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卵巢肿瘤组织中Wee1蛋白激酶的表达及意义
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作者 冯文龙 段震峰 +1 位作者 王静璐 史惠蓉 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2024年第5期655-658,共4页
目的:评估Wee1蛋白激酶在卵巢肿瘤组织中的表达水平及其临床意义。方法:采用免疫组化染色技术,对包含14例良性、9例交界性及36例恶性卵巢肿瘤组织的组织芯片中Wee1蛋白激酶表达水平进行检测。采用Kaplan-Meier法绘制Wee1蛋白激酶高、低... 目的:评估Wee1蛋白激酶在卵巢肿瘤组织中的表达水平及其临床意义。方法:采用免疫组化染色技术,对包含14例良性、9例交界性及36例恶性卵巢肿瘤组织的组织芯片中Wee1蛋白激酶表达水平进行检测。采用Kaplan-Meier法绘制Wee1蛋白激酶高、低表达卵巢恶性肿瘤患者的生存曲线,采用Cox回归分析Wee1蛋白激酶表达与卵巢恶性肿瘤预后的关联。结果:良性、交界性和恶性卵巢肿瘤组织中Wee1蛋白激酶表达水平分别为(1.29±0.47)、(2.22±0.83)和(2.03±1.00),3组比较,差异有统计学意义(P=0.017),恶性和交界性肿瘤组织中Wee1蛋白激酶表达水平高于良性肿瘤组织(P<0.05)。卵巢恶性肿瘤患者中15例Wee1蛋白激酶高表达,21例低表达;Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,高表达组生存状况差于低表达组(P<0.001);Cox回归分析结果显示,Wee1蛋白激酶高表达者预后差,HR(95%CI)为6.38(1.54~26.52)。结论:卵巢恶性肿瘤组织中Wee1蛋白激酶表达水平高于良性肿瘤组织,且与恶性肿瘤预后有关。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 组织芯片 wee1蛋白激酶
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酵母双杂交技术筛选与蛋白激酶Wee1相互作用的蛋白 被引量:5
2
作者 刘超 刘乙蒙 +3 位作者 栾治东 任丽莉 孟智超 肖建英 《中国生化药物杂志》 CAS 2016年第3期23-26,共4页
目的应用酵母双杂交技术筛选出与Wee1蛋白激酶相互作用的候选分子,为进一步研究Wee1的分子功能提供理论基础。方法利用分子克隆的方法重组酵母双杂交质粒p GBKT7-Wee1,并验证其在酵母中的毒性、自激活能力和表达。利用酵母双杂交技术从... 目的应用酵母双杂交技术筛选出与Wee1蛋白激酶相互作用的候选分子,为进一步研究Wee1的分子功能提供理论基础。方法利用分子克隆的方法重组酵母双杂交质粒p GBKT7-Wee1,并验证其在酵母中的毒性、自激活能力和表达。利用酵母双杂交技术从人卵巢c DNA文库中筛选出与Wee1蛋白相互作用的蛋白,并在酵母中重新验证其相互作用。结果成功构建p GBKT7-Wee1诱饵质粒,验证了其无毒性及自激活能力,且可以在酵母中表达,可进一步进行酵母双杂交的筛选工作。结论利用酵母双杂交系统筛选出与Wee1相互作用的候选分子30个,为揭示蛋白激酶Wee1可能通过与其他蛋白相互作用进而调控细胞周期进程。 展开更多
关键词 wee1 酵母双杂交 蛋白互作
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Research Advance on the Relationship between Wee1 and Tumor Genesis and Progression
3
作者 Ying Yin Guohua Yu 《Journal of Oncology Research》 2021年第1期22-27,共6页
In the process of biological genetic information transmission,complete and correct genetic information can make cell mitosis proceed normally.In the development of most tumor cells,G2/M cell cycle checkpoint becomes t... In the process of biological genetic information transmission,complete and correct genetic information can make cell mitosis proceed normally.In the development of most tumor cells,G2/M cell cycle checkpoint becomes the key checkpoint in the process of mitosis due to the lack of G1/S cell cycle checkpoint,which mainly depends on the abnormal DNA information blocked by Wee1 protein kinase in G2 phase to enter M phase and prolong the time of G2 phase to complete DNA sequencing So that the normal genetic information can be passed on.Wee1 protein kinase expression is significantly increased in most tumor cells,making it a potential target for tumor therapy. 展开更多
关键词 wee1 protein kinase Cell cycle wee1 kinase inhibitor TUMOR
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蛋白激酶A抑制剂H-89通过Wee1B蛋白调控小鼠1-细胞期受精卵发育
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作者 张苧兮 刘超 +4 位作者 任丽莉 刘乙蒙 齐川 于秉治 肖建英 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期137-141,共5页
目的:探讨蛋白激酶A(PKA)抑制剂H-89通过调控小鼠蛋白激酶WeelB蛋白S15位点磷酸化状态影响小鼠1-细胞期受精卵的发育。方法:超排卵方法获得小鼠1-细胞期受精卵,经H-89预处理后显微注射WeelB-mRNAs,相差显微镜观察受精卵的形态变... 目的:探讨蛋白激酶A(PKA)抑制剂H-89通过调控小鼠蛋白激酶WeelB蛋白S15位点磷酸化状态影响小鼠1-细胞期受精卵的发育。方法:超排卵方法获得小鼠1-细胞期受精卵,经H-89预处理后显微注射WeelB-mRNAs,相差显微镜观察受精卵的形态变化、计数卵裂率;放射自显影测定M期促进因子(MPF)活性;免疫印迹检测WeelB蛋白表达、CDC2-pTyr15和WeelB-pSer15磷酸化及WeelB-pSerl5非磷酸化状态。结果:H-89持续存在时,在受精卵G1和S期检测到WeelB-Ser15的磷酸化条带,在G2期和M期检测到WeelB-Serl5的非磷酸化条带;小鼠受精卵有丝分裂进程加快,但过表达WeelB-WT和过表达突变体weelBSl5A/D均能延缓受精卵有丝分裂进程,逆转由H-89引起的促进分裂作用。结论:H-89抑制PKA活性,从而抑制WeelB蛋白S15位点的磷酸化状态,但过表达WeelB-S15A/D有效逆转H-89加速的G2/M期转换,使受精卵的分裂延迟。提示weelB蛋白的S15位点可能是PKA作用的生理靶点。 展开更多
关键词 WeelB 蛋白激酶A 有丝分裂促进因子 H-89 受精卵 小鼠
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Wee1在小鼠1-细胞期受精卵中的表达和定位
5
作者 韩迪 刘智慧 +1 位作者 庄妍 孟峻 《山西医科大学学报》 CAS 2022年第12期1550-1555,共6页
目的研究Wee1在小鼠1-细胞期受精卵发育全过程(G_(1)、S、G_(2)、M期)中的表达和定位,为进一步探究Wee1对小鼠胚胎有丝分裂(主要是G_(2)/M转换)的作用提供理论依据。方法应用qRT-PCR和免疫印迹技术分别检测小鼠1-细胞期受精卵在G_(1)、S... 目的研究Wee1在小鼠1-细胞期受精卵发育全过程(G_(1)、S、G_(2)、M期)中的表达和定位,为进一步探究Wee1对小鼠胚胎有丝分裂(主要是G_(2)/M转换)的作用提供理论依据。方法应用qRT-PCR和免疫印迹技术分别检测小鼠1-细胞期受精卵在G_(1)、S、G_(2)、M不同时期Wee1的表达谱,并利用间接免疫荧光观察Wee1蛋白在1-细胞期受精卵发育全过程中的定位。结果Wee1 mRNA和蛋白在不同时期的表达水平变化趋势一致:从G_(1)到G_(2)期表达水平持续升高(P<0.05),但进入M期后表达水平显著降低(P<0.01)。间接免疫荧光显示:Wee1蛋白在G_(1)、S期定位于细胞质,在G_(2)期Wee1蛋白开始向核转位,M期细胞核内Wee1蛋白明显增多。结论小鼠1-细胞期受精卵的发育伴随Wee1表达水平的改变和Wee1蛋白的核浆转位,提示Wee1表达水平及其蛋白亚细胞定位的改变可能是调节小鼠1-细胞期受精卵细胞进程的机制之一。 展开更多
关键词 1-细胞期受精卵 wee1 mRNA wee1蛋白 细胞周期
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蛋白激酶WEE1在胃癌组织中的表达及其临床意义 被引量:1
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作者 李菁 金玉 +3 位作者 李启阳 许英卓 刘超 肖建英 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第6期680-684,690,共6页
目的探讨蛋白激酶WEE1在胃癌组织中的表达及其与胃癌临床指标的相关性,并阐述其在胃癌发生发展中的作用。方法使用Oncomine数据库分析WEE1在胃腺癌和胃黏膜组织中的表达差异。选取100例胃腺癌和80例癌旁组织标本,通过免疫组织化学法和... 目的探讨蛋白激酶WEE1在胃癌组织中的表达及其与胃癌临床指标的相关性,并阐述其在胃癌发生发展中的作用。方法使用Oncomine数据库分析WEE1在胃腺癌和胃黏膜组织中的表达差异。选取100例胃腺癌和80例癌旁组织标本,通过免疫组织化学法和组织芯片技术检测WEE1蛋白在胃癌和癌旁组织中的表达水平。对免疫组织化学结果中染色的比例以及染色程度进行半定量分析,对半定量分析结果与胃癌临床指标进行相关性分析。使用RT-PCR和Western blotting检测WEE1在胃癌和癌旁组织中的mRNA和蛋白表达水平。结果WEE1在100例胃癌患者中的阳性率为86%,高表达86例,低表达14例。通过Oncomine数据库分析,蛋白激酶WEE1在胃腺癌中的表达明显高于胃黏膜组织中的表达(P<0.01)。免疫组化、RT-PCR和Western blotting均显示,WEE1在胃癌组织中的表达明显高于癌旁组织(P<0.01);免疫组化还显示WEE1的表达量随着胃癌组织分期的增加而增加(P<0.01)。结论蛋白激酶WEE1在胃癌组织中高表达,提示其可作为胃癌治疗靶点之一。 展开更多
关键词 蛋白激酶wee1 胃癌 免疫组织化学 组织芯片 免疫印迹 逆转录-聚合酶链反应
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支架蛋白RACK1与蛋白激酶WEE1互作调控胃癌细胞株HGC27增殖的作用研究 被引量:2
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作者 任丽莉 刘超 +2 位作者 王一曌 刘乙蒙 肖建英 《中国现代医生》 2017年第23期29-32,F0003,共5页
目的研究活化的蛋白激酶C受体(Receptor for activated protein kinase C,RACK1)与蛋白激酶WEE1互作调控胃癌细胞株HGC27生长增殖及其作用机制。方法采用Lipofect AMINE 2000在HGC27细胞中过表达RACK1,Western blotting检测HGC27细胞中W... 目的研究活化的蛋白激酶C受体(Receptor for activated protein kinase C,RACK1)与蛋白激酶WEE1互作调控胃癌细胞株HGC27生长增殖及其作用机制。方法采用Lipofect AMINE 2000在HGC27细胞中过表达RACK1,Western blotting检测HGC27细胞中WEE1蛋白表达;免疫共沉淀验证RACK1和WEE1在HGC27细胞内存在相互作用;细胞内免疫荧光观测RACK1与WEE1在HGC27细胞中的表达定位情况。结果过表达RACK1后WEE1在胃癌细胞HGC27中的表达降低,RACK1与WEE1在HGC27细胞内存在相互作用且共定位在细胞质内。结论 RACK1与WEE1共同作用调控胃癌的发生发展过程,为RACK1成为临床上胃癌治疗的潜在靶点提供理论基础和实验依据。 展开更多
关键词 活化的蛋白激酶C受体 wee1 胃癌 HGC27细胞
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一种靶向Wee1蛋白激酶的小分子抑制剂体外筛选模型的建立
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作者 周秋华 苗雷 +3 位作者 季晓君 左锐 吴舰 徐丹 《中国医药生物技术》 2022年第2期138-144,共7页
目的建立靶向Wee1激酶的小分子抑制剂体外筛选模型,为Wee1抑制剂的筛选提供评价方法。方法使用ADP-Glo法检测Wee1的激酶活性;在p53突变型人结直肠癌细胞(WiDr)上优化了损伤剂的作用时间与浓度以及Wee1抑制剂的作用时间,建立了评价Wee1... 目的建立靶向Wee1激酶的小分子抑制剂体外筛选模型,为Wee1抑制剂的筛选提供评价方法。方法使用ADP-Glo法检测Wee1的激酶活性;在p53突变型人结直肠癌细胞(WiDr)上优化了损伤剂的作用时间与浓度以及Wee1抑制剂的作用时间,建立了评价Wee1抑制剂MK-1775单用以及与化疗药物吉西他滨联用的细胞活性评价模型;使用Odyssey in-cell Western方法检测细胞内Wee1的下游蛋白Cdc2及HH3的磷酸化水平,在细胞水平验证Wee1抑制剂的作用机制。结果优化了DNA损伤剂吉西他滨的作用浓度(4.5 nmol/L)与作用时间(48 h)以及Wee1抑制剂MK-1775的作用时间(72h)。使用MK-1775对筛选模型进行验证,吉西他滨或MK-1775单用对细胞均表现出较弱的增殖抑制作用,而在联用实验中,MK-1775能明显增加吉西他滨对细胞的损伤作用,且3次重复实验结果稳定。结论成功建立了一种简单、新颖、有效的Wee1激酶小分子抑制剂体外筛选模型。 展开更多
关键词 MK-1775 wee1激酶 DNA损伤 体外活性 药物联用 筛选模型
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蛋白激酶Pkmyt1对小鼠1-细胞期受精卵发育的抑制作用 被引量:4
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作者 刘超 孟智超 +4 位作者 任丽莉 刘乙蒙 郭淼 孙弋雅 肖建英 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期16-20,I0001,共6页
目的:通过在小鼠1-细胞期受精卵内过表达Pkmyt1-wild type(WT)(野生型)mRNAs,研究蛋白激酶Pkmyt1对小鼠受精卵早期发育的影响,为进一步阐明Pkmyt1对哺乳动物受精卵早期发育调控的机制奠定基础。方法:构建pcDNA3.1/myc-Pkmyt1-WT质粒。... 目的:通过在小鼠1-细胞期受精卵内过表达Pkmyt1-wild type(WT)(野生型)mRNAs,研究蛋白激酶Pkmyt1对小鼠受精卵早期发育的影响,为进一步阐明Pkmyt1对哺乳动物受精卵早期发育调控的机制奠定基础。方法:构建pcDNA3.1/myc-Pkmyt1-WT质粒。超排卵方法获得小鼠1-细胞期受精卵,实验分为未注射组、TE缓冲液注射组和Pkmyt1-WT mRNAs注射组,收集各组卵细胞后采用Western blotting法检测Pkmyt1蛋白表达和Cdc2-pTyr15磷酸化状态;相差显微镜观察受精卵的形态变化并计数卵裂率。结果:pcDNA3.1/myc-Pkmyt1-WT质粒构建成功。与未注射组(0.414±0.016)和TE缓冲液注射组(0.441±0.013)比较,受精卵显微注射Pkmyt1-WT mRNAs 4h后,Pkmyt1蛋白表达水平(1.112±0.025)增高(P<0.01)。与未注射组(60.81%±3.27%)和TE缓冲液注射组(61.79%±4.08%)比较,Pkmyt1-WT-mRNA注射组卵裂率(34.2%±3.25%)显著降低(P<0.01)。Pkmyt1-WT mRNA注射组在注射hCG后29.0h检测到微弱的磷酸化信号,29.5h检测不到任何磷酸化信号。结论:Pkmyt1过表达后磷酸化Cdc2-pTyr15可抑制小鼠1-细胞期受精卵的卵裂率,提示Pkmyt1负调控小鼠受精卵有丝分裂的进程。 展开更多
关键词 蛋白激酶Pkmyt1 蛋白激酶wee1 有丝分裂 小鼠受精卵
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Weel蛋白在鼻咽癌组织中的表达及其与临床预后的关系 被引量:1
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作者 霍占江 李伟 高飞 《海南医学》 CAS 2016年第3期360-362,共3页
目的探讨Wee1蛋白在鼻咽癌组织中的表达及其与临床预后的关系。方法收集2005年1月至2010年12月期间在张家口市第一人民医院和中国人民解放军251医院耳鼻喉科住院患者70例,手术病理活检均明确诊断为鼻咽癌,应用免疫组织化学(En VisionTM... 目的探讨Wee1蛋白在鼻咽癌组织中的表达及其与临床预后的关系。方法收集2005年1月至2010年12月期间在张家口市第一人民医院和中国人民解放军251医院耳鼻喉科住院患者70例,手术病理活检均明确诊断为鼻咽癌,应用免疫组织化学(En VisionTM)法检测其Wee1蛋白表达,并与30例正常组织的表达进行比较,同时分析Weel蛋白的表达与鼻咽癌临床病理因素的关系及其5年生存率。结果 Wee1蛋白在鼻咽癌组织、正常组织中的阳性表达率分别为52.86%(37/70)、10.00%(3/30),两组的阳性表达率比较差异有显著统计学意义(P>0.01);Wee1蛋白的阳性表达与肿瘤直径、淋巴结转移、浸润邻近组织及EBV感染有关(P>0.05),与性别、年龄、组织学类型及肿瘤部位无关(P>0.05);Wee1蛋白阳性表达的鼻咽癌患者5年生存率为35.14%(13/37),明显低于Wee1蛋白阴性表达的81.82%(27/33),两组比较差异有显著统计学意义(P>0.01)。结论 Wee1蛋白的异常表达不仅参与了鼻咽癌的发生,而且有利于癌细胞的浸润转移,对预测患者的生存预后也有参考价值。 展开更多
关键词 鼻咽癌 wee1蛋白 生存 预后
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Weel蛋白在浆液性卵巢腺癌组织中的表达及对患者预后的影响
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作者 李霞 季万里 黄艺 《中国性科学》 2021年第7期51-54,共4页
目的探讨wee1蛋白在浆液性卵巢腺癌组织中的表达及对患者预后的影响。方法收集2013年1月至2015年1月重庆市北碚区中医院及山东医学高等专科学校附属医院诊治的50例浆液性卵巢腺癌患者的组织和20例卵巢良性肿瘤患者的组织作为研究对象。... 目的探讨wee1蛋白在浆液性卵巢腺癌组织中的表达及对患者预后的影响。方法收集2013年1月至2015年1月重庆市北碚区中医院及山东医学高等专科学校附属医院诊治的50例浆液性卵巢腺癌患者的组织和20例卵巢良性肿瘤患者的组织作为研究对象。采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和免疫组化法检测wee1表达情况,同时分析weel蛋白的表达与卵巢癌临床病理参数及预后的关系。结果RT-PCR结果显示,wee1在浆液性卵巢腺癌组织中高表达,而在卵巢良性肿瘤中低表达,差异具有统计学意义(P<0.05)。免疫组化法检测结果显示,wee1主要表达在细胞核中,50例浆液性卵巢腺癌组织中有38例呈阳性表达,wee1的表达与浆液性卵巢腺癌病理分级(低vs.中,P<0.05;中vs.高,P<0.05)、临床分期(Ⅰvs.Ⅲ,P<0.05;Ⅱvs.Ⅲ,P<0.05)和淋巴结转移(P<0.05)有关,而与肿瘤大小和患者年龄无关(P>0.05)。Wee1蛋白阳性表达的浆液性卵巢腺癌患者生存率为28.95%(11/38),明显低于阴性表达的75.00%(9/12),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论Wee1蛋白在浆液性卵巢腺癌组织中高表达,临床分期、病理分级越高,Wee1的表达水平越高。而且Wee1蛋白的高表达很可能促进癌细胞的淋巴结转移,对患者的生存预后也具有参考价值。 展开更多
关键词 浆液性卵巢腺癌 wee1蛋白 临床分期 预后
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槲皮素通过调控WEE1蛋白激酶增加宫颈癌细胞的辐射敏感性 被引量:2
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作者 赵程程 席庆 +1 位作者 李瑞瑞 刘倩 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第24期3338-3341,3362,共5页
目的探究槲皮素(QU)通过调控WEE1蛋白激酶(WEE1)在宫颈癌(CC)细胞生长中的作用。方法将Hela细胞实验分为4组:对照组,实验组、实验组+NC组和实验组+WEE1组。对照组正常培养,实验组用50μmol·L^(-1)的QU处理,实验组+NC组先转染空载质... 目的探究槲皮素(QU)通过调控WEE1蛋白激酶(WEE1)在宫颈癌(CC)细胞生长中的作用。方法将Hela细胞实验分为4组:对照组,实验组、实验组+NC组和实验组+WEE1组。对照组正常培养,实验组用50μmol·L^(-1)的QU处理,实验组+NC组先转染空载质粒,再采用50μmol·L^(-1)的QU处理,实验组+WEE1组先转染WEE1过表达质粒,再采用50μmol·L^(-1)的QU处理。用实时荧光定量聚合酶链式反应检测WEE1 mRNA的表达;用细胞计数试剂盒8和克隆形成实验检测细胞增殖,用流式细胞术检测细胞凋亡,用免疫蛋白印迹法检测增殖细胞核抗原(PCNA)和B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)蛋白的表达。结果对照组,实验组,实验组+NC组和实验组+WEE1组的WEE1 mRNA的表达分别为1.00±0.14,0.34±0.05,0.37±0.08和0.92±0.12;这4组的细胞活力分别为0.68±0.15,0.45±0.11,0.48±0.15和0.91±0.18;这4组细胞凋亡率分别为(7.82±0.91)%,(27.76±0.80)%,(27.42±1.29)%和(15.36±1.41)%;这4组PCNA蛋白表达分别为1.00±0.11,0.28±0.04,0.32±0.04和1.12±0.15;这4组Bcl-2蛋白表达分别为1.00±0.13,0.32±0.04,0.34±0.04和1.04±0.12。上述指标,对照组与实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);实验组和实验组+WEE1组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 QU通过调控WEE1表达抑制CC细胞的生长。 展开更多
关键词 槲皮素 宫颈癌 wee1蛋白激酶 放射敏感性
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