水分亏缺条件下玉米根系PIP2-5基因的表达

在PEG-6000模拟水分亏缺条件下,以微管蛋白基因为内参基因,水通道蛋白基因PIP2-5为检测基因,采用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)体系检测PIP2-5基因在玉米根系中的表达的结果表明,人工模拟水分亏缺条件下PIP2-5基因表达量高于正常水分条件下的。这暗示,水分亏缺条件下细胞-细胞途径对根系吸水的贡献可能增大。

茯苓三萜类成分利水作用的虚拟筛选

目的探讨茯苓三萜类利水成分的虚拟筛选技术。方法选取39种茯苓三萜类成分作为配体,选取3种水通道蛋白AQP1,4,5作为靶蛋白,采用PyRx0.8软件autodock vina模块进行筛选。结果在39个茯苓三萜化合物中,去氢松香酸甲酯分别与AQP1,4,5结合的活性较强。结论去氢松香酸甲酯可能是茯苓利水健脾的活性物质。

水分亏缺条件下玉米根系TIP1-1基因的表达

以一组具有不同抗旱性状的玉米遗传材料杂交种户单4号(抗旱)及其父本803(不抗旱),母本天四(抗旱)为供试材料,以微管蛋白基因为内参基因,水通道蛋白基因TIP1-1为检测基因,在PEG-6000模拟水分亏缺条件下,采用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)体系检测TIP1-1基因在玉米根系中的表达情况。在正常供水条件下,TIP1-1基因在抗旱性强的天四和户单4号根系中表达量较多,而在不抗旱的803根系中的表达量较少。水分胁迫下,TIP1-1基因在天四和户单4号根系中表达量没有增多,而在803根系中表达量增多,但依然少于户单4号。并且无论是正常供水还是水分胁迫条件下,抗旱性最强的户单4号根系中TIP1-1基因的表达量均最多。证明水通道蛋白表达量的高低与根系吸水能力的强弱及作物抗旱性的强弱有关,这对水分亏缺条件下植物维持体内水分平衡具有重要意义。

单唾液酸神经节苷脂对创伤性脑水肿大鼠水通道蛋白4表达的影响

目的研究神经节苷脂对脑水肿大鼠水通道蛋白4表达的影响。方法建立大鼠重度颅脑损伤模型,随机分成正常组、模型组和治疗组。考察大鼠伤后不同时间点神经节苷脂对脑含水量和脑组织AQP 4mRNA表达水平的影响。结果模型组和治疗组大鼠脑组织含水量在造模4 h后逐步上升,治疗组在24 h到达峰值后下降,72 h大鼠脑组织含水量值与正常组接近,而模型组大鼠脑组织含水量一直升高,72 h含水量高达80%。两组大鼠造模后1 h后AQP 4 mRNA表达水平开始上调,逐步增加,治疗组在12 h达峰值,然后表达持续回落,72 h与正常组表达水平接近;模型组在24 h达峰值,且表达维持在高位,明显高于治疗组(P<0.05)。结论神经节苷脂能抑制脑水肿的发生,减轻脑水肿形成。

《金匮要略》泽泻汤超临界萃取物对膜迷路积水模型影响的研究

目的:研究泽泻汤超临界萃取物对膜迷路积水豚鼠模型的影响。方法:采用醋酸去氨加压素复制膜迷路积水模型,以豚鼠颞骨切片耳蜗蜗管面积和蜗管加前庭阶面积之和之比值以及耳蜗及肾的水通道蛋白-2的免疫组化表达为药效学的主要指标,研究泽泻汤超临界萃取物对膜迷路积水豚鼠模型的作用。结果:模型组与正常对照组比较有非常显著性差异(P<0.01);模型组与泽泻汤超临界萃取液治疗组比较有非常显著性差异(P<0.01)。水通道蛋白-2免疫组化表达实验组较模型组减弱。结论:泽泻汤超临界萃取物对膜迷路积水模型有较好作用,且机制可能为抑制其内耳及肾脏水通道蛋白-2的表达。

水通道蛋白-1,5在干燥综合征小鼠下颌下腺中的表达

目的:探讨水通道蛋白-1和-5(AQP1、AQP5)在干燥综合征(Sjgrensyndrome,SS)小鼠下颌下腺中的表达及其意义。方法:选用BALB/c小鼠10只,用完全弗氏佐剂+同种鼠下颌下腺抗原诱导,使之产生在临床表现、病理损害和免疫特征上都类似于人SS的动物模型,对照组10只均注射等体积的生理盐水。用免疫组化和Western印迹方法研究SS小鼠下颌下腺AQP1、AQP5表达的变化特点。结果:SS小鼠下颌下腺组织中AQP1和AQP5的表达量均显著减少(P<0.01),主要分布在导管部位;AQP5在腺泡顶膜表达减少,而基侧膜的表达增强。结论:AQP1和AQP5表达量减少以及分布部位的异常改变,可能是SS患者口干的重要原因之一。

腺病毒介导AQP1基因治疗涎腺干燥综合征的实验研究

目的 为了观察SS涎腺局部AQP1基因转移的治疗效果。方法 建立小鼠 SS动物模型,分别予以 AQP1 基因重组腺病毒、空病毒载体对照和生理盐水对照。观察各组小鼠饮水量、唾液流率的改变,Western blot分析各组小鼠颌下腺中 AQP1表达量的变化。结果 在SS小鼠颌下腺腺体破坏、腺泡萎缩变性、腺体分泌功能受到破坏的情况下,通过将 AQP1 基因腺病毒重组体转染到小鼠颌下腺可以有效提高唾液分泌,从而改善口干症状降低饮水量。结论 空载体对照组与 SS组在饮水量、唾液流率等方面无显著性差异说明腺病毒空载体转染对SS小鼠的唾液分泌无显著影响,说明 AQP1 基因腺病毒重组体对小鼠涎腺干燥综合征的治疗作用是通过其携带的AQP1基因发挥作用的。

脑外伤患者AQP4的表达及其与临床预后的关系

目的对比检测不同程度脑外伤患者的水通道蛋白4(AQP4)的表达差异,探讨AQP4与临床预后的关系。方法选取87例脑外伤患者根据GCS评分分为3组,中度损伤组(GCS 9～12分)33例,重度损伤组(GCS 4～8分)37例,特重度损伤组(GCS 3分)17例,取手术清除的创伤区脑组织标本,用免疫组化法检测不同组别的AQP4的表达情况。结果①中度脑外伤组中,脑组织细胞和血管内皮细胞轻度肿胀;在重度、特重度脑外伤组中,脑组织细胞肿胀明显,血管内皮细胞肿胀明显,血管周围间隙明显扩大,血脑屏障受损严重。②脑组织中细胞膜或细胞浆棕黄色染色为AQP4阳性表达。随损伤程度加重,AQP4表达逐渐增强,在特重度损伤组AQP4表达最强,其次为重度损伤组,中度损伤组,且比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 AQP4表达强度与病情程度呈正相关,会提示患者预后情况,抑制AQP4的活性有可能减轻脑水肿,改善预后。

脾胃湿热证临床研究新进展

从幽门螺杆菌感染、炎症、保护因子、胃肠动力学、细胞内能量代谢、细胞凋亡、基因调控及相关蛋白表达、水通道蛋白、肠道微生态的变化等方面对脾胃湿热证的研究进展进行分析总结。脾胃湿热证是机体对病因应答呈亢进性、失调性和代偿性的形态和功能的综合性病理反应;对其客观化研究需多方面、多层次进行。

水通道蛋白亚型1-5在鼠鼻粘膜中表达及意义

目的检测水通道蛋白(water channel protein;Aquaporin AQP)不同亚型在大鼠鼻粘膜组织中的分布及各亚型的组定位。探讨其组织水代谢障碍所致疾病的发生机制。方法取20只成年Wistar大鼠,3%戊巴比妥钠腹腔麻醉,即刻取鼻粘膜组织,4%多聚甲醛固定,石蜡包埋。应用免疫组织化学技术检测鼻粘膜组织中水通道蛋白1、2、3、4、5的分布情况。结果AQP1、4为1∶1000,AQP3为1∶300,AQP5为1∶400的抗体浓度可以观察到它们在鼻粘膜组织不同部位稳定、清晰的染色反应。但AQP2使用1∶50也未观察到染色,AQP1在基底膜反应清晰,AQP3在腺体内导管及胞浆被标记,AQP4在被覆上皮细胞膜、血管内皮表达清晰,AQP5在纤毛,浆液细胞胞浆广泛表达。结论水通道蛋白13、、45、广泛分布在鼻粘膜不同部位,当某种水通道蛋白亚型表达出现异常时,可能会成为导致组织发生水代谢异常疾病的重要原因之一。

灵芝多糖对荷膀胱癌T24细胞小鼠T细胞亚群及AQP1、AQP3表达的影响

目的研究灵芝多糖对荷膀胱癌T24细胞小鼠T细胞亚群及AQP1、AQP3表达的影响。方法选择BALB/c裸鼠30只作为实验动物,皮下注射膀胱癌T24细胞建立荷膀胱癌动物模型,随机分为对照组、顺铂组、灵芝多糖^+顺铂组各10只,顺铂组给予顺铂25 mg/kg腹腔注射,顺铂^+灵芝多糖组小鼠给予灵芝多糖200 mg/kg灌胃,顺铂25 mg/kg腹腔注射,对照组给予相当体积的生理盐水灌胃。测定肿瘤组织的体积和质量、外周血中T细胞亚群的含量以及肿瘤组织中AQP1、AQP3、Caspase-3、Bax的mRNA含量。结果顺铂组、顺铂^+灵芝多糖组小鼠肿瘤组织的体积、肿瘤组织质量明显低于对照组(P<0.05),顺铂^+灵芝多糖组小鼠肿瘤组织体积、肿瘤组织质量明显低于顺铂组(P<0.05);顺铂组、顺铂^+灵芝多糖组CD4^+T细胞、CD8^+T细胞、CD4^+/CD8^+均明显高于对照组(P<0.05),顺铂^+灵芝多糖组CD4^+T细胞、CD4^+/CD8^+均明显高于顺铂组(P<0.05);顺铂组、顺铂^+灵芝多糖组小鼠肿瘤组织中Bax、Caspase-3的mRNA含量明显低于对照组(P<0.05),顺铂^+灵芝多糖组鼠肿瘤组织中Bax、Caspase-3的mRNA含量明显低于顺铂组(P<0.05);顺铂组、顺铂^+灵芝多糖组小鼠肿瘤组织中AQP1、AQP3的mRNA含量明显低于对照组(P<0.05);顺铂^+灵芝多糖组小鼠肿瘤组织中AQP1、AQP3的mRNA含量明显低于顺铂组(P<0.05)。结论灵芝多糖干预能够抑制荷膀胱癌T24细胞小鼠的肿瘤生长,增强细胞免疫功能,调节凋亡基因、AQP1、AQP3的表达水平。

水通道蛋白1在人角膜内皮细胞的表达

目的 研究水通道蛋白 1(water channel protein1,AQP1)抗体在人角膜中的表达及水转运机制。方法 运用免疫组织化学法测定人角膜中 AQP1的表达。结果 在角膜内皮细胞和基质细胞中有 AQP1的表达 ,而角膜上皮细胞不表达 AQP1。结论 本实验证实了 AQP1在角膜内皮的表达 。

奥替溴胺联合洛哌丁胺治疗腹泻型肠易激综合征的疗效及机制分析

目的观察奥替溴胺联合洛哌丁胺治疗腹泻型肠易激综合征(IBS-D)的疗效及对血清水通道蛋白-3(AQP-3)和水通道蛋白-8(AQP-8)水平的影响。方法选择符合纳入标准的IBS-D病人共110例,按数字表法随机分为对照组和观察组,两组均55例;两组参照《肠易激综合征诊断和治疗的共识意见》给予非药物治疗;对照组给予奥替溴胺片,每次40 mg,每天3次,口服;观察组在对照组基础上给予洛哌丁胺,初始剂量2~4 mg,每天2次;两组病人均连续观察6周。比较两组腹痛、腹泻、腹胀评分及临床疗效;应用IBS生活质量问卷(IBS-QOL)量表评价两组生活质量;检测两组血清AQP-3和AQP-8水平。结果治疗后,观察组病人的腹胀、腹泻、腹痛评分均明显低于对照组(P<0.01);观察组病人治疗后总有效率为96.36%,显著高于对照组(83.02%)(P<0.05);观察组治疗后IBS-QOL量表评分均明显高于对照组(P<0.01);治疗后,观察组治疗后AQP-3和AQP-8水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论奥替溴胺联合洛哌丁胺治疗IBS-D疗效明显,上调血清AQP-3和AQP-8水平可能是该疗法作用机制之一。

单唾液酸神经节苷脂对创伤性脑水肿大鼠水通道蛋白4表达的影响

目的:研究神经节苷脂对脂水肿大鼠水通道蛋白4表达的影响。方法:通过建立大鼠重度颅脑损伤模型,随机分成正常组、模型组和神经节苷脂治疗组。考察大鼠伤后不同时间点,神经节苷脂对脑含水量和脑组织AQP4 mRNA表达水平的影响。结果:模型组和治疗组大鼠脑组织含水量在造模4h后逐步上升,治疗组在24h到达峰值后下降,72h大鼠脑组织含水量值与正常组接近,而模型组大鼠脑组织含水量一直升高,72h含水量高达80%。两组大鼠造模1h后AQP4 mRNA表达水平开始上调,逐步增加,治疗组在12h达峰,尔后表达持续回落,72h与正常组表达水平接近;模型组在24h达峰,然后表达维持在高位,明显高于治疗组组<0.05)。结论:神经节苷脂能抑制脑水肿引发的AQP4表达上调,减轻脑水肿形成。

严重烧伤后大鼠心肌组织水通道蛋白-1表达变化及其意义

目的探讨大鼠严重烧伤后心肌组织中水通道蛋白-1(AQP-1)的表达变化及意义。方法健康成年Wistar大鼠48只,分为正常对照组(n=6)、烫伤组(n=42);采用30%TBSAⅢ度烧伤大鼠模型,其中单纯烫伤组又分为2、4、8、12、24、48、72h组,每个时相点为6只动物。用干湿重法和ELSIA方法分别检测烧伤后不同时间段心肌组织含水量和AQP1的表达变化。结果严重烧伤后2h心肌组织含水量增加及AQP1表达增强;烧伤后12h达到高峰,烧伤后48h仍高于正常;统计学分析表明,AQP1的表达与心肌组织含水量呈显著正相关(r=0.844,P<0.01)。结论严重烧伤后AQP1蛋白表达明显增强可能导致心肌组织含水量的增加。试验提示AQP1可能参与介导烧伤后心肌水肿的病理进程。

无创高频振荡通气对急性呼吸衰竭新生儿SP-D、AQP-5水平的影响

目的探讨无创高频振荡通气治疗新生儿急性呼吸衰竭患者对其SP-D(肺表面活性物质D,Pulmonary surfactant D)、AQP-5(肺组织水通道蛋白5,Lung tissue water channel protein 5)水平的影响。方法选择2014年1月-2017年1月在本院诊治的急性呼吸衰竭患儿(acute respiratory failure,ARF)94例,按随机数字法分为无创高频(noninvasive high-frequency ventilation,NHFOV)组和常频机械通气(Constant frequency mechanical ventilation,CMV)组。NHFOV组予NHFOV治疗,CMV组给予CMV治疗,然后观察两组的治疗效果及机械通气时间、用氧时间、住院时间、并发症等,在治疗前、治疗12、24、48、72h监测两组患者的呼吸动力学、血气指标以及血清SP-D、AQP-5水平。结果NHFOV组的有效率为93.61%,显著高于CMV组(78.32%),差异有统计学意义(P=0.037);NHFOV组的气漏、呼吸相关性肺炎、下呼吸道感染等并发症显著低于CMV组,差异有统计学意义(P<0.05);NHFOV组的机械通气时间、用氧时间、经口喂养时间、住院时间显著短于CMV组(P<0.05);两组患儿的Pa O_2、Pa CO_2、Pa O_2/Fi O_2、OI、RI、p H在治疗后均较治疗前显著改善,差异有统计学意义(P<0.05),NHFOV组的血气指标、呼吸动力学在各时间点均明显改善,均显著优于CMV组,差异有统计学意义(P<0.05);在治疗后两组患者的SP-D、AQP-5水平均较治疗前改善显著(P<0.05),在治疗24h内两组患者的SP-D、AQP-5水平差异不大,差异无统计学意义(P>0.05),24h后各时间点NHFOV组的血清SP-D、AQP-5水平显著低于CMV组,差异有统计学意义(P<0.05);结论 NHFOV治疗新生儿ARF疗效较好,可以有效改善氧合功能,并且不良反应较少,在临床上应用价值较高。

麦冬地芍汤对NOD小鼠颌下腺的保护作用

目的观察麦冬地芍汤对干燥综合征模型(nonobese diabetic mouse,NOD)小鼠颌下腺的保护作用。方法取雌性NOD小鼠33只,随机分为模型组、羟氯喹组、麦冬地芍汤组,另取ICR(Institute of Cancer Research)小鼠8只作为空白组。适应性喂养一周后,羟氯喹组、麦冬地芍汤组分别灌服羟氯喹溶液(0.1 g/kg,20 ml/kg)及麦冬地芍汤(10 g/kg,20 ml/kg),空白及模型组生理盐水灌胃。观察小鼠10、13、16周龄唾液流率的变化,18周龄时取颌下腺,对颌下腺进行HE染色,免疫组化法测AQP5的表达。结果与模型组相比,麦冬地芍汤组小鼠16周龄时唾液流率明显改善(P<0.01),18周龄时,麦冬地芍汤组组织学评分低于模型组(P<0.05),AQP5的表达较模型组明显上调(P<0.05)。结论麦冬地芍汤对NOD小鼠颌下腺有保护作用,其机制可能与其上调AQP5的表达相关。

健脾益肝方对肝硬化大鼠AQP8的影响

目的:观察健脾益肝方对肝硬化模型大鼠肝组织水通道蛋白AQP8表达的影响。方法:将90只Wist-ar大鼠随机分为空白对照组、模型组、健脾益肝方高、中、低剂量组及秋水仙碱组,运用CCL4法造肝硬化模型,并对肝脏组织作AQP8 PCR定量及Western Blotting检测。结果:模型组AQP8蛋白含量及平均光密度值和积分光密度值均很低,与空白组相比有极显著差异(P<0.01);经过治疗后健脾益肝方可以使AQP8蛋白含量及平均光密度值和积分光密度值均升高,其中疗效与中药使用剂量正相关,健脾益肝方低剂量组与模型组相比有显著差异(P<0.05),而健脾益肝方中剂量组及高剂量组与模型组相比具有极显著差异(P<0.01);秋水仙碱组与模型组比较没有显著差异(P>0.05)。结论:健脾益肝方对AQP8蛋白的升高作用是治疗肝硬化的靶点之一。

发现细胞膜的通道:2003年诺贝尔化学奖简介

20 0 3年诺贝尔化学奖授予两位在细胞膜通道研究领域作出突出贡献的科学家 ,以表彰他们发现了细胞膜内的通道 .其中一半由彼特·阿格雷分享 ,因为他发现了且描述了第一个水通道蛋白质 ;另一半由罗德里克·麦金农分享 ,由于他发现并了阐述了离子通道功能的结构及机制的基础 .本文对细胞膜内的通道以及两位科学在该研究领域中所做的开创性贡献做了简要介绍 .

水通道蛋白8及水通道蛋白1表达在病变宫颈上皮组织中的临床意义

目的分析水通道蛋白8及水通道蛋白1在病变宫颈上皮组织中的临床意义。方法选择2013年至2014年医院收治的50例宫颈炎患者与50例宫颈癌患者，使用免疫组化方法检测并分析两组患者的水通道蛋白8及水通道蛋白1的表达。结果两组患者的水通道蛋白8阳性表达率差异显著（P〈0．05），水通道蛋白1微血管密度差异显著（P〈0．05），且两因子与宫颈癌的临床特征密切相关。结论不同宫颈上皮组织病变程度的水通道蛋白8、水通道蛋白l表达差异显著，故在宫颈癌病情的发生以及病情的发展过程中，检测水通道蛋白8、水通道蛋白1具有显著的临床病理价值。