粗叶榕组织培养常见问题及对策

分析粗叶榕组织培养外植体处理、培养基设计、生根苗移栽等关键步骤中常见问题,并进行试验,在此基础上总结出行之有效且可操作强的技术建议,旨在为粗叶榕组织培养提供参考,以提高繁殖效率和质量。

植物生长调节剂对金线莲玻璃化苗复壮与增殖的影响

金线莲市场应用前景广阔,但资源短缺,利用组织培养技术进行金线莲的快速繁殖,能有效解决金线莲繁殖周期长、市场供应不足等问题,对保护野生金线莲资源具有重要意义.但在试验过程中常常由于植物生长调节剂配比或培养条件不合理导致试验材料产生玻璃化导致试验材料浪费.针对这种情况,本试验在多因素筛选后的基础上,采用单一变量的方法,研究了不同的植物调节剂配比对玻璃化苗复壮的影响.结果显示,不仅玻璃化苗复壮并且得到了较好的增殖及原球茎诱导效果.金线莲玻璃化苗复壮最佳配比为:MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA;最佳增殖的配比为:MS+2.0 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA,培养条件为温度24℃、光照强度2000 lx、光照12 h/d.

金花茶组培玻璃化苗的预防及控制技术研究

金花茶无菌芽苗接种于添加有CH 300 mg/L、琼脂粉6 g/L、蔗糖40 g/L的改良MS继代培养基(MS+Na2SO450.0 mg/L+6-BA3.0 mg/L+NAA1.0 mg/L),置于光照强度为2 000~3 000 lx的环境中培养,可有效预防及控制玻璃化现象,玻璃化率为0。丛芽长势均匀,无被压芽苗,平均苗高为6.0cm以上,能较好地进行壮苗及开展生根工作。

广藿香玻璃化组培苗恢复逆转的培养条件优化

为探究不同浓度外源激素GA3与不同培养基凝固剂对广藿香玻璃化组培苗的影响机制。以广藿香玻璃化组培苗为实验材料,在原增殖培养基(MS+0.1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA+30 g/L蔗糖+5%(体积分数)椰子水)基础上,添加不同浓度外源激素GA3及凝固剂(5.7 g/L琼脂粉,2.3 g/L植物凝胶),对广藿香玻璃化组培苗恢复处理,并对3种不同形态广藿香[过氧化物歧化酶(SOD),过氧化物酶(POD),过氧化氢酶(CAT)]的酶活性生理指标测定并做比较。结果表明,MS+0.1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA+0.1 mg/L GA3+5.7 g/L琼脂粉+30 g/L蔗糖+5%(体积分数)椰子水为最佳配方,能有效地恢复逆转广藿香玻璃化组培苗,其恢复率高达93.12%;且恢复苗SOD、CAT的酶活性升高,POD酶活性降低,与正常苗酶活性接近,近似恢复正常苗。研究结果为解决广藿香组织培养过程中出现玻璃苗化现象困扰提供一定参考依据。

五莲杨(Populus wulianensis)再生体系建立及试管苗玻璃化的防治

为开展特有树种五莲杨异地保存与离体保存、促进其保护利用,以其两年生春梢嫩芽为外植体建立组织再生体系。结果表明,五莲杨玻璃化发生率高达65.9%,且与基础培养基的类型显著相关;采用两步正交试验L9(34)方法探索了不同生长调节因子和外源添加物对五莲杨试管苗玻璃化的影响,筛选出五莲杨初代培养基配方:1/2MS(NH4NO3)+0.05 mg/L NAA+0.4 mg/L 6-BA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖,试管苗不定芽玻璃化发生率降低至5%以下,平均苗高5.32 cm;将基础培养基调整为MS,微调节NAA和6-BA浓度,筛选出五莲杨增殖培养基配方:MS+0.04 mg/L NAA+0.3 mg/L 6-BA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖,试管苗不定芽增殖系数为15.35,平均苗高5.64 cm,无玻璃化试管苗,无菌苗茎叶粗壮且生长旺盛;调节NAA、IBA浓度及蔗糖配比,筛选出五莲杨生根培养基配方:1/2MS+0.05 mg/L NAA+15 g/L蔗糖+7.0 g/L琼脂粉,五莲杨生根率达92.0%,平均苗高为4.07 cm;幼苗经炼苗后进行移栽,成活率可达95%。本研究建立了五莲杨组织快繁体系,并通过正交实验的方法解决了试管苗玻璃化的问题,为五莲杨遗传转化及分子育种提供了理论依据。