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Biolistic Genetic Transformation of a Wide Range of Chinese Elite Wheat(Triticum aestivum L.)Varieties 被引量:4
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作者 Kang Zhang Jinxing Liu +2 位作者 Yi Zhang Zhimin Yang Caixia Gao 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 2015年第1期39-42,共4页
Wheat (Triticum aestivum L.) is a major staple food crop worldwide. It is economically important because it can be grown in a wide range of climates and geographic regions, and it has made an enormous contribution t... Wheat (Triticum aestivum L.) is a major staple food crop worldwide. It is economically important because it can be grown in a wide range of climates and geographic regions, and it has made an enormous contribution to the increase in global food production over the past four decades (Dixon et al., 2009). Wheat is produced on more than 18% of the arable land in the world, and is the most cultivated crop after maize and rice (FAOSTAT data, 2014). Despite its global strategic significance, progress in genomic and genetic engineering research on wheat has lagged behind that on other major crops due to the difficulty of culturing tissues, and the complexity of its hexaploid genome. The first successful wheat trans- formation was achieved by particle bombardment (Vasil et al., 1992). Since then additional transgenic wheat plants have been obtained by various transformation methods (Harwood, 2011). Microprojectile bombardment is considered to be a promising method, since it is robust, versatile and relatively efficient in terms of gene delivery. 展开更多
关键词 VARIETIES biolistic genetic Transformation of a Wide Range of Chinese Elite wheat Triticum aestivum L gene
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用天花粉蛋白基因转化小麦获得转基因植株 被引量:12
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作者 徐琼芳 李连城 +6 位作者 马有志 叶兴国 李晓兵 杜丽璞 辛志勇 张增艳 邵鹏柱 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期135-137,共3页
取普通小麦品种京411未成熟胚诱导愈伤组织,10天左右,对820个胚性愈伤组织用含有35S启动子的天花粉蛋白(trichosanthin, TCS)基因轰击。2周后,将这些被轰击的愈伤组织转到含潮霉素50mg/L的筛选培养基上,经分化和生根,获得了33棵... 取普通小麦品种京411未成熟胚诱导愈伤组织,10天左右,对820个胚性愈伤组织用含有35S启动子的天花粉蛋白(trichosanthin, TCS)基因轰击。2周后,将这些被轰击的愈伤组织转到含潮霉素50mg/L的筛选培养基上,经分化和生根,获得了33棵再生植株,经接饲毒蚜虫抗病性鉴定和PCR、Southern杂交分析,从中筛选出4株含有编码TCS的转基因小麦植株。转化频率为0.49%。 展开更多
关键词 转基因小麦 TCS基因 转化 基因枪 天花粉蛋白基因
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病毒复制酶基因Nib8和ERF转录因子W17基因枪法共转化小麦 被引量:12
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作者 刘永伟 徐兆师 +4 位作者 杜丽璞 徐惠君 李连城 马有志 陈明 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1548-1552,共5页
将对小麦黄花叶病毒表现高抗的复制酶基因Nib8和具有广谱抗病性的ERF基因W17分别构建到单子叶高效组成型表达载体上,采用基因枪共转化法转化到小麦品种扬麦12和扬麦16中,PCR检测共获得Nib8基因的阳性转基因植株42株,W17基因的阳性转基... 将对小麦黄花叶病毒表现高抗的复制酶基因Nib8和具有广谱抗病性的ERF基因W17分别构建到单子叶高效组成型表达载体上,采用基因枪共转化法转化到小麦品种扬麦12和扬麦16中,PCR检测共获得Nib8基因的阳性转基因植株42株,W17基因的阳性转基因植株48株,及两个功能基因均为阳性的转基因植株6株。以扬麦12为受体的转化率分别为1.53%(Nib8)、4.87%(W17)和0.42%(Nib8+W17);以扬麦16为受体的转化率分别为2.05%(Nib8)、0.86%(W17)和0.20%(Nib8+W17)。对2个功能基因都呈阳性的6个植株进行Southern blotting分析,进一步证实功能基因已经整合到小麦基因组中。本研究为获得具有综合抗病性的小麦新材料奠定了基础。 展开更多
关键词 小麦 基因枪 ERF转录因子 复制酶基因
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小麦Mlo反义基因的转化及转基因植株的白粉病抗性分析 被引量:8
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作者 邢莉萍 钱晨 +3 位作者 李明浩 曹爱忠 王秀娥 陈佩度 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期431-439,共9页
采用基因枪法将小麦反义Mlo基因导入扬麦158和济麦20的幼胚愈伤组织中,在含除草剂的分化培养基上经两轮筛选,获得抗性再生植株。PCR检测、PCR-Southern杂交、基因组DNA斑点杂交和除草剂BASTA抗性分析结果证实已获得转基因扬麦158和济麦2... 采用基因枪法将小麦反义Mlo基因导入扬麦158和济麦20的幼胚愈伤组织中,在含除草剂的分化培养基上经两轮筛选,获得抗性再生植株。PCR检测、PCR-Southern杂交、基因组DNA斑点杂交和除草剂BASTA抗性分析结果证实已获得转基因扬麦158和济麦20阳性植株,荧光定量表达分析亦证明Mlo基因发生沉默。对T0和T1代转基因植株的白粉病抗性鉴定表明,有6个转基因株系高抗白粉病。对T1代转基因小麦接种白粉菌后孢子发育的显微观察结果显示,Mlo反义基因的导入明显加快了乳突的形成和维持时间,有效抑制了吸器的发育,因而使转Mlo反义基因材料表现抗病性。 展开更多
关键词 基因枪转化 小麦反义Mlo基因 小麦白粉病 乳突和吸器
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葡萄糖氧化酶基因转化小麦的研究 被引量:12
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作者 康乐 叶兴国 +1 位作者 徐惠君 杜丽璞 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期686-691,共6页
葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase,GO)在植物抵抗真菌和细菌感染时起重要作用,但将GO基因转入小麦的研究目前还未见报道。本研究利用基因枪介导法将来源于黑曲霉的GO基因转入优良小麦品种扬麦10号、鲁麦22和鲁麦23,从轰击的3300块幼胚愈伤... 葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase,GO)在植物抵抗真菌和细菌感染时起重要作用,但将GO基因转入小麦的研究目前还未见报道。本研究利用基因枪介导法将来源于黑曲霉的GO基因转入优良小麦品种扬麦10号、鲁麦22和鲁麦23,从轰击的3300块幼胚愈伤组织中,获得了246棵再生植株,经PCR鉴定,其中的31棵含有GO基因,PCR阳性植株比例为0.94%。T1代经Southernblotting分析,证明GO基因已整合到小麦基因组中。T2代植株淀粉碘化钾染色结果证实GO基因已在蛋白质水平表达。对T2代植株进行了白粉病抗性鉴定,结果在34个转基因株系中有23个株系的病情指数低于相应的非转基因对照。T1代转基因植株经PCR分析,筛选到48株含有GO基因而不带有筛选标记基因(bar)的植株。 展开更多
关键词 小麦 葡萄糖氧化酶基因 基因枪转化法
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用基因枪法将抗除草剂基因导入小麦栽培品种的研究 被引量:3
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作者 赵虹 李名扬 +1 位作者 裴炎 董玉梅 《植物学通报》 CSCD 北大核心 2002年第4期457-461,共5页
利用基因枪法将抗除草剂bar基因导入西南地区的 3个小麦栽培品种 ,共获得 7个转基因植株 ,转化频率在 0 .45 %~ 1 .2 %之间 ,转化周期缩短至 3个月左右。对抗性植株进行PCR和PCR_Southern杂交检测 ,初步确定bar基因已导入小麦基因组。... 利用基因枪法将抗除草剂bar基因导入西南地区的 3个小麦栽培品种 ,共获得 7个转基因植株 ,转化频率在 0 .45 %~ 1 .2 %之间 ,转化周期缩短至 3个月左右。对抗性植株进行PCR和PCR_Southern杂交检测 ,初步确定bar基因已导入小麦基因组。做转基因植株叶片对除草剂PPT的抗性试验 ,有 4株呈抗性 ,3株呈部分抗性 ,表明bar基因已在小麦植株中得到表达。 展开更多
关键词 基因枪法 抗除草剂基因 小麦 栽培品种 基因导入 BAR
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基因枪法介导的转KN2基因小麦的获得及鉴定 被引量:1
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作者 周鹏 池青 +2 位作者 吕金洋 刘香利 赵惠贤 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2014年第1期83-88,共6页
【目的】获得转KN2基因的小麦植株,为研究KN2基因对提高转基因小麦抗寒性的作用,以及为利用基因工程提高小麦抗逆性奠定基础。【方法】以弱冬性小麦品种小偃22为供试材料,通过基因枪法,用含有KN2基因的植物表达载体和筛选标记基因bar共... 【目的】获得转KN2基因的小麦植株,为研究KN2基因对提高转基因小麦抗寒性的作用,以及为利用基因工程提高小麦抗逆性奠定基础。【方法】以弱冬性小麦品种小偃22为供试材料,通过基因枪法,用含有KN2基因的植物表达载体和筛选标记基因bar共转化小麦幼胚愈伤组织,经过除草剂(Phosphinothricin,草丁膦)筛选和愈伤组织分化获得再生植株,并对得到的再生小麦植株进行PCR检测。【结果】采用基因枪法共轰击小偃22的幼胚愈伤组织1 680个,共获得再生植株17株,移栽到花盆中成活15株;根据目标基因序列设计特异引物,对成活的小麦植株进行PCR检测,结果表明获得含有bar基因和KN2基因的转基因阳性植株分别为6株和4株,转化率分别为0.36%和0.24%,bar和KN2的共转化率为0.24%。【结论】KN2基因成功地转入到小麦品种小偃22中。 展开更多
关键词 小麦 基因枪法 共转化法 KN2基因
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抗逆相关基因GmAREB转基因小麦的获得与鉴定 被引量:9
8
作者 陈红敏 陈明 +5 位作者 魏安智 徐兆师 李连城 徐惠君 杜丽璞 马有志 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期749-754,759,共7页
从大豆中克隆一个抗逆相关的bZIP类转录因子基因GmAREB,功能分析表明:GmAREB基因的过表达可以显著提高转基因拟南芥和烟草的抗旱、耐盐和耐寒性。为了获得抗逆转基因小麦,本研究利用玉米的Ubiqutin启动子控制GmAREB基因表达,构建了用于... 从大豆中克隆一个抗逆相关的bZIP类转录因子基因GmAREB,功能分析表明:GmAREB基因的过表达可以显著提高转基因拟南芥和烟草的抗旱、耐盐和耐寒性。为了获得抗逆转基因小麦,本研究利用玉米的Ubiqutin启动子控制GmAREB基因表达,构建了用于小麦转化的载体pSK-GmAREB。采用基因枪共转化法转化小麦品种郑147和济麦22。通过PCR检测共获得T0代的阳性植株70株,转化率为1.37%。其中,郑147阳性植株共31株,转化率为2.14%;济麦22阳性植株39株,转化率为1.08%。目前,已经获得T1代转基因株系18个,其中以郑147为受体的株系4个,以济麦22为受体的株系14个。对部分株系进行Southern blotting分析,进一步证实GmAREB基因已经整合到小麦基因组中。在低温胁迫条件下,3个以济麦22为受体的转基因株系体内脯氨酸的积累与受体小麦相比有显著增加,初步证明在小麦中过表达GmAREB基因,可以促进渗透调节物质脯氨酸的积累,可能有助于转基因小麦抗逆性的提高。本研究为进一步筛选抗逆转基因小麦新材料奠定了基础。 展开更多
关键词 小麦 基因枪法转化 转录因子 GmAREB基因 脯氨酸
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基因枪法介导转ZmalⅠ基因小麦植株的获得和鉴定 被引量:3
9
作者 王海凤 韩冉 +2 位作者 张东武 刘振华 赵惠贤 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2011年第8期90-94,101,共6页
【目的】获得转玉米ZmalⅠ基因的安全转基因小麦植株,为研究玉米ZmalⅠ基因在增加小麦籽粒大小和粒质量方面的作用,以及利用基因工程提高小麦产量奠定基础。【方法】以陕农138为供试材料,绿色荧光蛋白基因(GFP)为安全标记基因,利用基因... 【目的】获得转玉米ZmalⅠ基因的安全转基因小麦植株,为研究玉米ZmalⅠ基因在增加小麦籽粒大小和粒质量方面的作用,以及利用基因工程提高小麦产量奠定基础。【方法】以陕农138为供试材料,绿色荧光蛋白基因(GFP)为安全标记基因,利用基因枪法,将由谷蛋白胚乳特异表达启动子启动的ZmalⅠ+GFP融合蛋白基因的过表达载体pGlu-exbessa::ZmalⅠ导入小麦中,并对转基因小麦进行PCR检测。【结果】采用基因枪法共轰击3 000个幼胚,获得再生植株59株,移栽至培养钵后成活52株,成活率为88.1%;利用载体上安全标记基因GFP的特异引物对成活的转化植株进行PCR检测,获得含有GFP基因的阳性安全植株16株,转化率为0.53%。【结论】将ZmalⅠ基因成功地整合到了小麦基因组中。 展开更多
关键词 小麦 基因枪法 增大种子体积Zmal I基因 安全标记基因GFP
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