 4 0MPN 10 0g。零售环节带壳牡蛎VP的检出率较高。未来应加强对生食海产品中VP污染状况的监测。

铜绿假单胞菌对22种抗生素耐药性的差异

目的 探讨不同标本分离铜绿假单胞菌 (PA)对 2 2种抗生素耐药性的差异。方法 用 AMS法检测 16 2株自痰液、伤口、粪便、尿液分离 PA的耐药性。结果 PA的总耐药率 :头孢呋辛钠 (FUR)、头孢呋辛酯 (CXM)、头孢他啶 (CAZ)为 3.1%～ 4.3%,阿米卡星 (AMK)、羧苄西林 (CB)、环丙沙星 (CIP)、头孢哌酮 (CFP)为 6 .8%～ 9.9%,氨曲南 (ATM)、哌拉西林 (PIP)、头孢噻肟 (CTX)、替卡西林 (TIC)、妥布霉素 (TOB)为 13.6 %～ 19.8%,替卡西林 /克拉维酸 (TIM)、亚胺培南 (IPM)、美洛西林 (MEZ)、庆大霉素 (GEN)为 2 3.5 %～ 41.4%,头孢唑林(KZ)、头孢西丁 (FOX)、四环素 (TET)、头孢噻吩 (CEP)、氨苄西林 (AMP)、呋喃妥因 (NIT)为 94.4%～ 96 .9%。头孢呋辛酯 (CXM)等 17种抗生素对不同部位分离 PA的耐药性差异无显著性 (P<0 .0 5 0～ 0 .90 0 ) ,阿米卡星(AMK)等 5种抗生素对部分标本分离 PA的耐药性差异有显著性 (P<0 .0 5 0～ 0 .0 0 5 )。结论 耐药率最高的抗生素是头孢唑林 (KZ)、头孢西丁 (FOX)、四环素 (TET)、头孢噻吩 (CEP)、氨苄西林 (AMP)、呋喃妥因 (NIT) ,对不同标本分离菌的耐药性差异有显著性的抗生素是阿米卡星 (AMK)、妥布霉素 (TOB)、亚胺培南 (IPM)、美洛西林 (MEZ)、庆大霉素 (GEN)。

微生物洁净室环境菌库建立方法探讨

目的:本研究通过对洁净实验室环境菌的收集及鉴定,为超标结果调查分析、药品检出菌溯源分析及洁净环境菌数据库的建立与分析提供数据支持。方法:在洁净实验室、操作人员等监控点采集沉降菌、浮游菌及表面微生物,采用VITEK2 compact鉴定系统进行鉴定分型。结果:经过对不同洁净级别和微生物种类的分析,共收集获得环境菌53株,其中芽孢杆菌属、库克氏菌属和葡萄球菌属细菌分别占全部分离株的17.0%、15.1%和13.2%。结论:基本了解洁净室环境微生物构成,初步建立洁净室环境微生物数据库。建议洁净实验室规范人员更衣进场程序和洁净区行为,制定有效的清洁消毒程序,加强环境监控,定期分析监控数据,研究数据变化趋势,出现异常数据,应及时采取措施,使洁净区处于良好的受控状态。

金黄色葡萄球菌对几种常见抗生素耐药机制分析

目的:研究金黄色葡萄球菌对16种常用抗生素的耐药性及耐药机制。方法:用微生物分析仪VITEK 2-compact(法国梅里埃公司)对珠海市中西医结合医院住院患者送检标本中分离的50株金黄色葡萄球菌进行鉴定及药敏实验,然后再用头孢西丁纸片(OXOID公司)进行筛选实验,采用VITEK2 Advanced Expert System(AES)检测和分析16种抗生素的耐药机制。结果:50株金黄色葡萄球菌中有18株头孢西丁筛选试验阳性,32株头抱西丁敏感,与VlTEK2-compact检测结果一致;AES耐药机制分析结果:β-内酰胺类耐药分获得性青霉素酶和青霉素结合蛋白(PBP)改变两种类型;氨基糖苷类耐药机制为产生药物修饰酶包括:磷酸转移酶(2")+乙酰转移酶(6´)双功能酶(APH(2")+AAC(6´)和磷酸转移酶(3´)-Ⅲ、腺苷转移酶(4´)(4")(APH(3´)-Ⅲ、ANT(4´)(4"));大环内酯类、林可霉素、链阳霉素B(MLSB)的耐药机制有固有耐药和诱导耐药两种类型;四环素的耐药机制分为基因介导产生膜蛋白(TETK)主动排出抗生素和(TETM)蛋白表达阻遏蛋白;利福平主要表现为高水平的耐药性;38.9%耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcusaureus,MRSA)对喹诺酮类药物耐药,而甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(methicillin-sensitive Staphylococcus aureusaureus,MSSA)只有3.1%耐药;金黄色葡萄球菌对呋喃妥因,利奈唑胺,万古霉素,替考拉宁,奎奴普丁/达福普汀耐药率均为零。结论:金黄色葡萄球菌具有复杂的多重耐药机制,VITEK2 AES可以可靠地分析耐药细菌的耐药机制,为临床合理使用抗生素提供准确的依据。