期刊文献+
共找到4篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
Assessment of genotoxicity and cytotoxicity of standardized aqueous extract from leaves of Erythroxylum cuneatum in human HepG2 and WRL68 cells line
1
作者 RK Wesam AN Ghanya +2 位作者 HH Mizaton M ILham A Aishah 《Asian Pacific Journal of Tropical Medicine》 SCIE CAS 2013年第10期811-816,共6页
Objective:To investigate the cytotoxicity and the genotoxicity of standardized aqueous of dry leaves of Erythroxylum cuneatum(E.cuneatum)in human HepG2 and WRL68 cells.Methods:The cytoloxicity of E.cuneatum extract wa... Objective:To investigate the cytotoxicity and the genotoxicity of standardized aqueous of dry leaves of Erythroxylum cuneatum(E.cuneatum)in human HepG2 and WRL68 cells.Methods:The cytoloxicity of E.cuneatum extract was evaluated by both MTS and LDH assays.Genotoxicity study on E.cuneatum extract was assessed by the single cell gel electrophoresis(comet assay).The protective effect of E.cuneatum against menadione-induced cytotoxicity was also investigated.Results:Results from this study showed that E.cuneatum extract exhibited cytotoxic activities towards the cells with IC_(50)value of(125±12)and(125±14)μg/mL for HepG2and WRL68 cells respectively,after 72 h incubation period as determined by MTS assay.LDH leakage was detected at(251±19)and(199.5±12.0)μg/mL for HepG2 and WRL68 respectively.Genotoxicity study results showed that treatment with E.cuneatum up to 1 mg/mL did not cause obvious DNA damage in WRL68 and HepG2 cells.Addition of E.cunaetum did not show significant protection towards menadione in WRL68 and HepG2 Cells.Conclusions:E.cuneatum standardized aqueous extract might be developed in onler to establish new pharmacological possibilities for its application. 展开更多
关键词 Erythroxylum cuneatu CYTOTOXICITY GENOTOXICITY DNA DAMAGE HEPG2 wrl68
下载PDF
慢病毒介导的稳定过表达人谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚基基因的WRL68细胞株构建 被引量:2
2
作者 范誉 农清清 +5 位作者 廖娟 胡新梅 朱雪凤 李江恒 郭尧平 陆继培 《环境与健康杂志》 CAS 北大核心 2015年第10期903-907,F0003,共6页
目的利用慢病毒载体构建稳定过表达人谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)的WRL68细胞株。方法采用PCR方法合成GCLC基因全长,经Not I、Nsi I酶切后克隆到慢病毒载体LV6上;采用PCR、酶切、测序鉴定重组质粒LV6-GCLC;将重组质粒转染293T细... 目的利用慢病毒载体构建稳定过表达人谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)的WRL68细胞株。方法采用PCR方法合成GCLC基因全长,经Not I、Nsi I酶切后克隆到慢病毒载体LV6上;采用PCR、酶切、测序鉴定重组质粒LV6-GCLC;将重组质粒转染293T细胞,收集培养上清并感染WRL68细胞,经嘌呤霉素筛选出稳定过表达细胞株。采用增强型绿色荧光蛋白检测转染情况,采用Real-time PCR及Western blotting鉴定所构建的细胞株;MTT法检测细胞活性;采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞谷胱甘肽(GSH)含量。结果 PCR、酶切及测序结果表明重组慢病毒载体构建成功;重组慢病毒转染293T细胞后可观察到荧光及蛋白表达,包装过表达慢病毒并检测其浓缩滴度为1.0×109 TU/ml;用1μg/ml嘌呤霉素成功筛选出稳定过表达细胞株;GCLC过表达组中GCLC的m RNA和蛋白的表达量高于空载体转染组及对照组(P<0.05);GCLC过表达组、空载体转染组及对照组的细胞活性间比较,差异无统计学意义(P>0.05);GCLC过表达组GSH含量明显高于空载体转染组及对照组(P<0.05)。结论成功构建了稳定过表达人GCLC的WRL68细胞株。 展开更多
关键词 慢病毒载体 GCLC 过表达 wrl68细胞
原文传递
微囊藻毒素-LR诱导的恶性转化肝细胞miRNA表达谱的变化 被引量:3
3
作者 朱雪凤 农清清 +7 位作者 范誉 李江恒 贾雪姣 费梦雪 马智星 黄秋月 廖娟 胡新梅 《环境与健康杂志》 CAS 北大核心 2018年第1期10-13,F0003,共5页
目的构建微囊藻毒素-LR(microcystin-LR,MC-LR)诱导的人永生化肝细胞株(WRL68细胞)恶性转化模型,检测mi RNA表达谱,寻找差异表达的mi RNA。方法用10 nmol/L MC-LR对WRL68细胞进行连续染毒至第25代,进行软琼脂集落形成实验及裸鼠成瘤实... 目的构建微囊藻毒素-LR(microcystin-LR,MC-LR)诱导的人永生化肝细胞株(WRL68细胞)恶性转化模型,检测mi RNA表达谱,寻找差异表达的mi RNA。方法用10 nmol/L MC-LR对WRL68细胞进行连续染毒至第25代,进行软琼脂集落形成实验及裸鼠成瘤实验。通过mi RNA芯片技术检测和分析对照WRL68细胞和恶性转化细胞的mi RNA表达谱;采用实时荧光定量PCR对芯片结果加以验证;应用Target Scan在线软件预测mi RNA可能调控的靶基因。结果第25代MC-LR染毒组细胞在软琼脂中可以形成集落,能在裸鼠皮下形成肿瘤。芯片检测分析显示,表达差异显著的mi RNA有54个,表达上调有35个,表达下调有19个。实时荧光定量PCR结果显示,hsa-mi R-140-3p、hsa-mi R-19b-1-5p、hsami R-203a和hsa-mi R-494均下调(P<0.05),与芯片检测结果趋势一致。以生物信息学技术分析mi R-494可能调控的靶基因,结果预测到3个与肿瘤相关的潜在靶基因,分别是肿瘤坏死因子受体相关因子3(TNF receptor-associated factor 3,TRAF3)、微管相关肿瘤抑制基因(microtubule associated tumor suppressor 1,MTUS1)和结肠癌转移相关基因(metastasis associated in colon cancer 1,MACC1)。结论 MC-LR诱导肝细胞恶性转化过程中可引起mi RNA表达谱发生显著改变,差异表达的mi RNA可能在肝细胞恶性转化过程中起着重要作用。 展开更多
关键词 微囊藻毒素-LR 细胞恶性转化 MIRNA wrl68细胞
原文传递
微囊藻毒素-LR致人肝细胞恶性增殖中长链非编码RNA H19的表达及白藜芦醇的干预作用
4
作者 关斌 农清清 +5 位作者 费梦雪 贾雪姣 黄秋月 马智星 王佑新 唐燕梅 《环境与健康杂志》 CAS 北大核心 2020年第7期576-580,共5页
目的研究微囊藻毒素-LR(microcystin-LR,MC-LR)致人肝细胞株WRL68细胞恶性增殖过程中长链非编码RNA H19的表达改变及白藜芦醇(resveratrol,Res)的干预作用。方法将WRL68细胞随机分为溶剂对照(0.1%二甲基亚砜)组和25、100 nmol/L白藜芦... 目的研究微囊藻毒素-LR(microcystin-LR,MC-LR)致人肝细胞株WRL68细胞恶性增殖过程中长链非编码RNA H19的表达改变及白藜芦醇(resveratrol,Res)的干预作用。方法将WRL68细胞随机分为溶剂对照(0.1%二甲基亚砜)组和25、100 nmol/L白藜芦醇组及MC-LR染毒组(10 nmol/L MC-LR染毒至25代)以及25、100 nmol/L白藜芦醇干预(白藜芦醇+10 nmol/L MC-LR)组,培养至25代。采用MTT法、平板克隆形成实验检测细胞的增殖能力,采用实时荧光定量PCR测定H19的表达水平。结果与溶剂对照组相比,MC-LR染毒不同时间WRL68细胞的存活率均上升,除第15代染毒24 h外,差异均有统计学意义(P<0.05);且MC-LR染毒72、96 h时第25代WRL68细胞的存活率高于15代细胞,差异均有统计学意义(P<0.05)。MC-LR染毒第25代WRL68细胞的克隆形成率为114.6%,高于溶剂对照组(22.87%),差异有统计学意义(P<0.05)。与溶剂对照组相比,100 nmol/L白藜芦醇处理24~96 h的第25代WRL68细胞的存活率下降,差异均有统计学意义(P<0.05);100 nmol/L白藜芦醇干预组处理24~96 h的第25代WRL68细胞的存活率低于MC-LR染毒组和25 nmol/L白藜芦醇干预组,差异均有统计学意义(P<0.05)。而MC-LR染毒组和25 nmol/L白藜芦醇干预组染毒24~96 h的第25代WRL68细胞的存活率间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。与溶剂对照组比较,MC-LR染毒组第10、15、20、25代WRL68细胞中H19的表达水平均较高,而100 nmol/L白藜芦醇组表达水平均较低,差异均有统计学意义(P<0.05);与MC-LR染毒组比较,100 nmol/L白藜芦醇干预组第10、15、20、25代WRL68细胞中H19的表达水平均较低,差异均有统计学意义(P<0.05)。随着处理时间的延长,MC-LR染毒组WRL68细胞中H19的表达水平呈上升趋势,而100 nmol/L白藜芦醇组和100 nmol/L白藜芦醇干预组WRL68细胞中H19的表达水平均呈下降趋势。第5代不同处理组的细胞中H19的表达水平无明显变化。结论白藜芦醇可下调MC-LR染毒细胞中H19的表达水平并抑制MC-LR诱导的肝细胞恶性增殖。 展开更多
关键词 长链非编码RNA H19 微囊藻毒素-LR 白藜芦醇 wrl68细胞 恶性增殖
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部