新疆地区结核分枝杆菌北京/W系和非北京/W系间五种重要蛋白表达差异的初步研究

目的检测北京/W系和非北京/W系结核分枝杆菌HspX、Hsp65、38kDa、Ag85B和MPT64在基因、mRNA和蛋白水平有无差异,探讨5个重要蛋白对于北京/W系菌株广泛流行的可能作用。方法收集结核分枝杆菌临床分离株,其中北京/W系与非北京/W系菌株各30株,运用DNA直接测序法检测北京/W系和非北京/W系菌株HspX、Hsp65、38kDa、Ag85B和MPT64对应编码基因的PCR扩增产物,采用实时定量PCR技术检测细菌在对数生长期5个重要蛋白的编码基因mRNA的表达水平,使用Western blot技术检测细菌感染巨噬细胞24h后5个蛋白在不同菌株中的表达水平。结果统计分析采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果 HspX、Hsp65、38kDa、Ag85B和MPT64对应编码基因的PCR扩增产物测序均未发现突变。HspX、Hsp65在北京/W系菌株中的mRNA在对数生长期的表达差异均无统计学意义(P>0.05),而在感染巨噬细胞24h后,细菌中两个热休克蛋白的表达高于非北京/W系菌株,差异有统计学意义(P<0.05)。在细菌感染细胞前后,北京/W系菌株中38kDa、Ag85B的mRNA和蛋白水平的表达均低于非北京/W系菌株,差异有统计学意义(P<0.05)。MPT64在mRNA和蛋白水平的表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论与非北京/W系菌株比较,北京/W系菌株中HspX、Hsp65高表达,38kDa、Ag85B表达较低,推测这几个蛋白表达的改变可能与北京/W系菌株的流行有一定的关系。

在鄂西土家族人群中的一起伤寒流行中分离到不发酵山梨醇的伤寒沙门氏菌变异株

1986年6月,在鄂西自治州咸丰县丁寨区的一个土家族山泰中发生了一起经临床、流行病学及实验室确诊的介水传播的非典型性伤寒暴发。我们从伤寒患者的血液和大便以及饮用水样品中分离到5株不发醇山梨醇的伤寒沙门氏菌变异株,现简报如下。

天津地区临床分离株结核分枝杆菌分子流行病学研究

目的探讨天津地区结核分枝杆菌临床分离株分子流行病学特征。方法连续收集天津市海河医院2005年8月16日～11月25日就诊病人痰培养阳性的结核分枝杆菌100株，采用间隔区寡核苷酸分型（Spoligotyping）和数目可变串联重复序列（VNTR）两种方法进行基因分型，并运用软件对二者的结果进行分析。依据北京分化支的定义。运用多重和实时定量PCR方法将其区分为W菌/典型北京家族菌株和非典型北京菌株，x^2检验分析两种亚群与患者年龄和耐药性之间的联系。结果排除污染菌株，共对96株结核分枝杆菌临床分离株进行两种方法的基因分型，Spoligotyping结果为91．7％为北京基因型（含3株类北京基因型）结核分枝杆菌（88／96）。VNTR分型可将北京基因型分为60种基因型。在北京分化支结核分枝杆菌中，W菌/典型北京家族菌株占93．2％（82／88）。两种北京分化支亚群与患者年龄和耐药性没有显著性统计学差异（P〉0.05）。结论天津地区结核病患者临床分离的结核分枝杆菌中，北京基因型呈现较为明显的优势。VNTR的分辨率明显高于Spoligotyping。北京分化支的两种亚群在天津地区临床结核病患者中均存在流行，但以W菌/典型北京家族菌株为主。

结核分枝杆菌W-北京家族菌株研究进展

近年来许多对结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, M.TB)的研究特别提到"W菌株"、"北京菌株"、"北京基因型菌株"或"W-北京家族菌株".这些菌株传播广泛,有时引起大范围的结核病(tuberculosis,TB)爆发,在某些情况下又与多耐药性(multidrug resistance,MDR)有联系,从而引起人们的极大关注.这种遗传上高度保守的M.TB菌株家族是包括中国在内的广大地区的优势菌株,是结核病控制工作中值得研究的问题.本文综述该菌株家族的分子特征、传播证据及对其分布优势的解释.

新疆北疆地区北京/W系结核分枝杆菌临床分离株的流行特征及耐药相关性研究

目的了解新疆北疆地区北京/W系结核分枝杆菌的分布特征及与耐药的相关性。方法收集新疆北疆地区结核分枝杆菌临床分离株,采用RD105缺失基因检测鉴定北京/W系结核分枝杆菌,采用比例法检测细菌的耐药性。统计学分析采用χ2检验。结果 RD105缺失基因检测法显示,160株结核分枝杆菌临床分离株中122株属北京/W系结核分枝杆菌,占全部菌株的76.25%;非北京/W系38株,占23.75%。比例法测定北京/W系结核分枝杆菌的耐药率为30.32%(37/122),非北京/W系耐药率为26.32%(10/38),差异无统计学意义(χ2=0.225,P>0.05)。结论新疆北疆地区北京/W系结核分枝杆菌菌株为当地主要流行菌株,耐药情况较为严重,北京/W系结核分枝杆菌与耐药性之间无明显相关性。

相同多态性位点对结核分枝杆菌北京家族菌株多位点可变数目串联重复序列基因型构成的影响

目的探讨多态性相同的位点对北京家族结核分枝杆菌多位点可变数目串联重复序列（MIRU-VNTR）基因分型的影响，为合理选择分型位点提供科学依据。方法分别选取9个及12个位点，构成4组MIRU—VNTR位点组合，其中，9位点组成的两个组合中，分别有两个不同位点（MIRU40／MIRUl6）多态性一致，其余为相同位点；12位点的两个组合则分别包括另外两个多态性相同的位点（MIRu39／MIRu31）。进行聚类分析，比较含有相同多态性的不同位点组合的分辨能力、成簇能力以及基因型特点。结果9位点两个组合都将菌株分为三群，其中，Ⅲ群菌株仅有1株相同，分别占组合1、2的2．0％和1．6％。12位点组合也将菌株分为三群，第Ⅱ群菌株组成差异非常明显，完全没有相同的菌株。结论多态性相同的位点对北京家族菌株MIRU—VNTR基因分型影响较大。在选择MIRU—VNTR分型位点时，应不仅仅检验位点的分辨能力和对成簇的影响，还应考虑有相同／相近多态性的位点对基因型构成的影响。

天津地区临床分离结核分枝杆菌分型的初步研究

目的探讨天津地区结核分枝杆菌临床分离株分子流行病学特征。方法连续收集天津市海河医院2005年8月16日-11月25日就诊患者痰培养阳性的结核分枝杆菌100株,采用间隔区寡核苷酸分型(sp01igotyping)和多位点可变串联重复序列(VNTR)两种方法进行基因分型,并运用软件对二者的结果进行分析。依据北京分化支的定义,运用多重和实时定量PCR方法将其区分为W菌/典型北京家族菌株和非典型北京菌株,X^2检验分析两种亚群与患者年龄和耐药性之间的联系。结果排除污染菌株,共对96株结核分枝杆菌临床分离株进行两种方法的基因分型,spoligotyping结果91.7%为北京基因型(含3株类北京基因型)结核分枝杆菌(88/96)。VNTR分型可将北京基因型分为60种基因型。在北京分化支结核分枝杆菌中,W菌/典型北京家族菌株占93.2%(82/88)。两种北京分化支亚群与患者年龄及耐药性之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论天津地区结核病患者临床分离的结核分枝杆菌中,北京基因型呈现较为明显的优势。VNTR的分辨率明显高于spoligotyping。北京分化支的两种亚群在天津地区临床结核病患者中均有流行,但以W菌/典型北京家族菌株为主。