不平衡氨基酸肠内营养联合5-氟尿嘧啶对大鼠Walker-256癌肉瘤生长的影响

目的:探讨富含亮氨酸和精氨酸的不平衡氨基酸肠内营养(EN)联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)对大鼠Walker-256癌肉瘤生长的影响。方法:SD大鼠空肠造瘘,皮下接种Walker-256癌肉瘤,36只接种成功的大鼠随机分为A组(平衡氨基酸+生理盐水组)、B组(平衡氨基酸+5-Fu组)、C组(富含亮氨酸及精氨酸的不平衡氨基酸+5-Fu组)。测定各组治疗后肿瘤重量、抑瘤率、PCNA指数、凋亡指数、肿瘤细胞周期及大鼠生存时间。结果:A、B、C组G0/G1期比例依次增高(P<0.01);凋亡指数依次增高(P<0.05或P<0.01);生存时间依次延长(P<0.05或P<0.01);S期比例依次下降(P<0.01);PCNA指数依次下降(P<0.01);瘤重依次下降(P<0.01)。结论:富含亮氨酸及精氨酸的不平衡氨基酸EN能明显抑制肿瘤生长,并能增强5-Fu的抗肿瘤效应。

血管生成抑制剂TNP-470抑制Walker 256肉瘤生长的实验研究

ＴＮＰ－４７０是半合成的烟曲霉素类似物，具有较强的抗血管生成活性，为了验证其抗癌作用，本文将Ｗａｌｋｅｒ２５６肉瘤细胞接种于Ｗｉｓａｔｒ大鼠皮下，将５０只大鼠随机分成Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ５组。第二天起分别给予生理盐水。ＴＮＰ－４７０、ＣＴＸＳ．Ｃ．，ｑ．ｏ．ｄ．第九天时，Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ各组皮下瘤重分别为３．８８±１．２４、２．２０±０．２５、０．８６±０．３０，１．１７±０．３３克。

^(153)Sm-乙二胺四亚甲基膦酸对 Walker 256癌荷瘤大鼠骨侵袭骨溶解的抑制作用

目的研究１５３Ｓｍ－乙二胺四亚甲基膦酸（１５３Ｓｍ－ＥＤＴＭＰ）对荷瘤大鼠骨侵袭、骨溶解的抑制作用。方法运用Ｘ线骨骼照片和胫骨病理切片，观察Ｗａｌｋｅｒ２５６癌大鼠模型的肿瘤骨侵袭和骨溶解情况。结果荷瘤大鼠静脉注射１５３Ｓｍ－ＥＤＴＭＰ７４，１４８ＭＢｇ／ｋｇ后，遭受Ｗａｌｋｅｒ２５６癌侵袭及发生骨溶解的胫骨数减少近一半，３７ＭＢｇ／ｋｇ组对癌的骨侵袭和骨溶解仍有抑制作用。但各组大鼠的移植瘤重量没有差异。结论１５３Ｓｍ－ＥＤＴＭＰ能抑制Ｗａｌｋｅｒ癌模型大鼠骨侵袭和骨溶解，但对移植瘤生长无抑制作用，故其抗癌骨侵袭、骨溶解的作用不是通过抑制动物移植瘤生长来实现的。

皂荚提取物对肝癌大鼠基质金属蛋白酶抑制因子3/基质金属蛋白酶蛋白的影响

目的:观察皂荚提取物对肝癌大鼠TIMP3/MMPs蛋白的影响。方法:以皂荚提取物低、中、高剂量作用于肝癌模型大鼠,应用Western blot检测肝癌大鼠组织中TIMP3、MMP2及MMP9蛋白的表达水平。结果:皂荚提取物低、中、高剂量作用后的大鼠肝癌组织病理形态学得到明显改善,并且使组织中TIMP-3蛋白表达上调(均P<0.01),抑制MMP2(低剂量组P<0.05;中、高剂量组P<0.01)及MMP9(低剂量组P<0.05;中、高剂量组P<0.01)蛋白的表达。结论:皂荚提取物具有显著的抗肝癌作用,且该效应与影响TIMP3/MMPs蛋白有关,高剂量皂荚提取物效果最为显著。

高强度聚焦超声对大鼠肝癌及外周血淋巴细胞功能的影响

目的 通过组织学和淋巴细胞功能的变化 ,探讨高强度聚焦超声 (highintensityfocusedultrasound ,HIFU)对大鼠肝癌及其免疫的影响。方法 利用Wistar大鼠 ,采用癌块包埋法建立大鼠W 2 5 6肝癌模型 (4 0只 ) ;同时 ,以相同程序建立正常肝对照组 (C组 ,大鼠 2 0只 )。 10d后 ,应用HIFU(10MHz ,15 2 8.7W /cm2 ,2 0s× 2次 )对治疗组 (A组 ) 2 0只大鼠的癌灶进行照射 ,以同样方式照射C组大鼠相同部位的正常肝组织 ;荷癌肝对照组 (B组 )则按同样步骤对 2 0只大鼠的癌灶进行假照射。2周后采集大鼠外周血分离淋巴细胞 ,应用 4甲基偶氮唑盐 (MTT)法对各组大鼠淋巴细胞活性进行检测 ;并对病灶与正常组织交界区进行光镜、电镜观察。结果 靶区组织凝固坏死 ,无癌细胞或肝细胞残存。A组的淋巴细胞杀肿瘤细胞活性 (2 .0 5 41± 0 .6 6 42 )与C组的 (1.910 8± 0 .5 5 41)相似 ,两者差异无显著性 (P >0 .0 5 )。但均明显高于B组的淋巴细胞活性 (1.3913± 0 .6 0 6 8) ,(t=3.2 949,P <0 .0 0 5 ;t=2 .82 74,P <0 .0 2 )。结论 HIFU可以杀灭大鼠肝癌细胞 ;并能诱发机体抗癌免疫反应 。

大鼠肝包膜下移植Walker-256制备肝癌模型

目的通过原位移植的方法制备大鼠肝癌动物模型。方法取大鼠肿瘤细胞Walker-256制备为浓度1×108个/ml,分别于Wistar大鼠肝包膜下接种0.04 ml。观察大鼠肝脏实体瘤的生长情况及肺转移的发生率。结果肝包膜下接种细胞悬液7 d可见较小肿瘤块生长;14 d开始出现肺转移,并伴有肠系膜、生殖系统的转移;21 d肺转移率达100%。肝肿瘤组织HE染色结果可见肿瘤组织呈条索及团块状排列,排列紊乱,癌细胞索之间由血窦相连,癌肿边缘的肝组织受压萎缩。肺组织切面有多个散在的圆形或卵圆形实化灶。HE染色结果可见腺体样或乳头状结构,核染色深,核仁、核膜比较清楚。

磁场联合阿霉素磁液靶向治疗鼠种植性胃肿瘤的实验研究

目的 探讨阿霉素磁液经消化道给药后 ,联合外磁场对鼠种植性胃肿瘤的靶向治疗作用机制。方法 利用Walker- 2 5 6瘤细胞制作鼠种植性胃肿瘤模型 ,并分成阿霉素磁液联合外磁场的靶向组 ,单纯阿霉素治疗的非靶向组及空白对照组。观察动物的一般状况 ,肿瘤生长率 ,病理组织学改变及动物生存时间等变化。结果 与空白对照组比较 ,靶向组动物肿瘤生长明显缓慢 ,瘤重及瘤体积抑制率分别为 78.0 8%和 82 .5 2 % (χ2 =2 7.96 ,P <0 .0 1) ,动物生存时间明显延长 ,延长率达2 86 .38% (χ2 =19.5 4,P <0 .0 1) ,并出现明显病理组织学改变。结论 磁场联合阿霉素磁液的靶向治疗 ,具有明显协同的抑制鼠种植性胃肿瘤生长的作用 。

建立大鼠常位肺肿瘤模型的新方法

目的应用支气管内细胞移植的方法建立大鼠肺肿瘤模型。方法40只雌性Wistar大鼠（平均体重169g±10g），用戊巴比妥钠腹腔注射麻醉大鼠，气管切开，超细导管支气管插管，接种肿瘤细胞（1×10^5～5×10^5）。病理学检查，计算肿瘤成活率。结果造模动物40只，存活39只。接种1×10^5～5×10^5个细胞各组动物的肿瘤成活率分别为60％、80％、90％和100％。结论应用支气管内细胞移植建立常位大鼠肺肿瘤模型的方法是可行的，其肿瘤成活率高，手术死亡率低，方法简单易行，易于重复。

Influence of hepatic arterial blockage on blood perfusion and VEGF,MMP-1 expression of implanted lver cancer in rats

AIM: To investigate the influence of hepatic arterial blockage on blood perfusion of transplanted cancer in rat liver and the expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) and matrix metalloproteinase-1 (MMP-1), and to explore the mechanisms involved in transarterial embolization (TAE)-induced metastasis of liver cancer preliminarily. METHODS: Walker 256 carcinosarcoma was transplanted into rat liver to establish the liver cancer model. Hepatic arterial ligation (HAL) was used to block the hepatic arterial blood supply and simulate TAE. Blood perfusion of tumor in control, laparotomy control, and HAL group was analyzed by Hoechst 33342 labeling assay, the serum VEGF level was assayed by ELISA, the expression of VEGF and MMP-1 mRNA was detected by in situ hybridization. RESULTS: Two days after HAL, the number of Hoechst 33342 labeled cells which represent the blood perfusion of tumor directly and hypoxia of tumor indirectly in HAL group decreased significantly compared with that in control group (329+/-29 vs 384+/-19, P【0.01). The serum VEGF level in the HAL group increased significantly as against that of the control group (93 ng.L(-1)+/-44 ng.L(-1) vs 55 ng.L(-1)+/-19 ng.L(-1), P【0.05). The expression of VEGF and MMP-1 mRNA in the tumor tissue of the HAL group increased significantly compared with that of the control and the laparotomy control groups (P【0.05). The blood perfusion data of the tumor, represented by the number of Hoechst 33342 labeled cells, showed a good linear inverse correlation with the serum VEGF level (r=-0.606, P【0.05) and the expression of VEGF mRNA in the tumor tissue ( r =-0.338, P【0.01). CONCLUSION: Blockage of hepatic arterial blood supply results in decreased blood perfusion and increased expression of metastasis-associated genes VEGF and MMP-1 of transplanted liver cancer in rats. Decreased blood perfusion and hypoxia may be the major cause of up-regulated expression of VEGF.

碘油栓塞致大鼠肝肿瘤细胞凋亡和动态病理观察

目的 研究经肝动脉碘油灌注栓塞后大鼠肝肿瘤病理学表现 ,观察肿瘤细胞凋亡情况。方法 4 1只Walker 2 5 6大鼠肝癌模型随机分为 6组 :对照组 6只大鼠经胃十二指肠肝动脉灌注 76 %泛影葡胺 0 .2～ 0 .3ml;实验组肝动脉灌注栓塞超液态碘油 0 .5ml/kg与泛影葡胺乳剂 (1∶1) ,按碘油栓塞后 0 ,1,3,5 ,10d分为 5组 ,每组 7只。光镜和透射电镜分别观察大鼠肝肿瘤组织病理 ,检测凋亡细胞。结果 与对照组比较 ,实验组大鼠的肿瘤增长率 (GR)受到抑制 ,栓塞 3d组GR为 2 8% ,对照组为 133%。 3～ 10d组肿瘤坏死程度加重 (P <0 .0 1) ,10d组有 1例完全坏死 ,栓塞后早期炎症反应明显 ,后期出现纤维包裹和分隔。 1～ 10d组有 17例大鼠的凋亡细胞计数为阳性 ,主要位于肿瘤周边 ,呈典型细胞凋亡形态学特征。结论 经肝动脉单纯灌注栓塞碘油可引起大鼠肝肿瘤不同程度坏死 ,诱导肿瘤细胞凋亡可能是其另一种重要作用机制。

血管内皮生长因子反义寡聚脱氧核苷酸与碘油混合栓塞治疗大鼠肝癌的实验研究

目的 观察血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)反义寡聚脱氧核苷酸 (antisenseoligodeoxynucleotides,asODN)抑制体外培养的Walker 2 5 6瘤细胞VEGF表达的情况 ,评价其与碘油混合行肝动脉栓塞对大鼠肝癌的治疗效果。方法 将反义和正义VEGF寡核苷酸加入无血清培养的Walker 2 5 6瘤细胞的培养液中 ,4 8h后酶联免疫吸附试验 (ELISA)法测定上清VEGF含量 ,并观察上清刺激血管内皮细胞 (ECV 30 4 )生长受抑情况。 30只Walker 2 5 6移植性大鼠肝癌模型数字法随机分成 3组 ,分别经肝动脉注入超液态碘油 (UFLP) 0 2ml(UFLP组 ,n =10 ) ,UFLP 0 2ml+VEGFasODN 3OD混合物 (UFLP +asODN组 ,n =10 ) ,生理盐水 0 2ml (对照组 ,n =10 )。于术前及术后第 7天行MR检查观察肿瘤的体积 ,用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测瘤内及瘤周VEGFmRNA含量 ,免疫组织化学法检测肿瘤组织VEGF的表达及微血管密度 (microvesseldensity ,MVD)。结果 VEGFasODN可以明显抑制培养的Walker 2 5 6瘤细胞VEGF的表达。动脉栓塞实验中 ,UFLP +asODN组肿瘤生长率明显低于UFLP组和对照组 [分别为 (14 0 1± 33 8) %、(177 9± 6 4 9) %和 (4 0 3 9±6 9 4 ) % ;F =6 0 0 2 ,P <0 0 1]。

肝动脉化疗栓塞对肿瘤血管生成影响的实验研究

目的 研究化疗栓塞术后残存肿瘤组织中微血管密度 (microvesseldensity ,MVD)、血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)及碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)的表达情况及其意义。方法 6 0只大鼠Walker 2 5 6肝癌模型用简单随机抽样法随机分为 3组 ,每组 2 0只。对照组 :经肝动脉灌注生理盐水 0 2～ 0 3ml;单纯化疗组 :灌注 5 氟尿嘧啶(5 Fu) 2 0mg/kg ;化疗栓塞组 :灌注超液态碘油 0 5ml/kg及 5 Fu 2 0mg/kg。术后 2周用免疫组织化学(简称免疫组化 )方法检测各组von Willebrandfactor(Ⅷ因子 )、VEGF及bFGF的表达情况 ,对Ⅷ因子阳性血管内皮进行MVD计数。并结合其病理分布特征进行分析。结果 对照组、单纯化疗组及化疗栓塞组MVD值分别为 80 84± 2 4 2 4、83 0 5± 2 0 2 9及 85 2 0± 2 3 91(血管个数 /视野 ) ,VEGF阳性率分别为 75 %、75 %及 85 % ,bFGF阳性率分别为 30 %、2 5 %及 30 % ,各组间均无统计学差异 (F =0 193,χ2 =0 4 4 9,0 14 1,P值均 >0 0 5 )。MVD与VEGF之间存在较好的相关性 (r =0 4 5 2 ,F =2 3 2 92 ,P <0 0 1)。结论 化疗 碘油栓塞对肿瘤新生血管的形成影响较小。新生血管的形成及VEGF的表达对栓塞后侧支循环?

微泡超声空化增强乏血供肿瘤血流灌注的实验研究

目的通过调控脉冲重复频率(PRF)探讨诊断超声的不同占空比对增强乏血供肿瘤血流灌注的影响。方法选用SD大鼠15只,于大腿内侧皮下建立Walker-256肿瘤模型,根据PRF随机分为3组,每组5只:A组,PRF=50 Hz;B组,PRF=1.0 kHz;C组,PRF=2.0 kHz。每组荷瘤大鼠经超声联合微泡治疗10 min,于治疗前、治疗后即刻、治疗后4 h分别行超声造影检查,比较各组峰值强度(PI)、曲线下面积(AUC)和肿瘤血流灌注面积。结果治疗后即刻,A、B组的PI、AUC值较治疗前增加(均P<0.05);治疗后4 h,B组PI、AUC值持续增加,优于治疗后即刻(均P<0.05),而A、C组PI、AUC值相对于治疗后即刻减少(均P>0.05)。治疗后即刻,A、B组肿瘤血流灌注面积较治疗前增加(均P<0.05);治疗后4 h,B组的肿瘤血流灌注面积持续增加,优于治疗后即刻(P<0.05),A、C组的肿瘤血流灌注面积相对于治疗后即刻减少(均P>0.05)。结论PRF=1.0 kHz的低强度诊断超声激励微泡空化可产生较明显的肿瘤血流增强效应,且持续4 h以上。