Western blotting检测survivin封闭载体转染大肠癌SW620细胞的实验研究

【目的】探讨KNA interferenece(RNAi)对survivin在大肠癌细胞SW620表达的影响及siRNA干扰后诱导survivin蛋白表达降低的机制。【方法】构建survivin特异性的RNA封闭性载体survivin,通过培养大肠癌细胞SW620,survivin封闭性载体转染SW620细胞;Hoechest染色大肠癌细胞,通过荧光显微镜观察细胞形态变化;Western blotting分析肿瘤细胞的蛋白表达情况。【结果】DNA测序证实表达质粒构建成功;免疫荧光显微镜可见细胞凋亡小体;Western blotting显示:大肠癌survivin的蛋白表达明显弱于对照组。【结论】Survivin与大肠癌的发生存在一定的关系,RNAi能够下调survivin的表达。