苏云金芽胞杆菌菌株WB9编码活性因子的基因分析

采用PCR -RFLP及PCR技术对苏云金芽胞杆菌新分离菌株WB9的ICP、VIP、几丁质酶和肠毒素 4种活性因子的编码基因进行了分析 .结果表明 ,该菌株含有编码ICP的cry1Aa、cry1Ab、cry1Cb、cry1Fa和cry1Ga5个cry1基因型 ,编码Vip3A蛋白的vip3A基因以及编码 3种肠毒素的hblA、bceT和entS基因 ;不含编码几丁质酶的基因 .将vip3A、hblA、bceT和entS基因PCR产物回收纯化后直接测序 ,经在线的BLAST软件进行同源性分析 ,前两个基因片段与Bt已公布基因序列的相应片段同源性分别为 99%和 96 %～ 98% ,bceT基因片段与蜡质芽孢杆菌bceT相应片段同源性为 97% .图 6表 2参

苏云金杆菌新菌株WB9 cry1基因型的PCR-RFLP分析

利用 PCR- RFLP技术对 Bt新菌株 WB9的 cry1基因型进行分析 ,结果表明该菌株含有 cry1Aa、cry1Ab、cry1Cb、cry1Fa和 cry1Ga 5种 cry1基因型 ,且 cry1Ab的酶切产物不同于正常的 cry1Ab.采用特异引物对 G1/ G2扩增 ,也证明 WB9含有 cry1Ab基因 .在此基础上 ,再利用引物对 G1/ K3un2进行扩增 ,其产物经回收纯化后用 Eco R / Xba 双酶切分析 ,结果也表明 WB9所含的 cry1Ab与众不同 ,无大片段出现且有一条 4 0 0 - 5 0 0