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Wilms肿瘤1相关蛋白促进宫颈癌细胞增殖的作用及其机制
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作者 陈义波 龙玲 +1 位作者 范幸 林蓓蓓 《中南药学》 CAS 2023年第5期1190-1195,共6页
目的探讨Wilms肿瘤1相关蛋白(WTAP)对宫颈癌细胞增殖的影响及其机制。方法结合OncoLnc数据库和Cancer RNA-Seq Nexus(CRN)数据库分析WTAP基因与宫颈癌患者预后的相关性;通过Western blot分析人正常宫颈上皮细胞(HUCEC)、宫颈癌SiHa和HeL... 目的探讨Wilms肿瘤1相关蛋白(WTAP)对宫颈癌细胞增殖的影响及其机制。方法结合OncoLnc数据库和Cancer RNA-Seq Nexus(CRN)数据库分析WTAP基因与宫颈癌患者预后的相关性;通过Western blot分析人正常宫颈上皮细胞(HUCEC)、宫颈癌SiHa和HeLa细胞之间WTAP蛋白表达的差异;利用小干扰RNA(siRNA)和质粒转染分别调控HeLa细胞中WTAP的表达。HeLa细胞分为对照siRNA组(NC siRNA)、WTAP-siRNA组(WTAP siRNA)、对照质粒组(Empty vector)、WTAP过表达质粒组(WTAP OE vector)。通过Western blot验证转染效果,CCK8和克隆形成实验检测细胞增殖,Western blot检测丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)活性和G蛋白信号调节物5(RGS5)的表达,m6A-IP-qPCR检测RGS5的N6-甲基腺嘌呤(m6A)修饰水平。结果WTAP基因高表达组宫颈癌患者的总生存期显著低于WTAP基因低表达组患者[Log-rank检验P=0.0412(OncoLnc)和0.0078(CRN)]。与HUCEC相比,宫颈癌细胞SiHa和HeLa细胞WTAP蛋白表达显著升高,HeLa细胞升高更加显著(P<0.05)。与对照siRNA组相比,WTAP-siRNA组HeLa细胞增殖能力显著升高(P<0.05),AKT磷酸化水平显著降低、RGS5表达显著增多(P<0.05),RGS5 m6A水平显著降低(P<0.05);与对照质粒组相比,WTAP过表达质粒组HeLa细胞增殖能力显著降低(P<0.05),AKT磷酸化水平显著升高、RGS5表达显著减少(P<0.05),RGS5 m6A水平显著升高(P<0.05)。结论WTAP促进宫颈癌HeLa细胞增殖,其机制与调节RGS5的m6A修饰,从而影响AKT信号通路有关。 展开更多
关键词 wilms肿瘤1相关蛋白 宫颈癌 HELA细胞 增殖
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Wilms肿瘤基因反义寡苷酸对白血病细胞凋亡的影响
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作者 吴晓雄 汪月增 +4 位作者 裴雪涛 楼方定 张伯龙 王立生 徐黎 《军医进修学院学报》 CAS 2000年第2期111-113,共3页
了解Wilms肿瘤基因 (WT1)反义寡核苷酸 (ASO)对白血病细胞凋亡的作用。方法 :应用WT1ASO以及足叶乙甙 (VP 16 )作用K5 6 2、HL 6 0细胞系 ,然后应用流式细胞仪测定DNA含量以确定白血病细胞的凋亡数。结果 :K5 6 2细胞系经WT1ASO作用 2 4... 了解Wilms肿瘤基因 (WT1)反义寡核苷酸 (ASO)对白血病细胞凋亡的作用。方法 :应用WT1ASO以及足叶乙甙 (VP 16 )作用K5 6 2、HL 6 0细胞系 ,然后应用流式细胞仪测定DNA含量以确定白血病细胞的凋亡数。结果 :K5 6 2细胞系经WT1ASO作用 2 4h和 6 0h后细胞凋亡数分别为 14.6 %和 2 6 .8% ;而WT1有义寡核苷酸 (SO)组分别为 3.1% (2 4h)和 3 9% (6 0h) ;加入少量VP 16后凋亡数达到 37 2 % (2 4h)和 6 6 .6 % (6 0h)。HL 6 0细胞经WT1ASO作用 2 4h及 6 0h后细胞凋亡数无明显增高 ,但作用 6 0h后与VP 16联合作用 ,细胞凋亡可达 34.7% ,大于单用VP 16 (13 .7% )及VP 16 +SO (15 .4% )诱导的细胞凋亡数。结论 :WT1ASO可以导致K5 6 2细胞凋亡并可提高白血病细胞对VP 16的敏感性。WT1基因与白血病细胞的凋亡有关 ,其在不同细胞中所发挥的作用不同。 展开更多
关键词 白血病 反义寡核苷酸 wilms肿瘤基因 细胞凋亡
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CCCG-WT-2016方案治疗43例Wilms肿瘤临床分析 被引量:3
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作者 田小毛 马伟 +5 位作者 石秦林 陆鹏 刘星 林涛 何大维 魏光辉 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期915-920,共6页
目的总结WT-2016方案治疗Wilms肿瘤的疗效。方法回顾分析2017年3月至2019年3月,采用CCCGWT-2016方案治疗的Wilms肿瘤患儿的临床资料,患儿随访至2020年4月1日,以Kaplan-Meier曲线描述生存结局。结果共纳入43例患儿,男23例、女20例,左侧发... 目的总结WT-2016方案治疗Wilms肿瘤的疗效。方法回顾分析2017年3月至2019年3月,采用CCCGWT-2016方案治疗的Wilms肿瘤患儿的临床资料,患儿随访至2020年4月1日,以Kaplan-Meier曲线描述生存结局。结果共纳入43例患儿,男23例、女20例,左侧发病23例、右侧发病19例、双侧发病1例,中位年龄2.40(0.83~2.00)岁。I期7例、II期7例、III期21例、IV期6例、V期2例;病理分型FH型38例、uFH型5例。随访中位时间24.13(17.23~31.10)月,除1例复发患儿需继续强化治疗外,其余患儿已结束治疗。死亡4例(9.3%),2例死于复发、1例死于疾病进展、1例死于脓毒症休克;复发4例(9.3%),3例转移至肺部(其中1例肿瘤原位复发合并肺部转移)、1例转移至纵膈。估计2年总生存率为(93.02±3.89)%,2年无复发生存率为(90.58±4.49)%。总体脓毒症发生率14.0%,呼吸道感染发生率18.6%,药物性肝损害发生率7.0%,4级骨髓抑制发生率39.5%。Ⅳ级骨髓抑制各种不良反应的发生率分别为白细胞降低32.6%,中性粒细胞绝对值降低34.9%,血小板降低23.3%,血红蛋白降低9.3%。结论采用WT-2016方案治疗儿童Wilms肿瘤预后较好。 展开更多
关键词 wilms肿瘤 肾母细胞瘤 化疗方案 生存分析 骨髓抑制
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Wilms肿瘤易感基因在急性髓系白血病中的研究进展 被引量:2
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作者 阳勇龙 朱刚直 陈小平 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2016年第11期1313-1320,共8页
Wilms肿瘤易感基因(Wilms tumor type 1,WT1)起初作为肿瘤抑制基因而被大家认识,而最近报道指出WT1作为原癌基因在正常造血系统细胞增殖分化过程中发挥着重要的作用,且预示着较差的肿瘤预后。表明WT1基因与疾病的发生、发展及预后存在... Wilms肿瘤易感基因(Wilms tumor type 1,WT1)起初作为肿瘤抑制基因而被大家认识,而最近报道指出WT1作为原癌基因在正常造血系统细胞增殖分化过程中发挥着重要的作用,且预示着较差的肿瘤预后。表明WT1基因与疾病的发生、发展及预后存在密切关系。近年来对WT1基因的表达、突变与急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)疗效和预后的关系有进一步的研究进展。本文就近几年WT1在AML疾病中的作用进行了综述,旨在全面考虑该基因对于疾病的作用并对患者实施分层治疗,从而达到精准治疗。 展开更多
关键词 wilms肿瘤易感基因 急性髓性白血病 预后
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Wilms肿瘤基因在生长发育及非肿瘤性疾病中作用研究 被引量:1
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作者 陈俊玲 杨芝春 《中南医学科学杂志》 CAS 2018年第3期232-235,246,共5页
Wilms肿瘤基因(WT1)是与Wilms肿瘤密切相关的癌基因,具有锌指转录因子活性。近年来研究表明,WT1基因是维持组织器官生长发育的重要调控因子;当WT1基因表达异常时,除了作为抑癌或原癌基因参与多种肿瘤发生发展外,还与肥胖、糖尿病、高血... Wilms肿瘤基因(WT1)是与Wilms肿瘤密切相关的癌基因,具有锌指转录因子活性。近年来研究表明,WT1基因是维持组织器官生长发育的重要调控因子;当WT1基因表达异常时,除了作为抑癌或原癌基因参与多种肿瘤发生发展外,还与肥胖、糖尿病、高血压等非肿瘤性疾病关系密切。本文主要就WT1基因在生长发育及非肿瘤性疾病发生中的作用综述如下。 展开更多
关键词 wilms肿瘤基因 发育 疾病 生物学功能
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Wilms肿瘤基因蛋白Wt1可激活血管内皮细胞钙黏附蛋白的基因转录
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作者 刘晔 杨卓 《天津医药》 CAS 北大核心 2011年第1期87-87,共1页
Wt1是Wilms肿瘤(肾母细胞瘤)的一个新的靶基因,其通过调节黏附蛋白5(血管内皮细胞的钙黏附蛋白,CDH5)的转录活动来完成血管和肾脏的生成过程。Wt1编码一个锌指蛋白,是儿科肾脏肿瘤的一个亚型,Wilms肿瘤中有该蛋白的突变体。近期研... Wt1是Wilms肿瘤(肾母细胞瘤)的一个新的靶基因,其通过调节黏附蛋白5(血管内皮细胞的钙黏附蛋白,CDH5)的转录活动来完成血管和肾脏的生成过程。Wt1编码一个锌指蛋白,是儿科肾脏肿瘤的一个亚型,Wilms肿瘤中有该蛋白的突变体。近期研究表明, 展开更多
关键词 wilms肿瘤 血管内皮细胞 钙黏附蛋白 基因转录 WT1 基因蛋白 激活 肾脏肿瘤
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卵巢上皮癌中Wilms肿瘤基因的表达
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作者 Hylander B Repasky E +3 位作者 Shrikant P K. O- dunsi 吕涛(译) 高雪莲(校) 《世界核心医学期刊文摘(妇产科学分册)》 2006年第6期56-56,共1页
Objectives. The identification of proteins that are selectively expressed in cancer and with potential to elicit an immune response is the first step towards antigen- specific immunotherapy. The Wilms tumor gene produ... Objectives. The identification of proteins that are selectively expressed in cancer and with potential to elicit an immune response is the first step towards antigen- specific immunotherapy. The Wilms tumor gene product (WT1) is inherently immunogenic and is now thought to be oncogenic. The aim of this study was to determine the expression of WT1 in epithelial ovarian cancer (EOC) and correlate with clinico- pathologic characteristics. Methods. WT1 expression was examined using immunohistochemistry applied on a tissue microarray of normal tissues and a panel of 100 EOC tissues. The distribution of WT1 expression and clinico- pathologic variables were analyzed. Survival probabilities were estimated by Kaplan- Meier method, and statistical significance was determined by the logrank test. Results. WT1 expression was observed in 78/100 of specimens. The predominant expression pattern was homogenous, occurring in 66/100 (66% ) of WT1- positive specimens, while 12/100 (12% ) demonstrated heterogeneous staining. In normal tissues, WT1 expression was noted in kidneys, splenic capsule, Sertoli cells of the testis, and granulosa cells of the ovary. The median follow- up of the patient population was 30 months. Patients with WT1- positive tumors tended to have a higher grade (P = 0.006) and stage (P = 0.002) of tumor. However, there were no significant differences in the distribution of patients with WT1- positive tumors in relation to disease- free and overall survival. Conclusions. Our data demonstrate that WT1 is expressed at high frequency in patients with EOC. Since WT1 demonstrates tissue- restricted expression and is inherently immunogenic, it could represent an attractive target for antigen- specific immunotherapy in EOC. 展开更多
关键词 卵巢上皮癌 wilms肿瘤 基因表达 免疫反应
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Wilms肿瘤基因在骨髓增生异常综合征与急性白血病患者骨髓细胞中的表达及其临床意义 被引量:3
8
作者 华海应 高华强 +3 位作者 朱文艳 孙爱宁 岑建农 吴丽丽 《江苏医药》 CAS 2015年第20期2394-2396,共3页
目的研究Wilms肿瘤基因(WT1)在骨髓增生异常综合征(MDS)及急性白血病(AL)患者骨髓细胞中的表达及其临床意义。方法采用qRT-PCR检测62例MDS(MDS组)、157例AL(AL组)和38例非恶性血液病患者(对照组)骨髓细胞中WT1的表达。结果 MDS组WT1阳... 目的研究Wilms肿瘤基因(WT1)在骨髓增生异常综合征(MDS)及急性白血病(AL)患者骨髓细胞中的表达及其临床意义。方法采用qRT-PCR检测62例MDS(MDS组)、157例AL(AL组)和38例非恶性血液病患者(对照组)骨髓细胞中WT1的表达。结果 MDS组WT1阳性率低于AL组(27.4%vs.79.0%)(P<0.01);对照组无WT1阳性表达。MDS组内难治性血细胞减少伴单系发育异常/难治性贫血伴环状铁粒幼红细胞(RCUD/RARS)型、难治性血细胞减少伴多系发育异常(RCMD)型、难治性贫血伴原始细胞增多Ⅰ型(RAEB-1型)和RAEB-2型WT1阳性率分别为9.1%、20.0%、35.3%和57.1%,组间均有统计学差异(P<0.01);AL组内急性髓细胞性白血病(AML)型和急性淋巴细胞性白血病(ALL)型WT1阳性率分别为80.8%和71.9%(P>0.05)。AL患者中,WT1阳性组化疗后的完全缓解率低于WT1阴性组(P<0.05),且半年内复发率高于WT1阴性组(P<0.05)。结论 WT1在MDS及AL患者骨髓细胞中表达水平可作为临床评估疾病的发生发展、预后及检测微小残留病的指标。 展开更多
关键词 wilms肿瘤基因 骨髓增生异常综合征 急性白血病
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Wilms肿瘤临床治疗和生物学研究新进展
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作者 于国鹏 齐隽(综述) 施诚仁(审校) 《中华小儿外科杂志》 CSCD 北大核心 2013年第6期468-471,共4页
Wilms肿瘤(WT)是儿童期最常见的肾脏恶性肿瘤,是我们清楚认识到辅助化疗价值的第一个儿童实体恶性肿瘤。术后辅以放疗及化疗可以显著的提高其生存率,生存率已从30%提高到80%。虽然,目前患有良好组织学类型Wilms肿瘤儿童的总体生... Wilms肿瘤(WT)是儿童期最常见的肾脏恶性肿瘤,是我们清楚认识到辅助化疗价值的第一个儿童实体恶性肿瘤。术后辅以放疗及化疗可以显著的提高其生存率,生存率已从30%提高到80%。虽然,目前患有良好组织学类型Wilms肿瘤儿童的总体生存率已经达到90%,但是对复发性肿瘤或横纹肌样和间变性肿瘤的儿童来说,最终的结局仍然不容乐观。 展开更多
关键词 wilms肿瘤 临床治疗 生物学 肾脏恶性肿瘤 实体恶性肿瘤 辅助化疗 组织学类型 间变性肿瘤
原文传递
从中医学角度认识Wilms瘤-无虹膜-泌尿生殖系统异常-智力发育迟缓综合征 被引量:1
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作者 陈永 陈荣良 +1 位作者 李彦斌 韩立民 《中国医药导报》 CAS 2012年第10期130-131,136,共3页
WAGR综合征是一种由于染色体11p13等的基因畸变导致的罕见遗传性家族性肿瘤综合征,其临床表现复杂,主要表现为:Wilms瘤、无虹膜畸形、泌尿生殖系统异常和智力发育迟缓。由于在中医基础理论中,"肾"与生殖系统、大脑的功能,以及... WAGR综合征是一种由于染色体11p13等的基因畸变导致的罕见遗传性家族性肿瘤综合征,其临床表现复杂,主要表现为:Wilms瘤、无虹膜畸形、泌尿生殖系统异常和智力发育迟缓。由于在中医基础理论中,"肾"与生殖系统、大脑的功能,以及"目"的关系是非常密切的。本文以中医理论中"肾精"的生理、病理为主线,将这些临床表现串联在一起;将肾的先天之精包括了染色体及其基因的正常结构、功能。将WAGR综合征中11p13等染色体及其基因突变理解为先天精气的不足或异常。 展开更多
关键词 wilms肿瘤 五行 生殖系统 中西医结合
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卵巢浆液性肿瘤中WT-1异常活化对ki-67和P53蛋白表达的调控作用 被引量:7
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作者 廖寿雁 郭苑莉 《解剖学研究》 CAS 2017年第2期119-122,共4页
目的探讨卵巢浆液性肿瘤WT-1异常活化情况,并分析对ki-67和P53蛋白表达的调控作用及临床意义。方法随机选取我院卵巢肿瘤患者100例,其中卵巢浆液性囊腺瘤26例、交界性浆液性肿瘤15例、卵巢浆液性癌34例和卵巢黏液性癌25例,采用免疫组化... 目的探讨卵巢浆液性肿瘤WT-1异常活化情况,并分析对ki-67和P53蛋白表达的调控作用及临床意义。方法随机选取我院卵巢肿瘤患者100例,其中卵巢浆液性囊腺瘤26例、交界性浆液性肿瘤15例、卵巢浆液性癌34例和卵巢黏液性癌25例,采用免疫组化检测WT-1、ki-67、P53蛋白的表达,并分析其与关系。结果在卵巢浆液性癌中WT-1阳性率为32.35%,显著高于交界性浆液性肿瘤,其中高级别浆液性癌中的阳性率为36.84%,又明显高于低级别浆液性癌(26.87%),组间比较差异具有统计学意义(P<0.05),而在卵巢浆液性囊腺瘤中未见WT-1蛋白异常表达。在卵巢浆液性癌和交界性浆液性肿瘤中ki-67、P53蛋白的表达明显高于浆液性囊腺瘤(P<0.05),ki-67和P53在不同级别卵巢癌中亦存在差异性表达(P<0.05);在卵巢黏液性癌和浆液性癌组织中WT-1和ki-67、P53蛋白差异均未见统计学意义(P>0.05)。Spearman等级相关分析显示,WT-1蛋白与ki-67、P53蛋白的表达均呈正相关(r=0.998和0.745,P=0.001)。结论卵巢浆液性癌中存在WT-1异常活化,且主要发生于高级别浆液性癌中,其可能通过调控ki-67、P53蛋白的表达而发挥癌基因的作用,检测WT-1蛋白对判断肿瘤性质和级别具有重要的指导价值。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 wilms肿瘤基因-1 KI-67 P53蛋白
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不同基因突变的急性髓系白血病患者的疗效及预后研究进展 被引量:2
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作者 刘洋 刘述川 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第22期4284-4289,共6页
急性髓系白血病(AML)是一组起源于造血干细胞的血液系统恶性肿瘤。近年来细胞遗传学改变被认为是AML患者重要的独立预后因素。FLT3、NPM1、RUNX1及WT1基因突变已成为重要的危险分层评价指标。其中FLT3-ITD突变可导致白血病细胞增殖失控... 急性髓系白血病(AML)是一组起源于造血干细胞的血液系统恶性肿瘤。近年来细胞遗传学改变被认为是AML患者重要的独立预后因素。FLT3、NPM1、RUNX1及WT1基因突变已成为重要的危险分层评价指标。其中FLT3-ITD突变可导致白血病细胞增殖失控,是独立预后不良因素。NPM1突变预示着更好的预后,可考虑选择全反式维甲酸和砷剂联合治疗、抗CD33单抗、放线菌素等治疗。RUNX1基因突变是近年来在髓系肿瘤中发现的热点突变,在初发核型正常AML中频发,与短的总体生存时间及不成熟的细胞形态有关,被认为是维持AML生存所必需的肿瘤抑制因子。WT1基因为调节造血和凋亡的肿瘤抑制基因,表达高低可能与临床缓解和复发有关,可作为潜在的预后因素和特异性免疫治疗的新靶点。复发时用定量PCR方法检测NPM1突变较WT1更具优势。本文就以上分子标志作一综述。旨在寻找潜在的基因靶点,为开发精准治疗AML的新型基因靶向药物提供参考。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 FMS样酪氨酸激酶3基因 核磷蛋白基因 Runt相关转录因子基因 wilms肿瘤1基因
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敲低WTAP表达抑制脑胶质瘤干细胞的增殖、迁移和侵袭
13
作者 刘祯 赵海洋 +1 位作者 吴环立 李琳坤 《中国临床神经外科杂志》 2023年第4期263-266,共4页
目的 探讨敲低Wilms肿瘤抑制因子(WTAP)表达对脑胶质瘤干细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及机制。方法 从手术切除胶质瘤标本中提取胶质瘤干细胞(GSC),应用lipofectamine2000转染WTAP shRNA质粒敲低WTAP表达,以shRNA为阴性对照;PCR检测W... 目的 探讨敲低Wilms肿瘤抑制因子(WTAP)表达对脑胶质瘤干细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及机制。方法 从手术切除胶质瘤标本中提取胶质瘤干细胞(GSC),应用lipofectamine2000转染WTAP shRNA质粒敲低WTAP表达,以shRNA为阴性对照;PCR检测WTAP mRNA水平分析敲低效率;MTT法检测细胞增殖能力,Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭能力,免疫印迹法检测细胞AKT磷酸化水平。结果 从胶质瘤标本中成功提取GSC,其SOX2表达显著降低(P<0.001),而α-SMA和PDGFRb的表达上调(P<0.001)。与阴性对照组相比,WTAP敲低组GSC细胞WTAP mRNA水平明显降低(P<0.05),细胞增殖、迁移和侵袭能力均显著下降(P<0.05),细胞AKT的磷酸化水平显著降低(P<0.05)。结论 敲低WTAP表达可抑制GSC的增殖、迁移和侵袭能力,其机制可能与抑制AKT磷酸化有关。 展开更多
关键词 胶质瘤 胶质瘤干细胞 细胞增殖 细胞侵袭 细胞迁移 wilms肿瘤抑制因子(WTAP)
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慢性束缚应激对小鼠海马N6-甲基腺苷及相关酶表达的影响
14
作者 张圆 时萌萌 +5 位作者 贺嘉贝 吴琼 钟小林 向宇燕 徐杨 何洁 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期142-148,共7页
目的探讨慢性束缚应激对小鼠海马N6-甲基腺苷(m6A)及相关酶表达影响。方法将20只C57BL/6J雄鼠随机分成对照(control)组、慢性束缚应激模型(CRS)组;给予CRS组小鼠3周慢性束缚应激建立小鼠焦虑模型,采用旷场实验和高架十字迷宫实验检测各... 目的探讨慢性束缚应激对小鼠海马N6-甲基腺苷(m6A)及相关酶表达影响。方法将20只C57BL/6J雄鼠随机分成对照(control)组、慢性束缚应激模型(CRS)组;给予CRS组小鼠3周慢性束缚应激建立小鼠焦虑模型,采用旷场实验和高架十字迷宫实验检测各组小鼠焦虑样行为变化;采用免疫组织化学法和m6A RNA甲基化检测试剂盒检测小鼠海马m6A的表达变化;采用Western blotting和Real-time PCR方法分析海马m6A相关酶表达变化。结果1.小鼠焦虑相关行为学检测结果显示,与control组相比,CRS组小鼠在旷场内框停留时间明显下降(P<0.01);高架十字迷宫开放臂探索时间减少(P<0.0001);2.m6A RNA甲基化检测试剂盒检测结果显示,与control组相比,CRS组小鼠海马m6A含量明显减少(P<0.05);免疫组化结果显示,与control组相比,CRS组小鼠海马m6A阳性产物明显减少(P<0.001);3.PCR结果显示,与control组相比,CRS组小鼠海马去甲基化酶间变性淋巴瘤激酯B(AlkB)同源蛋白5(ALKBH5)(P<0.001)、脂肪和肥胖相关蛋白(FTO)表达显著上调(P<0.05);甲基化酶Wilms肿瘤蛋白1相关蛋白(WTAP)(P<0.05)表达显著下调;m6A甲基化结合蛋白YTH结构域家族蛋白3(YTHDF3)(P<0.05)和YTH结构域蛋白2(YTHDC2)(P<0.01)表达显著上调。Western blotting结果显示,与control组相比,CRS组小鼠海马去甲基化酶ALKBH5(P<0.05)、FTO(P<0.05)表达显著上调;甲基化酶WTAP(P<0.01)表达显著下调;m6A甲基化结合蛋白YTHDF3(P<0.01)和YTHDC2(P<0.05)表达显著上调。结论在慢性束缚应激所致小鼠焦虑与海马m6A表达下调有关,其机制可能与m6A甲基化酶WTAP表达下调或去甲基化酶ALKBH5和FTO表达上调相关。 展开更多
关键词 慢性束缚应激 焦虑 N6-甲基腺苷 间变性淋巴瘤激酯B同源蛋白5 脂肪和肥胖相关蛋白 wilms肿瘤蛋白1相关蛋白 免疫印迹法 小鼠
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敲低m6A甲基转移酶WTAP对皮肤鳞癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响
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作者 黄志顺 霍然 《山东医药》 CAS 2023年第17期33-37,共5页
目的通过敲低N6-甲基腺嘌呤(m6A)甲基转移酶Wilms肿瘤蛋白1相关蛋白(WTAP)在皮肤鳞癌(cSCC)细胞中的表达,探讨WTAP对cSCC细胞增殖,迁移和侵袭能力的影响。方法选取人cSCC细胞A431、SCL-1及正常人表皮角质形成细胞HaCaT,Western blottin... 目的通过敲低N6-甲基腺嘌呤(m6A)甲基转移酶Wilms肿瘤蛋白1相关蛋白(WTAP)在皮肤鳞癌(cSCC)细胞中的表达,探讨WTAP对cSCC细胞增殖,迁移和侵袭能力的影响。方法选取人cSCC细胞A431、SCL-1及正常人表皮角质形成细胞HaCaT,Western blotting法及qRT-PCR法分别检测各细胞中WTAP蛋白及mRNA表达。选取WTAP蛋白及mRNA表达最高的A431细胞转染WTAP敲低慢病毒shWTAP-1、shWTAP-2、shWTAP-3及阴性对照慢病毒shNC,使用qRT-PCR与Western blotting验证转染效率。选取敲低差异最显著的shWTAP-3转染细胞作为WTAP敲低组,shNC转染细胞作为对照组。采用比色法检测细胞m6A表达,CCK-8法及克隆形成实验检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果WTAP敲低组m6A表达低于对照组,各时点细胞OD值均低于对照组,克隆形成数少于对照组,穿膜细胞数、细胞迁移率低于对照组(P均<0.05)。结论敲低WTAP可抑制cSCC细胞的增殖、侵袭和迁移,该作用可能通过下调m6A表达来实现。 展开更多
关键词 wilms肿瘤蛋白1相关蛋白 N6-甲基腺嘌呤 细胞增殖 细胞侵袭 细胞迁移 皮肤鳞状细胞癌
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胰腺导管腺癌组织中WT1,IGF-IR表达与细胞凋亡的关系 被引量:3
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作者 龚勇 赵秋 +2 位作者 杨芳 王渝 马松林 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2006年第28期2810-2814,共5页
目的:研究胰腺导管腺癌组织中WT1,IGF-IR的表达与细胞凋亡关系.方法:应用免疫组化技术检测WT1,IGF-IR在49例胰腺导管腺癌及15例正常胰腺组织中的表达,并应用TUNEL法检测细胞凋亡,计算凋亡指数(AI).结果:WT1,IGF-IR在正常胰腺组织中的... 目的:研究胰腺导管腺癌组织中WT1,IGF-IR的表达与细胞凋亡关系.方法:应用免疫组化技术检测WT1,IGF-IR在49例胰腺导管腺癌及15例正常胰腺组织中的表达,并应用TUNEL法检测细胞凋亡,计算凋亡指数(AI).结果:WT1,IGF-IR在正常胰腺组织中的阳性表达率分别为26.67%(4/15)、40.00%(6/15);在胰腺导管腺癌组织中的阳性表达率分别为71.43%(35/49)、77.55%(38/49),两者在癌组织中的表达分别明显高于其在正常胰腺组织中的表达(P<0.05),且在癌组织中的表达呈正相关(r=0.385,P<0.05).正常胰腺组织及癌组织中的AI分别为0.41±0.13、5.93±4.18,两者比较有显著性差异(P<0.05),癌组织中AI随组织分化程度的升高而升高.IGF-IR表达阳性组的AI显著低于阴性组(4.11±3.68 vs 12.21±5.67,P<0.01).结论:胰腺导管腺癌组织中IGF-IR的高表达抑制细胞凋亡,WT1,IGF-IR的高表达以及细胞凋亡的减少可能在胰腺导管腺癌的发生发展中起重要作用. 展开更多
关键词 wilms肿瘤基因 胰岛素样生长因子Ⅰ受体 胰腺导管腺癌 免疫组织化学 细胞凋亡
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实时荧光定量RT-PCR检测白血病细胞WT1 mRNA方法的建立 被引量:1
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作者 沈红强 汤永民 +4 位作者 杨世隆 宋华 石淑文 徐卫群 钱伯芹 《实用肿瘤杂志》 CAS 北大核心 2003年第5期371-374,共4页
目的 建立实时荧光定量 RT-PCR检测白血病细胞 WT1m RNA的方法。方法 在 PCR反应体系中加入了一条与靶基因序列互补的寡核苷酸双荧光标记探针 (5′端为荧光报告基团 ,3′端为荧光淬灭基团 ) ,建立实时荧光定量 RT-PCR检测白血病细胞 W... 目的 建立实时荧光定量 RT-PCR检测白血病细胞 WT1m RNA的方法。方法 在 PCR反应体系中加入了一条与靶基因序列互补的寡核苷酸双荧光标记探针 (5′端为荧光报告基团 ,3′端为荧光淬灭基团 ) ,建立实时荧光定量 RT-PCR检测白血病细胞 WT1m RNA的方法 ,并测试其特异性及敏感性。结果 所建立的实时荧光定量 RT-PCR检测 WT1m RNA的方法具有很好的准确性 ,检测 WT1m RNA的灵敏度达 10 - 4。方法的变异系数为1.93 % ,稳定性较好。循环阈值与 PCR体系中起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系 (斜率为 -3 .5,线性相关系数 r=0 .997) ,可对 WT1m RNA的表达进行准确定量分析。结论 实时荧光定量 RT-PCR检测白血病细胞WT1m RNA的方法具有很好的特异性和敏感性 ,且操作简便、安全。 展开更多
关键词 实时荧光定量RT-PCR 检测 白血病 癌基因 wilms肿瘤基因 基因表达
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Beckwith-Wiedemann综合征1例及文献复习 被引量:2
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作者 王子威 陈莹 《中国现代医生》 2016年第26期155-157,共3页
目的认识Beckwith-Wiedemann综合征(BWS)临床特点、诊疗及基因特征。方法总结分析1例BWS患儿的临床表现、诊断、随访和基因检测结果,并进行文献复习。结果本例患儿具有巨舌、脐疝、血管痣、低血糖、内脏肥大、肾脏发育异常、先天性心脏... 目的认识Beckwith-Wiedemann综合征(BWS)临床特点、诊疗及基因特征。方法总结分析1例BWS患儿的临床表现、诊断、随访和基因检测结果,并进行文献复习。结果本例患儿具有巨舌、脐疝、血管痣、低血糖、内脏肥大、肾脏发育异常、先天性心脏病等BWS典型症状,同时基因印迹显示母源Kv DMR去甲基化。结论临床上发现新生儿存在巨舌、短暂性低血糖、脐疝、面部鲜红斑痣等表现,应考虑BWS可能。 展开更多
关键词 BECKWITH-WIEDEMANN综合征 表观遗传学 DNA甲基化 印记基因 wilms肿瘤
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巢式PCR检测WT1在白血病患者中的表达及其临床意义
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作者 汤屹 乔振华 刘文励 《同济医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期441-444,共4页
应用巢式逆转录 -聚合酶链反应 ( RT- PCR)测定 K5 62细胞株及 75例白血病患者及 10名正常人 WT1基因的表达。并同时测定 mdr1的表达。检测结果为 K5 62细胞株高表达 ,急性髓性白血病 ( AML) 3 0例中 19例 ,急性淋巴细胞白血病 ( AL L)... 应用巢式逆转录 -聚合酶链反应 ( RT- PCR)测定 K5 62细胞株及 75例白血病患者及 10名正常人 WT1基因的表达。并同时测定 mdr1的表达。检测结果为 K5 62细胞株高表达 ,急性髓性白血病 ( AML) 3 0例中 19例 ,急性淋巴细胞白血病 ( AL L) 13例中 10例 ,慢性粒细胞白血病 ( CML)共 17例 ,其中加速及急变期 3例 ,慢性期 14例中 8例 ,WT1表达为阳性 ,10名正常人及 7例缓解期患者 WT1表达均为阴性 ;且 WT1阳性患者完全缓解率 ( CR)低于表达阴性者 (分别为 65 %和 88% ,P<0 .0 5 )。此结果说明 WT1在白血病患者中高表达 ,可作为检测白血病微小残留病的标记基因 ,WT1的阳性表达者化疗后 CR率低 ,且其与白血病的病程发展可能有关 ,WT1与 m dr1无明显相关性。 展开更多
关键词 白血病 wilms肿瘤基因 聚合酶链反应 微小残留病 发病机制
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白血病细胞系WT1的表达及反义核苷酸对其的抑制作用
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作者 吴晓雄 汪月增 +1 位作者 裴雪涛 达万明 《临床血液学杂志》 CAS 2006年第4期224-226,共3页
目的:探讨RT-PCR方法测定白血病细胞系WT1基因的表达以及WT1反义寡核苷酸对白血病细胞系增殖的抑制作用。方法:应用RT-PCR方法测定K562、HL-60、TF-1及U937 4株白血病细胞系WT1基因的表达,然后应用针对WT1翻译起始位点的反义寡核苷酸(WT... 目的:探讨RT-PCR方法测定白血病细胞系WT1基因的表达以及WT1反义寡核苷酸对白血病细胞系增殖的抑制作用。方法:应用RT-PCR方法测定K562、HL-60、TF-1及U937 4株白血病细胞系WT1基因的表达,然后应用针对WT1翻译起始位点的反义寡核苷酸(WT1 ASO)处理K562细胞系、U937细胞系,采用锥虫蓝拒染法确定白血病细胞的增殖。结果:K562、HL-60及TF-1 3株白血病细胞系均高度表达WT1,而U937细胞系未测到WT1。WT1 ASO能够抑制WT1表达阳性的K562细胞的生长,对WT1表达阴性的U937则无抑制作用;而WT1有义寡核苷酸对K562细胞系、U937细胞系均无抑制作用。结论:RT-PCR测定方法可以检测WT1基因在白血病细胞系表达,WT1反义寡核苷酸对白血病细胞有特异的抑制作用。WT1基因在白血病细胞增殖过程中起一定作用。 展开更多
关键词 白血病 wilms肿瘤基因 反义寡核苷酸 细胞增殖
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