人乳腺癌组织中Wnt2基因的表达及靶向抑制基因表达对乳腺癌细胞MCF-7增殖、迁移和侵袭力的影响

目的探讨人乳腺癌组织中Wnt2基因的表达及靶向抑制基因表达对乳腺癌细胞MCF-7增殖、迁移和侵袭力的影响。方法选取乳腺癌患者68例和女性健康志愿者60例作为研究对象。采用EILSA法检测2组血清中Wnt2表达量;利用免疫组化法(IHC)检测68例乳腺癌患者的乳腺癌组织、癌旁组织、正常组织中Wnt2的阳性表达情况及表达量。通过向乳腺癌细胞株MCF-7中转染Wnt2的siRNA和阴性对照(NC)的siRNA进行靶向抑制,测定Wnt2基因对MCF-7细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭能力的调节作用。结果与健康志愿者相比,乳腺癌患者Wnt2含量(10.56±3.62)ng/m L明显升高(P<0.01)。乳腺癌组织中Wnt2阳性细胞率、染色强度、IHC评分分别为(77.34±9.68)%、(2.45±0.18)分、(9.86±1.15)分,均高于癌旁组织和正常组织,组间差异有统计学意义(P<0.05)。Wnt2-siRNA组细胞在培养24 h、48 h、72 h、96 h的OD_(450 nm)值均显著低于NC-siRNA组,组间差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。Wnt2-siRNA组细胞凋亡率为(8.56±0.52)%,显著高于NC-siRNA组的(6.18±0.63)%(P<0.01)。Wnt2-siRNA组细胞穿过Transwell小室的细胞数显著少于NC-siRNA组(P<0.01)。结论乳腺癌组织中Wnt2基因表达量显著增加,通过靶向抑制实验揭示Wnt2能够促进乳腺癌细胞增殖、抑制凋亡、促进癌细胞迁移侵袭。

Wnt2基因启动子DNA甲基化在子痫前期发病机制中的作用

目的检测胎盘组织中Wnt2基因启动子区的DNA甲基化程度,探讨Wnt2基因与子痫前期发病的关系。方法收集产科病房经剖宫产分娩的早发型重度子痫前期患者30例作为早发型重度子痫前期组(ZPE),晚发型重度子痫前期患者30例作为晚发型重度子痫前期组(WPE),同期住院经剖宫产分娩的正常晚期妊娠妇女30例作为对照组(NC)。采用甲基化特异性PCR技术检测三组胎盘组织中Wnt2基因启动子区的DNA甲基化程度。结果与NC组相比,ZPE组及WPE组Wnt2基因启动子区的DNA甲基化程度均显著升高(P<0.05);ZPE组及WPE组差异无统计学意义。结论正常晚期妊娠妇女、早发型及晚发型重度子痫前期患者的胎盘组织中,均存在Wnt2基因启动子区的DNA不完全甲基化。与正常晚期妊娠妇女相比,早发型重度子痫前期及晚发型重度子痫前期患者胎盘组织中Wnt2基因启动子区的DNA甲基化程度均明显增加。

苏博美利奴羊胚胎期WNT2基因的组织表达及其生物信息学预测分析

【目的】检测WNT2基因在苏博美利奴羊胚胎期135 d不同组织中的表达水平,了解WNT2基因的分子结构和进化特征,从分子水平及进化特征上研究苏博美利奴羊的组织器官与WNT2基因表达之间的内在联系,为筛选细毛羊毛囊发育相关候选基因提供理论依据。【方法】采用qRT-PCR法研究苏博美利奴羊毛囊成熟时期WNT2基因在不同组织中的表达,并使用PROMO软件预测WNT2基因启动子区域序列的转录因子,并用Cytoscape_v3.5.1软件可视化,使用MEGA 7.0软件分析WNT2基因启动子区域序列的核苷酸组成成分及密码子的偏好性,并且利用绵羊、山羊、牛、人等9个物种的WNT2基因的DNA序列构建系统进化树。【结果】WNT2基因在皮肤组织中的表达量极显著高于心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏及肌肉组织。在绵羊WNT2基因启动子区域序列共预测出101个相关转录因子,4种碱基呈现均匀分布,CAG与UCU是使用相对较多的密码子,对WNT2基因的DNA序列系统进化树分析发现山羊和绵羊之间的进化关系比与其他哺乳动物进行比较时更为接近。【结论】建立了胚胎期135 d的苏博美利奴羊的不同组织中WNT2基因表达量的RT-PCR方法,并使用生物信息学软件对其分子结构和进化特征进行分析。

苏博美利奴羊皮肤组织中WNT2基因的DNA甲基化与表达量分析

毛囊是皮肤的衍生物,WNT信号通路是已知与毛囊发育密切相关的通路之一,为研究WNT信号通路中关键基因WNT2的DNA甲基化和基因表达对羊毛性状的调控作用,本研究以周岁苏博美利奴羊为研究对象,采用亚硫酸氢盐测序法(BSP),并结合前期MeDIP-seq结果检测了WNT2基因在第5外显子及前后100 bp处的DNA甲基化模式,通过实时荧光定量PCR法检测WNT2基因在苏博美利奴羊皮肤组织中的表达量。结果显示:WNT2基因在2组中的甲基化水平均较高,且2组的表达水平与DNA甲基化水平变化趋势一致,同时,CpG11位点的甲基化水平与表达量之间呈现显著正相关,该位点可能与羊毛纤维直径有关,表明WNT2基因的DNA甲基化水平对羊毛纤维直径有一定作用。本实验为后期深入研究DNA甲基化对毛囊的影响提供了重要参考,也为该基因的进一步研究提供理论基础。

松果菊苷对大鼠Leydig细胞衰老模型AXL和wnt2b基因的影响

目的探讨松果菊苷对大鼠Leydig细胞衰老模型AXL和wnt2b基因的影响。方法选用原代大鼠睾丸间质(Leydig)细胞为研究对象,主要分为正常组,衰老组和松果菊苷用药组,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)和甲基化特异性PCR检测AXL和wnt2b基因的表达水平和甲基化水平。结果松果菊苷用药组AXL mRNA表达水平明显低于衰老组(P<0.05),wnt2b甲基化水平明显高于衰老组(P<0.05)。结论松果菊苷可以通过降低AXL mRNA表达水平,提高wnt2b基因的甲基化水平,抑制Leydig细胞的衰老状态。

Wnt2/β-catenin信号通路及其在肿瘤中的作用

Wnt2基因是Wnt家族成员之一，定位于染色体7q31。Wnt2蛋白属于分泌型糖蛋白，蛋白大小约为40kD，含有360个氨基酸残基。Wnt2是wnt信号通路的启动分子，通过自分泌或旁分泌方式发挥作用，通常激活经典的Wnt／β-cate-nin信号通路。研究表明Wnt2与胚胎发育、肿瘤的发生发展关系密切。wnt2 mRNA在胎儿的肺脏、肾脏以及胎盘有表达，但在成人的胃肠道却没有表达。Wnt2是大鼠内胚层器官如前肠、肺发育的必要因素。Wnt2与许多肿瘤的发生、增殖、侵袭、转移等许多生物学行为相关，有可能作为肿瘤诊断与治疗的靶点。本文将重点介绍近年来wnt2信号通路研究进展，以及Wnt2通路与肿瘤的关系。

Wnt_2B基因在胃癌组织及相应癌旁组织中的表达

目的:探讨Wnt2B基因在胃癌组织及相应癌旁组织中的表达及其意义。方法:采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术检测胃癌组织及相应癌旁组织中Wnt2B基因mRNA的表达水平。结果:Wnt2B基因在37例人类胃癌组织及相应癌旁组织中均有表达,阳性率达100%;Wnt2B基因在胃癌组织中的表达水平明显高于相应癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.001)。结论:Wnt2B基因可能参与了胃癌的发生发展过程,在胃癌组织中表达上调可能有助于胃癌的早期诊断。