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人WDR79基因启动子表达载体的构建及鉴定
被引量:
1
1
作者
杨潮
何小杨
+3 位作者
莫淑芳
戴京
张欣宇
陈慧
《井冈山大学学报(自然科学版)》
2019年第3期31-34,55,共5页
人WDR79是一种重要的支架蛋白,在端粒酶组装、卡哈尔体(Cahar body)形成和DNA损伤修复等过程中发挥着重要作用。采用PCR扩增技术获得人WDR79基因启动子上游DNA序列,构建人WDR79基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-WDR79-promoter;通过...
人WDR79是一种重要的支架蛋白,在端粒酶组装、卡哈尔体(Cahar body)形成和DNA损伤修复等过程中发挥着重要作用。采用PCR扩增技术获得人WDR79基因启动子上游DNA序列,构建人WDR79基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-WDR79-promoter;通过双酶切、琼脂糖凝胶电泳、DNA测序和荧光素酶活性测定等实验手段,验证质粒pGL3-WDR79-promoter构建的正确性及其表达活性。本研究结果为进一步探讨人WDR79基因表达的调控机制奠定实验基础。
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关键词
wdr79
启动子克隆
荧光素酶活性检测
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职称材料
RNAi干扰WDR79基因对肺腺癌A549细胞增殖的抑制效应
被引量:
1
2
作者
袁平
王志田
+3 位作者
吕望
泮辉
杨运海
胡坚
《中国细胞生物学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第10期1382-1388,共7页
通过RNA干扰技术沉默端粒酶关键组分WDR79的表达,采用PCR法、Western blot、免疫荧光共聚焦、Southern blot、MTT、流式细胞术(FCM)分别检测WDR79 siRNA瞬时转染A549细胞后WDR79基因和蛋白的表达水平、端粒酶和端粒的结合情况和端粒长...
通过RNA干扰技术沉默端粒酶关键组分WDR79的表达,采用PCR法、Western blot、免疫荧光共聚焦、Southern blot、MTT、流式细胞术(FCM)分别检测WDR79 siRNA瞬时转染A549细胞后WDR79基因和蛋白的表达水平、端粒酶和端粒的结合情况和端粒长度变化、细胞生长增殖变化、细胞周期的变化及细胞凋亡率,探讨该基因的沉默表达对A549细胞的抑制作用。结果表明,WDR79 siRNA瞬时转染A549细胞显著降低WDR79 mRNA及蛋白水平(P<0.05),端粒和端粒酶的结合水平明显减少(P<0.05),细胞增殖的活力被抑制(P<0.05),干扰后停留在S期的细胞减少(P<0.05),停留在G1期的细胞增多(P<0.05)。提示WDR79 siRNA的瞬时转染可显著降低WDR79基因及蛋白的表达,并有抑制肺腺癌A549细胞的生物学效应,进一步探索了WDR79基因在肿瘤发生发展中的重要作用,并在为肺癌的治疗中寻找更有效的靶点提供了实验证据。
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关键词
肺腺癌
wdr79
端粒酶
A549细胞
原文传递
题名
人WDR79基因启动子表达载体的构建及鉴定
被引量:
1
1
作者
杨潮
何小杨
莫淑芳
戴京
张欣宇
陈慧
机构
赣南师范大学生命科学学院
出处
《井冈山大学学报(自然科学版)》
2019年第3期31-34,55,共5页
基金
国家自然科学基金项目(81660491,81402304)
江西省自然科学基金项目(20161BAB215221)
赣南师范大学大学生创新创业训练计划项目(15zb08)
文摘
人WDR79是一种重要的支架蛋白,在端粒酶组装、卡哈尔体(Cahar body)形成和DNA损伤修复等过程中发挥着重要作用。采用PCR扩增技术获得人WDR79基因启动子上游DNA序列,构建人WDR79基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-WDR79-promoter;通过双酶切、琼脂糖凝胶电泳、DNA测序和荧光素酶活性测定等实验手段,验证质粒pGL3-WDR79-promoter构建的正确性及其表达活性。本研究结果为进一步探讨人WDR79基因表达的调控机制奠定实验基础。
关键词
wdr79
启动子克隆
荧光素酶活性检测
Keywords
wdr79
promoter cloning
activity assay of luciferase
分类号
Q782 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
RNAi干扰WDR79基因对肺腺癌A549细胞增殖的抑制效应
被引量:
1
2
作者
袁平
王志田
吕望
泮辉
杨运海
胡坚
机构
浙江大学医学院附属第一医院
出处
《中国细胞生物学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第10期1382-1388,共7页
基金
国家自然科学基金(批准号:31170720/c050103)资助的课题~~
文摘
通过RNA干扰技术沉默端粒酶关键组分WDR79的表达,采用PCR法、Western blot、免疫荧光共聚焦、Southern blot、MTT、流式细胞术(FCM)分别检测WDR79 siRNA瞬时转染A549细胞后WDR79基因和蛋白的表达水平、端粒酶和端粒的结合情况和端粒长度变化、细胞生长增殖变化、细胞周期的变化及细胞凋亡率,探讨该基因的沉默表达对A549细胞的抑制作用。结果表明,WDR79 siRNA瞬时转染A549细胞显著降低WDR79 mRNA及蛋白水平(P<0.05),端粒和端粒酶的结合水平明显减少(P<0.05),细胞增殖的活力被抑制(P<0.05),干扰后停留在S期的细胞减少(P<0.05),停留在G1期的细胞增多(P<0.05)。提示WDR79 siRNA的瞬时转染可显著降低WDR79基因及蛋白的表达,并有抑制肺腺癌A549细胞的生物学效应,进一步探索了WDR79基因在肿瘤发生发展中的重要作用,并在为肺癌的治疗中寻找更有效的靶点提供了实验证据。
关键词
肺腺癌
wdr79
端粒酶
A549细胞
Keywords
lung adenocarcinoma
wdr79
telomerase
A549 cells
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人WDR79基因启动子表达载体的构建及鉴定
杨潮
何小杨
莫淑芳
戴京
张欣宇
陈慧
《井冈山大学学报(自然科学版)》
2019
1
下载PDF
职称材料
2
RNAi干扰WDR79基因对肺腺癌A549细胞增殖的抑制效应
袁平
王志田
吕望
泮辉
杨运海
胡坚
《中国细胞生物学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
1
原文传递
已选择
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