双酶辅助水蒸气蒸馏法提取肉豆蔻精油及其GC-MS成分分析

采用双酶辅助水蒸气蒸馏法提取广西产肉豆蔻的精油,并通过GC-MS对其进行成分分析。正交实验结果表明,最优提取工艺条件为加酶量2%、酶解pH 4.0、酶解温度40℃,在此条件下,肉豆蔻精油的得率为6.50 mL/100 g。利用GC-MS和保留指数法从精油中鉴定出56种化合物,占精油总量的99.71%,主要成分为肉豆蔻醚(16.60%)、甲基丁香酚(14.78%)、桧烯(13.47%)、(+)-柠檬烯(7.29%)、4-萜烯醇(6.75%)、榄香素(6.62%)、γ-松油烯(4.28%)、反式-甲基异丁香酚(3.73%)、β-蒎烯(3.59%)和黄樟素(3.22%)。

海南产肉豆蔻叶挥发油及其主要成分动态变化研究

目的:研究海南产肉豆蔻叶挥发油及其主要成分含量动态变化,确定肉豆蔻叶适宜采收时间。方法:每月中旬采用水蒸气蒸馏法分别提取雌、雄肉豆蔻鲜叶挥发油,并对部分挥发油采用GC-MS法测定化学成分。结果:雄株叶挥发油4月和11月含量最高分别达0.447%、0.450%,雌株4月份最高达0.503%。除10月雌、雄植株叶挥发油含量相同外,其它月份雄株均低于雌株。单萜及其衍生物含量,雄株1月最高90.0%,雌株5月和11月最高达86.2%、86.1%。其中α-蒎烯含量,雄株5月最高达29.24%,雌株1月最高达14.70%;而4-萜烯醇含量,雄、雌株均9月最高,分别为13.84%、18.20%。结论:肉豆蔻叶挥发油及其主要成分含量不同月份差异明显,应根据需要适时采收。

不同月份肉豆蔻叶片挥发油成分分析

目的比较不同月份肉豆蔻叶片中挥发油成分,为其开发利用奠定基础。方法采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,用GC毛细管柱色谱法分析,图谱采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件进行相似度比较,归一化法测定其相对含有量,利用GC-MS分析挥发油的化学成分。结果不同月份叶片挥发油相似度较高,雌雄株的主要成分基本一致。雌雄株中相对含有量大于0.1%的主要成分数量差异不大。叶片挥发油成分主要是单萜和倍半萜类物质,主要成分随季节呈现一定的规律性变化。结论不同月份肉豆蔻叶片挥发油成分有一定的差异,但主要组分基本相同,为叶片的开发利用提供了科学依据。

春、冬季采收肉豆蔻中挥发性成分分析

目的:研究春、冬两季采收的肉豆蔻中的挥发性成分,探讨不同季节采收对其挥发性成分的影响。方法:采用HS-SPME-GC-MS法对春、冬季采收的肉豆蔻挥发性成分进行对比分析。结果:从春季采收的肉豆蔻中检测出挥发性成分55种,鉴定出28种,占挥发性成分总量的89.14%;从冬季采收的肉豆蔻中检测出挥发性成分48种,鉴定出26种,占挥发性成分总量的92.85%;比较2次实验的结果,发现不同季节采收的肉豆蔻中挥发性成分在成分及含量上有较大差异。结论:该研究为肉豆蔻的挥发性成分分析提供了方法学基础,为其开发利用提供了物质基础和实验依据。

肉豆蔻叶和种仁挥发油GC-MS分析

目的分析肉豆蔻叶片和种仁挥发油的化学成分,为其资源利用和质量评价提供依据。方法采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,用GC毛细管柱色谱法分析,归一化法测定其相对含量,利用GC-MS分析挥发油的化学成分。结果叶片中挥发油含量低于种仁。叶片中鉴定了46个化合物,种仁中鉴定了41个化合物;叶片和种仁挥发油中化学成分主要是单萜类和芳香类化合物。结论叶片和种仁化学成分大致相同,但相对含量有差异。叶片在产品开发上有较高的利用价值。

印度尼西亚产肉豆蔻挥发油成分的GC-MS分析

目的:分析印度尼西亚产肉豆蔻挥发油的化学成分,为其质量评价提供科学依据。方法:采用水蒸气蒸馏法提取肉豆蔻挥发油,用GC毛细管柱进行分析,归一化法测定其相对含量,并用GC-MS法鉴定化学成分。结果:检出93个色谱峰,鉴定出61个化合物,占总挥发油的97.62%。结论:印度尼西亚产肉豆蔻挥发油中的主要成分为单萜类化合物及其衍生物,占总挥发油的78.87%;酚类化合物为次要化学成分,占总挥发油的16.79%;挥发油中存在致动物基因毒性和突变性物质黄樟醚、致幻物质肉豆蔻醚和榄香脂素,提示应慎重使用肉豆蔻。

微波辅助水蒸气蒸馏调味香料肉豆蔻挥发油化学成分的研究

对云南产调味香料肉豆蔻挥发油进行了成分分析。采用微波水蒸气蒸馏法(MHD,300 W,料液比1∶10,蒸馏时间1 h)及水蒸气蒸馏法(HD)提取了肉豆蔻挥发油,利用气相色谱/质谱(GC/MS)联用技术和保留指数比较法分析了该挥发油的化学成分。从MHD肉豆蔻挥发油中鉴定了48种化合物,占挥发油总量的99.81%。主要成分为肉豆蔻醚(36.53%)、4-萜品醇(12.47%)、肉豆蔻酸(8.27%)、榄香素(4.96%)、黄樟素(4.75%)、γ-松油烯(4.56%)和甲基丁香酚(4.38%)。

两种肉豆蔻挥发油对人癌细胞体外增殖影响的比较研究

目的:研究长型肉豆蔻(Myristica argentea Warb.)和圆型肉豆蔻(Myristica fragrans Houtt.)挥发油对人癌细胞HepG-2、SGC-7901和KB体外增殖的抑制作用。方法:采用MTT法测定长形肉豆蔻及圆形肉豆蔻挥发油对上述三种人癌细胞的IC50值。结果:2种肉豆蔻挥发油对HepG-2、SGC-7901和KB细胞体外增殖均具有一定的抑制作用,并呈一定的剂量依赖性。圆型肉豆蔻挥发油对三种不同细胞系的IC50值分别为308、311、378μg.mL-1,长形肉豆蔻对三种不同细胞系的IC50值分别为325、246、362μg.mL-1。结论:圆型和长型肉豆蔻挥发油对上述三种人癌细胞体外增殖均具有一定的抑制作用,两者的作用未见明显区别。

海南芳香药物的超临界萃取工艺及GC-MS分析研究

目的:研究3种海南芳香药物油——海南砂仁叶油、海南肉豆蔻叶油和海南降香油的SFE-CO2工艺及化学成分。方法:用正交试验以及单因素分析确定SFE-CO2提取工艺,采用气质联用技术对其化学成分进行分析。结果:确定了3种海南芳香药物精油的SFE-CO2工艺;并从海南砂仁叶油中分析确认了α-蒎烯等12个化合物,从海南降香油中分析确认了反式橙花叔醇等5个主要成分,从海南肉豆蔻叶油中分析确认了榄香脂素等24种成分。结论:确定了SFE-CO2提取海南砂仁叶精油、肉豆蔻叶精油、降香油新工艺。

肉豆蔻挥发油中α-蒎烯,β-蒎烯含量测定及动态分析

目的建立同时测定肉豆蔻挥发油中α-蒎烯和β-蒎烯含量的气相色谱法;研究肉豆蔻叶片挥发油中两种成分含量的动态变化。方法水蒸气蒸馏提取挥发油,GC法测定肉豆蔻挥发油中α-蒎烯和β-蒎烯的含量。气相色谱条件:HP-5MS石英毛细管柱(0.25mm×30m×0.25μm);氢火焰离子化检测器(FID);进样口温度240℃;检测器温度250℃;柱温起始温度为40℃,保持1min,以5℃.min-1的速率升高到220℃,保持1min;载气为氮气,流速1mL.min-1,分流比为10∶1,进样量为:1μL。结果α-蒎烯和β-蒎烯在相应的线性范围内呈现良好的线性关系,加样回收率(n=3)分别为:99.2%和98.7%。肉豆蔻不同组织挥发油中α-蒎烯和β-蒎烯含量有明显差异。不同月份肉豆蔻叶片挥发油中α-蒎烯和β-蒎烯含量变化呈现一定的规律性。结论方法简便快速,可以用于肉豆蔻挥发油中α-蒎烯和β-蒎烯的含量测定。

蒙药肉豆蔻挥发油对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨蒙药肉豆蔻挥发油对大鼠心肌缺血再灌注(myocardial ischemia reperfusion,MIR)损伤的保护作用及其机制。方法:48只健康Wistar大鼠,随机分成6组,预处理7d后,除空白组外,其余各组均结扎左冠状动脉前降支。缺血30min后,再灌注60min,处死大鼠,取心肌缺血组织测定GOT、CK、LDH、MDA及SOD等生化指标。结果:肉豆蔻挥发油大、中、小剂量组可明显减慢心率,降低心律失常的发生率,同时降低心肌细胞损伤所释放的GOT、CK、LDH的含量、降低MDA和升高SOD的活性。结论:肉豆蔻挥发油对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用。

肉豆蔻挥发油对缺血豚鼠心室肌动作电位及L型钙离子通道的影响

目的研究肉豆蔻挥发油对缺血豚鼠心室肌动作电位及L型钙离子通道的影响。方法通过全细胞电流钳技术记录豚鼠单细胞动作电位,通过全细胞电压钳技术记录豚鼠心室肌L型钙通道电流。结果肉豆蔻挥发油可使豚鼠心室肌细胞动作电位时缩短,豚鼠心室肌L型钙离子电流幅值减小,具有剂量依赖性,有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论肉豆蔻挥发油对缺血心肌起保护作用。

肉豆蔻挥发油对低氧诱导肺动脉平滑肌细胞增殖的抑制作用及其抗氧化活性

目的对肉豆蔻挥发油(VOMF)的化学成分及其体外抗氧化活性进行分析,在细胞水平评价其对低氧诱导的肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖的抑制作用及其抗氧化活性。方法采用气相色谱-质谱联用技术分析VOMF化学成分,通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除和铁离子还原/抗氧化能力法(FRAP)测定其体外抗氧化活性。将SD大鼠PASMC细胞分为2组:常氧组(5%CO_2+95%O_2)和低氧组(3%O_2+5%CO_2+92%N_2),每组设置VOMF 1.0,1.5,2.0,2.5,3.0,3.5和4.0 g·L^(-1)处理,37℃作用12 h,利用MTS染色法检测PASMC增殖,计算IC_(50)的值。随后设VOMF 0.8,1.6和3.2 g·L^(-1)组测定细胞中丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果 VOMF中含有大量的单萜类和芳香族类化合物,具有较好的体外抗氧化能力,能显著抑制低氧条件下PASMC增殖,作用于细胞12 h,其半数抑制浓度(IC_(50))为1.66 g·L^(-1);当浓度为3.2 g·L^(-1)时,与常氧下PASMC相比,低氧刺激下细胞SOD活性增加(P<0.05),MDA含量减少(P<0.05),GSH含量升高(P<0.05)。结论 VOMF含有多种化学成分,具有显著的抗氧化和清除自由基的能力,且对低氧诱导PASMC增殖具有明显的抑制作用,有可能用于低氧性肺动脉高压的治疗。

基于转录组学和网络药理学探讨肉豆蔻挥发油干预低氧性肺动脉高压的作用机制

目的基于转录组学和网络药理学探讨肉豆蔻挥发油(volatile oil from Myristica fragrans,VOMF)干预低氧性肺动脉高压(hypoxic pulmonary artery hypertension,HPAH)的作用机制。方法通过SwissTargetPrediction数据库获取VOMF活性成分和药物潜在靶点,应用GEO数据库获取HPAH疾病相关靶点,Cytoscape软件构建“成分-靶点-疾病”网络;运用Pymol和MOE软件对VOMF关键活性成分与作用靶点进行分子对接。采用雄性SD大鼠制备肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs),低氧处理并给予VOMF干预后,进行转录组学分析获取差异表达基因,采用Western blotting验证VOMF对细胞周期信号通路相关蛋白表达的影响。结果网络药理学分析共得到VOMF潜在作用靶点512个,HPAH疾病相关差异靶点2912个,交集基因80个;转录组学分析共得到40个共同差异表达基因。以P<0.05为筛选条件将转录组学和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析结果进行交集,得到交集通路8条,其中与HPAH密切相关的包括细胞周期信号通路、丝裂原活化蛋白激酶信号通路、缺氧诱导因子-1信号通路。结合文献报道和课题组前期研究,选取细胞周期信号通路进行验证。Western blotting结果显示,与对照组比较,模型组细胞周期蛋白依赖性激酶2(cyclin dependent kinase 2,CDK2)、CDK4、细胞周期蛋白D1(cell cycle protein D1,Cyclin D1)、Cyclin A2蛋白表达水平升高(P<0.01、0.001),p27Kip1蛋白表达水平降低(P<0.01);与模型组比较,VOMF组CDK2、CDK4、Cyclin D1、Cyclin A2蛋白表达水平降低(P<0.05、0.01、0.001),p27Kip1蛋白表达水平升高(P<0.05、0.01)。结论从网络药理学和转录组学角度初步阐明了VOMF能够通过干预细胞周期信号通路,进而干预HPAH的发生,可为后续的药理学研究和临床应用提供依据与参考。

肉豆蔻挥发油对行为绝望抑郁小鼠的影响

目的 观察肉豆蔻挥发油对行为绝望抑郁小鼠的影响并探讨其作用机制.方法 健康雄性昆明种小鼠分为对照组、盐酸氟西汀组、肉豆蔻挥发油高、中、低剂量组,连续灌胃（ig）7d,末次给药0.5 h后通过悬尾实验、强迫游泳实验研究肉豆蔻挥发油的抗抑郁作用,采用酶联免疫法测定小鼠脑内5-羟色胺（5-HT）、多巴胺（DA）、去甲肾上腺素（NE）的含量.结果 与对照组[（82.60±24.70）s]比较,肉豆蔻挥发油中剂量组小鼠悬尾不动的时间[（54.40±15.87）s]显著降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）;肉豆蔻挥发油中剂量组小鼠脑内5-HT、DA、NE的含量分别为（19.35±2.79） ng/ml、（12.16±0.71） pg/ml、（0.27±0.12）pg/ml,对照组小鼠脑内三种递质的含量分别为（14.95±4.83） ng/ml、（11.32±0.95） pg/ml、（0.20±0.11）ng/ml,中剂量组5-HT含量显著增高,差异具有统计学意义（P＜0.05）.结论 肉豆蔻挥发油有抗抑郁作用,可能与提高小鼠脑内5-HT、DA、NE的含量有关.

肉豆蔻药材霉变前后挥发油成分的GC-MS分析

目的:分析不同霉变程度(未霉变、轻微霉变、严重霉变)肉豆蔻挥发油的含量及化学成分,为霉变肉豆蔻的质量评价提供科学依据。方法:采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,通过GC-MS法测定各挥发油的化学成分,并对其进行鉴定。采用峰面积归一化法计算各组分的相对含量。结果:肉豆蔻霉变前后挥发油的含量未见明显变化,挥发油成分发生了变化,有9个成分含量明显增加,1个成分含量明显降低。其中毒性成分肉豆蔻醚、黄樟醚含量增加,止泻成分异丁香酚甲醚含量降低。结论:霉变对肉豆蔻药材质量有很大影响。因此,肉豆蔻在储藏、运输、销售过程中应严密监控,建议在现有质量标准基础上增加肉豆蔻醚和黄樟醚两个指标以共同监测肉豆蔻的质量。