腹水Walker256乳腺癌细胞接种建立SD大鼠胫骨骨癌痛模型

探讨应用腹水传代培养的Walker256大鼠乳腺癌细胞系建立SD大鼠胫骨癌痛模型,为骨癌痛的研究和镇痛药物开发创造有利条件.结果显示,在骨癌模型组,接种后体质量呈缓慢下降,从第15天起与接种前相比存在极显著差异,到第21天时,体质量下降了12. 5%(P <0. 001);热缩足潜伏期也逐渐下降,从第6天开始,与接种前相比存在显著性差异,至第21天时,缩足潜伏期下降了34. 1%,接种的对侧后足也出现类似现象;X-影像观察显示骨癌痛模型大鼠的胫骨结构受到破坏,骨密度不均一.以上结果表明,应用腹水传代的Walker256乳腺癌细胞接种后能产生较为稳定的痛觉过敏等骨癌痛行为,SD大鼠胫骨癌痛模型建立成功.

电针对Walker256乳腺癌细胞致骨癌痛大鼠痛阈和脾NK细胞的影响

目的:以吗啡为对照,观察电针对Walker 256乳腺癌细胞致骨癌痛大鼠痛阈和脾NK细胞的影响,初步电针抗骨癌痛潜在作用优势。方法:实验大鼠随机分为正常组、假模型组、模型组、电针组和吗啡组5组,采用大鼠左侧胫骨腔内注射Walker 256乳腺癌细胞建立骨癌痛模型。电针组给予电针治疗,双侧"足三里"和"昆仑"穴,频率2/100 Hz,强度0.5-1.0-1.5 mA(各10 min),每次治疗30 min,隔日1次。吗啡组大鼠以10 mg/kg的量腹腔注射盐酸吗啡注射液,隔日1次。检测各组大鼠造模前和造模后6、10、16、20 d的体质量和缩腿潜伏期;检测大鼠脾NK细胞活性和百分率(CD_3-CD^+_(161))情况。结果:与正常组比较,造模后10 d和16 d时模型组和吗啡组大鼠体质量增长率降低(P<0.05)。与正常组和假模型组比较,模型组于造模后所有时点缩腿潜伏期缩短(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,电针组和吗啡组缩腿潜伏期延长(P<0.01),但电针组短于同期吗啡组(P<0.01)。与正常组和假模型组比较,模型组和吗啡组大鼠脾NK细胞活性降低(P<0.01);电针组大鼠脾NK细胞活性低于正常组大鼠(P<0.05),但高于吗啡组(P<0.05)。与模型组比较,吗啡组大鼠脾NK细胞百分率略增多(P<0.05)。结论:电针治疗大鼠骨癌痛具有镇痛和增强免疫双重作用优势,后者主要是通过其增强骨癌痛大鼠脾NK细胞杀伤活性,而增加非NK细胞数量实现。

应用Walker-256细胞建立大鼠骨癌痛模型

目的:应用Walker-256细胞建立大鼠骨癌痛模型。方法:将4×104个W256癌细胞注入SD大鼠胫骨上段骨髓腔内,利用大鼠热板法和足跖加压法分别测量热刺激和机械刺激痛阈的变化,X线摄片进行放射学评估骨质破坏程度,同时,组织切片HE染色观察肿瘤生长和骨结构的破坏情况。结果:造模动物在12天左右开始出现热刺激和机械刺激痛阈明显下降(痛觉过敏),并呈渐进性发展;胫骨X线摄片显示14天即有明显的骨破坏,第21天时出现病理性骨折;组织切片显示骨髓腔内肿瘤生长活跃,向外侵蚀破坏骨皮质。结论:从疼痛行为学、放射学、组织学等方面的研究结果显示,应用Walker-256细胞成功建立了大鼠骨癌痛模型。

全反式维甲酸对Walker-256肝癌细胞分化及凋亡的诱导作用

目的:观察ATRA对Walker-256肝癌细胞的分化诱导及促进凋亡作用,探讨其作用机制.方法:在肝癌细胞Walker-256细胞株中加入不同浓度的ATRA(100、10、5、1μmol/L),培养2d,荧光倒置显微镜观察细胞形态学变化;MTT比色法检测Walker-256细胞的增殖抑制;流式细胞术分析不同DNA含量的细胞分布,计算细胞凋亡百分率;RT-PCR检测凋亡相关基因Fas、bcl-2mRNA的表达;Western blot检测Caspase3、8蛋白的表达.结果:随着ATRA浓度的递增,Walker-256细胞表现出细胞分化及凋亡的形态学上的改变.ATRA可明显抑制细胞增殖,5和10μmol/LAT R A对细胞增殖抑制最为明显,24、48、72h的增殖抑制率分别为21.86%、57.39%、68.17%和27.23%、80.09%、92.15%,呈浓度及时间依赖性.5和10μmol/L ATRA对细胞的凋亡诱导率与对照组相比,差异有统计学意义(t=9.61,11.38,P<0.05,0.01).ATRA作用Walker-256细胞后上调Fas表达,下调bcl-2的表达,10μmol/L ATRA对Fas及bcl-2的调节与对照组相比,差异有统计学意义(t=12.33,10.78,均P<0.05).与对照组相比,10μmol/LATRA作用48h后对Caspase3及Caspase8酶原剪切活化明显(t=9.76,10.21,均P<0.05).结论:ATRA对Walker-256肝癌细胞具有分化诱导及促进其凋亡的作用.

肿瘤坏死因子联合化疗药物抗Walker-256肿瘤细胞的研究

目的 :研究重组人肿瘤坏死因子 (rhTNF)及其联合化疗药物的体外杀伤肿瘤细胞的作用。方法 :采用体外细胞毒方法 (MTT)及流式细胞仪分析法检测重组人肿瘤坏死因子或 /和阿霉素 (ADM)对大鼠Walker 2 5 6肿瘤细胞作用后的细胞毒性及细胞分裂周期各时象的变化。结果 :rhTNF有很强的抗瘤活性 ,与阴性对照组比较有显著差异 (P <0 .0 1) ,并有很好的量效关系 (Υ =0 .9811) ,与ADM联用表现有协同增强细胞毒性 ;rhTNF使G2、S期细胞减少 ,增殖指数 (PI)降低 ,与ADM联用 ,其作用更加显著。结论 :rhTNF与ADM联用对Walker 2 5 6肿瘤细胞有协同增强的杀伤作用。

树突状细胞疫苗对大鼠Walker-256肿瘤抑制作用

目的建立Walker-256大鼠种植瘤模型,探讨树突状细胞(DC)疫苗抑制肿瘤生长的机制。方法从大鼠骨髓细胞中利用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)在体外定向诱导分化出DC,液氮冻融法提取Walker-256肿瘤细胞抗原后刺激DC制备负载抗原的DC疫苗。ELISA法检测培养液中IL-12的浓度。雌性SD大鼠,皮下注射Walker-256肿瘤细胞制备种植瘤模型,成瘤大鼠按照体重配对,分为肿瘤治疗组和肿瘤对照组。10只体重分别相对应的雌性SD大鼠作为正常对照组。肿瘤治疗组大鼠皮下注射负载抗原的DC细胞悬液,肿瘤对照组和正常对照组大鼠皮下注射等量PBS。分别检测大鼠血IL-12浓度和肿瘤最大径。结果得到大量具备典型光镜和电镜形态特征的DC,表达大鼠DC特异性标志OX62、OX6。负载抗原前后DC产生IL-12的水平存在明显差异(P<0.05)。肿瘤治疗组大鼠肿瘤最大径显著小于肿瘤对照组(P<0.01)。肿瘤对照组与正常对照组比较,IL-12明显下降(P<0.05),肿瘤治疗组与肿瘤对照组比较,IL-12明显上升(P<0.01)。肿瘤治疗组的肿瘤最大径与IL-12呈显著负相关(r=-0.826,P<0.01)。结论增强Th1介导的抗肿瘤细胞免疫可能是树突状细胞疫苗抑制肿瘤生长的机制之一。

探讨键合表阿霉素纳米胶束对肝癌Walker-256细胞周期的影响

原发性肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,早期诊断困难,手术切除率低,临床治疗以化学疗法为主。传统的小分子化疗药物缺乏对肿瘤组织的特异性,间断性的冲击化疗在杀死肿瘤细胞的同时,也会对正常组织产生毒副作用,并易导致肿瘤细胞耐药性的产生,远期疗效并不满意。

近交系HFJ大鼠的抗肿瘤细胞Walker-256特性

目的检测近交系HFJ大鼠的肿瘤学特性。方法采用大鼠肿瘤细胞Walker-256分别接种HFJ大鼠和Wistar大鼠制作腹水瘤、实体瘤模型,观察两种动物对同一种肿瘤细胞的敏感性及免疫反应差异。结果对于腹水瘤Walker-256接种7d,Wistar大鼠有6只腹水产生为阴性,HFJ大鼠腹水产生均为阳性。继续观察至20d,可见到Wistar大鼠有3只腹水阴性(阳性率9/12,死亡2只,染色体用1只),而HFJ大鼠腹水全部为阴性(阳性率0/12,死亡2只,染色体用1只)。腹水中Walker-256细胞染色体分析,Wistar大鼠和HFJ大鼠众数变化范围均为50～62条,无显著差异。实体瘤接种7d,Wistar大鼠和HFJ大鼠均可触摸到右侧腋下有肿块产生。20d后Wistar大鼠除2只肿块消失外其他均有肿块存在并随时间延长而增大(阳性率13/15);所有HFJ大鼠腋下肿块均变软并逐渐消失(阳性率0/15)。检测各组大鼠的细胞免疫、体液免疫功能,发现正常HFJ大鼠IgM、IgA显著低于Wistar大鼠(P<0.01),IgG差异不显著。荷瘤组HFJ大鼠和Wistar大鼠IgG均高于各自正常对照组,差异极显著(P<0.01)。Wist-ar大鼠腹水瘤阳性组IgG显著低于阴性组和HFJ腹水阳性组(P<0.05),Wistar大鼠实体瘤阳性组也显著低于HFJ实体阳性组(P<0.01)。Wistar大鼠腹水瘤阳性组IgM显著低于阴性组(P<0.05),Wistar大鼠腹水瘤阴性组和HFJ大鼠腹水瘤、实体瘤阳性组IgM均高于各自对照组,且差异显著(P<0.05)。细胞免疫结果显示各组CD4+数量差异不显著;正常HFJ大鼠CD8+显著少于Wistar大鼠(P<0.05),Wistar大鼠腹水瘤和实体瘤阳性组CD8+数量较阴性组和正常对照组均显著减少(P<0.05)。各荷瘤阴性组大鼠CD8+数量均较正常值增加,除Wistar大鼠腹水瘤和HFJ实体瘤阴性组大鼠差异显著(P<0.05)外,其他均不显著;CD4+/CD8+结果与CD8+相反。结论 HFJ大鼠具有抗大鼠肿瘤细胞Walker-256的特性,腹水瘤及实体瘤均不易生长。

负载Walker-256肿瘤细胞抗原的树突状细胞疫苗的制备

目的制备负载大鼠Walker-256肿瘤细胞抗原的树突状细胞(DC)疫苗,为进一步研究打下基础。方法从大鼠骨髓细胞中利用粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介导素4(IL-4)在体外定向诱导分化出DC,以液氮冻融法制备肿瘤抗原刺激DC制备肿瘤疫苗。ELISA检测培养液中IL-12的浓度。结果得到大量具备典型光镜和电镜形态特征的DC,表达大鼠DC特异性标志OX62。负载抗原前后DC产生IL-12的水平存在明显差异(P<0.05)。结论负载Walker-256肿瘤抗原的树突状细胞疫苗制备成功,具有促进Th1极化的潜能。

乳腺术后骨转方对大鼠乳腺癌骨癌痛模型镇痛作用研究

目的:建立大鼠Walker-256乳腺癌细胞骨癌痛模型,探讨乳腺术后骨转方对骨癌痛的镇痛作用。方法:SD大鼠54只,按体重随机分成6组,每组9只,于大鼠左后肢注射Walker-256细胞建立骨癌痛模型,观察各组大鼠造模前后体重、造模后热痛敏阈值的变化、胫骨CT影像、胫骨HE病理染色及破骨计数情况。结果:1造模后第7天乳腺术后骨转方高剂量+唑来膦酸组体重高于模型组(P<0.05);造模后第14天,乳腺术后骨转方高剂量+唑来膦酸组和乳腺术后骨转方低剂量组体重高于模型组(P<0.01)。2乳腺术后骨转方各剂量组在造模后第21天的热痛敏阈值高于模型组(P<0.05),至造模后28 d,乳腺术后骨转方高剂量+唑来膦酸组热痛敏阈值仍高于Model组(P<0.05)。3造模后第28天,乳腺术后骨转方各剂量组可以减轻模型大鼠的骨质破坏以及肿瘤浸润,各组破骨细胞计数低于模型组(P<0.01)。结论:乳腺术后骨转方可以显著提高模型大鼠的热痛敏阈值,减轻热痛敏反应,表现出明显的镇痛作用。其次,本方在一定程度上能够抑制骨癌痛模型大鼠体重的下降、减轻骨质的破坏。乳腺术后骨转方联合唑来膦酸等够早期干预模型大鼠体重下降的情况,并可以延长减轻热痛敏反应的作用时间。

不平衡氨基酸疗法及化疗对大鼠Walker-256癌肉瘤增殖的影响

目的 探索低缬氨酸高亮氨酸不平衡氨基酸TPN及 5 FU化疗对大鼠Walker 2 5 6癌肉瘤增殖的影响。方法 荷Walk er 2 5 6癌肉瘤的大鼠 ,随机分为 4组 ,A组 (平衡氨基酸TPN组 ) ,B组 (低缬氨酸高亮氨酸不平衡氨基酸TPN组 ) ,C组 (平衡氨基酸TPN +化疗组 ) ,D组 (低缬氨酸高亮氨酸不平衡氨基酸TPN +化疗组 ) ;以大鼠体重 ,血清白蛋白、前白蛋白 ,肝脏病理 ,肿瘤重量 ,及肿瘤细胞周期作为观察指标。结果 处理前后 ,A组和B组大鼠体重均有增加 (P <0 .0 5 ) ;A组和B组的血清白蛋白、前白蛋白 ,脂肪肝的发生率无差异 (P >0 .0 5 ) ;A ,B ,C ,D组的瘤重依次下降 (P <0 .0 5 ) ,G0 /G1期比例依次增高 (P<0 .0 5 ) ,S期比例依次下降 (P <0 .0 5 )。结论 低缬氨酸高亮氨酸TPN能够改善荷瘤大鼠营养状况 ,抑制肿瘤生长 ,并能够加强 5 FU的化疗作用 ,未发现低蛋白血症。

不同浓度Walker-256癌性腹水腹腔接种对大鼠免疫功能的影响

目的观察不同浓度肿瘤腹水接种后,Wistar大鼠腹水产生的情况与其本身免疫功能的关系。方法24只大鼠被接种不同浓度的Walker-256肿瘤腹水0.3 ml,另外12只大鼠腹腔注入生理盐水0.3 ml作为对照组,8d后观察各组大鼠产生腹水的数量及细胞免疫及体液免疫功能各指标。结果高浓度腹水接种后产生腹水的大鼠只数少于稀释后接种的大鼠只数,各组免疫指标均具有统计学意义,P<0.05,其中高浓度腹水接种组免疫功能最好,稀释后接种的大鼠免疫功能最差。结论不适当地增加含肿瘤腹水的浓度并不能增加产生腹水的可能性,相反确有可能激活大鼠本身的细胞和免疫功能消灭腹水内肿瘤细胞,使得产生腹水的可能性降低。

Walker-256腹水传代鼠的免疫功能研究

目的为了探讨患者免疫功能与肿瘤诱发腹水的相关性,本研究分析大鼠接种肿瘤后腹水产生组、未产生组、正常对照组之间的免疫功能差别。方法选择了接种过程中未产生腹水的大鼠,同期产生腹水的大鼠及未接种的正常大鼠各15只,观察大鼠外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+的数量值及Ig免疫球蛋白IgG、IgM、IgA功能。结果三组之间的CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+均差异显著(P<0.05),其中未产生腹水组的CD3+、CD4+及CD4+/CD8+值大于正常组;产生腹水组CD3+、CD4+及CD4+/CD8+的数值小于正常组,但CD8+大于正常组的数值。免疫球蛋白IgG、IgM、IgA含量三组未见差异,P>0.05。结论腹腔接种Walker-256肿瘤细胞未产生腹水的细胞免疫被活,体液免疫则腹水生成未产生明显的影响,不同个体之间免疫功能的强弱是一种影响腹水产生的重要因素之一。

磁感应热疗联合免疫佐剂对Wistar大鼠Walker-256肿瘤的异位效应的研究

目的观察不同加热温度及联合免疫佐剂对大鼠Walker-256肿瘤生长及CD4+T细胞和CD8+T细胞表达的影响。方法建立大鼠双侧腋下皮下移植Walker-256肿瘤模型,接种后7d随机分成6组:Ⅰ组(单纯植入热籽对照);Ⅱ组(42～46℃单纯热疗);Ⅲ组(42～46℃热疗+免疫佐剂);Ⅳ组(50～55℃单纯热疗);Ⅴ组(50～55℃热疗+免疫佐剂);Ⅵ组(单纯免疫佐剂对照)。每3d测双侧肿瘤大小的变化,治疗后14d取肿瘤组织行HE染色,免疫组织化学方法检测肿瘤组织CD8+T细胞的表达,免疫荧光法检测CD4+T细胞的表达。结果热疗后14d,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组两侧肿瘤体积均有不同程度缩小,Ⅴ组治疗侧及对侧肿瘤体积分别缩小34.6%、60.1%,并有3只大鼠对侧肿瘤完全消退,与Ⅰ组、Ⅵ组2个对照组比较,有显著性差异(q=4.552,P<0.05;q=4.400,P<0.05)。组织学检查肿瘤细胞呈凋亡、坏死性改变,伴大量淋巴细胞浸润,V组还可见大量吞噬细胞,对侧未见明显坏死肿瘤细胞,淋巴细胞浸润较明显。免疫学检查加热后CD4+T细胞和CD8+T细胞较对照组(Ⅰ、Ⅵ组)明显增多,差异具有显著性(P<0.05),其中均以V组表达最多(P<0.05)。结论50～55℃瘤内局部加热不仅能抑制乳腺癌生长,还可增强机体的细胞免疫功能并具有异位效应,免疫佐剂能增强其抑瘤作用及异位效应。

大鼠Walker-256移植瘤Cyclin E表达水平与其对化疗药物敏感性的关系

目的:探究大鼠Walker-256移植瘤中Cyclin E的表达水平同荷瘤大鼠接受化疗治疗后生存率的关系。方法:建立大鼠Walker-256移植瘤模型,利用随机表按照安全随机法随机分为4组,对照组、阿霉素组、紫杉醇组、丝裂霉素组。分别以生理盐水、阿霉素组、紫杉醇组、丝裂霉素予以治疗。绘制各组大鼠的生存曲线、并检测各组大鼠移植瘤内Cyclin E的表达水平。以方差分析统计各组之间Cyclin E表达水平的差异,各亚组间荷瘤大鼠的生存率以Wilcoxon法及Kaplan-Meier法进行生存分析。结果:在各组之间,Cyclin E的表达水平无明显差异(P=0.875);在各组中,移植瘤内Cyclin E表达水平高的大鼠生存率较低,反之移植瘤内Cyclin E表达水平低的大鼠生存率较高,除丝裂霉素组外(P=1.000),这种差异有显著的统计学意义(对照组P=0.016,阿霉素组P=0.009,紫杉醇组P=0.043)。结论:CyclinE表达水平的高低同大鼠Walker-256移植瘤对化疗治疗的敏感性有关,对乳腺肿瘤患者进行CyclinE的检测或可有助于预测患者的化疗效果。

阿霉素磁性蛋白微球联合外磁场对恶性肿瘤细胞的毒性试验

为了观察恒定磁场诱导下阿霉素磁性蛋白微球体外对恶性肿瘤细胞生长的抑制作用。将体外培养的Walker- 2 5 6细胞分为阿霉素磁性微球联合磁场组 ,阿霉素磁性微球组及阿霉组三组 ,倒置显微镜观察细胞的生长状态 ,改良 MTT法检测各组细胞的抑制率。结果表明 :阿霉素磁性微球组与游离阿霉素组抑制率 (P>0 .0 5 ) ,联合磁场组抑制率明显提高 (P<0 .0 1) ,细胞形态出现显著变化。显示阿霉素磁性蛋白微球与游离阿霉素对恶性肿瘤细胞具有相似的抑制作用 。

丹参对肝癌致梗阻性黄疸时增殖细胞核抗原表达的作用

目的 建立恶性梗阻性黄疸模型 ,通过对模型鼠腹腔内注射丹参注射液 ,观察肝癌瘤体大小、形态学改变和肝癌、癌周组织中增殖细胞核抗原 (proliferatingcellnuclearantigen ,PCNA)的表达 ,评价其作用。 方法 用Walker 2 5 6肝癌株近肝门部肝实质内种植致移植性肝癌侵袭的高位胆管 ,造成胆道癌性狭窄 ,以建立SD大鼠恶性梗阻性黄疸模型。将模型鼠分成四组 ,腹腔内分别注射等量的生理盐水、肌苷 +VC、丹参和 5 FU。结果 丹参组肝癌平均减小体积、PCNA的表达明显低于生理盐水组和肌苷 +VC组 ,抑瘤率提高 ;与 5 FU组相比 ,丹参组PCNA在肝癌组织和癌周组织的表达均低于 5 FU组 ;而丹参组平均瘤体大于 5 FU组。结论 丹参在肝癌致梗阻性黄疸时 ,通过促进肝癌细胞分化成熟、抑制肝癌细胞增殖 ,对肿瘤发展起抑制作用。

C_(60)-AEDP对SD大鼠Walker-256乳腺癌肉瘤骨破坏的抑制效应

目的:探讨C60-AEDP对Walker-256乳腺癌肉瘤骨破坏的影响。方法:建立SD大鼠Walker-256乳腺癌肉瘤骨破坏模型,随机分组药物处理后处死,测量瘤质量、治疗前后SD大鼠的质量、血清钙、磷、碱性磷酸酶的变化、胫骨破坏的程度、左右胫骨的质量。结果:AEDP组和C60-AEDP组的血钙水平分别为(2.36±0.21)和(2.29±0.31)mmol/L,血AKP水平分别为25.54±4.32和20.50±2.50(金氏单位),差异有统计学意义,P<0.05;光镜和X片结果显示,无破坏大鼠数分别为12只和10,且C60-AEDP组的瘤体质量较其他组明显减轻,平均为(4.29±1.79)g,差异有统计学意义,P<0.05。结论:C60-AEDP有抗瘤和保护骨组织免遭肿瘤的破坏作用,但该药有使SD大鼠体质量减轻的趋势,需进一步开展药物安全性方面的评价。

两种方法建立肝癌皮下瘤块模型的比较

目的:采用注射Walker-256肿瘤细胞的方法建立Wistar鼠和BALB/c裸鼠皮下瘤块模型。方法:抽取含Walker-256肿瘤细胞的BALB/c裸鼠腹水,进行离心洗涤,将洗涤液分别接种于Wistar鼠及BALB/c裸鼠腹股沟区皮下形成皮下瘤块。观察并比较两种不同实验鼠所建立的皮下瘤块模型成瘤率及瘤体生长速度。实验结束后,采用免疫组织化学法检测皮下瘤的微血管密度(MVD)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果:两种方法成瘤率均为100%,但是裸鼠皮下瘤块生长速度快于Wistar鼠皮下瘤;裸鼠组的MVD与VEGF表达均高于Wistar组,差异有统计学意义(t=8.52、5.13,P<0.05)。结论:用Wistar鼠或裸鼠作为肝癌皮下瘤块模型均可以满足临床试验研究的需要,但由于裸鼠为免疫缺陷动物,瘤块生长速度会明显快于Wistar鼠,且肿瘤血管生成指标更高,故选择肝癌瘤块生长模型时,裸鼠为最佳选择。

内皮抑素基因联合放射治疗对大鼠Walker-256细胞种植性肿瘤的抑制作用

目的探讨鼠源性内皮抑素(endostatin)基因联合放射治疗对大鼠种植性肿瘤的抑制效应。方法制作大鼠乳腺癌Walker-256细胞种植性肿瘤的动物模型,通过检测肿瘤重量和肿瘤生长速率观察内皮抑素基因治疗联合放疗的抑瘤效应。体外采用Western blot检测构建pCMV-endostatin质粒转染的Walker-256细胞endostatin蛋白表达,体内采用RT-PCR观察各组endostatinmRNA表达。结果基因治疗组和基因治疗联合放射治疗组均可见到endostatin mRNA及其蛋白明显表达,但两组间表达无统计学意义;基因与放射联合组肿瘤的生长速率和重量均明显小于单纯基因治疗和放疗组(P<0.01),后两组其肿瘤的生长速率和重量明显低于对照组(P<0.01),但二者之间差异无统计学意义。结论pCMV-endostatin在Walker-256细胞内有明显表达endostatin mRNA及其蛋白;endostatin基因治疗有明显的抑瘤作用,但endostatin基因联合放疗的抑瘤效应更明显,促进放疗的抑瘤效果。