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Vitreoscilla hemoglobin gene(vgb)improves lutein production in Chlorella vulgaris 被引量:5
1
作者 马瑞娟 林祥志 《Chinese Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2014年第2期390-396,共7页
Vitreoscilla hemoglobin is an oxygen-binding protein that promotes oxygen delivery and reduces oxygen consumption under low oxygen conditions to increase the effi ciency of cell respiration and metabolism.In this stud... Vitreoscilla hemoglobin is an oxygen-binding protein that promotes oxygen delivery and reduces oxygen consumption under low oxygen conditions to increase the effi ciency of cell respiration and metabolism.In this study,we introduced a Vitreoscilla hemoglobin gene(vgb)into Chlorella vulgaris by Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation(ATMT).PCR analysis confi rmed that the vgb gene was successfully integrated into the Chlorella vulgaris genome.Analysis of biomass obtained in shake fl asks revealed transformant biomass concentrations as high as 3.28 g/L,which was 38.81% higher than that of the wild-type strain.Lutein content of transformants also increased slightly.Further experiments recovered a maximum lutein yield of 2.91 mg/L from the transformants,which was 36.77% higher than that of the wild-type strain.The above results suggest that integrated expression of the vgb gene may improve cell growth and lutein yield in Chlorella vulgaris,with applications to lutein production from Chlorella during fermentation. 展开更多
关键词 Chlorella vulgaris vitreoscilla hemoglobin gene (vgb) genetic engineering LUTEIN
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Simultaneous Expression of Vitreoscilla Globin Gene and Lytic Genes of Phage A in a Novel Recombinant Escherichia Coli Used for Production of PHB 被引量:2
2
作者 于慧敏 史悦 +2 位作者 尹进 沈忠耀 杨胜利 《Chinese Journal of Chemical Engineering》 SCIE EI CAS CSCD 2001年第4期407-411,共5页
Exogenous Vitreoscilla globin gene (vgb), lytic genes of phage A with S amber mutation (S-RRz) and poly(B-hydroxybutyrate) (PHB) biosynthetic genes (phbCAB) were cloned into a same Escherichia coli cell, simultaneousl... Exogenous Vitreoscilla globin gene (vgb), lytic genes of phage A with S amber mutation (S-RRz) and poly(B-hydroxybutyrate) (PHB) biosynthetic genes (phbCAB) were cloned into a same Escherichia coli cell, simultaneously or respectively. Six novel strains containing phbCAB and vgb with or without lytic genes were constructed. Strain VG1 (pTU14), in which vgb, phbCAB and S-RRz could all be successfully expressed, has superior characteristics in cell growth and PHB accumulation, while the results of strains containing vgb and phbCAB without S- RRz were not better than that of strains harbored ph&CAB only. The simultaneous expression of vgb and S- RRz in the recombinant VG1 (pTU14) showed a great potential for low-cost production of PHB. 展开更多
关键词 vitreoscilla hemoglobin lytic genes of phage λ poly (β-hydroxybutyrate)
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含血红蛋白基因(VHb)的铜绿假单胞菌重组菌的构建及鼠李糖脂表达条件的研究 被引量:3
3
作者 冯蕾 谭之京 +5 位作者 胡鸢雷 杨新平 陈竞 秦新政 唐娴 林忠平 《工业微生物》 CAS CSCD 2012年第3期78-82,共5页
将RDR(ribonucleotide diphosphate reductase)启动子驱动下的透明颤菌(Vitreoscillasp.)血红蛋白(Vitreoscilla hernoglobin,VHb)基因的表达载体pSETRDR-VHb转入铜绿假单胞(Pseudamanas aeruginosa)s301菌株中。并对其中阳... 将RDR(ribonucleotide diphosphate reductase)启动子驱动下的透明颤菌(Vitreoscillasp.)血红蛋白(Vitreoscilla hernoglobin,VHb)基因的表达载体pSETRDR-VHb转入铜绿假单胞(Pseudamanas aeruginosa)s301菌株中。并对其中阳性转化子AY26菌株进行了鼠李糖脂表达条件的研究。正交实验k(4。)优化培养基,最佳组分为:硫酸镁0.075%、硝酸钠0.5%、清油3mUL、酒石酸钠0.4%。在限碳培养条件下,转化子SY26鼠李糖脂产量达到12.9dL,比对照菌株S301(8.4g/L)提高150%,5L发酵罐放大实验验证,重组菌AY26的表面活性剂产量达到33.12g/L。 展开更多
关键词 透明颤菌 血红蛋白基因 铜绿假单胞菌 表面活性剂 鼠李糖脂
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高产莫能菌素肉桂地链霉菌的透明颤菌vgb基因异源表达 被引量:1
4
作者 李欣颖 张善飞 +2 位作者 刘旻炜 黄子瑄 孙付保 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1-9,共9页
肉桂地链霉菌(Streptomyces cinnamonensis)发酵产生的聚醚类抗生素莫能菌素(Monensin)因其环保且高效的特性而被广泛应用在医药、农业等领域,但莫能菌素实际生产中普遍的低氧条件严格限制了肉桂地链霉菌发酵莫能菌素水平。该文在前期... 肉桂地链霉菌(Streptomyces cinnamonensis)发酵产生的聚醚类抗生素莫能菌素(Monensin)因其环保且高效的特性而被广泛应用在医药、农业等领域,但莫能菌素实际生产中普遍的低氧条件严格限制了肉桂地链霉菌发酵莫能菌素水平。该文在前期整合表达莫能菌素生物合成基因簇中途径特异性正向调控基因(monH、monRⅡ)基础上,尝试通过异源整合表达透明颤菌血红蛋白基因vgb,以期通过改善菌株摄取溶氧能力来提高莫能菌素产量。结果显示,在40 mmol/L Ca^(2+)、供受体菌比例100∶1和培养18 h覆盖抗生素条件下,接合转移效率提高3倍;成功将基因vgb与莫能菌素生物合成途径特异性调控基因monH/monRⅡ进行串联整合,得到工程菌2110-monH-vgb和2110-monH-monRⅡ-vgb,其摇瓶生物量在高限氧条件下稍有提高(6%),但发酵效价分别较异源表达前提高18.0%和21.3%;后者在5 L罐水平生物量较异源表达前略有提高,发酵效价高达11.5 kU/mL,较出发菌提高47.3%。通过优化遗传操作系统并用于肉桂地链霉菌发酵产莫能菌素基因工程改造,成功获得有效提高莫能菌素发酵效价的vgb异源串联整合表达菌,为其后续的工业应用奠定基础。 展开更多
关键词 肉桂地链霉菌 莫能菌素 接合转移 异源表达 透明颤菌血红蛋白基因vgb
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透明颤菌血红蛋白在肉桂地链霉菌中的表达对其细胞生长及抗生素合成的影响 被引量:17
5
作者 文莹 宋渊 李季伦 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期24-28,共5页
肉桂地链霉菌 (S .cinnamonensis)是莫能菌素 (Monensin)的产生菌。大肠杆菌 链霉菌穿梭表达载体pHZ12 5 2中的透明颤菌血红蛋白基因 (vhb)位于硫链丝菌素诱导启动子PtipA之下 ,它在肉桂地链霉菌中的结构不稳定 ,发生了重组缺失 ,缺失... 肉桂地链霉菌 (S .cinnamonensis)是莫能菌素 (Monensin)的产生菌。大肠杆菌 链霉菌穿梭表达载体pHZ12 5 2中的透明颤菌血红蛋白基因 (vhb)位于硫链丝菌素诱导启动子PtipA之下 ,它在肉桂地链霉菌中的结构不稳定 ,发生了重组缺失 ,缺失的片段包括大肠杆菌质粒部分和vhb基因。但来自阿维链霉菌 (S .avermitilis)中缺失了大肠杆菌质粒部分却保留了完整的vhb基因及tipA启动子的 pHZ12 5 2 ,可在肉桂地链霉菌中稳定复制 ,不再发生缺失 ,经硫链丝菌素诱导表达出了有生物活性的VHb蛋白。摇瓶发酵实验证明 ,VHb蛋白在氧限条件下可明显促进肉桂地链霉菌的菌体生长和抗生素合成。 展开更多
关键词 透明颤菌血红蛋白 肉桂地链霉菌 vhb基因表达 抗生素 合成
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透明颤菌血红蛋白基因在阿维链霉菌中的表达 被引量:14
6
作者 文莹 李季伦 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期50-56,共7页
将含有自身启动子的透明颤菌血红蛋白基因( vhb) 克隆至大肠杆菌—链霉菌穿梭质粒载体pIJ653 中构建成表达载体p WY101 和p WY102 ,用它们转化阿维菌素(avermectins) 产生菌———阿维链霉菌( ... 将含有自身启动子的透明颤菌血红蛋白基因( vhb) 克隆至大肠杆菌—链霉菌穿梭质粒载体pIJ653 中构建成表达载体p WY101 和p WY102 ,用它们转化阿维菌素(avermectins) 产生菌———阿维链霉菌( Streptomyces avermitilis) ,经Western blotting 分析并未检测到vhb 基因表达,但用穿梭载体pHZ1252( 其中的vhb 基因位于受硫链丝菌素诱导的链霉菌强启动子PtipA之下) 转化阿维链霉菌并经硫链丝菌素诱导,则在该菌中表达出了有活性的VHb 蛋白。pHZ1252 在阿维链霉菌中发生了重组缺失,但缺失的pHZ1252 上仍含有完整的vhb 基因及诱导型强启动子,且可在阿维链霉菌中稳定遗传,却不能再转化大肠杆菌。 展开更多
关键词 透明颤菌 血红蛋白 阿维链霉菌 vhb 基因表达
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透明颤菌血红蛋白基因在金色链霉菌中的克隆与表达 被引量:10
7
作者 孟春 叶勤 +3 位作者 石贤爱 邱荔 宋思扬 郭养浩 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期305-310,共6页
分别用质粒pJJ6 99与pUC1 9(vhb) ,pIJ70 2与pBR3 2 2 (vhb) ,构建大肠杆菌 链霉菌穿梭质粒 ,将透明颤菌血红蛋白基因转入金色链霉菌。在低溶解氧浓度下 ,透明颤菌血红蛋白的表达 ,可提高金色链霉菌氧的利用效率 ,产物合成比原始菌株提... 分别用质粒pJJ6 99与pUC1 9(vhb) ,pIJ70 2与pBR3 2 2 (vhb) ,构建大肠杆菌 链霉菌穿梭质粒 ,将透明颤菌血红蛋白基因转入金色链霉菌。在低溶解氧浓度下 ,透明颤菌血红蛋白的表达 ,可提高金色链霉菌氧的利用效率 ,产物合成比原始菌株提高 40 %~ 6 0 %。在局部低氧的环境中 ,采用四环素抗性基因启动子带动血红蛋白基因表达 ,可有效发挥透明颤菌血红蛋白的氧传递效率 。 展开更多
关键词 透明颤菌 血红蛋白基因 金色链霉菌 克隆 表达 四环素 抗性基因启动子 天然启动子
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利用透明颤菌血红蛋白基因在谷氨酸棒杆菌中的表达提高谷氨酸和谷氨酰胺的产量 被引量:8
8
作者 孙智杰 梁楠 +2 位作者 李润东 沈忠耀 陈国强 《北京理工大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第2期180-184,共5页
为了降低谷氨酰胺 (glutamine,Gln)生产过程中所需要的高溶氧水平对设备的要求 ,在谷氨酸棒杆菌 C.glutamicum ATCC14 0 6 7中表达增强摄氧的透明颤菌血红蛋白基因 (Vitreoscilla hemoglobin gene,vgb) ,以此提高细胞的摄氧能力及能量... 为了降低谷氨酰胺 (glutamine,Gln)生产过程中所需要的高溶氧水平对设备的要求 ,在谷氨酸棒杆菌 C.glutamicum ATCC14 0 6 7中表达增强摄氧的透明颤菌血红蛋白基因 (Vitreoscilla hemoglobin gene,vgb) ,以此提高细胞的摄氧能力及能量的供给水平 .对得到的重组菌和野生菌进行了发酵实验 .在溶氧只有 5 %的条件下 ,重组菌比野生菌细胞干重提高了 1.2倍 ,单位细胞谷氨酸的生产能力提高了 6 .5倍 ,单位细胞谷氨酰胺的生产能力提高了 1.4倍 .对比结果显示 ,含有 vgb基因的重组菌比野生菌在细胞生长。 展开更多
关键词 透明颤菌血红蛋白基因 谷氨酸棒杆菌 谷氨酸 谷氨酰胺 发酵
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透明颤菌血红蛋白研究进展及其在芽孢杆菌属中的应用 被引量:3
9
作者 冯静 施庆珊 +2 位作者 疏秀林 欧阳友生 陈仪本 《化学与生物工程》 CAS 2007年第11期5-8,共4页
透明颤菌血红蛋白(VHb)可在低氧条件下提高细胞对氧气的利用效率,促进细胞的生长和代谢产物的合成,因而被广泛应用于多种异源微生物的研究中。简述了VHb的结构特征、在细胞内的定位、编码基因vgb的表达调控及其生物化学功能;介绍了VHb... 透明颤菌血红蛋白(VHb)可在低氧条件下提高细胞对氧气的利用效率,促进细胞的生长和代谢产物的合成,因而被广泛应用于多种异源微生物的研究中。简述了VHb的结构特征、在细胞内的定位、编码基因vgb的表达调控及其生物化学功能;介绍了VHb在芽孢杆菌属中的应用情况及其在芽孢杆菌属菌株外源表达中的重要意义。 展开更多
关键词 透明颤菌血红蛋白(vhb) 透明颤菌血红蛋白编码基因(vgb) 芽孢杆菌
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重组大肠杆菌VG1(pTU14)产PHB的补料分批培养 被引量:9
10
作者 于慧敏 张延平 +2 位作者 史悦 杨胜利 沈忠耀 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第7期742-746,共5页
利用已构建的同时含有透明颤菌血红蛋白基因 (vgb)、λ噬菌体裂解基因 (S-RRz)和PHB合成基因(phbCAB)的产PHB基因工程大肠杆菌VG1(pTU14 ) ,在 5L发酵罐里进行补料分批培养 .研究发现 :碳氮比(C/N) ,DO(溶氧 )及碳源和氮源的浓度是影响... 利用已构建的同时含有透明颤菌血红蛋白基因 (vgb)、λ噬菌体裂解基因 (S-RRz)和PHB合成基因(phbCAB)的产PHB基因工程大肠杆菌VG1(pTU14 ) ,在 5L发酵罐里进行补料分批培养 .研究发现 :碳氮比(C/N) ,DO(溶氧 )及碳源和氮源的浓度是影响菌体生长和PHB积累的重要因素 ;补料时间可以通过DO和 pH值两个参数的变化在线综合识别 ;流加策略应使发酵前期菌体大量生长 ,发酵后期PHB大量积累 .在优化条件下 ,对VG1(pTU14 )进行 6 0h的补料分批培养 ,菌体细胞浓度、PHB浓度和PHB占细胞干质的分数分别高达2 15 .9g·L-1、 193.7g·L-1和 89.7% . 展开更多
关键词 重组大肠杆菌VG1 PHB 透明颤菌血红蛋白基因 塑料 白色污染 微生物降解 补料 分批培养 λ噬菌体裂解基因 聚Β-羟基丁酸酯
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透明颤菌血红蛋白基因表达对金色链霉菌生长代谢的影响 被引量:6
11
作者 孟春 叶勤 +3 位作者 邱荔 石贤爱 苏文金 郭养浩 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期418-424,共7页
利用四环素抗性基因启动子在金色链霉菌中表达透明颤菌血红蛋白基因。在 1m3 发酵罐中研究了工程菌株的生长代谢特性。在溶解氧充足的条件下 ,透明颤菌血红蛋白表达 ,对金色链霉菌生长代谢未产生明显影响 ,工程菌株与参比菌株的生长代... 利用四环素抗性基因启动子在金色链霉菌中表达透明颤菌血红蛋白基因。在 1m3 发酵罐中研究了工程菌株的生长代谢特性。在溶解氧充足的条件下 ,透明颤菌血红蛋白表达 ,对金色链霉菌生长代谢未产生明显影响 ,工程菌株与参比菌株的生长代谢特性基本一致 ,工程菌株和参比菌株金霉素最终浓度分别为 2 2 90 5u mL、2 2 896u mL。在低溶解氧条件下 ,透明颤菌血红蛋白的表达 ,可促进金色链霉菌菌体生长、菌丝活力保持和金霉素的合成 :工程菌菌体浓度比参比菌株高 5 %~ 1 0 % ,产物合成提高 1 1 4%。 展开更多
关键词 透明颤菌 血红蛋白 基因表达 金色链霉菌 生长代谢 溶解氧浓度 金霉素
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D-氨基酸氧化酶与麦芽糖结合蛋白和透明颤菌血红蛋白的融合表达 被引量:5
12
作者 于慧敏 马现锋 +2 位作者 罗晖 文程 沈忠耀 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期1004-1009,共6页
D-氨基酸氧化酶(DAAO)是一种重要的工业酶。为了进一步提高DAAO在大肠杆菌中的可溶性和活性表达,分别构建了麦芽糖结合蛋白(MBP)和透明颤菌血红蛋白与三角酵母DAAO(TvDAAO)的N-端融合蛋白。其中,MBP融合蛋白MBP-TvDAAO在组成型(JM105/pM... D-氨基酸氧化酶(DAAO)是一种重要的工业酶。为了进一步提高DAAO在大肠杆菌中的可溶性和活性表达,分别构建了麦芽糖结合蛋白(MBP)和透明颤菌血红蛋白与三角酵母DAAO(TvDAAO)的N-端融合蛋白。其中,MBP融合蛋白MBP-TvDAAO在组成型(JM105/pMKC-DAAO)和诱导型菌株(JM105/pMKL-DAAO)中表达时,目标蛋白的可溶性表达量分别达到全细胞蛋白表达量的28%以上和17%左右,比无MBP融合的对照菌株BL21(DE3)/pET-DAAO分别提高3.7和1.8倍;但其酶活水平显著下降。VHb融合蛋白VHb-TvDAAO在重组菌BL21(DE3)/pET-VDAAO中摇瓶诱导表达时,DAAO酶活达到了3.24u/mL,比对照菌株BL21(DE3)/pET-DAAO提高了约90%。 展开更多
关键词 D-氨基酸氧化酶 大肠杆菌麦芽糖结合蛋白 透明颤菌血红蛋白 融合表达
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透明颤菌vgb基因整合型大肠杆菌的培养特性 被引量:1
13
作者 陈新爱 徐志南 +1 位作者 王芳 岑沛霖 《浙江大学学报(工学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第1期124-128,共5页
透明颤菌血红蛋白(VHb)是一种氧调节、氧结合蛋白,其基因vgb的表达在转录水平上受氧调控.大肠杆菌E.coliBV是采用基因同源重组方法将vgb基因整合到基因工程常用宿主菌E.coliBL21中构建得到的.研究了不同价态的铁离子对同源重组菌的生长... 透明颤菌血红蛋白(VHb)是一种氧调节、氧结合蛋白,其基因vgb的表达在转录水平上受氧调控.大肠杆菌E.coliBV是采用基因同源重组方法将vgb基因整合到基因工程常用宿主菌E.coliBL21中构建得到的.研究了不同价态的铁离子对同源重组菌的生长特性及VHb合成的影响,研究表明,0.2mmol/L的二价铁离子具有促进VHb表达从而刺激菌体细胞生长的作用.在0.1L/h低通气量条件下,E.coliBV分别进行间歇培养和流加培养,低溶氧刺激VHb在短时间内迅速大量合成,改善了细胞内氧的传递性能,使生长期分别延长到25h和45h,生物量(DCW)分别达到9.6g/L和26g/L. 展开更多
关键词 透明颤菌 VGB基因 基因同源重组 血红蛋白 大肠杆菌 基因表达 基因工程 微生物培养
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透明颤菌血红蛋白基因在产PHB重组大肠杆菌中的引入 被引量:4
14
作者 于慧敏 史悦 +2 位作者 张延平 杨胜利 沈忠耀 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期548-552,共5页
将透明颤菌血红蛋白基因 (vgb)采用插入染色体的方式引入产聚 β 羟基丁酸酯(PHB)重组大肠杆菌VG1 (pTU1 4)中 ,以从分子水平上提高克隆菌对氧的利用率 ,解决PHB发酵生产过程中的供氧矛盾 ,透明颤菌血红蛋白的一氧化碳差光谱分析明表 ,... 将透明颤菌血红蛋白基因 (vgb)采用插入染色体的方式引入产聚 β 羟基丁酸酯(PHB)重组大肠杆菌VG1 (pTU1 4)中 ,以从分子水平上提高克隆菌对氧的利用率 ,解决PHB发酵生产过程中的供氧矛盾 ,透明颤菌血红蛋白的一氧化碳差光谱分析明表 ,vgb基因可以在VG1 (pTU1 4)中成功表达 ,且其表达量受溶氧水平的调控。vgb基因的引入可以同时促进菌体生长和PHB产品的积累 ,且溶氧水平越低 ,VHB表达量越高 。 展开更多
关键词 透明颤菌 血红蛋白基因 聚Β-羟基丁酸酯 PHB 溶氧调控 大肠杆菌 好氧生物发酵
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溶氧控制对氨基酸发酵的影响 被引量:9
15
作者 刘晓波 李宗伟 +2 位作者 闫世梁 丁晓兵 秦广雍 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第19期7977-7979,共3页
对溶氧控制对氨基酸发酵工艺的影响及增加溶氧的一些方法进行了综合分析与探讨。
关键词 溶氧控制 氨基酸 发酵工艺 氧载体 透明颤菌血红蛋白基因
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透明颤菌血红蛋白基因调控与功能的研究 被引量:16
16
作者 吴奕 杨胜利 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期1-5,共5页
透明颤菌(Vitreoscila)血红蛋白(VHb)是一种氧调节、氧结合蛋白。其基因(vgb)已被克隆及表达。vgb基因表达在转录水平上受氧控制,FNR蛋白作为厌氧激活子介入该调节过程。VHb可与氧结合参与细胞代谢过... 透明颤菌(Vitreoscila)血红蛋白(VHb)是一种氧调节、氧结合蛋白。其基因(vgb)已被克隆及表达。vgb基因表达在转录水平上受氧控制,FNR蛋白作为厌氧激活子介入该调节过程。VHb可与氧结合参与细胞代谢过程,使细胞适应贫氧环境。 展开更多
关键词 透明颤菌 血红蛋白 基因调控 功能
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利用PCR法扩增透明颤菌血红蛋白基因条件的优化 被引量:3
17
作者 吴琼 王洪军 +4 位作者 张志强 王立强 冯立 孙艳 吴益民 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2006年第3期50-52,共3页
以透明颤菌染色体基因组DNA为模板,利用PCR技术获取透明颤菌(Vitreoscilla)血红蛋白基因(vgb)。在多聚合酶链式反应中采用碱变性模板与热启动等方法进行透明颤菌血红蛋白基因体外扩增,成功地扩增出约0.5 kb的透明颤菌血红蛋白基因,并对... 以透明颤菌染色体基因组DNA为模板,利用PCR技术获取透明颤菌(Vitreoscilla)血红蛋白基因(vgb)。在多聚合酶链式反应中采用碱变性模板与热启动等方法进行透明颤菌血红蛋白基因体外扩增,成功地扩增出约0.5 kb的透明颤菌血红蛋白基因,并对vgb的PCR条件进行了研究。获取理想的目的基因PCR反应的综合参数比十分重要。 展开更多
关键词 PCR 透明颤菌 血红蛋白基因
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透明颤菌血红蛋白基因在解淀粉芽孢杆菌中的表达及其影响 被引量:1
18
作者 刘清术 夏立秋 +6 位作者 罗玉双 李敬业 张允雷 丁学知 胡胜标 余子全 孙运军 《激光生物学报》 CAS CSCD 2010年第6期790-797,共8页
将强启动子P_(43)与透明颤菌血红蛋白基因(vgb)通过重叠延伸PCR进行融合,克隆到芽孢杆菌整合表达载体pDC1730中,重组表达载体pDG-P43vgb转化促生防病解淀粉芽孢杆菌FZB42,Wsetem-Blot和CO差光谱分析表明重组菌株FZB42-VHb表达了有活性的... 将强启动子P_(43)与透明颤菌血红蛋白基因(vgb)通过重叠延伸PCR进行融合,克隆到芽孢杆菌整合表达载体pDC1730中,重组表达载体pDG-P43vgb转化促生防病解淀粉芽孢杆菌FZB42,Wsetem-Blot和CO差光谱分析表明重组菌株FZB42-VHb表达了有活性的VHb蛋白,VHb的表达对重组菌株菌体的生长及抗菌脂肽的产生都有促进作用。在相同培养条件下,重组菌最大菌体密度比原始菌株提高了14.49%,抗菌脂肽fengycin的产量提高了1.74倍,抗菌脂肽surfactin的产量提高了3.14倍。 展开更多
关键词 透明颤菌血红蛋白基因 解淀粉芽孢杆菌 抗菌脂肽
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透明颤菌血红蛋白基因在提高枯草芽孢杆菌产脂肽功能中的研究 被引量:4
19
作者 王大威 胡鸢雷 +1 位作者 刘永建 林忠平 《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第5期116-119,127,共5页
脂肽是一类具有特殊作用的生物表面活性剂。本实验将血红蛋白基因(vhb)置于RDR细菌启动子驱动下的质粒PSET中,构建PSET-RDR-vhb重组质粒,并通过电激作用转入脂肽代谢菌株-枯草芽孢杆菌株(bacillus subtilis)ZW-3中,转化菌株经酶切和PCR... 脂肽是一类具有特殊作用的生物表面活性剂。本实验将血红蛋白基因(vhb)置于RDR细菌启动子驱动下的质粒PSET中,构建PSET-RDR-vhb重组质粒,并通过电激作用转入脂肽代谢菌株-枯草芽孢杆菌株(bacillus subtilis)ZW-3中,转化菌株经酶切和PCR电泳检测鉴定,Southern-blot杂交显示部分转化菌株中外源基因插入基因组DNA,采用一氧化碳差异色谱法测定了血红蛋白的表达量。实验进一步对转化菌株的生长曲线、总蛋白量、过氧化氢酶活性、脂肽的产率进行了测定,结果显示,相比于原始菌株,转化菌株数据均有明显提高。 展开更多
关键词 透明颤菌血红蛋白基因 枯草芽孢杆菌 脂肽 表达
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透明颤菌血红蛋白基因的克隆及其在林可链霉菌中的表达 被引量:6
20
作者 杨洪涛 刘瑞华 +1 位作者 何建勇 曾红 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期657-662,共6页
目的通过将透明颤菌血红蛋白基因vgb克隆到林可链霉菌染色体黑色素生物合成基因m elC位点,使m elC基因被破坏失活,vgb基因实现表达同时提高林可霉素产量。方法构建大肠杆菌-链霉菌重组质粒pYHT04,通过接合转移实验将重叠延伸PCR得到的... 目的通过将透明颤菌血红蛋白基因vgb克隆到林可链霉菌染色体黑色素生物合成基因m elC位点,使m elC基因被破坏失活,vgb基因实现表达同时提高林可霉素产量。方法构建大肠杆菌-链霉菌重组质粒pYHT04,通过接合转移实验将重叠延伸PCR得到的具有红霉素抗性基因启动子的透明颤菌血红蛋白基因,以双交换的方式整合进林可链霉菌黑色素生物合成基因m elC中。采用不同装瓶量摇瓶发酵,HPLC检测发酵液中林可霉素含量。结果重组菌株颜色变浅,CO结合差光谱显示在420 nm处有明显吸收峰,随着装瓶量的增加重组菌株发酵液中林可霉素效价与对照菌株相比降低幅度较小。结论重组菌株m elC基因失活不能继续合成黑色素,vgb基因得到表达并表现出生物学功能,限氧条件下重组菌株发酵液中林可霉素效价高于对照菌株,有希望应用于工业发酵生产。 展开更多
关键词 林可链霉菌 林可霉素 透明颤菌血红蛋白基因vgb 黑色素
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