口腔扁平苔藓患者血清血管生成素-2水平与叉头翼状螺旋转录因子阳性调节性T细胞及疾病活动度的相关性分析

目的探讨口腔扁平苔藓(OLP)患者血清血管生成素-2(Ang-2)水平与叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)阳性调节性T淋巴细胞(Treg)及疾病活动度相关性分析。方法选取113例不同分型OLP患者为研究对象(试验组),其中网纹型45例,充血型36例,糜烂型32例。另选取健康志愿者76例设为对照组。血清Ang-2和Foxp3+Treg水平分别采用酶联免疫吸附法和流式细胞仪进行检测。统计OLP患者临床体征评分、OLP网纹-萎缩-糜烂(RAE)病损评分和疾病活动评分。采用Pearson相关性分析明确Ang-2水平与Foxp3+Treg及各评分的相关性。结果与对照组相比,不同分型OLP患者血清Ang-2、Foxp3+Treg水平均升高(P<0.05);与网纹型相比,糜烂型和充血型患者血清Ang-2、Foxp3+Treg水平升高(P<0.05);与充血型相比,糜烂型患者血清Ang-2、Foxp3+Treg水平升高(P<0.05)。糜烂型和充血型患者临床体征评分、RAE病损评分、疾病活动评分均高于网纹型(P<0.05);与充血型患者相比,糜烂型患者上述指标水平升高(P<0.05)。OLP患者血清Ang-2水平与Foxp3+Treg、临床体征评分、RAE病损评分、疾病活动评分均呈正相关(r值分别为0.531、0.548、0.554、0.528,P<0.001)。结论血清Ang-2水平在OLP患者体内异常升高,且其升高程度与患者Foxp3+Treg水平、临床体征、病损程度及疾病活动程度呈正相关。

西黄胶囊联合TP方案对晚期非小细胞肺癌患者血清Foxp3、Ang-2水平的影响

目的探讨西黄胶囊联合TP方案治疗晚期非小细胞肺癌患者的临床疗效。方法选取2017年6月—2019年6月期间新乡医学院第一附属医院收治的晚期非小细胞肺癌患者86例,采用随机摸球法分为对照组和治疗组,每组各43例。对照组采用TP方案化疗,治疗组在此基础上加用西黄胶囊治疗。两组患者均连续治疗42 d后,观察两组患者近期疗效及不良反应发生情况,同时观察两组患者治疗前后中医证候症状积分、血清叉头翼状螺旋转录因子3(Forkhead or winged helix transcription,Foxp3)、血管生成素-2(Angiopoietin-2,Ang-2)、美国东部肿瘤协作组体能状况(Eastern cooperative oncology group performance status,ECOGPS)评分变化。结果治疗后治疗组有效率为46.51%、疾病控制率为83.72%,与对照组有效率25.38%、疾病控制率65.12%比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者咳嗽、气短、胸闷、出汗、乏力、畏寒肢冷、腰膝酸软积分及总分较治疗前均降低,差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者血清Foxp3、Ang-2水平较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组ECOGPS评分均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组低于对照组(P<0.05)。治疗组发热(30.23%)、恶心呕吐(30.23%)、血小板减少(34.88%)、白细胞减少(41.86%)及肝肾功能损伤(30.23%)发生率与对照组(53.49%、60.47%、55.81%、48.84%、44.19%)比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论西黄胶囊联合TP方案治疗NSCLC的效果显著,能明显改善患者临床症状及体能状况,减轻化疗毒副反应,并降低血清Foxp3、Ang-2表达水平发挥抗癌作用。

宫颈癌淋巴结转移患者PD-L1与TILs表达水平及其与预后的关系

目的探讨宫颈癌淋巴结转移患者程序性死亡配体-1(PD-L1)、肿瘤浸润淋巴细胞亚群(TILs)表达水平及其与患者预后的关系。方法选取2007年1月至2013年9月在梅州市人民医院诊治并接受宫颈癌根治性切除术后发生淋巴结转移的101例患者作为研究对象。采用免疫组织化学法检测PD-L1、CD4^(+)TILs、CD8^(+)TILs、叉头翼螺旋转录因子3(Foxp3)^(+)TILs表达水平。比较不同PD-L1表达水平患者临床病理特征差异;采用Spearman相关对PD-L1表达水平与TILs密度的相关性进行分析;采用Kaplan-Meier生存分析法分析PD-L1表达水平、TILs密度及密度比值与累计生存率的关系;采用Cox比例风险模型分析患者预后的独立影响因素。结果PD-L1表达于肿瘤细胞的细胞质和(或)细胞膜,阳性表达率为34.65%(35/101);CD4^(+)TILs计数为94(45,190);CD8^(+)TILs计数为63(31,117);FoxP3^(+)TILs计数为6.0(2.5,13.5);FoxP3^(+)TILs/CD8^(+)TILs比值为0.109(0.036,0.193)。PD-L1阳性表达组与PD-L1阴性表达组CD4^(+)TILs、CD8^(+)TILs、FoxP3^(+)TILs密度比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。PD-L1表达情况与CD4^(+)TILs、CD8^(+)TILs、FoxP3^(+)TILs密度均呈正相关(r=0.305、0.222、0.222,P=0.002、0.026、0.026)。生存组与死亡组CD4^(+)TILs密度、CD8^(+)TILs密度和PD-L1表达情况比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。手术年龄<50岁、PD-L1阳性表达、CD4^(+)TILs高密度、CD8^(+)TILs高密度、FoxP3^(+)TILs/CD8^(+)TILs低比值患者累计生存率均高于手术年龄≥50岁、PD-L1阴性表达、CD4^(+)TILs低密度、CD8^(+)TILs低密度、FoxP3^(+)TILs/CD8^(+)TILs高比值患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示,PD-L1阳性表达、CD8^(+)TILs高密度是患者预后的独立保护因素(P<0.05)。结论PD-L1、CD4^(+)TILs、CD8^(+)TILs、FoxP3^(+)TILs/CD8^(+)TILs比值与宫颈癌淋巴结转移患者预后均有关,其中PD-L1阳性表达、CD8^(+)TILs高密度是宫颈癌淋巴结转移患者预后的独立保护因素。

靛玉红对溃疡性结肠炎小鼠CD4CD25Treg细胞Foxp3表达的影响

目的观察青黛及其有效成分靛玉红对溃疡性结肠炎(UC)小鼠脾脏CD4CD25Treg细胞Foxp3表达的影响,探讨其治疗UC的作用机制和靶点。方法将50只BABL/c小鼠随机分为正常组、模型组、靛玉红组、青黛组和5-ASA组。除正常组外,其余小鼠采用自由饮用5%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液5天,制备DSS诱导的UC小鼠模型。于造模后第5天开始,予各组小鼠给药治疗7天。观察各组小鼠一般状况及结肠组织病理学改变,同时检测脾脏CD4CD25Treg细胞Foxp3的表达变化。结果与正常组比较,模型组小鼠CD4CD25Treg细胞Foxp3的表达显著减少(P<0.01);各治疗组CD4CD25Treg细胞Foxp3的表达较模型组升高(P<0.01)。结论青黛及其有效成分靛玉红可通过上调CD4CD25Treg细胞Foxp3表达以防治UC。

慢性乙型肝炎患者CD4+CD25+Treg细胞的检测及意义

目的:探讨慢性乙型肝炎患者外周血CD4+CD25+T调节细胞(regulatory T cell,Treg)的变化及其意义.方法:采用流式细胞术对66例乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)感染者和19例健康对照者外周血CD4+CD25+Treg细胞进行检测,并观察CD4+CD25+Treg细胞与患者总胆红素(total bilirubin,TBIL)、凝血酶原活动度(prothrombin activitv,PTA)和病毒复制指标HBV DNA水平的关系.免疫组化检测叉状头/翅膀状螺旋转录因子(forkhead/winged helix transcription factor,FOXP3)蛋白的表达水平.结果:慢性重型肝炎组CD4+CD25+Treg细胞(4.80±1.50)%分别高于慢性肝炎组(1.67±0.87)%、HBV携带者组(0.53±0.37)%和正常对照组(0.50±0.34)%,(P<0.01);慢性肝炎组与HBV携带者组和正常对照组相比有显著性差异(P<0.01);慢性重型乙型肝炎患者和慢性乙型肝炎患者FOXP3蛋白表达也相应增高,且与CD4+CD25+Treg细胞的变化相平行.CD4+CD25+Treg细胞的变化与TBIL的变化成正相关(r=0.43,P<0.01),与PTA的变化成负相关(r=-0.57,P<0.05),与HBV-DNA水平的变化没有相关性(r=0.22,P>0.05).结论:在慢性乙型肝炎发病过程中,CD4+CD25+Treg细胞水平相应增高,FOXP3蛋白变化与CD4+CD25+Treg细胞的改变相平行.

分离培养人外周血CD4^+CD25^-T细胞及其生物学特性研究

目的:分离培养人外周血CD4+CD25-T细胞,并鉴定其生物学特性。方法:设对照组(A组)、LPS组(B组)、LPS+抗TGF-β1mAb组(D),用Percoll不连续密度梯度离心与免疫磁珠法,分离培养健康人外周血CD4+CD25-T细胞。用光镜及电镜观察其形态特征,台盼蓝试验检测其活力,流式细胞术(FCM)鉴定其纯度。体外培养4h、3d及5d后,用FCM检测CD4+CD25+T细胞的阳性率,ELISA法检测培养上清中TGF-β1的浓度,RT-PCR法检测细胞中叉状头/翼状螺旋转录因子(FOXP3)mRNA的表达。结果:(1)光镜下观察分离的CD4+CD25-T细胞主要为小体积细胞,电镜下观察细胞核呈圆形,染色质致密。体外抗人CD3/CD28mAb刺激培养的CD4+CD25-T细胞体积逐渐增大,胞质较丰富,电镜下观察细胞核呈椭圆形或肾型,染色质较稀疏。(2)FCM检测CD4+CD25-T细胞纯度达91.5%～96%。台盼蓝试验检测分离前后活细胞数无统计学意义(P>0.05)。(3)FCM检测表明,B5d组为CD4+CD25+T细胞的阳性率为(55.99±1.42)%与A5d组相比较有统计学意义(P<0.01);D5d组CD4+CD25+T细胞的阳性率为(1.99±0.83)%与A5d组的阳性率(1.29±0.04)%相比较无统计学意义。(4)ELISA测定表明,培养液中TGF-β1的浓度,B3d组为(1.60±0.09)μg/L、B5d组为(1.83±0.14)μg/L,分别与A3d组为(0.35±0.04)μg/L、A5d组为(0.33±0.08)μg/L相比较,均有统计学意义(P<0.01);而D3d、D5d组与A3d、A5d组相比较均无统计学意义。(5)RT-PCR检测表明,FOXP3mRNA的表达:以β-actin的A值作为内参照,B3d组为(0.84±0.07)、B5d组为(1.85±0.24)分别与A3d组(0.05±0.02)、A5d组(0.04±0.02)相比较,均有统计学意义(P<0.01);而D组与A组的各个组间相比较均无统计学意义。(6)LPS诱导的人外周血中CD4+CD25-T细胞培养液上清中TGF-β1的水平与该细胞中FOXP3mRNA的表达呈显著的正相关(r=0.812,P<0.01)。结论:用Percoll不连续密度梯度离心与免疫磁珠法体外分离培养的人外周血CD4+CD25-T细胞的活力及纯度较理想;LPS诱导的CD4+CD25-T细胞中FOXP3mRNA的表达,可能与TGF-β1有关。

CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞在急性白血病患者外周血的表达

目的初步探讨CD4+CD25+调节性T细胞在急性白血病(AL)患者外周血中的表达及其临床意义。方法流式细胞术分别检测43例AL初诊(A组)、经化疗完全缓解(CR,B组)25例及20例健康志愿者(C组)外周血中CD4+CD25+T细胞所占比例;荧光定量RT-PCR分析各组外周血中叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3) mRNA的表达水平,并逐层分析比较。结果B组CD4+CD25+T细胞比例及Foxp3含量均明显高于A、C组(P<0.01)。A组Foxp3表达明显高于C组(P<0.01)。在AL各亚型之间CD4+CD25+T细胞及Foxp3表达均无显著差异。结论CD4+CD25+调节性T细胞在初治AL或CR患者外周血中比例增加,可能是AL免疫抑制的一个重要原因。

支气管哮喘患者外周血CD_~4+ CD_(25)^+调节性T细胞水平及Foxp3 mRNA表达的分析

目的观察支气管哮喘(哮喘)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中CD4+CD2+5调节性T细胞(Treg)水平及叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)mRNA表达的变化,探讨CD4+CD2+5Treg在哮喘发病中的作用。方法采用流式细胞仪检测78例哮喘患者(急性发作期组30例,慢性持续期组25例,缓解期组23例)和29例健康志愿者(正常对照组)PBMCs中CD4+CD2+5Treg的比例;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测PBMCs中Foxp3mRNA的表达。结果急性发作期组和慢性持续期组PBMCs中CD4+CD2+5Treg的比例及Foxp3mRNA的表达明显低于缓解期组和正常对照组(P<0.05);缓解期组CD4+CD2+5Treg的比例及Foxp3mRNA的表达虽亦低于正常对照组,但差异无统计学意义(P>0.05);急性发作期组CD4+CD2+5Treg的比例及Foxp3mRNA的表达低于慢性持续期组(P<0.05)。结论哮喘患者外周血中具有免疫抑制活性的CD4+CD2+5Treg数量减少,功能下降,可能参与哮喘的发生和发展。

CC类趋化因子22和叉头状翅膀样转录因子3在胆管癌组织中的表达及意义

目的探讨CC类趋化因22(C-C class chemokines 22,CCL22)和叉头状翅膀样转录因子3(forkhead/winged helix transcription factor 3,FOXP3)在胆管癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测70例胆管癌组织和15例非肿瘤胆道上皮组织中CCL22、FOXP3的表达情况,分析其与胆管癌临床和预后的关系。结果 70例胆管癌、15例非肿瘤胆道上皮组织中CCL22和FOXP3阳性表达率分别为62.4%(44/70)、20.0%(3/15)及71.4%(50/70)、13.3%(2/15)。CCL22和FOXP3蛋白在胆管癌组织中的表达水平均明显高于非肿瘤胆道上皮组织(P<0.01)。有淋巴结转移者和TNM分期Ⅲ+Ⅳ期者较无淋巴结转移者和TNM分期Ⅰ+Ⅱ期者CCL22和FOXP3的表达阳性率高,差异有统计学意义(P<0.05)。CCL22与FOXP3蛋白表达呈明显正相关(P<0.01)。CCL22和FOXP3蛋白阴性表达者生存时间明显长于阳性表达者(P<0.01)。结论 CCL22和FOXP3可能对胆管癌发展及预后产生重要影响。

食道癌患者CD4^+、CD25^+、Foxp3^+调节性T细胞的变化及意义

[目的]初步探讨CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在食道癌患者外周血中的变化及临床意义。[方法]59例食道癌患者,分为鳞癌组47例,腺癌组12例,另外30例健康志愿者为对照组,用流式细胞术分别检测外周血中CD4+、CD25+、Foxp3+T细胞占CD4+T细胞的比例。[结果]食道癌初诊患者组CD4+、CD25+、Foxp3+T细胞比例为(10.33±5.72)%,明显高于健康志愿者组(4.56±1.06)%(P<0.01),而食道鳞癌组和食道腺癌组CD4+、CD25+、Foxp3+T细胞比例没有明显差异。[结论]CD4+、CD25+、Foxp3+调节性T细胞在食道癌初诊患者外周血中比例增加,可能是食道癌免疫抑制的一个重要原因。

人外周血单个核细胞中FOXP3 mRNA与T细胞CDA^+CD25^+Treg表达相关性探讨

目的探讨人外周血单个核细胞中FOXP3mRNA的表达与CD4+CD25+Treg表达的相关性。方法提取人外周血单个核细胞总RNA,逆转录成mRNA,以β-actin为内参照,实时荧光定量RT-PCR检测29例哮喘患儿及24例同龄对照FOXP3mRNA的相对表达量,采用融解曲线和琼脂糖电泳鉴定PCR产物特异性;同时采用流式细胞技术检测CD4+CD25+Treg的比例。结果哮喘患儿组CD4+CD25+Treg细胞百分率明显低于同龄对照组,P<0.01;FOXP3mRNA的表达也显著降低,P<0.05;FOXP3和β-actin的融解曲线分析表明均仅有单一峰,Tm值分别为82.4℃和87.8℃;琼脂糖电泳显示都仅有单一扩增产物。结论应用SYBRGreenⅠ实时荧光定量RT-PCR技术检测FOXP3mRNA表达水平简便、经济、可行,哮喘患儿CD4+CD25+Treg明显降低可能参与哮喘发病,FOXP3表达降低可能是导致CD4+CD25+Treg发育障碍的重要因素。

先天性睑裂狭小基因FOXL2与卵巢早衰相关性的研究进展

据流行病学调查统计,卵巢早衰(POF)发病率呈上升趋势,在女性中发病率约1%。资料显示POF与遗传因素有关,可能是一种潜在的多基因遗传病,且极具遗传特质。先天性睑裂狭小基因(winged helix/forkhead transcription factorgene2,FOXL2)是第一个被认为在维持卵巢功能方面发挥重要作用的人类常染色体基因。近来,FOXL2与POF的关系备受关注,本文就最新进展作一综述。

千金藤素对口腔鳞癌细胞凋亡及FOXL2、Ki67表达的影响

目的:探讨千金藤素对口腔鳞癌细胞系TSCCA的凋亡及翼状螺旋/叉头转录因子(FOXL2)、细胞增殖抗原Ki67表达的影响。方法:培养人口腔鳞癌细胞系TSCCA,采用不同浓度(10,20,30μmol·L^(-1))的千金藤素处理细胞将其分别对应设为LD组、MD组、HD组。MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测FOXL2、Ki67 mRNA表达水平,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测FOXL2、Ki67蛋白表达水平。结果:与正常口腔HIOE细胞系相比,TSCCA细胞FOXL2、Ki67 mRNA及蛋白表达均显著升高(P<0.05);与空白组相比,LD组、MD组、HD组细胞增殖抑制率与凋亡率均显著升高(P<0.05),且HD组显著高于LD组、MD组(P<0.05);与空白组相比,LD、MD、HD组FOXL2、Ki67 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05),且HD组显著低于LD组、MD组(P<0.05)。结论:千金藤素可有效抑制口腔鳞癌细胞TSCCA的增殖,并可抑制FOXL2与Ki67表达并发挥抗肿瘤的作用进而诱导TSCCA细胞凋亡。

超促排卵Gn用量对卵泡液FOXL2水平及临床结局的影响

目的:探究卵泡液翼螺旋/叉头转录因子基因2(FOXL2)对辅助生殖技术过程中超促排卵外源性促性腺激素(Gn)用量及临床结局的影响。方法:收集2017年4月-2020年4月本院收治的体外受精-胚胎移植或卵胞浆内单精子显微注射患者98例临床资料,根据促排卵过程中促性腺激素(Gn)总剂量分为小剂量组(<2000IU,29例)、中剂量组(2000~4000IU,42例)和大剂量组(≥4000IU,27例)。获取患者临床资料、实验室指标和妊娠结局、FOXL2与人绒毛膜促性腺激素(hCG)日血清雌二醇(E_(2))水平、FOXL2水平及其影响妊娠危险因素。结果:小剂量组、中剂量组、大剂量组比较,随着患者年龄增加其基础黄体生成素(LH)增加、窦卵泡数(AFC)降低,获卵数和优质胚胎率逐渐降低,Gn用量逐渐增加,卵泡液FOXL2和hCG日E;逐渐降低(均P<0.05);3组正常受精率、临床妊娠率无差异(P>0.05)。与未妊娠组比较,妊娠组Gn剂量较低,卵泡液FOXL2水平较高(P<0.05)。经logistic回归分析,Gn剂量过多和卵泡液FOXL2降低是影响辅助生殖技术后妊娠结局危险因素[OR(95%CI)2.285(1.287~5.195),P=0.021)]。结论:患者年龄越大Gn用量越多,Gn用量增加会降低卵泡液FOXL2水平;而促排卵过程Gn用量越少,卵巢对Gn反应越大,FOXL2水平增加,卵巢对超促排卵药物反应越大,获卵数越多,优质胚胎率和临床妊娠率增加,对辅助生育结局有积极作用。

慢性乙型肝炎患者血清IL-12、IL-18水平和外周血单个核细胞FOXp3基因水平研究

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者血清白细胞介素-12(IL-12)、IL-18和外周血单个核细胞叉头蛋白P3(Foxp3)基因水平变化及其临床意义。方法2015年7月~2018年3月我院收治的CHB患者78例和同期健康体检者25例,采用ELISA法检测血清IL-12和IL-18水平,分离外周血单个核细胞,采用RT-PCR法检测细胞Foxp3 mRNA水平。结果在78例CHB患者中,经肝组织活检诊断G1组21例,G2组24例,G3组19例,G4组14例;CHB患者血清ALT和AST水平分别为(278.3±89.4)U/L和(305.3±84.6)U/L,显著高于健康人的[(25.3±7.6)U/L和(20.3±6.5)U/L,P<0.05];G4组血清ALT和AST水平分别为(563.5±132.4)U/L和(513.3±102.5)U/L,显著高于G1组[(113.2±67.4)U/L和(73.5±25.3)U/L]或G2组[(153.6±45.3)U/L和(113.8±35.2)U/L]或G3组[(240.5±56.6)U/L和(156.7±51.2)U/L,P<0.05];CHB患者血清IL-12和IL-18水平及单个核细胞Foxp3 mRNA水平分别为(198.3±19.6)pg/ml、(408.6±91.2)pg/ml及(4.5±0.7),显著高于健康人[(64.5±10.9)pg/ml、(127.3±15.7)pg/ml、(3.3±0.4),P<0.05];G4组血清IL-12、IL-18及Foxp3基因水平分别为(237.5±23.6)pg/ml、(431.5±106.3)pg/ml、(5.1±0.3)],显著高于G1组[(146.3±15.2)pg/ml、(390.2±90.3)pg/ml、(3.7±0.6)]或G2组[(185.2±13.6)pg/ml、(403.6±93.2)pg/ml、(3.9±0.5)pg/ml]或G3组[(203.2±18.3)pg/ml、(414.3±105.4)pg/ml、(4.3±0.7),P<0.05]。结论CHB患者外周血单个核细胞Foxp3基因及血清IL-12和IL-18水平显著升高,且肝组织炎症活动显著者,其水平更高,提示其参与了CHB的发病过程。及时检测这些指标可能对监测病情变化和判断治疗应答有帮助。

基于RORγt/FoxP3免疫失衡探讨定喘汤对呼吸道合胞病毒诱导肺炎性损伤幼鼠免疫微环境的影响

目的研究定喘汤对呼吸道合胞病毒(RSV)诱导肺炎性损伤幼鼠转录因子孤核受体(RORγt)、叉头翼状螺旋转录因子3(FoxP3)及其相关细胞因子表达的影响,揭示定喘汤治疗RSV诱导肺炎性损伤的作用机制。方法将18只幼龄SD大鼠随机分为正常组、模型组、定喘汤组,每组6只。模型组、定喘汤组采用RSV滴鼻法建立肺炎性损伤模型。定喘汤组在第3天滴鼻2 h后给予定喘汤2 g/(kg·d)灌胃,1次/d,连续7 d。实验第8天取肺组织,观察肺损伤情况,计算肺湿干比,RT-PCR和Western blot法检测肺组织中RORγt、FoxP3 mRNA和蛋白表达情况,ELISA法检测肺泡灌洗液中转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-23(IL-23)含量。结果模型组幼鼠肺泡壁受损,肺间质大量炎性细胞浸润;定喘汤组幼鼠肺泡壁损伤和肺间质炎性细胞浸润较模型组轻。与正常组比较,模型组肺组织病理损伤评分、湿干比、肺组织中RORγt mRNA及蛋白相对表达量和肺泡灌洗液中IL-17、IL-23含量均明显增高(P均<0.05),肺组织中FoxP3 mRNA及蛋白相对表达量和肺泡灌洗液中TGF-β、IL-10含量均明显降低(P均<0.05)。与模型组比较,定喘汤组肺组织病理损伤评分、湿干比、肺组织中RORγt mRNA及蛋白相对表达量和肺泡灌洗液中IL-17、IL-23含量均明显降低(P均<0.05),肺组织中FoxP3 mRNA及蛋白相对表达量和肺泡灌洗液中TGF-β、IL-10含量均明显升高(P均<0.05)。结论RSV诱导肺炎性损伤时RORγt/FoxP3及相关细胞因子表达异常,定喘汤可通过调控RORγt/FoxP3及相关细胞因子表达调节免疫微环境,减轻RSV诱导肺炎性损伤。

骨髓细胞学及血清sVCAM-1、Foxp3水平联合检测在再生障碍性贫血诊断中的价值

目的:探究骨髓细胞学及血清可溶性血管细胞黏附分子-1(sVCAM-1)、叉头状/翅膀状旋转转录因子(Foxp3)水平联合检测在再生障碍性贫血诊断中的价值。方法:回顾性分析2021年4月至2022年5月该院收治的32例再生障碍性贫血患者的临床资料作为研究组,另选择同期32例非再生障碍性贫血患者的临床资料作为对照组。所有患者均行骨髓细胞学及血清sVCAM-1、Foxp3水平检测,比较两组骨髓细胞学检查结果(细胞内、细胞外铁水平)、sVCAM-1、Foxp3水平,绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析骨髓细胞学、血清sVCAM-1、Foxp3水平单项及联合检测在再生障碍性贫血诊断中的价值。结果:研究组细胞内铁水平低于对照组,细胞外铁水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组sVCAM-1水平高于对照组,Foxp3水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线结果显示,骨髓细胞学、sVCAM-1、Foxp3水平单项及联合检测诊断再生障碍性贫血的曲线下面积分别为0.838、0.714、0.718、0.995,均具有诊断价值,且联合检测诊断价值高于三者单项检测诊断价值。结论:骨髓细胞学及血清sVCAM-1、Foxp3水平联合检测诊断再生障碍性贫血的价值高于三者单项检测。

TGF⁃β1对炎症状态下人牙周膜成纤维细胞的调控作用

目的探讨转化生长因子⁃β1(transforming growth factor⁃β1,TGF⁃β1)对在牙龈卟啉单胞菌来源脂多糖(lipopolysaccharide from Porphyromonas gingivalis,Pg⁃LPS)刺激模拟炎症状态下的人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblasts,hPDLFs)的调控作用。方法获取hPDLFs并进行免疫组化鉴定,通过qRT⁃PCR与CCK⁃8确定Pg⁃LPS的刺激浓度。将hPDLFs分成4组:空白对照组,单纯100μg/mL Pg⁃LPS;低浓度组,1 ng/mL TGF⁃β1+100μg/mL Pg⁃LPS;中浓度组,10 ng/mL TGF⁃β1+100μg/mL Pg⁃LPS;高浓度组100 ng/mL TGF⁃β1+100μg/mL Pg⁃LPS。CCK⁃8检测细胞增殖情况;划痕实验与Transwell小室实验检测hPDLFs细胞迁移能力;流式细胞术检测hPDLFs的细胞周期;qRT⁃PCR检测hPDLFs的转录因子叉头盒p3(forkhead/winged helix transcription⁃al factor p3,Foxp3)、白细胞介素6(interleukin⁃6,IL⁃6)及EB病毒诱导基因3(Epstein⁃Barrvirus⁃induced gene 3,EBI3)mRNA表达;Western blot检测hPDLFs的Foxp3、IL⁃6及EBI3蛋白表达。结果免疫组化鉴定显示抗波形丝蛋白阳性及抗角蛋白阴性;Pg⁃LPS浓度为100μg/mL时,hPDLFs中IL⁃6 mRNA表达相比空白对照组显著上升(P<0.0001)且细胞增殖能力下降(P<0.0001),所以选择100μg/mL Pg⁃LPS用于模拟炎症状态。10、100 ng/mL TGF⁃β1能提高炎症状态下hPDLFs的增殖能力(P<0.0001);1、10、100 ng/mL TGF⁃β1能促进炎症状态下hPDLFs的迁移能力(P<0.0001);1、10、100 ng/mL TGF⁃β1可加快炎症状态下hPDLFs的细胞周期(P<0.0001);1、10、100 ng/mL TGF⁃β1可抑制炎症状态下hPDLFs的IL⁃6基因和蛋白表达量(P<0.0001),1、10 ng/mL TGF⁃β1可提高炎症状态下hPDLFs的EBI3基因及蛋白表达量(P<0.0001),1、10 ng/mL TGF⁃β1可提高炎症状态下hPDLFs的Foxp3基因表达量,10 ng/mL TGF⁃β1可提高Foxp3蛋白表达量(P<0.05)。结论TGF⁃β1可促进炎症状态下hPDLFs的增殖及迁移能力、上调EBI3表达,可能与转录因子Foxp3表达有关。

T辅助细胞亚群在大鼠非酒精性脂肪性肝病模型中的变化

目的:探讨T辅助细胞亚群Th1/Th2和Treg在非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)发病机制中的意义.方法:SD大鼠正常喂养1wk后,随机分为正常组(n=20)和高脂饮食组(n=20).正常组大鼠以普通饲料喂养,高脂饮食组以高脂饲料喂养.实验第8、16周分批处死大鼠.观察肝组织的病理改变,荧光定量PCR方法检测肝脏TNF-a、IFN-γ、IL-4和Foxp3的基因表达.结果:高脂饮食8wk大鼠肝细胞脂肪变明显,无明显炎症改变,IFN-γ、IL-4在肝脏的基因表达与正常组比较无明显变化,TNF-α稍升高,但无统计学意义,Foxp3 mRNA的表达比正常组明显降低(ct值:26.12±0.69 vs 24.22±0.62,P<0.05).高脂饮食16wk大鼠脂肪肝明显,炎症明显,IFN-γ和TNF-α基因表达均显著升高(ct值:24.52±0.87 vs 29.94±1.44,24.31±1.13 vs 28.88±1.95,均P<0.05),IL-4与正常组相比较无明显变化,Foxp3基因表达较正常组和高脂饮食8wk时均显著降低(ct值:32.57±1.54 vs 24.29±1.08,26.12±0.69,P<0.05).结论:高脂饮食大鼠肝脏Foxp3和Treg表达减少可能是高脂饮食NAFLD发生发展的重要因素.IFN-γ和TNF-α的联合作用加重了肝脏的炎症损伤.

叉状头/翅膀状螺旋转录因子在BXSB狼疮小鼠肾脏中的表达

目的观察叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)在BXSB狼疮小鼠肾脏中的表达,探讨Foxp3在狼疮性肾炎中可能的免疫耐受诱导作用及机制。方法选取8周龄及16周龄雄性BXSB小鼠各6只,以8周龄C57BL/6雄性小鼠6只为正常对照,用免疫组织化学及实时荧光定量PCR方法,检测Foxp3在小鼠肾脏中的表达。结果正常对照组C57BL/6小鼠肾组织Foxp3阳性表达,细胞呈深棕色着色,广泛分布于肾小管;8周龄及16周龄BXSB小鼠肾脏组织Foxp3弱阳性表达,细胞呈浅棕色着色,分布于肾小管。8、16周龄BXSB组小鼠肾组织内Foxp3mRNA表达水平[(0.55±0.06),(0.51±0.07)]均较正常对照组(1.02±0.08)降低,差异有统计学意义(均P<0.01);16周龄BXSB组小鼠的Foxp3mRNA表达水平较8周龄BXSB组降低,但差异没有统计学意义(P>0.05)。结论 BXSB小鼠狼疮肾炎的发病机制可能与调节性T细胞的Foxp3表达下调相关。