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WCX-MB联合MALDI-TOF MS技术建立宫颈癌诊断预测模型及初步验证 被引量:2
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作者 孙克娜 许小雨 +2 位作者 朱小双 宋御繁 刘晓斐 《生物技术通讯》 CAS 2020年第5期547-553,共7页
目的:筛选宫颈癌患者血清差异性蛋白/多肽,建立宫颈癌诊断预测模型,寻找宫颈癌潜在肿瘤标志物。方法:收集宫颈癌患者血清标本34例、良性对照组血清标本27例、健康组血清标本26例,按照3∶1随机分为训练组(宫颈癌患者25例、良性对照19例... 目的:筛选宫颈癌患者血清差异性蛋白/多肽,建立宫颈癌诊断预测模型,寻找宫颈癌潜在肿瘤标志物。方法:收集宫颈癌患者血清标本34例、良性对照组血清标本27例、健康组血清标本26例,按照3∶1随机分为训练组(宫颈癌患者25例、良性对照19例、健康者19例)和验证组(宫颈癌患者9例、良性对照8例、健康者7例)。弱阳离子交换磁珠(WCX-MB)富集低丰度蛋白/多肽,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)检测得到血清蛋白表达图谱,采用ClinPro Tools 3.0软件筛选差异表达蛋白/多肽峰,建立宫颈癌诊断预测模型并进行验证。结果:筛选出12个具有显著性差异的多肽峰,与健康组相比,9个差异峰在宫颈癌患者中表达上调,3个表达下调。其中多肽峰m/z 4210.90和4645.11的ROC曲线下面积分别为0.97、0.85。采用快速分类算法(QC)建立的宫颈癌诊断预测模型效能最佳,其对癌症组和健康组的诊断准确性为93.75%,特异性为100%,敏感性为88.89%;对癌症组和良性对照组的诊断准确性为88.24%,特异性为75%,敏感性为100%。结论:应用QC建立的宫颈癌诊断预测模型具有较高的诊断效能,可较好地应用于宫颈癌辅助诊断,多肽峰m/z 4210.90和4645.11有望成为诊断宫颈癌的潜在肿瘤标志物。 展开更多
关键词 弱阳离子交换磁珠 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 宫颈癌 诊断预测模型
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WCX纳米磁珠联合MALDI-TOF-MS研究正常人血清蛋白指纹图谱的年龄与性别差异 被引量:2
2
作者 姚东 陈文虎 +3 位作者 郑智国 凌志强 许沈华 毛伟敏 《肿瘤学杂志》 CAS 2010年第8期644-647,共4页
[目的]探讨正常人血清蛋白指纹图谱的年龄和性别差异。[方法]用WCX纳米磁珠联合基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱检测54例男性和66例女性健康人群的血清。用Ciphergen ProteinChip 3.2.1软件收集数据,用Biomarker Wizard软件分析找... [目的]探讨正常人血清蛋白指纹图谱的年龄和性别差异。[方法]用WCX纳米磁珠联合基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱检测54例男性和66例女性健康人群的血清。用Ciphergen ProteinChip 3.2.1软件收集数据,用Biomarker Wizard软件分析找出差异蛋白并进行统计学分析。[结果]男女性20~40岁组与〉60岁组比较分别存在3个和8个蛋白差异峰(P〈0.01),其中女性组中6441、6637m/z曾被鉴定为载脂蛋白CⅠ和载脂蛋白CⅢ,8939m/z曾被鉴定为补体C3a片段。20~40岁、40~60岁与〉60岁年龄组中男女性间分别存在3个、2个和1个蛋白差异峰(P〈0.01)。[结论]人体血清中部分蛋白存在性别和年龄差异。因而,在今后的肿瘤标志物研究和临床应用中,最好细分性别和年龄等因素,使肿瘤标志物的研究和临床应用更加准确。 展开更多
关键词 蛋白 年龄 性别 基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱 wcx磁珠 差异峰
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水产品中河鲀毒素的高效液相紫外测定法 被引量:7
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作者 岑剑伟 李来好 +5 位作者 杨贤庆 魏涯 刁石强 辛少平 周婉君 石红 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期1036-1044,共9页
以鲀科鱼类为研究材料,采用超声波法提取,C18-WCX联用固相萃取纯化,使用高效液相色谱紫外检测方法测定水产品中河鲀毒素含量,通过探索提取方法和色谱条件对检测结果的影响,并确定和优化色谱分离和紫外检测条件,建立了一种高效液相紫外... 以鲀科鱼类为研究材料,采用超声波法提取,C18-WCX联用固相萃取纯化,使用高效液相色谱紫外检测方法测定水产品中河鲀毒素含量,通过探索提取方法和色谱条件对检测结果的影响,并确定和优化色谱分离和紫外检测条件,建立了一种高效液相紫外检测测定水产品中河鲀毒素的方法。该检测方法稳定性好,可操作性强,加标回收率在75%~82%之间,相对标准偏差小于15%,检出限达到0.02mg/kg。与现行河鲀毒素检测方法相比,该方法具有对仪器要求低、操作简便的特点,易于推广应用。 展开更多
关键词 河鲀毒素 高效液相色谱 固相萃取 C18小柱 wcx小柱 紫外检测
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血液蛋白质组与质谱仪检测流程标准化初探 被引量:15
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作者 刘建栋 李永哲 +2 位作者 李宁 郦卫星 许洋 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2007年第2期193-197,共5页
目的探讨不同的标本处理和储存条件对蛋白指纹图谱技术检测血清多肽及低分子量蛋白质(1-30 ku)的影响。方法将血液凝固后马上分离得到的血清分装后分别置于-80℃6个月以上以及室温、4℃条件下2-72 h进行蛋白质质谱分析。结果血清样本在... 目的探讨不同的标本处理和储存条件对蛋白指纹图谱技术检测血清多肽及低分子量蛋白质(1-30 ku)的影响。方法将血液凝固后马上分离得到的血清分装后分别置于-80℃6个月以上以及室温、4℃条件下2-72 h进行蛋白质质谱分析。结果血清样本在-80℃6个月以上以及4℃或者25℃保存2 h或者反复冻溶1次,对多肽及低分子量蛋白质的影响相对较小。将血清用U9缓冲液稀释后放置于室温,在24 h内结果稳定。溶血会对蛋白质组的结果造成很大影响。结论建议血液标本的处理、运送、操作及储存的蛋白质质谱分析的标准条件是:4℃下处理血液标本,2 h内尽快分离血清及细胞。用U9缓冲液稀释血清后,可以24 h内在室温下运送或对血清及WCX磁珠结合过程进行操作。血清应分装并长期储存在-80℃,但限冻溶1次。溶血标本应弃用,建议重新取血。 展开更多
关键词 wcx磁珠 蛋白指纹图谱技术 质谱
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耻垢分枝杆菌7天培养滤液与Middlebrook 7H9培养液蛋白质组对比分析 被引量:1
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作者 张为民 吴劲松 龚文波 《现代医院》 2013年第8期8-10,共3页
目的初步了解耻垢分枝杆菌体外培养过程中对蛋白质的利用及其蛋白分泌活动状况,以进一步了解其生物特性。方法应用与弱阳离子交换蛋白质芯片(WCX2)联用的表面增强激光解吸一电离飞行时间质谱(SELDI—TOF—MS)技术检测Middlebrook7H... 目的初步了解耻垢分枝杆菌体外培养过程中对蛋白质的利用及其蛋白分泌活动状况,以进一步了解其生物特性。方法应用与弱阳离子交换蛋白质芯片(WCX2)联用的表面增强激光解吸一电离飞行时间质谱(SELDI—TOF—MS)技术检测Middlebrook7H9培养液和耻垢分枝杆菌7天培养滤液蛋白质/多肽,采用描述性分析其蛋白质/多肽谱并比较两者间的差异。结果在Middlebrook7H9培养液中检测到97种蛋白质/多肽,相对分子质量在1050~3940之间,丰度水平在86~7838相对强度值之间(相对强度值通过质谱峰面积计算);在耻垢分枝杆菌7天培养滤液中检测到125种蛋白质/多肽,相对分子质量在1050~9330之间,丰度水平在111~9961相对强度值之间;相对Middlebrook7H9培养液,耻垢分枝杆菌7天培养滤液的蛋白质/多肽谱发生了下列变化:45种消失、20种丰度降低、3种未变化、30种丰度增大、71种新产生。结论耻垢分枝杆菌作为快速生长分枝杆菌菌种,在体外培养生长时有活跃的蛋白质利用和分泌活动,对于既无侵袭力又无毒素产生的耻垢分枝杆菌而言,这些活动可能与其致病性密切相关,值得人们深入研究。 展开更多
关键词 耻垢分枝杆菌 培养滤液 蛋白质组 弱阳离子交换蛋白质芯片(wcx2) 表面增强激光解吸-电离飞行时间质谱(SELDI—TOF—MS)
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飞行时间质谱技术筛查上皮性卵巢癌患者血清特异性蛋白的研究
6
作者 王弋 胡芝 +1 位作者 柯晓慧 蒋联萍 《中国中西医结合外科杂志》 CAS 2009年第6期578-581,共4页
目的:应用飞行时间质谱技术筛选上皮性卵巢癌患者与正常人血清中差异性蛋白,探讨蛋白质组学诊断模型用于上皮性卵巢癌的早期诊断的可行性。方法:应用弱阳离子芯片(WCX2)及表面增强激光解析电离飞行时间质谱仪(SELDI-TOF-MS)检测20例正常... 目的:应用飞行时间质谱技术筛选上皮性卵巢癌患者与正常人血清中差异性蛋白,探讨蛋白质组学诊断模型用于上皮性卵巢癌的早期诊断的可行性。方法:应用弱阳离子芯片(WCX2)及表面增强激光解析电离飞行时间质谱仪(SELDI-TOF-MS)检测20例正常人(对照组)和40例上皮性卵巢癌(观察组)患者血清中的差异蛋白质,并检测差异蛋白筛选上皮性卵巢癌的特异性和敏感度。结果:对照组与观察组在1500~20000Da间,质荷比为3865Da、4318Da及5089Da的蛋白峰差异有统计学意义(P<0.05)。3个蛋白区分对照组与观察组的敏感性与特异性为80.00%(32/40)、85.00%(17/20)。结论:SELDI-TOF-MS技术对上皮性卵巢癌早期诊断具有一定价值。 展开更多
关键词 上皮性卵巢癌 wcx2芯片 SELDI-TOF-MS技术
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离心加速度对自蔓延离心法制备WC_x/Fe金属陶瓷组织的影响 被引量:1
7
作者 张育潜 高峰 《有色金属(冶炼部分)》 CAS 北大核心 2013年第10期48-50,共3页
采用自蔓延离心法制备WCx/Fe金属陶瓷内衬钢管,研究离心加速度对金属陶瓷组织的影响。结果表明,当离心加速度为50g时,涂层中存在氧化铝陶瓷相,随着离心加速度的增加,涂层组织由树枝晶向等轴晶转变。当离心加速度为200g时,涂层中的硬质... 采用自蔓延离心法制备WCx/Fe金属陶瓷内衬钢管,研究离心加速度对金属陶瓷组织的影响。结果表明,当离心加速度为50g时,涂层中存在氧化铝陶瓷相,随着离心加速度的增加,涂层组织由树枝晶向等轴晶转变。当离心加速度为200g时,涂层中的硬质相呈梯度分布。 展开更多
关键词 自蔓延离心法 离心加速度 wcx Fe金属陶瓷 组织
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基于QuEChERS前处理技术和弱阳离子交换色谱的牛奶和奶粉中三聚氰胺的快速检测方法 被引量:12
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作者 魏杰 郭志谋 +2 位作者 沈爱金 章飞芳 梁鑫淼 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期687-690,共4页
应用QuEChERS前处理技术,并结合弱阳离子交换色谱,建立了牛奶和奶粉中三聚氰胺的快速检测方法。样品使用医用酒精(乙醇含量75%)和一种新型脂肪吸附(LAS)材料超声振荡处理,在沉淀(吸附)蛋白质和脂肪的同时提取三聚氰胺,然后经8 000... 应用QuEChERS前处理技术,并结合弱阳离子交换色谱,建立了牛奶和奶粉中三聚氰胺的快速检测方法。样品使用医用酒精(乙醇含量75%)和一种新型脂肪吸附(LAS)材料超声振荡处理,在沉淀(吸附)蛋白质和脂肪的同时提取三聚氰胺,然后经8 000r/min离心,上清液过膜直接分析。色谱分析在弱阳离子交换色谱柱(WCX)上进行,采用2mmol/L pH为3.8的磷酸二氢钾水溶液为流动相,在5min内实现分离分析。结果表明,该方法在0.02~20mg/L内线性相关系数大于0.999 9。在1~50mg/kg添加浓度范围内,牛奶的平均回收率为98.9%~105.2%,相对标准偏差(RSD)为0.9%~3.4%;奶粉的平均回收率为86.4%~102.9%,RSD为1.5%~6.7%。本方法的检出限为0.05mg/kg(牛奶)和0.1mg/kg(奶粉)。整个分析检测过程没有使用有毒有害有机溶剂,是一种绿色的分析方法。 展开更多
关键词 QuEChERS方法 弱阳离子交换色谱 快速分析 三聚氰胺 牛奶 奶粉
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一种混合模式反相弱阳离子交换色谱填料的制备及其保留机理 被引量:8
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作者 彭西甜 冯钰锜 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期381-387,共7页
采用"点击化学"的合成方法制备了一种混合配体的辛基-羧基共同键合硅胶(OCS)材料,经元素分析和红外光谱表征,证明了辛基和羧基官能团均已成功键合到硅胶表面。将其作为混合模式反相弱阳离子交换(RP/W C X)的固定相填料,以3种... 采用"点击化学"的合成方法制备了一种混合配体的辛基-羧基共同键合硅胶(OCS)材料,经元素分析和红外光谱表征,证明了辛基和羧基官能团均已成功键合到硅胶表面。将其作为混合模式反相弱阳离子交换(RP/W C X)的固定相填料,以3种同系物阳离子表面活性剂作为探针分子,定量研究了该固定相的混合模式保留机理,考察了溶质保留因子与盐浓度和溶质亚甲基数目的关系,验证了混合模式固定相的单点和两点保留机理的数学模型,并进一步将其应用于一系列标准碱性混合物的分离。结果表明:两点保留机理更加符合实验的结果;根据混合模式两点保留机理的数学方程,可以得到单一的疏水或离子交换作用力对总保留的影响,对混合模式色谱的实际分离应用提供了有价值的参考。本文建立了反相弱阳离子交换混合模式OCS固定相的保留机理的定量模型,并证明了该固定相在碱性化合物的分离中具有很大的应用前景。 展开更多
关键词 反相弱阳离子交换色谱固定相 混合模式色谱 保留机理 数学模型 色谱分离
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Analysis of diferentially expressed protein from primary and recurrent ovarian cancer serum 被引量:5
10
作者 Yuan Wang Jin-Jin Yu +5 位作者 Ting Zhu Ling Xu Ming Xu Yu-Zheng Huang Hong Pu Chun-Qing Yu 《Asian Pacific Journal of Tropical Medicine》 SCIE CAS 2012年第7期573-576,共4页
Objective:To study the value of the differentially expressed proteins from primary and recurrent ovarian cancer serum for early diagnosis of primary and recurrent ovarian cancer.Methods: WCX kit(Bruker Daltonics GraBH... Objective:To study the value of the differentially expressed proteins from primary and recurrent ovarian cancer serum for early diagnosis of primary and recurrent ovarian cancer.Methods: WCX kit(Bruker Daltonics GraBH) and matrix-assisted laser desorption/ionization time-offlight mass spectrometry(MALDI-TOF-MS]technology were used to detect serum samples from 49 patients with primary ovarian cancer and 21 patients with recurrent disease.Results:In the mass range(Mr) from 1 000 to 12 000 Da,eight differentially expressed protein peaks were screened from primary ovarian cancer serum.Among them,four protein peaks with Mr 1 457,1 857,2 202, 7 761 were lowly expressed and the others with Mr 2 946,5 333,5 859,5 901 were highly expressed. Ten differentially expressed protein peaks were screened from recurrent ovarian cancer serum. Among them.1 944,1 980,2 080,2 661,2 993,4 450,4 659,5 359 Da protein expressions were increased significantly,and 1897,7868 Da protein expressions were decreased significantly.The pattern of primary ovarian cancer was applied to 8 early-stage ovarian cancer serum samples, and 7 serum samples were successfully predicted with the accuracy of 87.5%.The pattern of recurrent ovarian cancer was applied to 9 without pelvic:or abdominal mass recurrent ovarian cancer serum samples,and 8 serum samples were successfully predicled with the accuracy of 88.9%.Conclusions:Combination of MALDI-TOF-MS and WCX kit technology can directly screen the diferrential expressed protein from primary and recurrent ovarian cancer serum.They have clinical significance for enhancement of sensitivity and specificity of ovarian cancer diagnosis. 展开更多
关键词 Covarian cancer PRIMARY RECURRENT PROTEOMICS wcx KIT MALDI-TOF-MS
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气质法快速测定畜禽肉中4种β-兴奋剂的前处理新技术研究 被引量:4
11
作者 刘五一 方建军 +2 位作者 张旭 梅凯 王健 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2016年第6期154-157,共4页
研究气相色谱-质谱测定畜禽肉中特布他林、克伦特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺的简便、高效、准确的前处理技术。将绞碎的肉样品用5%高氯酸超声波提取,再以10 000 r/min离心15 min后,上清液用WCX固相萃取柱进行富集净化,衍生化后检测。4种... 研究气相色谱-质谱测定畜禽肉中特布他林、克伦特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺的简便、高效、准确的前处理技术。将绞碎的肉样品用5%高氯酸超声波提取,再以10 000 r/min离心15 min后,上清液用WCX固相萃取柱进行富集净化,衍生化后检测。4种兴奋剂在50μg/L^1000μg/L的范围具有良好线性,相关系数在0.995以上,加标回收率在84.32%~103.15%之间,RSD在1.35%~4.78%之间,表明试验方法准确可靠。 展开更多
关键词 特布他林 克伦特罗 沙丁胺醇 莱克多巴胺 wcx固相萃取柱
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固相萃取净化-超高效液相色谱-高分辨质谱法测定尿液中百草枯和敌草快残留 被引量:2
12
作者 潘胜东 王立 +1 位作者 邱巧丽 何仟 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1087-1094,共8页
尿液样品中百草枯(PQ)和敌草快(DQ)的检测是理化检验工作的难点。PQ和DQ具有分子极性大和水溶性好等特点,常规反相色谱柱难以保留;现有文献方法多采用亲水相互作用色谱法(HILIC)进行保留,但文献方法需采用高浓度缓冲盐作为流动相,增加... 尿液样品中百草枯(PQ)和敌草快(DQ)的检测是理化检验工作的难点。PQ和DQ具有分子极性大和水溶性好等特点,常规反相色谱柱难以保留;现有文献方法多采用亲水相互作用色谱法(HILIC)进行保留,但文献方法需采用高浓度缓冲盐作为流动相,增加了质谱仪的污染。基于上述问题,研究建立了弱阳离子交换(WCX)固相萃取净化-超高效液相色谱-高分辨质谱法(UPLC-HRMS)快速准确测定尿液样品中PQ和DQ残留的检测方法。尿液样品经混合磷酸盐缓冲液(pH=6.86)稀释和WCX固相萃取净化后,在Syncronis HILIC色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)上进行梯度洗脱分离,采用正离子电喷雾离子化模式(ESI^(+))和一级全扫描-数据依赖二级质谱扫描模式(Full mass-ddMS^(2))进行定量分析。研究通过对色谱条件的不断优化,将HILIC模式下流动相中甲酸铵缓冲盐的浓度降低至10 mmol/L,并系统优化了样品前处理过程中影响PQ和DQ准确性的因素。在最优条件下,PQ和DQ线性关系良好(r^(2)>0.998),在4个加标水平下(1.0、20.0、100.0和200.0μg/L),PQ和DQ的平均加标回收率分别为85.8%~101%和80.3%~86.9%,精密度(RSD)分别为0.8%~5.1%和0.9%~4.2%。方法的检出限(S/N≥3)和定量限(S/N≥10)分别为0.2μg/L和0.6μg/L。将建立的方法用于中毒病人临床治疗过程尿液中DQ含量的跟踪监测。该方法具有快速、简便、灵敏和准确等优点,适用于临床中毒病例尿液样品中PQ和DQ的检测。 展开更多
关键词 超高效液相色谱-高分辨质谱 弱阳离子交换固相萃取 百草枯 敌草快 尿液样品 基质效应
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复发性卵巢癌血清差异表达蛋白分析 被引量:1
13
作者 王元 余进进 +3 位作者 余玲 徐明 黄玉政 浦红 《中国现代医药杂志》 2010年第10期66-68,共3页
目的探讨血清差异表达蛋白对提高复发性卵巢癌的诊断意义。方法采用弱阳离子(WCX)磁珠纯化试剂盒和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术,对21例复发性卵巢癌和18例完全临床缓解期卵巢癌患者(对照组)的血清标本进行检测... 目的探讨血清差异表达蛋白对提高复发性卵巢癌的诊断意义。方法采用弱阳离子(WCX)磁珠纯化试剂盒和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术,对21例复发性卵巢癌和18例完全临床缓解期卵巢癌患者(对照组)的血清标本进行检测,筛选出复发性卵巢癌患者与对照组血清中的差异表达质谱峰,并建立诊断模型。结果在Mr1000~12000区段,发现复发性卵巢癌与对照组间差异表达蛋白峰10个(P<0.05)。其中Mr1944、1980、2080、2661、2993、4450、4659、5359的蛋白峰显著上调,Mr1897、7868则显著下调。结论 MALDI-TOF-MS结合磁珠技术能直接检测出复发性卵巢癌患者血清差异表达蛋白,对提高复发性卵巢癌诊断的敏感性和特异性具有一定的临床意义。 展开更多
关键词 卵巢癌 复发 蛋白组学 磁珠 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术
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卵巢癌血清差异表达蛋白分析 被引量:2
14
作者 朱婷 余进进 +3 位作者 徐明 黄玉政 浦红 郁春晴 《现代肿瘤医学》 CAS 2010年第3期542-545,共4页
目的:探讨卵巢癌血清差异表达蛋白对提高卵巢癌的诊断的意义。方法:采用弱阳离子(WCX)磁珠纯化试剂盒和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术,对41例晚期卵巢癌(FIGOⅢ、Ⅵ期)、40例良性卵巢肿瘤患者及40例健康人群对照... 目的:探讨卵巢癌血清差异表达蛋白对提高卵巢癌的诊断的意义。方法:采用弱阳离子(WCX)磁珠纯化试剂盒和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术,对41例晚期卵巢癌(FIGOⅢ、Ⅵ期)、40例良性卵巢肿瘤患者及40例健康人群对照血清标本进行检测,筛选出卵巢癌患者与对照组血清中的差异表达质谱峰,并建立诊断模型;再用此模型对8例早期卵巢癌(FIGOⅠ、Ⅱ期)进行测试,检测其用于早期卵巢癌诊断的可行性。结果:在Mr1000-12000区段,发现卵巢癌与对照组间差异表达蛋白峰8个(P<0.01或P<0.05),其中低表达的4个,Mr分别为1457,1857,2202,7761,高表达的4个,Mr分别为:2946,5333,5859,5901。用它们建立成卵巢癌的诊断模型,对8例早期卵巢癌患者进行预测,7例预测准确,准确率为87.5%。结论:MALDI-TOF-MS结合磁珠技术能直接检测出晚期卵巢癌患者血清差异表达蛋白,并且适用于早期卵巢癌患者的诊断,对提高卵巢癌诊断的敏感性和特异性具有一定的临床意义。 展开更多
关键词 卵巢癌 蛋白组学 磁珠 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术
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Peptidomic analysis of Chinese shrimp(Fenneropenaeus chinensis) hemolymph by magnetic bead-based MALDITOF MS
15
作者 王宝杰 刘梅 +2 位作者 蒋克勇 张国范 王雷 《Chinese Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2013年第2期407-415,共9页
Peptides in shrimp hemolymph play an important role in the innate immune response.Analysis of hemolymph will help to detect and identify potential novel biomarkers of microbial infection.We used magnetic bead-based pu... Peptides in shrimp hemolymph play an important role in the innate immune response.Analysis of hemolymph will help to detect and identify potential novel biomarkers of microbial infection.We used magnetic bead-based purification(ClinProt system) and matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry(MALDI-TOF MS) to characterize shrimp hemolymph peptides.Shrimp serum and plasma were used as the source of samples for comparative analysis,and it was found that serum was more suitable for shrimp hemolymph peptidomic analysis.To screen potential specific biomarkers in serum of immune-challenged shrimps,we applied magnetic bead-based MALDI-TOF MS to serum samples from 10 immune-challenged and 10 healthy shrimps.The spectra were analyzed using FlexAnalysis 3.0 and ClinProTools 2.1 software.Thirteen peptide peaks significantly different between the two groups were selected as candidate biomarkers of lipopolysaccharide(LPS)-infection.The diagnostic model established by genetic algorithm using five of these peaks was able to discriminate LPS-challenged shrimps from healthy control shrimps with a sensitivity of 90% and a specificity of 100%.Our approach in MALDITOF MS-based peptidomics is a powerful tool for screening bioactive peptides or biomarkers derived from hemolymph,and will help to enable a better understanding of the innate immune response of shrimps. 展开更多
关键词 MALDI-TOF-MS 生物活性肽 中国对虾 血淋巴 磁珠 表达分析 生物标志物 电离飞行时间质谱
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弱阳离子固相萃取净化-高效液相色谱-串联质谱法检测奶酪中链霉素和双氢链霉素残留 被引量:1
16
作者 杨昊 公丕学 +3 位作者 王骏 薛霞 吴昊 王德利 《中国食品卫生杂志》 CSCD 北大核心 2023年第4期529-534,共6页
目的建立奶酪中链霉素和双氢链霉素高效液相色谱-串联质谱分析方法。方法样品经20 mmol/L Na_(2)HPO_(4)(使用6 mol/L HCl调节pH到7.4)超声提取,WCX混合型弱阳离子交换柱净化,液相分离,串联四极杆质谱仪使用电喷雾电离,多反应监测正离... 目的建立奶酪中链霉素和双氢链霉素高效液相色谱-串联质谱分析方法。方法样品经20 mmol/L Na_(2)HPO_(4)(使用6 mol/L HCl调节pH到7.4)超声提取,WCX混合型弱阳离子交换柱净化,液相分离,串联四极杆质谱仪使用电喷雾电离,多反应监测正离子模式。结果在1~200 ng/mL浓度范围,线性相关系数(r)大于0.996;加标回收率范围82.2%~116.2%,相对标准偏差范围2.67%~7.6%。链霉素和双氢链霉素方法检出限、定量限为5、20μg/kg。结论本方法简便快速、灵敏度较高,适用于奶酪中链霉素及双氢链霉素的检测。 展开更多
关键词 链霉素 双氢链霉素 奶酪 wcx混合型弱阳离子固相萃取柱 高效液相色谱-串联质谱
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一种弱阳离子交换材料的亲水模式糖肽富集新方法 被引量:1
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作者 李先琴 俞冬萍 +4 位作者 丰小敏 郭志谋 李秀玲 邹丽娟 梁鑫淼 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1074-1079,共6页
亲水作用色谱(HILIC)材料在糖肽的富集与分离中得到越来越广泛的应用.针对目前HILIC材料糖肽选择性不足的缺点,发展新的糖肽富集方法十分必要.本工作发展了一种商品化的弱阳离子交换材料(WCX)在亲水模式下对糖肽的富集方法.首先考察了... 亲水作用色谱(HILIC)材料在糖肽的富集与分离中得到越来越广泛的应用.针对目前HILIC材料糖肽选择性不足的缺点,发展新的糖肽富集方法十分必要.本工作发展了一种商品化的弱阳离子交换材料(WCX)在亲水模式下对糖肽的富集方法.首先考察了微固相萃取(SPE)模式下WCX上多肽保留的机理.结果显示,WCX上糖肽的保留同时受乙腈含量和p H的影响.将WCX用于牛胎球蛋白(fetuin)胰蛋白酶酶解液中糖肽的富集,获得了39条糖肽信号.当fetuin与牛血清白蛋白(BSA)酶解液以物质的量比1∶5混合时,富集到26条糖肽信号.富集人免疫球蛋白(Ig G)胰蛋白酶酶解液时获得25条糖肽信号,1∶5时获得23条糖肽信号.实验说明WCX对唾液酸化和非唾液酸化糖肽的富集均有高选择性.该方法拓展了WCX的应用范围,丰富了HILIC材料的种类. 展开更多
关键词 wcx 糖肽富集 亲水作用色谱 质谱
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弱阳离子磁珠联合MALDI-TOF-MS在2型糖尿病大血管并发症检测中的应用探讨
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作者 颜怀军 周越球 +2 位作者 徐超 陈斌 相杭 《上海预防医学》 CAS 2016年第5期302-305,307,共5页
目的弱阳离子(WCX)磁珠联合应用基质辅助激光解析电离化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术分析2型糖尿病大血管并发症患者血清蛋白组,筛选差异蛋白峰并建立决策树模型,初步探讨所建立的决策树模型在2型糖尿病大血管并发症早期鉴别诊断中... 目的弱阳离子(WCX)磁珠联合应用基质辅助激光解析电离化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术分析2型糖尿病大血管并发症患者血清蛋白组,筛选差异蛋白峰并建立决策树模型,初步探讨所建立的决策树模型在2型糖尿病大血管并发症早期鉴别诊断中的临床意义。方法 55例2型糖尿病大血管并发症患者,84例2型糖尿病无大血管并发症患者,采用WCX联合MALDI-TOF-MS技术获得其蛋白质谱,分析差异并建立决策树模型,扩大样本量,通过盲法验证诊断模型的可靠性。结果建立了由质荷比为16 062.20、31 883.60和7 986.76差异蛋白峰组成的2型糖尿病大血管并发症决策树诊断模型,扩大样本量盲筛敏感性为96.3%,特异性分别为100.0%。结论应用WCX磁珠联合MALDI-TOF-MS技术可筛选出2型糖尿病大血管并发症患者的差异蛋白峰,建立的决策树模型具有的一定的临床应用前景。 展开更多
关键词 基质辅助激光解析电离化飞行时间质谱 wcx磁珠 2型糖尿病 大血管并发症
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固相萃取-高效液相色谱法分析血浆中的13种药物 被引量:6
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作者 张吟 陈一农 陈崇宏 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第21期1648-1651,共4页
目的建立弱阳离子交换(WCX)固相萃取法提取血浆中13种主要作用于中枢神经系统的药物并用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)分析。方法血浆经WCX小柱固相萃取后,在Agilent TC-C18色谱柱上,以磷酸盐缓冲液-乙腈为流动相,采用... 目的建立弱阳离子交换(WCX)固相萃取法提取血浆中13种主要作用于中枢神经系统的药物并用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)分析。方法血浆经WCX小柱固相萃取后,在Agilent TC-C18色谱柱上,以磷酸盐缓冲液-乙腈为流动相,采用梯度洗脱,流速为1.5 mL.min-1,扫描波长:200~364 nm;检测波长:210 nm。结果 13种药物的萃取回收率72.60%~110.24%,精密度均小于11.55%,检测限0.01~0.10 mg.L-1,线性相关系数在0.998 5以上。结论本法快速、灵敏、重现性好,可用于同时分析测定血浆中的13种药物。 展开更多
关键词 固相萃取 高效液相二极管阵列检测法 弱阳离子交换 血药浓度
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同一个体多种体液用于筛选卵巢癌早期诊断标志物的研究 被引量:2
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作者 樊冬梅 何涛 +2 位作者 周晓燕 谢晓娟 王焱 《医药论坛杂志》 2012年第1期58-59,63,共3页
目的采用蛋白质组学方法在卵巢癌患者的多种体液中同时筛选出共同异常的多肽,用于卵巢癌早期诊断的研究,并在卵巢癌患者的血清中进行验证,加深对卵巢癌癌变机制的理解。方法采用WCX磁珠结合MALDI-TOF-MS技术在卵巢癌患者的血清、腹水、... 目的采用蛋白质组学方法在卵巢癌患者的多种体液中同时筛选出共同异常的多肽,用于卵巢癌早期诊断的研究,并在卵巢癌患者的血清中进行验证,加深对卵巢癌癌变机制的理解。方法采用WCX磁珠结合MALDI-TOF-MS技术在卵巢癌患者的血清、腹水、尿液、囊液中进行比对筛选,将筛选出的异常改变的多肽峰在训练集和验证集血清中检验其诊断卵巢癌的灵敏度与特异度。结果四种体液中筛选出来卵巢癌患者血清中下调和上调的多肽峰分别为6081Da和4466DaP<0.05),经留一法验证,诊断卵巢癌的特异度为100%,敏感度为100%,盲法检测的诊断特异度为100%,敏感度为87.5%。结论同一个体的四种体液中同时筛选得到的肿瘤标志物具有较高的特异性,对卵巢癌的早期诊断具有一定价值。 展开更多
关键词 卵巢癌 早期诊断 磁珠 MALDI-TOF-MS
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